第十七章 基因診斷技術(shù)及其臨床應(yīng)用進(jìn)展

本章主要學(xué)習(xí)內(nèi)容和要求主要學(xué)習(xí)內(nèi)容要求基因診斷

的含義

PCR技術(shù)在臨床上的應(yīng)用SNP技術(shù)在臨床的應(yīng)用進(jìn)展掌握

第十七章基因診斷技術(shù)及其臨床應(yīng)用進(jìn)展

核酸分子雜交技術(shù)的原理及應(yīng)用DNA測序技術(shù)的原理及應(yīng)用腫瘤相關(guān)基因檢測熟悉了解PCR-SSCP技術(shù)的原理及應(yīng)用有關(guān)高血壓、糖尿病等疾病基因診斷進(jìn)展上一頁下一頁返回第一節(jié)概述一、基因診斷的含義

基因診斷是用直接探查基因的存在和缺陷技術(shù)，對人類狀態(tài)和疾病做出診斷的方法。它是以遺傳物質(zhì)（如：DNA或RNA）為檢查對象，利用分子生物學(xué)技術(shù)，通過檢查基因的結(jié)構(gòu)或表達(dá)量的多少來診斷疾病的方法。這里的遺傳物質(zhì)既可是外源性基因（如侵入機(jī)體的病毒、細(xì)菌、支原體等病原微生物的基因），也可以是內(nèi)源性的基因（如癌基因、抑癌基因或突變的基因等）。主要用于感染性疾病病原體診斷、先天遺傳性疾病診斷、基因突變性疾?。ㄈ缒[瘤）診斷、產(chǎn)前診斷、親子鑒定和法醫(yī)物證等。

基因診斷的內(nèi)容主要包括有：基因突變檢測；基因連鎖分析；基因表達(dá)分析；病原體診斷等等。上一頁下一頁返回

二、分子生物學(xué)診斷的對象及在診斷中的位置

轉(zhuǎn)錄翻譯分泌和表達(dá)

DNA核膜蛋白細(xì)胞膜臨床表現(xiàn)

mRNA功能性產(chǎn)物

核酸診斷生化診斷血清學(xué)診斷臨床診斷

（基因診斷）（酶法測定）（血清蛋白）上一頁下一頁返回第二節(jié)基因診斷技術(shù)及其原理聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）限制性片段多態(tài)性（RFLP）等位基因特異性寡核苷酸分析（ASO）基因芯片技術(shù)（genechip）逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT－PCR）核酸分子雜交STR技術(shù)單核苷酸多態(tài)性(SNP)DNA測序技術(shù)上一頁下一頁返回reverseprimerforwardprimer3'5'5'3'5'5'3'5'5'3'5'5'3'5'5'3'5'5'3'PCR的原理鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的雪崩效應(yīng)3'5'5'3'5'5'3'3'5'5'3'5'5'3'3'5'5'3'5'5'3'3'5'5'3'5'5'3'3'5'5'3'5'5'3'3'5'5'3'5'5'3'上一頁下一頁返回PCR技術(shù)的分類

免疫PCR（Immuno－PCR，I-PCR）套式引物PCR（NestedprimerPCR）反轉(zhuǎn)錄PCR（ReversetranscriptionPCR，RT-PCR）反向PCR（ReversePCR）標(biāo)記PCR（LabelledprimersPCR）不對稱PCR（AsymmetricPCR）玻片PCR（Slide—PCR）定量PCR錨定PCR（AnchoredPCR）

上一頁下一頁返回二、核酸分子雜交技術(shù)

核酸分子雜交是指兩條互補(bǔ)單鏈核酸（DNA或RNA）在一定條件下按堿基互補(bǔ)配對原則退火形成雙鏈的過程。它是研究核酸結(jié)構(gòu)與功能的常用技術(shù)。雜交的雙方是探針與待檢核酸，雜交后形成的雙鏈分子稱為雜交分子（DNA－DNA、DNA－RNA或RNA－RNA）。上一頁下一頁返回（一）Southern印跡雜交英國人Southern于1975年創(chuàng)建。其基本方法是將待檢測的DNA分子用/不用限制性內(nèi)切酶消化后，通過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離，繼而將其變性并按其在凝膠中的位置轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜或尼龍膜上，固定后再與同位素或其他標(biāo)記物標(biāo)記的DNA或RNA探針進(jìn)行反應(yīng)。如果待檢物中含有與探針互補(bǔ)的序列，則兩者通過堿基互補(bǔ)的原理進(jìn)行結(jié)合，洗滌游離探針后用自顯影或其他合適的技術(shù)進(jìn)行檢測，從而顯示出待檢的片段及其相對大小。臨床上主要用于進(jìn)行疾病的連鎖分析、基因缺失診斷。由于DNA印跡雜交技術(shù)相對較煩瑣，需要的DNA量較大,在取材量受限的疾病診斷中已被其他方法所取代。上一頁下一頁返回（二）Northern印跡雜交

