儀器分析實驗指導(dǎo)書

試驗一 高效液相色譜法測定蛇床子提取物中蛇床子素的含量一、目的要求．理解反相色譜的原理和應(yīng)用。二、根本原理三、儀器與試劑儀器:高效液相色譜儀LC20A;PDA樣品:蛇床子根莖、根及葉。蛇床子素標(biāo)準(zhǔn)品。試劑:甲醇(AR)四、試驗內(nèi)容與步驟色譜條件:色譜柱AgilentXDB-C18色譜柱(4.6mm250mm,5μm);流淌75∶2530℃;流速1mL/min322nm10μL。1mg/ml蛇床子素標(biāo)準(zhǔn)液，分別取該標(biāo)溶液2μL,4μL,8μL,16μL進(jìn)樣,分別測數(shù)據(jù)處理機給出峰面積值,以標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量(μg)YX),得標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品液制備:精取蛇床子根、根莖、葉粉末(過200.5g儀中以甲醇提取30min,定容至25.0ml,即為供試液。五、試驗數(shù)據(jù)及處理、以色譜峰面積為縱坐標(biāo)。蛇床子素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。、依據(jù)試樣溶液色譜圖中蛇床子素峰面積，查出試樣溶液中蛇床子g/100Ml。六、問題與爭論、外標(biāo)法是否要求嚴(yán)格準(zhǔn)確進(jìn)樣？操作條件的變化對定量結(jié)果有無明顯影響？為什么？、在那些狀況下，承受外標(biāo)法定量較為適宜？試驗?zāi)康模?、把握外標(biāo)定量法。2、嫻熟把握微量注射器進(jìn)樣技術(shù)。3、把握色譜工作站的應(yīng)用。試驗原理：外標(biāo)法是在肯定的操作條件下，用純組分或濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制一系列不同含量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，定量地準(zhǔn)確進(jìn)樣，用所得色譜圖相應(yīng)組分峰面積〔或峰高對組分含量作標(biāo)準(zhǔn)曲線。分析樣品時，由準(zhǔn)確定量進(jìn)樣所得峰面積〔或峰高，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其含量。檢測，依據(jù)甲醇的色譜峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進(jìn)展定量。試驗內(nèi)容：1、儀器與試劑、儀器帶程序升溫的氣相色譜儀，配置氫焰檢測器，化學(xué)工作站，色譜柱RXT--wax30mX0.25mmX0.25mm或其他中強極性毛細(xì)管柱；自動進(jìn)樣器、試劑甲醇〔色譜純〕60%乙醇水溶液〔不含甲醇〕2、試驗步驟、色譜操作條件檢測器：氫火焰離子檢測器汽化室、檢測器溫度：2500C353min5℃/min753min，20℃/min升溫至180℃，保持1.5min。氫氣流速：30mL/mim空氣流速：300mL/mim氮氣〔N2〕流速：1.5mL/min20。、甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制以600.5%、1.0%、1.5%、2.0%的甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。、色譜測定用微量注射器分別吸取1.0uL各甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列溶液及試樣溶液注入色譜儀，取得色譜圖，以保存時間比照定性，確定甲醇色譜峰。甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列溶液試樣溶液甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列溶液試樣溶液濃度0.5%1.0%1.5%2.0%C2色譜峰高3、試驗數(shù)據(jù)及處理、以色譜峰高為縱坐標(biāo)。甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。、依據(jù)試樣溶液色譜圖中甲醇峰峰高，查出試樣溶液中甲醇的含量g/100M。4、問題與爭論、外標(biāo)法是否要求嚴(yán)格準(zhǔn)確進(jìn)樣？操作條件的變化對定量結(jié)果有無明顯影響？為什么？、在那些狀況下，承受外標(biāo)法定量較為適宜？實臉三原子吸取光譜分析法自來水中鈣、鎂---標(biāo)準(zhǔn)曲線法一、目的要求．學(xué)習(xí)原子吸取光譜分析法的根本原理。．了解原子吸取光譜的根本構(gòu)造及使用方法。．把握以標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定自來水中鈣、鎂含量的方法。二、根本原理標(biāo)準(zhǔn)曲線法是原子吸取光譜分哲中最常用的方法之一該法是配制濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，在肯定的儀器條件下，依次測出它們的吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的含量，再換算成原始樣品中被測元素的含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線法常用于分析共存的基體成分較為簡潔的樣品光譜法測定根本上沒有干擾，樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后，即可承受標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)展測定。三、儀器與試劑．儀器AA6800型原子吸取分光光度計〔日本島津〕或其他型號；鈣、鎂空心陰極燈；無油空氣壓縮機；乙炔鋼瓶；通風(fēng)設(shè)備；容量瓶、移液管等。．試劑〔優(yōu)級純1mol·L純水，去離子水或蒸餾水。．標(biāo)準(zhǔn)溶液配制(1〕鈣標(biāo)準(zhǔn)儲藏液〔1000ug/mL)110℃下烘干2h的無水碳酸鈣0.6250g于100mL1mol/L鹽酸溶液，直至完全溶解，然后把溶液轉(zhuǎn)移到250.mI容量瓶中，用水稀釋到刻度，搖勻備用。(2〕〔100ug/mL)：準(zhǔn)確吸取10mL上述鈣標(biāo)準(zhǔn)儲藏液于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度．