法醫(yī)物證學(11選修)

歡迎法醫(yī)物證學南方醫(yī)科大學法醫(yī)學系臺運春法醫(yī)物證學、法醫(yī)物證、法醫(yī)物證鑒定的概念法醫(yī)物證學的任務(wù)和意義概述

法醫(yī)物證學是運用醫(yī)學、生物學和其它自然科學的理論與技術(shù)，研究并解決與法律有關(guān)的生物性檢材的檢驗與鑒定的一門學科。法醫(yī)物證：對案件的真實情況有證明作用的物品和痕跡。與人體有關(guān)的組織器官或其分泌物、排泄物作案工具和致傷物日常用品及其附著物藥品、毒品、生草藥等指紋、掌紋、趾紋、足跡、鞋印等印鑒、票證、筆跡、文件、遺書及偽造品等

法醫(yī)物證鑒定：對與案件有關(guān)的生物性檢材進行專門檢驗，判斷它們在該案件中能否作為證據(jù)的過程。符合法律程序任務(wù)個體識別意義為偵察提供線索親權(quán)鑒定為審判提供證據(jù)為行政提供依據(jù)親子鑒定

Paternitytesting“親子鑒定熱〞摧毀家庭的基石造福人類還是戕害家庭？親子鑒定殺死了中國人的家庭忠誠“親子鑒定〞折射家庭信任危機親子鑒定拷問“真實的謊話〞親子鑒定有什么錯

應(yīng)用醫(yī)學和生物學的理論和技術(shù)判斷父母與子女是否有親生關(guān)系。1.1概念1.2開展史》古代三國：滴骨驗親〔《會稽先賢傳》〕明代：滴血認親〔“合血法〞〕電視劇《洗冤錄》中滴骨驗親劇照電影《九品芝麻官》中滴血認親劇照1920年，歐洲將血型用于親子鑒定1935年，美國開始親子鑒定1985年，PCR技術(shù)創(chuàng)造/使親子鑒定從排除走向認定1.2開展史》現(xiàn)代基于PCR的STR分型已成為非常成熟的技術(shù)手段，商業(yè)化試劑盒的開發(fā)和自動測序儀的應(yīng)用，結(jié)果科學可靠。案件量〔例/年〕：美國，20000；德法，3000余；我們中心2023年1800余。1.2開展史》當代1.3親子鑒定類型涉及民事糾紛涉及刑事案件涉及行政事務(wù)子女撫養(yǎng)、財產(chǎn)繼承懷疑產(chǎn)院調(diào)錯嬰兒強奸致孕案的生父確認碎尸案的身源認定殺嬰或拐賣兒童案孩子身源認定移民涉外公證失散親人親緣關(guān)系認定計劃外生育責任人確認或上戶口妊娠期限：280±14天，早產(chǎn)兒、過熟兒性交能力和生殖能力：受精期間遺傳特征〔遺傳性狀〕：最主要的依據(jù)1.4親子鑒定的依據(jù)多基因遺傳特征單基因遺傳特征遺傳特征是生物體表現(xiàn)的一切形態(tài)特征、生理特征和代謝類型的統(tǒng)稱。受多個基因控制和環(huán)境因素影響，如相貌、身高、智力受單個基因控制，遺傳方式明確，不受環(huán)境影響遺傳標記可檢測的、遺傳方式明確的性狀或基因1.4親子鑒定的依據(jù)遺傳特征紅細胞型、白細胞型、血小板型基因產(chǎn)物水平遺傳標記DNA水平遺傳標記血液細胞表面的遺傳標記血液蛋白質(zhì)的遺傳標記紅細胞酶型、血清酶型、血清型長度多態(tài)性序列多態(tài)性RFLP，VNTR，STR