是一種研究RNA的方法，可用于測定細(xì)胞的總RNA或mRNA分子量的大小。其基本原理和基本過程與Southern雜交相似，不同之處在于：①Northern印跡雜交檢測的對象為RNA，而Southern印跡雜交檢測的是DNA。②Northern印跡雜交是在RNA電泳前對其進(jìn)行變性，并在電泳時(shí)加入變性劑，使RNA電泳時(shí)保持變性狀態(tài)，而Southern印跡雜交是在電泳后進(jìn)行變性。上一頁下一頁返回（三）斑點(diǎn)雜交斑點(diǎn)雜交（dotblotting）即狹縫雜交，其基本原理是將被檢樣品點(diǎn)到一張硝酸纖維素膜上，烘烤固定，預(yù)雜交后，經(jīng)中和、洗脫、干燥，再將其和探針放入復(fù)性緩沖溶液中緩緩復(fù)性，洗滌干燥后進(jìn)行放射自顯影，觀察結(jié)果。若雜交樣品為RNA需在點(diǎn)樣前對RNA進(jìn)行變性后再進(jìn)行點(diǎn)樣，若為DNA在點(diǎn)樣后對膜進(jìn)行變性處理。斑點(diǎn)雜交是一種快速、簡便、既可檢測DNA又可檢測RNA的方法，可同時(shí)檢測多個(gè)樣品，既可進(jìn)行定性還可以進(jìn)行半定量。上一頁下一頁返回（四）原位雜交原位雜交(insituhybridization，ISN）就是在保持細(xì)胞基本形態(tài)的情況下，用放射性核素或非放射性核素標(biāo)記的探針與細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA進(jìn)行雜交。若探針是同位素標(biāo)記，雜交后需進(jìn)行放射自顯影，然后觀察曝光點(diǎn)在組織或染色體分裂象上的相對位置。若探針用熒光標(biāo)記，雜交后用熒光顯微鏡直接觀察，現(xiàn)已發(fā)展了多色熒光技術(shù)，因此可同時(shí)檢測多種DNA或RNA的情況。原位雜交由于是在原位檢測，因此在對特定DNA或RNA進(jìn)行檢測的同時(shí)還可對其進(jìn)行定位。上一頁下一頁返回三、ＤＮＡ測序技術(shù)

（一）雙脫氧鏈終止法

基本原理是：DNA聚合酶利用單鏈DNA作為模板，準(zhǔn)確合成互補(bǔ)DNA鏈，它不僅可以以單脫氧核苷酸（dNTP）為底物，而且可以以雙脫氧核苷酸（ddNTP）為底物，若在合成過程中3’-末端摻入了ddNTP，DNA鏈的生長將會(huì)被終止，因此生成一系列不同長度的DNA片段。

基本操作步驟：共設(shè)4個(gè)反應(yīng)管，各管中同樣加入DNA模板、DNA聚合酶、放射性核素32P標(biāo)記的引物、4種dNTP，將四種不同的ddNTP（ddATP、ddTTP、ddGTP、ddCTP）分別加入相應(yīng)管進(jìn)行溫育，將四管反應(yīng)產(chǎn)物平行加到同一變性凝膠上作電泳分離，通過放射自顯影術(shù)可獲得一系列全部以3′—末端ddNTP為終止堿基的長度不等的DNA片段的電泳譜帶，通過電泳譜帶可直接讀出DNA的核苷酸順序。上一頁下一頁返回三、ＤＮＡ測序技術(shù)

（一）雙脫氧鏈終止法

上一頁下一頁返回三、ＤＮＡ測序技術(shù)

（一）雙脫氧鏈終止法

上一頁下一頁返回三、ＤＮＡ測序技術(shù)

