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第六章微生物的代謝與發(fā)酵其次節(jié)微生物發(fā)酵及其特征主要內(nèi)容一、發(fā)酵的定義及應(yīng)用范圍二發(fā)酵工程及發(fā)酵工業(yè)三發(fā)酵方法的類別與流程四我國發(fā)酵工業(yè)的科技進(jìn)步提問:什么是發(fā)酵微生物發(fā)酵技術(shù)1857年法國化學(xué)家、微生物家巴斯德提出了著名的發(fā)酵理論:“一切發(fā)酵過程都是微生物作用的結(jié)果?!卑退沟抡J(rèn)為,釀酒是發(fā)酵,是微生物在起作用;酒變質(zhì)也是發(fā)酵,是另一類微生物在作祟;隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)展,可以用加熱處理等方法來殺死有害的微生物,防止酒發(fā)生質(zhì)變。
同時(shí),也可以把發(fā)酵的微生物分別出來,通過人工培育,依據(jù)不同的要求去誘發(fā)各種類型的發(fā)酵,獲得所需的發(fā)酵產(chǎn)品。
一、發(fā)酵的定義1、傳統(tǒng)發(fā)酵2、生化和生理學(xué)意義的發(fā)酵3、工業(yè)上的發(fā)酵1、傳統(tǒng)發(fā)酵
最初發(fā)酵是用來描述酵母菌作用于果汁或麥芽汁產(chǎn)生氣泡的現(xiàn)象,或者是指酒的生產(chǎn)過程。2、生化和生理學(xué)意義的發(fā)酵指微生物在無氧條件下,分解各種有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生能量的一種方式,或者更嚴(yán)格地說,發(fā)酵是以有機(jī)物作為電子受體的氧化復(fù)原產(chǎn)能反響。如葡萄糖在無氧條件下被微生物利用產(chǎn)生酒精并放出CO2。3、工業(yè)上的發(fā)酵
泛指利用微生物制造或生產(chǎn)某些產(chǎn)品的過程包括:1.厭氧培育的生產(chǎn)過程,如酒精,乳酸等。2.通氣〔有氧〕培育的生產(chǎn)過程,如抗生素、氨基酸、酶制劑等。產(chǎn)品有細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也包括菌體細(xì)胞、酶等。提問:發(fā)酵工程的應(yīng)用領(lǐng)域發(fā)酵工程應(yīng)用范圍食品工程酶工業(yè)氨基酸工業(yè)有機(jī)酸工業(yè)飼料工業(yè)新材料開發(fā)生物化工環(huán)境保護(hù)在食品工業(yè)中的應(yīng)用這是生物技術(shù)最早開發(fā)應(yīng)用的領(lǐng)域,含醇飲料:以果汁、米、麥、高梁、玉米、土豆等為主要原料釀造或經(jīng)加工的有葡萄酒、果酒、黃酒、白酒、啤酒、白蘭地、威士忌、伏特加、金酒、香檳酒、朗姆酒等傳統(tǒng)調(diào)味品及發(fā)酵食品:以豆類、米、麥等生產(chǎn)的醬、醬油、醋、豆豉、豆腐乳、泡菜等。發(fā)酵乳制品:奶酒、干酪、酸奶等飲料酒類產(chǎn)量大、產(chǎn)值高、影響面廣,很多國家利用生物工程的技術(shù)改革舊工藝已取得明顯效果,收到顯著的經(jīng)濟(jì)效益。用近代發(fā)酵或酶反響技術(shù)生產(chǎn)的食品原料:葡萄糖、麥芽糖、果葡糖漿、甘露糖醇、脂肪等食品添加劑:面包酵母、味精(谷氨酸單納)、賴氨酸、檸檬酸、紅曲(色素)、甜味肽、肌苷酸和鳥苷酸(均為增鮮劑)、右旋糖酐葡聚糖和茁霉多糖(均為增稠劑)、葡萄糖氧化酶和異維生素C(均為食品保鮮劑)、乳鏈菌肽(食用防腐劑)。新型發(fā)酵飲料活性乳酸飲料。微生物與飲食、調(diào)味品