SNP、mtDNA1.4親子鑒定的依據(jù)遺傳標記分類用于親權(quán)鑒定的遺傳標記的要求遺傳方式明確遺傳標記的分型終身不變，具有體細胞的穩(wěn)定性和遺傳的穩(wěn)定性檢測方法穩(wěn)定。不同實驗室、不同批次的結(jié)果相同具有遺傳多態(tài)性1.4親子鑒定的依據(jù)基因產(chǎn)物水平遺傳標記的局限性為基因編碼產(chǎn)物，多態(tài)信息容量小，應(yīng)用價值有限在基因表達過程中受許多因素影響，不能正確反映DNA多態(tài)性情況某些血型系統(tǒng)存在生理性變異和病理性變異，使判型錯誤易受環(huán)境中各種理化因素影響而失活，檢材難以保存檢測方法多樣、復雜，技術(shù)、人為誤差較大1.4親子鑒定的依據(jù)DNA遺傳標記的優(yōu)點直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的組成，不受表達過程環(huán)節(jié)影響是顯性遺傳標記，遺傳路徑明確多態(tài)性程度高，可到達肯定和否認結(jié)論檢材類型廣泛可進行復雜親權(quán)關(guān)系鑒定比較穩(wěn)定，不易受生理、病理影響1.4親子鑒定的依據(jù)DNA標記的開展1980：White首次描述限制片段長度多態(tài)性(RFLP)標記1985：Jeffreys發(fā)現(xiàn)可變數(shù)目串聯(lián)重復(VNTR)1985：聚合酶鏈反響(PCR)第一篇論文發(fā)表1988：FBI開始利用DNA分析協(xié)助辦案1991：短串聯(lián)重復序列(STR)第一篇論文發(fā)表1995：英國開始建立DNA數(shù)據(jù)庫1998：美國啟動CODIS〔DNA檢索系統(tǒng)〕數(shù)據(jù)庫2001：人類基因組方案HGP完成/同時發(fā)現(xiàn)300萬SNP……1.4親子鑒定的依據(jù)即DNA的結(jié)構(gòu)在不同的個體或等位基因之間存在差異。其本質(zhì)就是由于進化過程中各種原因引起染色體DNA中核苷酸排列順序發(fā)生了改變/即產(chǎn)生的DNA片段和DNA序列在個體間的差異。長度多態(tài)性序列多態(tài)性1.5DNA多態(tài)性短串聯(lián)重復序列〔shorttandemrepeat/STR〕也叫微衛(wèi)星DNA/是由2-6bp長的“核心序列〞串聯(lián)重復構(gòu)成。STR在人類基因組中分布廣泛/平均每6-10kb就出現(xiàn)一個。絕大多數(shù)位于非編碼區(qū)/極少數(shù)在編碼區(qū)域。長度多態(tài)性重復單位的長度2CA3AAT4AGAT5AAAGA二核苷三核苷四核苷五核苷TH01/asimplelocus

(TCAT)3-14516961737177818191851018911193Allele:*AmpFlSTR9.3188=TCASTRsHighlydiscriminatingAbundantingenomeAmenabletoautomationDiscreteallelesNon-isotopicLow-quantityDNAPCR-basedDegradedDNARapidtypingadvantages是指基因組內(nèi)特定核苷酸位置上存在著2種不同的堿基/其中較少的一種在群體的頻率不少于1%。通常表現(xiàn)出二態(tài)性。