（二）化學(xué)降解法

基本原理是：不同的堿基（G，A＋G，C＋T，C）可被不同的化學(xué)試劑特異地修飾，使相應(yīng)的糖苷鍵變得不穩(wěn)定，造成堿基的特異性切割，產(chǎn)生四組不同長度的DNA鏈的反應(yīng)混合物，反應(yīng)后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳和放射自顯影也可讀出DNA的序列。優(yōu)點(diǎn)：模板不需體外酶促反應(yīng)，只要末段標(biāo)記的DNA片段，無論單鏈或雙鏈，分別標(biāo)記3′端和5′端可進(jìn)行雙側(cè)讀取檢測短的寡核苷酸片段；

缺點(diǎn)：方法復(fù)雜費(fèi)時(shí)，末段標(biāo)記比活性低。上一頁下一頁返回三、ＤＮＡ測序技術(shù)

（三）自動(dòng)測序技術(shù)自動(dòng)測序技術(shù)采用自動(dòng)化測序儀進(jìn)行，其原理同雙脫氧鏈終止法。不同的是自動(dòng)測序技術(shù)是用四種不同的熒光染料分別標(biāo)記ddNTP或標(biāo)記引物，采用激光掃描器同步掃描，計(jì)算機(jī)進(jìn)行閱讀和編輯，電泳結(jié)束后，結(jié)果以彩圖和序列形式打印出來。自動(dòng)測序技術(shù)結(jié)果清晰、準(zhǔn)確、分辨率高，特別是近年來采用毛細(xì)管電泳技術(shù)取代傳統(tǒng)的聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA分離，大大提高了測序的速度和測序的功能。自動(dòng)測序技術(shù)在疾病診斷、家族遺傳性疾病分析、親子鑒定、法醫(yī)領(lǐng)域等都被廣泛應(yīng)用。上一頁下一頁返回三、ＤＮＡ測序技術(shù)

（三）自動(dòng)測序技術(shù)

上一頁下一頁返回四、單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）分析單個(gè)核苷酸的改變即可造成DNA片段單鏈構(gòu)象的改變，單鏈DNA片段呈復(fù)雜的空間折疊構(gòu)象，這種立體結(jié)構(gòu)主要是由其內(nèi)部堿基配對等分子內(nèi)相互作用力來維持的；當(dāng)有一個(gè)堿基發(fā)生改變時(shí)，會(huì)或多或少地影響其空間構(gòu)象，使構(gòu)象發(fā)生改變，空間構(gòu)象有差異的單鏈DNA分子在聚丙烯酰胺凝膠中受阻力大小不同。因此將PCR產(chǎn)物在變性后通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)，可以非常敏銳地將構(gòu)象上有差異的分子分離開，借以檢測出突變位點(diǎn)。

SSCP多與PCR技術(shù)聯(lián)用（PCR－SSCP）檢測基因突變，提高了基因突變檢測的靈敏性。上一頁下一頁返回五、單核苷酸多態(tài)性（SNP）分析單核苷酸多態(tài)性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）主要是指在基因級水平上由單個(gè)核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。它是人類可遺傳的變異中最常見的一種，在人群中的發(fā)生率大于l%。SNP有單堿基的轉(zhuǎn)換、顛換、插入、缺失等形式，但更多的是單個(gè)堿基的轉(zhuǎn)換?，F(xiàn)今，人們認(rèn)為基因組中的這類多態(tài)性有助于解釋個(gè)體間的表型差異、不同群體和個(gè)體對疾病，特別是對復(fù)雜疾病易感性的差異，以及對各種藥物的耐受性和對環(huán)境因素反應(yīng)的不同。上一頁下一頁返回五、單核苷酸多態(tài)性（SNP）分析

