丙烯酰胺液相色譜-質(zhì)譜法測定化妝品安全技術(shù)規(guī)范

——1—丙烯酰胺范圍

Acrylamide本方法規(guī)定了液相色譜-質(zhì)譜法測定化裝品中丙烯酰胺的含量。本方法適用于化裝品中丙烯酰胺含量的測定。方法提要樣品經(jīng)過提取后，用液相色譜-質(zhì)譜法測定，以多反響離子監(jiān)測模式進展監(jiān)測，承受特征離子豐度比進展定性，丙烯酰胺與內(nèi)標峰面積比定量。0.00005μg，定量下限為0.0002μg；取樣量為0.2g時，檢出濃0.1mg/kg0.4mg/kg。試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。99.0%。氘代丙烯酰胺2,3,3-D，純度大于等于98。醋酸銨。乙腈，色譜純。甲醇，色譜純?？瞻谆b品樣品：選擇不含丙烯酰胺的化裝品作為空白樣品?！惨译?10%：量取10mL乙腈〔3.〕置100mL混勻。醋酸銨溶液[c〔醋酸銨〕=0.02mol/L]0.08g50mL量瓶中，加水溶解并定0.02mol/L的醋酸銨溶液。丙烯酰胺標準儲藏溶液[〔丙烯酰胺〕=0.5g/L]：稱取丙烯酰胺標準品〔3.1〕50mg〔準確0.1mg〕100mL量瓶中，加乙腈溶液〔3.7〕使溶解并定容至刻度，搖勻，即得質(zhì)量濃度為0.5g/L的丙烯酰胺標準儲藏溶液。儀器和設(shè)備液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。天平。超聲波清洗器。高速離心機。周密移液器。渦旋振蕩器。分析步驟標準系列溶液制備丙烯酰胺標準溶液1操作，分別周密量取肯定體積的丙烯酰胺標準儲藏溶液〔3.9〕10mL量瓶中，以乙腈溶液〔3.7〕稀釋并定容至刻度，得不同濃度的丙烯酰胺系列標準溶液。內(nèi)標溶液10mg〔0.0001g〕100mL量瓶中，加乙腈溶液〔3.7〕使溶解并定容至刻度，搖勻，即得濃度為100μg/mL的氘代丙烯酰胺儲藏溶液，然后周密量取氘代1mL50mL量瓶中，加乙腈溶液〔3.7〕使溶解并定容至刻度，搖勻，即得濃2μg/mL的氘代丙烯酰胺內(nèi)標溶液。丙烯酰胺參加空白樣品標準溶液60.20g〔0.001g〕5mL塑料離心管中，分別加濃度2μg/mL50μL30s，再分別加丙烯酰胺系列標準溶液50μL30s；然后0.15mL0.02mol/L的醋酸銨水溶液〔3.8〕，30s2.0mL乙腈〔3.4〕，60s后，10000rpm10min2mL色譜流淌相復(fù)溶，渦旋60s，10000rpm5min0.45μm微孔濾膜過濾后，濾液作為待測溶液，備用，0.025μg、0.05μg、0.25μg、1.25μg、12.5μg、25μg。樣品處理0.20g〔0.001g〕，5mL2μg/mL的內(nèi)標溶液50μL30s0.15mL0.02mol/L的醋酸銨水溶液〔3.8〕，渦旋30s2.0mL乙腈〔3.4〕，渦旋60s后，以10000rpm10min，取上清液，氮氣吹干，殘渣加2mL色譜流淌相復(fù)溶，渦旋60s，以10000rpm5min0.45μm微孔濾膜過濾后，濾液作為待測溶液，備用。參考儀器條件色譜色譜柱：WatersAtlantisT3〔3.5μm,2.1mm×100mm〕或具有同等柱效的色譜柱；流淌相：甲醇+0.1%甲酸水溶液=1.5+98.53min；流速：0.3mL/min；柱溫：25℃；進樣量：5μL。質(zhì)譜離子源：電噴霧離子源ESI源；監(jiān)測模式：正離子監(jiān)測模式；監(jiān)測離子對及相關(guān)電壓參數(shù)設(shè)定見表2；霧化氣壓力：50psi；枯燥氣流速：12L/min；枯燥氣溫度：350℃；毛細管電壓：4000V；0min～1min：不進入質(zhì)譜儀分析,1min～2.5min：進入質(zhì)譜儀分析。測定定性用液相色譜-且所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與標準樣品的離子對相對豐度比相全都〔見表3，則可以推斷樣品中存在丙烯酰胺。定量在“5.3”分析條件下，用丙烯酰胺參加空白樣品的系列濃度的標準溶液〔5.1.3〕分別進樣，以丙烯酰胺參加空白樣品的系列濃度為橫坐標，丙烯酰胺與內(nèi)標的峰面積比為縱坐標，進展線性回0.99。取“5.2”5μL，將丙烯酰胺與內(nèi)標的峰面積比代入標準曲線，計算丙烯酰胺的質(zhì)量濃度，按“6”計算，得出樣品中丙烯酰胺的含量。計算m= 1m式中：——化裝品中丙烯酰胺的含量，mg/kg；m——樣品取樣量，g；m1——代入回歸方程計算得到的樣品待測溶液中丙烯酰胺的質(zhì)量，g；在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果確實定差值不得超過算術(shù)平均值的15%。溶液表1溶液初始濃度丙烯酰胺系列標準溶液的配制量取體積 定容終體積標準溶液終濃度1〔0.5mg/mL〕2mL 10mL100μg/mL2〔0.5mg/mL〕1mL 10mL50μg/mL3〔50μg/mL〕1mL 10mL5μg/mL4〔5μg/mL〕2mL 10mL1μg/mL5〔1μg/mL〕2mL 10mL0.2μg/mL6〔1μg/mL〕1mL 10mL0.1μg/mL表2三重四級桿離子對及相關(guān)電壓參數(shù)設(shè)定表編號 物質(zhì)名稱1 丙烯酰胺

〔m/z〕72

Frag.(V)40

〔m/z〕55

CE〔V〕82 氘代丙烯酰胺〔內(nèi)標〕 75 40 58 84表3監(jiān)測離子和離子相對豐度比監(jiān)測離子對〔