優(yōu)勢：豐富遺傳穩(wěn)定性序列多態(tài)性單核苷酸多態(tài)性

〔singlemucleotidepolymorphisms/SNPs〕2.1總體思路

檢測遺傳標記的表型/觀察否符合相應(yīng)遺傳規(guī)律，并進行統(tǒng)計學計算，判斷血緣關(guān)系DNA核DNA線粒體DNA常染色體性染色體X染色體Y染色體父系遺傳母系遺傳22對/孟德爾DNA類型奶→父→孫女常用STR基因座及在染色體上的位置CSF1POD5S818D21S11TH01TPOXD13S317D7S820D16S539D18S51D8S1179D3S1358FGAVWAAMELAMELD2S1338D19S433PentaDPentaE在肯定孩子的某一遺傳基因必然來自生父〔生父基因obligatorygene/OG〕/而假設(shè)父〔allegedfather/AF〕不帶有這個基因時/可以排除他是孩子的生父。14/1513/1715/17否認親生2.2根本原理在肯定孩子的某一遺傳基因必然來自生父/而AF也帶有這個基因時/不能排除他是孩子的生父/這時可以計算他與孩子具有親生關(guān)系的相對時機有多大。13/1513/1715/17不排除親生肯定親生？×2.2根本原理父權(quán)指數(shù)〔paternityindex/PI〕PI＝AF提供OG成為小孩生父的可能性RM提供OG成為小孩生父的可能性H0：爭議父是孩子的生物學父親H1：隨機無關(guān)男子是孩子的生物學父親兩個概念13/1513/1715/17PI=1/2p13=12×0.1797=2.7821/2×p17+0×p13p13×p17+p17×p13==1.391PI=12p13=14p13父權(quán)相對時機〔relativechanceofpaternity/RCP/W〕RCP＝πPIπ

PI＋(1-π)PIPI＋1=π=0.5前概率〔π〕：非遺傳學證據(jù)相信爭議父是孩子生父的概率父權(quán)相對時機意義RCP值（%）意義99.73～可以肯定有親子關(guān)系99～99.73極可能有親子關(guān)系95～99非?？赡苡杏H子關(guān)系90～95可能有親子關(guān)系80～90傾向有親子關(guān)系50～80不能肯定是否有親子關(guān)系10～50傾向排除親子關(guān)系5～10不大可能有親子關(guān)系0.27～5不可能有親子關(guān)系

～0.27可以排除親子關(guān)系1、結(jié)果準確性更高99.73%→99.95%→99.99%2、結(jié)論嚴謹性更強可以肯定〔排除〕被檢男子是孩子的生物學父親→被檢男子是〔不是〕孩子的生物學父親/從遺傳學角度已經(jīng)得到科學合理確實信。DNA提取PCR擴增電泳別離檢測結(jié)果分析評估一般流程圖Chelex法、酚-氯仿法單基因座或復合擴增激光誘導熒光檢測或銀染各種檢材血液、唾液、精斑、毛發(fā)、肌肉、骨骼、牙齒等根據(jù)等位基因ladder分型2.3親子鑒定方法分型結(jié)果違反Mendelian定律突變〔親生〕不違反Mendelian定律非親生親生多個遺傳標記聯(lián)合檢測非親生/巧合2.4結(jié)果評估累積非父排除概率超過0.9999雙親鑒定：15個以上單親鑒定：18個以上多個遺傳標記聯(lián)合檢測結(jié)果沒有基因座違反/W＞99.99%1~3個基因座違反3個以上基因座違反雙親鑒定排除親權(quán)關(guān)系單親鑒定肯定親權(quán)關(guān)系不排除親權(quán)關(guān)系增加更多基因座/計算PI無違反/W＞99.99%新違反被檢男子是孩子的生物學父親/從遺傳學角度已經(jīng)得到科學合理確實信被檢男子不是孩子的生物學父親/從遺傳學角度已經(jīng)得到科學合理確實信雙親鑒定單親鑒定不排除被檢男子是孩子的生物學父親案例分析案例一父權(quán)概率為99.99999957%。結(jié)論：爭議父是子的生物學父親，從遺傳學角度已經(jīng)得到科學合理確實信。簡要案情：父疑心子是否為其親生。D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358D5S818D13S317D16S539爭議父12/152910/1210/121510/128/1111/13生母16/1729/3011/1212/1315/1611/12811/13子12/162911/1212/1315128/1111D2S1338D19S433vWAD12S391D18S51D6S1043FGAAMEL爭議父20/231516/1818/241413/1418/26X/Y生母19/2413.2/1416/1920/2216/1814/1823/24X子19/2313.2/1516/1822/2414/1613/1418/24X/Y案例二簡要案情：父疑心子是否為其親生。D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358D5S818D13S317D16S539爭議父12/1330/318/127/1214/189/108/1111/12生母14/1529/30111216118/1011/12子11/14301110/1215/1611811/12D2S1338D19S433vWAD12S391D18S51D6S1043FGAAMEL爭議父18/2313/1414/1818/2016/1814/1822/25X/Y生母18/1914/15.214/1719/221611/1921/24.2X子17/1913/15.217/2019/22161124/24.2X/Y10個基因座違反遺傳規(guī)律。結(jié)論：爭議父把是子的生物學父親，從遺傳學角度已經(jīng)得到科學合理確實信。案例三D3S1358TH01D13S317D16S539D2S1338D8S1179D21S11D7S820父315/16710/119/1418/2412/14298/10母315/178/99/119/122412/1330/31.211/12子315/177/810/1112/152412/1429/31.210/12CSF1POD19S433vWATPOXD18S51AMELD5S818FGA父310/1213/15.217/18813/19X/Y1124.2/25母311/1213/14.2148/1113/14X10/1222/26子310/1114.2/15.214/18813/14X/Y10/1125/26PentaDPentaELPLF13BFESFPSF13A01父39/12111010123.2/5母311/135/11109/10113.2子312/135/11101011/123.2/5簡要案情：父疑心子是否為其親生。僅D16S539違反孟德爾遺傳規(guī)律，父權(quán)概率99.99876357%。結(jié)論：爭議父把是子的生物學父親，從遺傳學角度已經(jīng)得到科學合理確實信。檢測系統(tǒng)