SNP作為一種遺傳標(biāo)記具有以下特性：（1）密度高它在基因組中的分布比微衛(wèi)星標(biāo)記廣泛。（2）具有代表性某些位于基因內(nèi)部的SNP有可能直接影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平，因此它們本身可能就是疾病遺傳機(jī)制的候選改變位點(diǎn)。（3）遺傳穩(wěn)定性（4）分析易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化由于SNP是雙等位基因標(biāo)記，容易進(jìn)行自動(dòng)化批量檢測，分析也相對簡單，不需要像檢測RFLP及微衛(wèi)星多態(tài)標(biāo)記那樣進(jìn)行片段長度的測量?？s短了研究時(shí)間。上一頁下一頁返回五、單核苷酸多態(tài)性（SNP）分析一個(gè)遺傳標(biāo)記的頻率在患者明顯高于正常個(gè)體時(shí)，表明該標(biāo)記與疾病關(guān)聯(lián)。通過比較分析兩者的單倍型和發(fā)現(xiàn)連鎖不平衡。常認(rèn)為與下列疾病有關(guān)聯(lián)①肝炎的慢性化；②白內(nèi)障；③老年性癡呆；④妊娠高血壓；⑤疾病相關(guān)基因鑒定，如牛皮癬、哮喘相關(guān)基因SNP的鑒定；⑥SNP檢測與臨床表現(xiàn)的相關(guān)性，如抗高血壓藥物療效的個(gè)體差異；⑦單基因遺傳病診斷，如血友病、地貧等。上一頁下一頁返回六、限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析

限制性片段長度多態(tài)性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)分析是限制性內(nèi)切酶、核酸電泳、印跡技術(shù)、探針-雜交技術(shù)的綜合應(yīng)用，多用于臨床遺傳性疾病的基因診斷。RFLP可應(yīng)用于對致病基因尚一無所知或知之甚少，還沒有搞清其基因突變位點(diǎn)的，依靠基因外與其基因緊密連鎖的RFLP為遺傳標(biāo)志，進(jìn)行間接分析。因?yàn)榛蛲饣蚧騼?nèi)的中性突變可引起限制酶切位點(diǎn)的丟失或新位點(diǎn)的出現(xiàn)，有些則沒有。所以DNA用限制酶水解后，由于酶切位點(diǎn)的有無，得到的DNA片段長度也不一樣，由電泳分離限制片段大小，再由標(biāo)記探針與限制片段雜交顯示出來。對那些致病基因已完全了解的，可根據(jù)酶切位點(diǎn)的有無，結(jié)合DNA探針雜交，直接分析做出判斷。上一頁下一頁返回七、基因芯片（genechip）技術(shù)基因芯片（genechip）通常指DNA芯片，其基本原理是將大量已知的寡核苷酸分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過檢測雜交信號的強(qiáng)弱進(jìn)而判斷樣品中靶分子的數(shù)量?；蛐酒夹g(shù)集成了探針固相原位合成技術(shù)、照相平板印刷技術(shù)、高分子合成技術(shù)、精密控制技術(shù)和激光共聚焦顯微技術(shù)，使基因芯片具有微型化、集約化和標(biāo)準(zhǔn)化的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了對靶基因快速、高通量的檢測。上一頁下一頁返回七、基因芯片（genechip）技術(shù)

基因芯片在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中具有廣闊的應(yīng)用前景。①在優(yōu)生方面：目前知道有600多種遺傳疾病與基因有關(guān)。婦女在妊娠早期用DNA芯片做基因診斷，可以避免許多遺傳疾病的發(fā)生。②在疾病診斷方面：由于大部分疾病與基因有關(guān)，而且往往與多基因有關(guān)，因而，利用DNA芯片可以對一些疾病進(jìn)行診斷。③在器官移植、組織移植、細(xì)胞移植的基因配型方面④病原體診斷：如細(xì)菌和病毒鑒定、耐藥基因的鑒定。⑤在環(huán)境對人體的影響方面：已知花粉過敏等人體對環(huán)境的反應(yīng)都與基因有關(guān)。⑥在法醫(yī)學(xué)方面：DNA芯片比早先的DNA指紋鑒定更進(jìn)一步。上一頁下一頁返回八、高通量篩選（HighThroughputScreening）技術(shù)