搖勻備用。(3〕鎂標(biāo)準(zhǔn)儲藏液〔l000ug/m。準(zhǔn)確稱取金屬鎂0.2500g于100ml，燒杯中．蓋上鹽酸溶液溶解之，然后把溶液轉(zhuǎn)移到250ml，容量瓶中．用水稀釋。(4〕鎂標(biāo)準(zhǔn)使用液〔50ug/m：準(zhǔn)確吸取5mI上述鎂標(biāo)準(zhǔn)儲藏液于100ml用水稀釋至刻度．搖勻備用。四、試驗條件以6800儀器而定。五、試驗步驟．配制標(biāo)準(zhǔn)溶液系列(l〕2.00mL4.00mIJ6.00mL8.00mL10.00mL鈣標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于5只25mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，搖勻備用標(biāo)準(zhǔn)8.00、16.00、24.00、32.00、40.00ug/mL。(21.00mL2.00mL3.00mL4.00mL5.00mL5只25mL2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ug/mL。．配制自來水樣溶液準(zhǔn)確吸取適量自來水樣至于25mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，搖勻。在測定之前，先用去離子水噴霧，調(diào)整讀數(shù)至零點，然后依據(jù)濃度由低到高的原則，依次間隔測量標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液并記錄吸光度。．在一樣的試驗條件下，測量水樣中鈣的吸光度。潔燃燒器，然后關(guān)閉儀器。關(guān)電源，關(guān)儀器時，必需先關(guān)閉乙炔，再最終關(guān)閉空氣。六.數(shù)據(jù)及處理(1〕記錄試驗條件。(2〕將鈣、鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的吸光度值記錄于下表，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算回歸方程和標(biāo)準(zhǔn)偏差〔或相關(guān)系數(shù)。(3〔或用回歸方程計算。假設(shè)經(jīng)稀釋，需乘上相應(yīng)的倍數(shù)，求得水樣中鈣、鎂的含量ug/mL。試驗四氟離子選擇電極測定水中微量氟一、試驗?zāi)康陌盐罩苯与娢环治龅脑砑霸囼灧椒?；了解離子選擇性電極的類型及其應(yīng)用，學(xué)習(xí)離子計的使用。二、試驗原理0.5mg/L左右。方法?！埠喎Q氟電極、甘汞電極與待測定溶液組成原E與氟離子活度的關(guān)系式為〔25oC：FE＝k－0.059logαF－Elog[F－]Elog[F－]標(biāo)準(zhǔn)曲線，依據(jù)樣品的E求得氟離子濃度。三、儀器與試劑儀器容量瓶、塑料小燒杯、刻度移液管等。試劑1L，搖勻，儲于聚乙烯瓶中，備用。離子強度調(diào)整劑〔TISA：5810800mLpH＝5.01L。待測溶液：~10－4mol∕L四、試驗步驟電極預(yù)備將F1.00×10－4mol∕LF－30min，使其活化。然后用去離子水清洗至電位值約－300mV備用。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制7100mL10mLTISAB1.00×10－2～1.00mol∕LF－標(biāo)準(zhǔn)溶液。10.00mL10－1mol∕LF－100mL10－2mol∕LF－溶液，再移取10.00mL10－2mol∕LF－100mL容量瓶中配10－3mol∕LF－〕1min，待電位穩(wěn)定后按下讀數(shù)開關(guān)，讀取電E。F電極用去離子水浸泡。2．水樣的測定100mL10mLTISAB溶液，稀至Ex。標(biāo)準(zhǔn)參加法測定：1.00×10－2mol∕LF－1.00mL，參加10mLTISAB溶液，稀至100mL，混合均勻。測其電位五、數(shù)據(jù)處理極的實際斜率和線性范圍，并依據(jù)樣品的電位值計算水樣中氟離子濃度。ExEx1，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線法所得結(jié)果進(jìn)展比較。六、問題爭論什么是直接電位分析法？儀器裝置組成主要有哪些？離子選擇性電極分為幾類？氟電極屬于哪類？電位分析法應(yīng)留意哪些問題？試驗五紫外吸取光譜法測定APC片劑中乙酰水楊酸的含量一、試驗?zāi)康?、了解紫外－可見分光光度計的性能、構(gòu)造及其使用方法。2、把握紫外－可見分光光度法定量分析的根本原理和試驗技術(shù)。二、方法原理APCNaOH295nm并用濃度的水楊酸的NaOH水楊酸的含量。依據(jù)兩者的分子量，即可求得APC中乙酰水楊酸的含量。溶劑和其他成分不干擾測定。COOH

COO+3OH O

COO +2H2O3 3O乙酰水楊酸濃度=[水楊酸濃度]×

180.15138.12三、儀器和試劑儀器紫外—可見分光光度計；小漏斗1250mL1支；50mL720mL15mL1試劑0.5000mm-10.5000g水楊酸先溶于少量0.10moL-1NaOH1000mL0.10moL·L-1NaOH溶液。四、試驗內(nèi)容150mL0-60.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL1.0mL0.10moL·L-1NaOH溶液，先用蒸30mL80102、放一片APC50mL2.0mL0.10moL·L-1NaOH10mL0.1MNaOH220mL)，20mL480mL250mL3250mL20.0mLAPC50mL30mL右，80104、在紫外分光光度計上對標(biāo)樣3進(jìn)展掃描，波長范圍是320—280nm，找出最大吸取波長，并在該波長下由低濃度到高濃度測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，最終測定未知液的吸光度。五、數(shù)據(jù)處理1、以吸光度AC2、依據(jù)APC溶液的吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出相應(yīng)的濃度mg/m水楊酸的濃度。31APC〔25mg〕進(jìn)展比較，計算誤差。六、留意事項1、配制樣品前要將所使用的玻璃儀器用自來水沖洗，再用少量蒸餾水潤洗。2、