分光光度計(jì)操作規(guī)程與光譜分析技術(shù)

分光光度計(jì)操作規(guī)程與光譜分析技術(shù)一、儀器分析設(shè)備721、723可見分光光度計(jì)、752紫外可見分光光度計(jì)、UV-2401PC紫外可見分光光度計(jì)、UV-3150PC紫外可見近紅外分光光度計(jì)RF-5301PC熒光分光光度計(jì)、比色液及標(biāo)準(zhǔn)溶液、濾紙等。三、原 理光譜儀器是一種簡潔易用的分光光度法與紅外光譜的波長范圍不同，可以依據(jù)自己的需要選擇要使用的儀器。(或者透過率)與溶質(zhì)的濃度成正比(玻爾定律)。通過準(zhǔn)確濃度的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)其吸光值(透過率)作圖，我們就可以得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定未知濃度的待測樣品的吸光值(透過率)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較就可以得到其濃度。四、適用范圍可廣泛用于醫(yī)學(xué)衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保檢測、質(zhì)量掌握等方面作定量、定性分析。UV-3150PC紫外可見近紅外分光區(qū)的固體、液體樣品的吸取光譜，RF-5301PC熒光分光光度計(jì)的進(jìn)展數(shù)據(jù)處理與分析。五、操作步驟UV-3150PC紫外可見近紅外分光光度計(jì)為例表達(dá)光譜儀器的性能和操作方法。1、插上電源，翻開光度計(jì)前面的電源開關(guān)。2UVProbeUVProbeUVProbe中“Connect”圖標(biāo)聯(lián)機(jī)，消滅自檢畫面。3、如自檢完全部綠燈亮，則點(diǎn)擊“OK”進(jìn)入系統(tǒng)。假設(shè)消滅紅燈亮，可關(guān)掉光度計(jì)重連接，假設(shè)仍未通過自檢，應(yīng)馬上報(bào)告儀器負(fù)責(zé)教師。4、完全通過并進(jìn)入系統(tǒng)，消滅UVProbe菜單欄和工具欄。UVProbe有四大主要模塊，包括光譜掃描模塊、光度測量模塊、時(shí)間掃描模塊和報(bào)告生成器。每種模式都可以直接點(diǎn)擊后面的方法設(shè)定按鈕設(shè)置方法。5、點(diǎn)下光譜掃描圖標(biāo)，消滅光譜掃描界面。6、點(diǎn)擊方法按鈕，消滅方法設(shè)置對(duì)話框。在此可以設(shè)置掃描波長范圍，儀器的最大范圍為3200～190nm?？梢栽O(shè)置掃描速度，一般可選中速(Medium)或快速(Fast)進(jìn)展掃描。采樣間隔表示光度計(jì)每隔多少nm讀一個(gè)吸光度值，如沒有特別要求，選擇自動(dòng)即可?？蛇x擇是否重復(fù)掃描曲線，假設(shè)重復(fù)則設(shè)置重復(fù)次數(shù)和間隔時(shí)間。7、點(diǎn)擊“SamplePreparation”輸入樣品信息。包括樣品的質(zhì)量、體積、稀釋倍數(shù)和測量光程等。也可以輸入樣品的其他信息。8、點(diǎn)擊“InstrumentParameters(儀器分析參數(shù))”設(shè)置測量方式和儀器的一些參數(shù)。在測量模式中可選擇“Transmittance透過率、“Absorbance、“Energy和(反射)”Reflectance3200～800nm5nm800～190nm2nm。假設(shè)包括這兩個(gè)范圍的波長如1500～500nm則選擇狹縫為5nm。9、換燈和檢測器可依據(jù)所測樣品進(jìn)展設(shè)置，換燈在393～282nm范圍內(nèi)任意值均可，換檢測器在895～750nm范圍內(nèi)任設(shè)一個(gè)值即可。