高通量篩選技術(shù)是指以分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法為基礎(chǔ)，用微板形式作為實(shí)驗(yàn)工具載體，用自動(dòng)化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗(yàn)過程，用靈敏快速的檢測儀器采集實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)，用計(jì)算機(jī)對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，在較短時(shí)間對數(shù)以萬計(jì)化合物樣品進(jìn)行篩選，獲得線索分子。高通量篩選技術(shù)采用微孔板作為反應(yīng)容器，具有固定的分布模式，不同的微孔板通過條形碼加以標(biāo)記。自動(dòng)化操作系統(tǒng)通過光電閱讀器對特定的微孔板上的特定位置進(jìn)行操作，并將操作結(jié)果及相關(guān)數(shù)據(jù)存貯在計(jì)算機(jī)內(nèi)，使篩選結(jié)果準(zhǔn)確，實(shí)驗(yàn)過程快速。上一頁下一頁返回第三節(jié)臨床常用的基因診斷項(xiàng)目一、病原微生物檢測二、腫瘤相關(guān)基因檢測（一）癌基因（二）抑癌基因三、遺傳性疾病的基因診斷（見遺傳病章節(jié)）上一頁下一頁返回病原體的檢測人類免疫缺陷病毒（HIV）乙肝病毒(HBV)及其分型丙肝病毒（HCV）與戊肝病毒（HEV）人乳頭瘤病毒（HPV）及其分型結(jié)核桿菌其它病原微生物:腦膜炎雙球菌、淋球菌、寄生蟲等上一頁下一頁返回腫瘤相關(guān)基因檢測（一）惡性腫瘤分子標(biāo)記的檢測

如慢性粒細(xì)胞性白血病(CML）。CML的費(fèi)城染色體(即ph染色體）是標(biāo)記染色體，它是第9號染色體的c－abl原癌基因易位至22號染色體ber基因內(nèi),從而形成ber／abl融合基因，這是白血病細(xì)胞所特有的。（二）癌基因、抗癌基因缺失與點(diǎn)突變檢測

設(shè)計(jì)引物有兩種方式：①若缺失DNA片段不大，一對引物分別與缺失兩側(cè)的順序互補(bǔ)，PCR擴(kuò)增后，有缺失的樣品，擴(kuò)增片段減少；②若缺失片段較大，一對引物設(shè)計(jì)在缺失片段內(nèi)，有缺失的樣品無靶DNA的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。（三）腫瘤相關(guān)病毒基因的研究及檢測

目前認(rèn)為與人類腫瘤發(fā)生有關(guān)的病毒有乙肝病毒（HBV）、人乳頭瘤病毒（HPV）、EB病毒（EBV）、人巨細(xì)胞病毒（HCMV）等等。上一頁下一頁返回遺傳性疾病的基因診斷

α、β地中海貧血鐮形細(xì)胞貧血甲型血友病苯丙酮尿癥有遺傳傾向的疾病，尤其是老年性疾病，如糖尿病、高血壓、一些腫瘤疾病等

上一頁下一頁返回法醫(yī)學(xué)應(yīng)用

個(gè)體識別親子鑒定性別鑒定上一頁下一頁返回第四節(jié)疾病基因診斷的進(jìn)展一、高血壓病相關(guān)基因診斷進(jìn)展

高血壓候選基因包括涉及腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)、交感神經(jīng)系統(tǒng)、下丘腦-垂體軸、內(nèi)皮素、利鈉肽、激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)、類固醇激素、前列腺素、生長因子和激素、骨架蛋白和粘附分子、細(xì)胞內(nèi)信使、載脂蛋白、離子通道或轉(zhuǎn)運(yùn)體等至少150種基因。上一頁下一頁返回第四節(jié)疾病基因診斷的進(jìn)展一、高血壓病相關(guān)基因診斷進(jìn)展基因檢測指導(dǎo)原發(fā)性高血壓的預(yù)防、診斷和治療尚處在探索階段。這方面令人關(guān)注的研究有：(1)高血壓易感者的早期檢出如AGT、ACE和上皮鈉通道等基因多態(tài)性與鹽敏感關(guān)系的研究。(2)高血壓靶器官損傷的早期判斷盡管ACE基因I/D多態(tài)性與高血壓發(fā)病間的關(guān)系未能確立，目前許多研究結(jié)果顯示ACE基因D等位基因頻率增加與腦卒中、左心室肥厚、冠心病、心肌梗死和腎小血管病變等有一定的相關(guān)關(guān)系。(3)高血壓的個(gè)體化治療患者對于抗高血壓藥物的療效反應(yīng)及藥物副反應(yīng)的個(gè)體差異與遺傳有一定關(guān)系。某些基因多態(tài)性與各類抗高血壓藥物降壓效果間的對應(yīng)性研究、細(xì)胞色素P450藥物代謝酶基因多態(tài)性與抗高血壓藥物療效和副作用關(guān)系的研究都頗受關(guān)注。高血壓發(fā)病、靶器官損傷和藥物反應(yīng)的遺傳背景都很復(fù)雜，研究單一基因多態(tài)性顯然不能全面反映上述病理或藥理過程的遺傳本質(zhì)。上一頁下一頁返回第四節(jié)疾病基因診斷的進(jìn)展一、高血壓病相關(guān)基因診斷、治療進(jìn)展