被檢母親

嬰兒

被檢父親

D3S1358

15/19

17/19

17/18

vWA

14/17

15/16

14/14

FGA

22/24

21/27

20/21

D8S1179

10/16

10/14

13/14

D21S11

32.2/33.2

30/33.2

30/30

D18S51

14/15

15/16

15/17

D5S818

12/13

13/13

10/11

D13S317

9/11

11/11

8/9

D7S820

8/11

8/10

8/10

D16S539

9/14

9/9

9/11

THO1

9/9

9/9

7/9

TPOX

11/11

8/11

8/11

CSF1PO

11/12

12/12

10/12

D2S1338

17/18

19/23

23/24

D19S433

13/16.2

12/13

14/15.2

案例四簡要案情：父母疑心子在醫(yī)院報錯。檢測系統(tǒng)

被檢父1

(爸爸)

被檢父2

（爺爺）

孩子

D3S1358

15/16

16/16

15/16

vWA

16/16

14/16

14/16

FGA

21/26

24/26

21/25

D8S1179

12/14

14/16

14/14

D21S11

31.2/32

29/31.2

30/31.2

D18S51

14/19

13/14

14/17

D5S818

11/11

11/12

11/11

D13S317

9/11

11/11

11/12

D7S820

9/10

10/12

9/12

D16S539

9/9

9/12

9/11

THO1

7/9

7/9

7/9

TPOX

8/11

8/11

8/10

CSF1PO

10/13

10/12

12/13

PentaD

10/12

10/12

9/10

PentaＥ

11/16

11/16

16/18

簡要案情：被檢父1〔爸爸〕疑心孩子是其妻子與其父親〔被檢父2〕所生。簡要案情：劉某自稱是呂某包養(yǎng)的二奶/且與其生有非婚生孩子陳某某〔男〕。呂某與其妻子張某生有一子呂某某〔男〕?，F(xiàn)呂某意外死亡/由于涉及遺產(chǎn)糾紛事宜/張某和劉某共同委托要求鑒定陳某某是否是呂某的親生孩子。1、有無確信是呂某的生物性檢材遺留2、有無更多的近親屬？目的：反推出呂某的基因型組合3、同一父系鑒定，必要時可結(jié)合常染色體STR進行同胞關(guān)系鑒定如果為一男一女或者均為女孩，能否鑒定？個體識別

