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核型分析系統(tǒng)使用指南一、攝影:1.10×低倍鏡下尋找分散良好的分裂相,用40×物鏡確認(rèn),調(diào)至100×物鏡,滴香柏油,調(diào)至清晰(注意:載片樣面一定要向上。);2.在電腦桌面上,雙擊“Karyo3.1”,打開分析軟件;3.單擊“InputImageIntoNewDocument”;4.點(diǎn)左側(cè)“Auto”,待圖像顯示后,同時(shí)調(diào)節(jié)“Fine”,或光源亮度,至清晰;再點(diǎn)擊“Camera”之“Gamma”,待染色體輪廓清晰;點(diǎn)“OK”,以“jpg”格式保存圖片。二、分析:1.在電腦桌面上,雙擊“Karyo3.1”,打開分析軟件;2.點(diǎn)“Open”打開分析功效,打開待分析圖片;3.點(diǎn)擊“Metaphase”功效:3.1點(diǎn)擊“CropbyFreehandSelection”框選適合的染色體群;3.2若邊沿為黑色,則可依次點(diǎn)擊“Metaphase”→“Negative”→“Freehand”→“Negative”即可消除邊沿黑色;4.點(diǎn)擊“Analysis”功效:4.1點(diǎn)擊“ChromosomeDetection”:拉動(dòng)“▲”,調(diào)節(jié)適合亮度,點(diǎn)擊“√”,至染色體至46±2條即可。4.2于圖像空白處點(diǎn)擊右鍵,點(diǎn)“ShowonMetaphasePlate”,勾選“ChromosomeContours”、“ChromosomeCentromeres”等功效;4.3點(diǎn)擊“Add/Remove”:Add:于圖像區(qū)上方點(diǎn)擊“放大鏡”,放大待添加的染色體后,點(diǎn)左鍵畫線并閉合,松開左鍵完畢,即可添加;Delate:于圖像區(qū)點(diǎn)住要?jiǎng)h除的染色體,點(diǎn)右鍵,點(diǎn)“Delate”,即可刪除;6.3點(diǎn)擊“EditProfiles”:畫中軸線:于起點(diǎn)處點(diǎn)左鍵,終點(diǎn)處再點(diǎn)左鍵,不要移動(dòng)鼠標(biāo),再點(diǎn)右鍵,即可重新畫中軸線;畫著絲粒:按住“Shift”,左鍵在中軸線上適宜位置點(diǎn)擊,即可移動(dòng)著絲粒位置;6.4點(diǎn)擊“Scissors”:在待分割處點(diǎn)左鍵并移動(dòng)劃開,即可;6.5點(diǎn)擊“OverlapSeperation”:在端部交疊區(qū),點(diǎn)住左鍵,畫出交疊區(qū)邊沿輪廓,松開左鍵,即完畢;6.6點(diǎn)擊“CrossSeperation”:在中部交疊區(qū),點(diǎn)左鍵,移動(dòng)鼠標(biāo)到第二點(diǎn),再點(diǎn)左鍵,移動(dòng)鼠標(biāo)到第三點(diǎn),再點(diǎn)左鍵,移動(dòng)鼠標(biāo)至第四點(diǎn),再點(diǎn)左鍵,松開左鍵,即完畢(注意交疊區(qū)的四點(diǎn)要在染色體輪廓線以外);6.7點(diǎn)擊“UndoSeperation”:在待和合并區(qū)邊沿點(diǎn)擊左鍵即可;7、點(diǎn)擊“Karyogram”功效:核型配對(duì)自動(dòng)完畢,若需調(diào)節(jié),則可點(diǎn)擊不當(dāng)之染色體,再點(diǎn)“Analysis”,回到分析界面重新調(diào)節(jié),再次比對(duì),兼可使用下列功效,調(diào)節(jié)核型。7.1點(diǎn)擊“MirrorChromosome”:左鍵點(diǎn)目的染色體,反轉(zhuǎn)為鏡像;7.2點(diǎn)擊“StraightenChromosomes”:左鍵點(diǎn)一染色體,全部染色體被拉直;7.3點(diǎn)擊“StraightenOneChromosome”:左鍵點(diǎn)待拉直的染色體,即可拉直。再點(diǎn)右鍵,染色體恢復(fù)彎曲;7.4于核型圖空白處點(diǎn)擊右鍵,再點(diǎn)“ShowonKaryogram”,勾選“Midlines”、“Centromeres”、“AlignmentLines”,染色體上即可顯示。待配對(duì)無誤時(shí),點(diǎn)“File”→“Saveas”保存即可。
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