目前高血壓基因治療的主要策略有：①采取質(zhì)粒DNA直接導(dǎo)入或經(jīng)病毒載體介導(dǎo)技術(shù),增加舒血管物質(zhì)的生成;②采取反義寡核苷酸阻斷縮血管物質(zhì)的生成。目前在阻斷縮血管物質(zhì)生成方面,基因治療的靶基因主要針對RAS系統(tǒng)的某些成份,如AG和AT1基因。在增加舒血管物質(zhì)生成方面，靶基因主要涉及心鈉素、激肽釋放酶、一氧化氮合酶、腎上腺髓質(zhì)降壓素和降鈣素基因相關(guān)肽等。上一頁下一頁返回二、糖尿病相關(guān)基因診斷進(jìn)展

糖尿病的分子遺傳學(xué)研究,也遇到與原發(fā)性高血壓同樣的問題，這類復(fù)雜性疾病具有以下共同特點(diǎn):遺傳模式未確定、異質(zhì)性強(qiáng)、外顯率低、多個(gè)基因參與、單一基因的作用微弱、發(fā)病與環(huán)境因素和生活方式有關(guān)等。多個(gè)基因變異的共同作用使攜帶者對疾病產(chǎn)生易感性,發(fā)病需要一組基因和一組環(huán)境因素的共同作用,不同患者的發(fā)病可能存在這些因素的不同組合。多基因病的這些特點(diǎn)給識別相關(guān)基因帶來的巨大障礙,用單基因病研究的理論、策略和方法是很難逾越的。上一頁下一頁返回二、糖尿病相關(guān)基因診斷進(jìn)展

線粒體基因突變糖尿病的發(fā)現(xiàn)是近年來糖尿病分子遺傳學(xué)研究的重要進(jìn)展之一，也是近年來糖尿病研究的一大熱點(diǎn)。線粒體基因突變中唯線粒體tRNA

leu(uuR)A3243G突變被國內(nèi)外學(xué)者公認(rèn)，目前WHO己將其歸類為特殊類型糖尿病，屬胰島β細(xì)胞功能缺陷糖尿病。它是目前己知的單基因突變糖尿病中患病率最高，且能以簡易的分子生物學(xué)技術(shù)檢出，首先進(jìn)入日常臨床基因診斷的一種糖尿病亞型。上一頁下一頁返回三、腫瘤相關(guān)基因診斷進(jìn)展

HER2(人類表皮生長因子受體2)是一種原癌基因,約有25%～30%的乳腺癌患者過表達(dá)HER2蛋白。HER2基因擴(kuò)增和過度表達(dá)與乳腺癌的惡性程度和侵襲性具有很大的相關(guān)性。因此，HER2的表達(dá)情況可以作為預(yù)測腫瘤預(yù)后的一項(xiàng)重要指標(biāo)。在特異性HER2單克隆抗體藥物赫賽汀(Herceptin)問世之后,HER2檢測已成為篩選乳腺癌患者的常規(guī)檢查。HER2陽性是Herceptin治療的絕對必要條件。上一頁下一頁返回三、腫瘤相關(guān)基因診斷進(jìn)展

分子診斷的進(jìn)展現(xiàn)已允許在單個(gè)試驗(yàn)中評估多個(gè)基因或蛋白。在篩選正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞之間的個(gè)別基因/蛋白的差異表達(dá)、確定與癌癥發(fā)生的關(guān)鍵途徑以及將癌癥分成各種臨床類型用于選擇適用于特定治療的患者等方面，基因譜和蛋白質(zhì)組學(xué)具有振奮人心的潛能。隨著更多的和全方位的診斷性、預(yù)測性、預(yù)后性分子檢測進(jìn)入腫瘤醫(yī)學(xué),將會(huì)使腫瘤患者從個(gè)性化診療中最大程度地獲益。上一頁下一頁返回四、基因診斷在法醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用

STR（shorttandemrepeat）短串聯(lián)重復(fù)序列，也叫微衛(wèi)星DNA，是一類廣泛存在于真核生物基因組中的DNA串聯(lián)重復(fù)序列。其核心序列為2-6bp，重復(fù)次數(shù)通