牛子苷對糖尿病小鼠糖脂代謝的影響

牛子苷對糖尿病小鼠糖脂代謝的影響

牛干是薔薇科植物的干燥成熟果實?，F代藥理學研究表明,牛蒡子提取物對實驗性糖尿病大小鼠均有顯著的降血糖作用,而其有效成分牛蒡子苷應用于糖尿病治療的藥理和臨床報道較少。本實驗腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立糖尿病小鼠模型,觀察牛蒡子苷對糖尿病小鼠血糖,血脂水平的干預作用。1實驗分組、給藥與儀器1.1動物雄性清潔級昆明種小鼠80只,體質量(22±3)g,由安徽省醫(yī)學科學研究所實驗動物中心提供。1.2藥品與試劑牛蒡子苷購于南京澤朗醫(yī)藥有限公司;鹽酸二甲雙胍,規(guī)格0.5g/片,中美上海施貴寶制藥有限公司;鏈脲佐菌素,購于美國sigma公司;糖化血清蛋白試劑盒,南京建成生物研究所;血清胰島素放射免疫試劑盒,北京北方生物技術研究所。1.3儀器與設備美國強生血糖儀(美國強生公司);日立7020全自動生化分析儀(日本);722S紫外分光光度計(上海精密科學儀器有限責任公司);r計數儀(中國科技大學中佳科技實業(yè)有限公司)。1.4方法1.4.1糖尿病小鼠模型的制備80只昆明小鼠適應性喂養(yǎng)5d后,隨機取出10只作為正常對照組。所有小鼠禁食不禁水16h,pH4.4枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖溶液冰浴中新鮮配制1%的STZ溶液,造模組小鼠按80mg·kg-1腹腔注射,正常組予以等注射容量的緩沖液。自由飲食7d后,尾尖取血,血糖儀測定血糖值,以隨機血糖≥16.7mmol/L視為糖尿病模型小鼠。1.4.2分組將造模成功的40只糖尿病小鼠隨機分為4組,糖尿病模型組,ARC200mg·kg-1,400mg·kg-1組,二甲雙胍500mg·kg-1組。每組每天10mL·kg-1容量灌胃給藥,正常對照組與模型組予以等給藥容量的蒸餾水,連續(xù)4周。1.4.3實驗指標測定給藥第28天尾尖取血測各組小鼠隨機血糖值。第29天處理動物,處理動物前禁食12h。各組小鼠稱重,摘眼球取血,3500rpm離心,收集血清,-20℃保存。按試劑盒說明測小鼠血清GSP,INS水平,日立全自動生化儀測小鼠血清TG,TC,HDL-C,LDL-C水平。1.5統計學方法數據以(xˉ±s)(xˉ±s)表示,采用SPSS13.0統計軟件進行統計分析,P<0.05具有顯著性差異。2結果2.1arc對小鼠體重、血糖、糖化血清蛋白的影響實驗過程中糖尿病模型組,ARC200mg·kg-1組各死亡2只;ARC400mg·kg-1組,二甲雙胍組各死亡1只。如表1,表2所示,實驗4周后,與正常對照組相比,糖尿病模型組小鼠體重顯著降低,血糖、糖化血清蛋白顯著升高(P<0.01);與模型組相比,ARC低、高劑量組均可顯著降低糖尿病小鼠血糖(P<0.05,P<0.01)、糖化血清蛋白,具有統計學意義(P<0.05);ARC低、高劑量組均具有升高糖尿病小鼠體重的趨勢,但不具有統計學意義(P>0.05)。2.2牛素對糖尿病大鼠血清生化水平的影響如表3所示,與正常對照組相比,糖尿病模型組小鼠INS顯著降低,ARC各組對糖尿病小鼠血清INS水平無顯著性影響(P>0.05)。2.3優(yōu)化hdl-cp>0.05,hdl-cp>0.05水平如表4所示,與正常對照組相比,模型組小鼠TC,TG,LDL-C水平顯著提高(P<0.05,P<0.01,P<0.05),HDL-C(P<0.01)水平降低;高劑量ARC組可顯著降低糖尿病小鼠血清中TC,TG水平(P<0.05),對血清中HDL-C水平有升高趨勢但無顯著性差異(P>0.05),而對血清LDL-C水平無明顯影響(P>0.05)。3糖尿病模型小鼠血清中脂質代謝異常體內糖脂代謝紊亂是糖尿病最顯著的特征,而長期高血糖,高血脂水平則會進一步加重胰島β細胞的損害,嚴重威脅著糖尿病患者的身體健康。牛蒡子為菊科植物牛蒡的干燥成熟果實,是中醫(yī)傳統的天然降糖植物之一,為中藥降糖復方的重要組分之一。藥理學研究證明牛蒡子提取物對降低糖尿病動物模型血糖和防治糖尿病腎病具有良好的療效。牛蒡子苷作為其有效活性成分之一,探索其是否具有良好的降血糖功效,是開展本實驗的最終目的。STZ是目前使用的最為廣泛的糖尿病動物模型誘導劑,本實驗采用一次性腹腔注射80mg·kg-1的STZ制備糖尿病小鼠模型。實驗結果表明,ARC可顯著降低糖尿病小鼠的隨機血糖值和糖化血清蛋白值,而對血清中INS的水平無明顯影響。實驗結果表明ARC具有顯著的降糖功能,但其降血糖功能的機制可能與促進胰島β細胞的修復,提高胰島素的釋放無關。提示我們ARC其降血糖機制可能不依賴于胰島β細胞的功能,而與促進組織的葡萄糖攝取,抑制α-葡萄糖糖苷酶,增加胰島素敏感性有關,其降血糖機制需要進一步的研究。糖尿病模型小鼠存在血脂異常,其血清TG,TC,LDL水平顯著上升,HDL水平顯著降低。脂質代謝紊亂,長期高血脂水平可引起胰島β細胞脂質過氧化,誘導胰島β細胞凋亡。實驗結果表明,高劑量ARC可顯著降低血清中TC、TG含量,但對HDL-C、LDL-C無明顯影響。提示我們ARC具有一定的降血脂功效,能緩解胰島β細胞脂質化,減輕胰腺組織和功能損害的作用,但其降血脂功效具有局限性。通過檢測血清中INS水平,ARC對促進INS釋放無顯著性影響,說明ARC可能無法完全改善脂毒性對胰腺組織與功能的損害。