但換燈和檢測器由于儀器進(jìn)展機(jī)械的移動(dòng)，會(huì)造成信號(hào)波動(dòng)較大，稱儀器噪音大，此時(shí)所得掃描曲線誤差較大，所以所設(shè)波長應(yīng)當(dāng)避開在樣品吸取峰位置以免影響測定值。10、全部參數(shù)設(shè)置完成后，兩個(gè)樣品架均不放置樣品或兩個(gè)均放上同樣的空白溶液，點(diǎn)擊“Baseline”，開頭進(jìn)展基線校正，儀器掃描完成后，點(diǎn)擊“λGoToWL”將波長轉(zhuǎn)到750nm，點(diǎn)擊“AutoZero”750nm0“Start”0.001，750nm0重進(jìn)展基線掃描。11、基線校正完成后，取出樣品架的空白溶液，放入樣品溶液，點(diǎn)擊“Start”開頭掃描曲線。掃描完成后，消滅保存路徑框和文件名框，設(shè)置好后消滅掃描曲線。12、曲線掃描完成后，在譜圖上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，消滅快捷菜單。點(diǎn)擊“AutoScale”可是軟件自動(dòng)調(diào)整圖像坐標(biāo)使之適合掃描所得數(shù)據(jù)。點(diǎn)擊“CrossHair>Display”鼠標(biāo)顯示為穿插線，用鼠標(biāo)將穿插線放到曲線上某點(diǎn)即可顯示該點(diǎn)的波長和吸光度值。13、點(diǎn)擊“Label”可以在譜圖上添加標(biāo)簽，可在其中輸入文本以標(biāo)記譜圖。點(diǎn)擊“Legend”消滅各數(shù)據(jù)保存圖，假設(shè)在前面框里勾選該光譜數(shù)據(jù)，則在左面重疊圖上顯示其曲線。14、假設(shè)從右鍵快捷菜單中選擇“Customize(自定義)”，可以自定義曲線顯示顏色還可定義坐標(biāo)軸的數(shù)值。15、得出曲線后可以對(duì)譜圖進(jìn)展一系列的處理。點(diǎn)擊“DataPrint(顯示數(shù)據(jù))”圖標(biāo)可以將譜圖曲線直接顯示為數(shù)值。點(diǎn)擊“Manipulate(運(yùn)算)”圖標(biāo)，可以進(jìn)展加減乘除、差譜、扣除空白、倒數(shù)光譜、對(duì)數(shù)光譜等處理。點(diǎn)擊“PeakPoint(顯示峰值)”按鈕顯示“波峰”和“波谷”的數(shù)值。點(diǎn)擊“PointPick”圖標(biāo)，輸入要顯示的波長值，馬上顯示出所輸入波特長的吸光度值。(5)點(diǎn)擊“PeakArea”，設(shè)定峰閾值，即顯示大于此閾值的峰區(qū)域。(6)點(diǎn)擊“Sewingbox(裁縫)”圖標(biāo)，可以進(jìn)展譜圖的裁剪和縫合。16、曲線掃描完成后數(shù)據(jù)實(shí)際直接保存在內(nèi)存中，并沒有保存到硬盤上，此時(shí)假設(shè)關(guān)閉窗口，電腦會(huì)提示“SomeSpectrumdatahasnotbeensaved!Doyoustillwanttoexitandlostunsavedchange?(?)”選擇“No”返回主界面保存全部數(shù)據(jù)。兩篇相關(guān)資料，感覺不錯(cuò)分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)》《紫外/可見分光光度計(jì)系統(tǒng)的使用方法》六、留意事項(xiàng)1、光度計(jì)燈源壽命有限，假設(shè)長時(shí)間不測量，應(yīng)通過 UVProbe軟件斷開連接(點(diǎn)擊“Disconnect”)，然后關(guān)閉光度計(jì)電源。2、使用分光光度計(jì)時(shí)要保證樣品室確定干凈，留神放入樣品，放入比色皿前肯定要先用濾紙和擦鏡紙將比色皿外外表擦干凈，不要污染樣品池和光度計(jì)外外表。3、儀器自檢和掃描的過程中，不要翻開樣品