中藥藥理學基礎(chǔ)第八章 中藥藥理學實驗基本知識

第八章

中藥藥理學實驗基本知識第八章

中藥藥理學實驗基本知識§8－1中藥藥理實驗設(shè)計§8－2中藥樣品的制備§8－3實驗動物常識實訓(xùn)一中藥藥理樣品（紅景天提取物）制備實訓(xùn)二紅景天提取物急性毒性實驗實訓(xùn)三紅景天提取物提高缺氧耐受力功能實驗§8－１

中藥藥理實驗設(shè)計§8－１中藥藥理實驗設(shè)計學習目標１.掌握中藥藥理實驗的目的與要求；２.熟悉中藥藥理實驗設(shè)計的基本知識；３.提高實驗安全意識，養(yǎng)成良好的實驗習慣?！?－１中藥藥理實驗設(shè)計學習內(nèi)容一、中藥藥理實驗的目的與要求二、中藥藥理實驗設(shè)計的基本知識三、中藥藥理實驗的安全知識§8－１中藥藥理實驗設(shè)計一、中藥藥理實驗的目的與要求想一想為什么要進行中藥藥理實驗研究，中藥藥理實驗研究一般是為了解決什么問題？§8－１中藥藥理實驗設(shè)計二、中藥藥理實驗設(shè)計的基本知識１.動物實驗設(shè)計的定義２.動物實驗設(shè)計的基本原則３.動物實驗設(shè)計的方法和步驟４.藥物劑量的設(shè)計和換算§8－１中藥藥理實驗設(shè)計三、中藥藥理實驗的安全知識１.中藥藥理實驗中常見的安全隱患２.規(guī)范實驗動物采購３.規(guī)范實驗操作４.常見安全風險的防范與處理§8－１中藥藥理實驗設(shè)計本節(jié)筆記§8－１中藥藥理實驗設(shè)計思考與練習１.思考：免疫接種包括哪幾方面？對于動物實驗有什么意義？２.練習：查閱《實驗動物管理條例》，學習實驗動物的分級?！?－2

中藥樣品的制備§8－2中藥樣品的制備學習目標１.掌握中藥常用的提取方法；２.熟悉根據(jù)實驗要求制備中藥樣品的方法。§8－2中藥樣品的制備學習內(nèi)容一、中藥常用的提取方法二、試樣及樣品的配制方法三、實驗動物給藥劑量的計算§8－2中藥樣品的制備一、中藥常用的提取方法１.溶劑提取法２.水蒸氣蒸餾法３.超臨界萃取法４.升華法§8－2中藥樣品的制備二、試樣及樣品的配制方法１.灌胃給藥藥物的配制２.靜脈注射給藥藥物的配制３.離體細胞給藥藥物的配制三、實驗動物給藥劑量的計算給藥劑量（g／kg）＝藥物濃度（g／mL）×給藥容量（mL／kg）§8－2中藥樣品的制備本節(jié)筆記§8－2中藥樣品的制備思考與練習１.思考：乳劑的基本組成是什么？Ｗ／Ｏ表示哪種類型的乳劑？２.練習：天麻素是天麻藥材中的有效成分，具有易溶于水、甲醇、乙醇的特點，請問如要對天麻素進行經(jīng)口給藥，可以采用哪種方法進行受試樣品的制備？§8－3

實驗動物常識§8－3實驗動物常識學習目標１.熟悉實驗動物；２.了解動物實驗基本技術(shù)；３.形成善待實驗動物的良好職業(yè)素養(yǎng)?！?－3實驗動物常識學習內(nèi)容一、實驗動物分類二、中醫(yī)藥動物模型知識三、動物實驗基本操作技術(shù)四、實驗動物福利和倫理§8－3實驗動物常識一、實驗動物分類１.普通動物（一級）２.清潔動物（二級）３.無特定病原體動物（三級）４.無菌動物（四級）§8－3實驗動物常識二、中醫(yī)藥動物模型知識１.中醫(yī)藥動物模型的建立２.中醫(yī)動物模型的分類§8－3實驗動物常識三、動物實驗基本操作技術(shù)１.常用實驗動物抓取和固定方法２.編號方法３.給藥方法４.麻醉方法５.處死方法§8－3實驗動物常識三、動物實驗基本操作技術(shù)１.常用實驗動物抓取和固定方法§8－3實驗動物常識四、實驗動物福利和倫理“3R”原則１.尊重生命，科學、合理、仁道地使用動物２.《指導(dǎo)意見》內(nèi)容摘要§8－3實驗動物常識本節(jié)筆記§8－3實驗動物常識思考與練習１.思考：為什么要制定“3R”原則，實驗動物發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)后，會產(chǎn)生哪些安全風險？２.練習：請查詢文獻，思考“寒證”和“熱證”的動物模型該如何建立？實訓(xùn)一