IndividualIdentification

應(yīng)用醫(yī)學和生物學的理論和技術(shù)判斷生物性檢材是否同一來源。概念概述生物性檢材的個體識別意義生物性檢材通常細小且分布范圍廣罪犯難以徹底毀掉或掩蓋身份不明的尸體、活體或檢材辨明身份現(xiàn)場遺落血液、毛發(fā)、皮膚、指甲、牙齒、精液、唾液等災難性事故、水浮尸被拐賣的婦女、兒童被追捕的罪犯蠟塊、切片、組織等為偵查提供線索為審判提供證據(jù)生物性檢材是經(jīng)歷了環(huán)境調(diào)節(jié)作用的人體組織與器官或人體體液、分泌物、排泄物及由它們形成的生物性斑痕，由于環(huán)境的作用使生物性檢材具有不確定性，對法醫(yī)鑒定人是一個嚴峻的考驗。生物性檢材的法醫(yī)學特點血痕：現(xiàn)場地面、墻壁、家具、衣服、兇器、指甲縫等。黑暗現(xiàn)場用魯米諾噴射〔發(fā)出熒光〕。精斑：可附于衣褲、被褥、草紙、被害人腹壁、大腿和陰毛上。必要時用紫外線照射〔銀白色帶淡紫暈的熒光〕毛發(fā)：常見于地面、被褥、兇器上；死者手中、口中和衣服；強奸案被害人內(nèi)衣、外陰和大腿間唾液：現(xiàn)場煙頭、口香糖、牙簽、飲料容器及咬痕上皮膚及其它臟器組織碎片：可見于被害人或罪犯指甲內(nèi)；交通事故的車輪、擋泥板、車廂棱角、底盤生物性檢材的尋找、采集、包裝和送檢生物性檢材的尋找新鮮血：活體，靜脈血，EDTA抗凝；尸體，末梢血管血。4℃保存或干凈紗布、濾紙上晾干血痕：必須同時取周邊無斑痕局部做對照小件物品整件提取大件物品切割、刮取泥土上整塊取下，襯以消毒棉花于盒內(nèi)以防震碎體液、分泌液、排泄物、器官組織奸殺或死因不明女性尸體：取陰道內(nèi)容物，必要時取肛門、會陰、口腔標本毛發(fā)用鑷子夾取，勿損壞附著物皮膚、碎骨、臟器碎塊及煙頭，用鑷子或手套收集，不可加防腐劑生物性檢材的采集低溫或晾干保存，盡快送檢紙帶、紗布或玻璃容器包裝或存放，勿用塑料膜袋包裝物外注明物品名稱、來源、數(shù)量、采集日期等送檢同時附必要的對照樣本，如被害人或嫌疑人的血液、唾液必須附有委托書，且寫明送檢機關(guān)和聯(lián)系人、送檢物品清單、案情介紹、送檢目的要求等。包裝和送檢個體識別一般程序肉眼檢查預試驗確證試驗種屬鑒定個體識別精斑檢驗血痕檢驗數(shù)量、分布、形狀、色澤，重構(gòu)現(xiàn)場確定部位和分布，便于準確取材，提高檢出率篩除非血痕檢材聯(lián)苯胺試驗、酚酞試驗篩選可疑精斑酸性磷酸酶法證明檢材是血痕血色原結(jié)晶試驗確證檢材是精斑精子檢出法、環(huán)狀沉淀反應(yīng)確定是否是人血ELISA、Alu序列檢測確定是否人精斑抗p-30血清血型測定（吸收試驗）DNA檢測（STR、MtDNA）血型測定（中和試驗）DNA檢測（STR、MtDNA）一個案例引發(fā)我的注意委托鑒定女式內(nèi)褲襠部明顯斑痕是否含精液成分試紙條檢測陽性，但陽性區(qū)域條帶顏色較質(zhì)控區(qū)條帶和陽性對照略弱沉渣涂片鏡檢未發(fā)現(xiàn)精子細胞，僅見上皮細胞二