中藥藥理樣品（紅景天提取物）制備實訓(xùn)一中藥藥理樣品（紅景天提取物）制備一、實訓(xùn)目的１.掌握中藥藥理實驗中藥樣品的制備過程；２.掌握中藥材紅景天提取物的制備方法，為考察紅景天提取物對實驗動物提高缺氧耐受力功能研究進行準備；３.學會自主思考其他中藥藥理實驗樣品制備方法如何選擇。實訓(xùn)一中藥藥理樣品（紅景天提取物）制備二、器材準備１.實驗材料紅景天藥材、40目篩網(wǎng)、80目篩網(wǎng)、304材質(zhì)的不

銹鋼鍋、硅膠刮刀、溫度計。２.儀器中藥萬能粉碎機、標準篩、電子天平、電磁爐、

減壓干燥箱、水分測定儀。實訓(xùn)一中藥藥理樣品（紅景天提取物）制備三、實訓(xùn)內(nèi)容與步驟１.藥材粉碎２.提取、濃縮３.干燥實訓(xùn)二

紅景天提取物急性毒性實驗實訓(xùn)二紅景天提取物急性毒性實驗一、實訓(xùn)目的１.掌握小鼠灌胃操作；２.掌握小鼠的生理解剖操作、小鼠臟器狀態(tài)的判斷；３.了解急性毒性實驗設(shè)計的過程和實施方法。實訓(xùn)二紅景天提取物急性毒性實驗二、器材準備１.實驗材料紅景天提取物（實訓(xùn)一所制得干浸膏）、１mL注射器。２.實驗動物（１）品系：ICR成年小鼠。（２）性別：雌雄各半。（３）體重：18～22ｇ。（４）記錄動物提供單位及動物生產(chǎn)許可證，實驗前觀察７天，保留合格動物進行實驗。３.主要儀器設(shè)備秒表。實訓(xùn)二紅景天提取物急性毒性實驗三、實訓(xùn)內(nèi)容與步驟１.實驗分組２.給藥和觀察３.最大耐受量實訓(xùn)三

紅景天提取物提高缺氧耐受力功能實驗實訓(xùn)三紅景天提取物提高缺氧耐受力功能實驗一、實訓(xùn)目的１.掌握以小鼠為模型開展的常壓耐缺氧實驗、常壓缺氧損傷模型實驗以及亞硝酸鈉重度缺氧實驗的具體開展方式；２.掌握實驗結(jié)果分析方法；３.了解中藥藥理實驗設(shè)計的過程和實施方法；４.評估紅景天提取物提高缺氧耐受力的功能。實訓(xùn)三紅景天提取物提高缺氧耐受力功能實驗二、器材準備１.實驗材料紅景天提取物（實訓(xùn)一所制得干浸膏）、250mL磨口瓶、具塞離心管、20μL毛細管、1mL注射器。２.實驗動物（１）品系：ICR成年小鼠。（２）體重：18～88g。（３）記錄動物提供單位及動物生產(chǎn)許可證，實驗前觀察7天，保留合格動物進行實驗。實訓(xùn)三紅景天提取物提高缺氧耐受力功能實驗二、器材準備３.主要儀器設(shè)備秒表、低氧分壓呼吸效應(yīng)實驗系統(tǒng)、血細胞分析儀、可見光分光光度計、恒溫水浴槽、混旋器、組織勻漿器、低溫離心機、酶標儀、血生化儀、SPSS統(tǒng)計分析計算機。４.主要試劑血紅蛋白含量、腦勻漿丙二醛（MDA）試劑盒、腦總抗氧化能力（T-AOC）試劑盒、全血