青紅方醬,醬油,豆食用醋發(fā)酵飲料味精發(fā)酵面食食用藥用菌食用色素食品添加劑淹漬蔬菜Cncnc-micro發(fā)酵食品市場主要原料:橄欖、卷心菜和腌黃瓜。1999年韓國國內(nèi)泡菜市場產(chǎn)值約為16.7億美元。1998年日本泡菜生產(chǎn)量達(dá)18萬噸,市場為13億美元,在國際市場上日韓兩國占據(jù)了95%以上的份額。2023年,中國泡菜工業(yè)的市場銷售額約為10億元,中國泡菜的代表之一-------四川泡菜企業(yè)出口總額約500萬美元,僅占國際泡菜市場總量的3%。A各種抗生素:抗細(xì)菌,抗真菌,抗原蟲,抗腫瘤自然、合成、半合成B、各種氨基酸:在醫(yī)藥中主要用于生產(chǎn)氨基酸輸液可用發(fā)酵獲得或用酶法獲得C、維生素D、甾體激素生物技術(shù)在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用E、生物制品:生于預(yù)防、診斷或治療傳染病F、單克隆抗體、抗體與抗原具有高度親和性,用于制備診斷盒、治療疾病或作為生物藥物的運(yùn)載工具。純化抗原類物質(zhì),菌種鑒別。G、其它:治療用酶、酶抑制劑、核苷酸制品、制藥工業(yè)用酶、工業(yè)發(fā)酵藥物生物技術(shù)在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用抗生素:目前世界各國可用發(fā)酵法生產(chǎn)的抗生素約400種,其中廣泛應(yīng)用的大約120種。l980年世界總產(chǎn)量約為25000噸。僅青、四、紅和頭孢四類抗生素的產(chǎn)值就達(dá)42億美元,最大的發(fā)酵罐為400立方米。進(jìn)入90年月后,全球生產(chǎn)與銷售的各類抗生素原料藥平均每年約在3萬噸以上,總價(jià)值約為250一300億美元,1992一1993年度實(shí)際增長率為4%。美國抗感染藥物市場銷售額1992年達(dá)60.71美元。醫(yī)藥市場維生素發(fā)酵生產(chǎn)的維生素,1982年世界產(chǎn)量為6萬噸左右,六種維生累的總銷額為6.7億美元。在1969—1980年間,每年銷售量遞增10×,1981—1991年間仍以7一8%的速率遞增。目前,全球范圍內(nèi)使用最為普遍的是VA、VC和VE,三都每年市場銷售額近20億美元,其中VE超過10億美元,其余為VB族,每個(gè)品種都有億美元的市值。在各種用途中,維生素作為動(dòng)物飼料的市場正以每年2-3%速度增長,在藥用和食品領(lǐng)域都以4-5%的速度增長。甾體激素目前世界市場的年銷售額為67億元,今后仍將以6—10%的速率遞增。最近正在興起用固定化細(xì)胞進(jìn)展甾體轉(zhuǎn)化,將是一個(gè)有進(jìn)展前途的新工藝,目前國際上正在爭論中的除干擾素以外、還有口蹄疫疫苗,狂犬病疫苗等十余種。今后幾年內(nèi),在重組DNA的.工作逐步深入當(dāng)中,定會(huì)對(duì)人類和牲畜安康引起實(shí)質(zhì)性的改善。糖酶:a-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶、支鏈淀粉酶、轉(zhuǎn)化酶、異構(gòu)酶、半乳糖酶、纖維素酶。蛋白酶:堿性、酸性、中性蛋白酶果膠酶脂肪酶凝乳酶過氧化氫酶。
應(yīng)用于輕工、食品用酶的生產(chǎn)應(yīng)用于化工能源產(chǎn)品的生產(chǎn)利用發(fā)酵、生物轉(zhuǎn)化或酶法生產(chǎn):烷烴、醇及溶劑、有機(jī)酸、多糖等酵母生產(chǎn)燃料乙醇沼氣在利用工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的有機(jī)物廢料,將它們發(fā)酵制取燃料(沼氣)氣體方面,美國打算解決全國能源需要量的10%,工業(yè)有機(jī)廢水(渣)的利用在西歐轉(zhuǎn)向甲烷發(fā)酵,英、美、德、日、俄都已建成了很多大型沼氣發(fā)酵廠,如倫敦,每年可回收沼氣8800萬立方米。氫能生物柴油5、飼料工業(yè)方面隨著世界人口的不斷增加,人民生活的逐步提高可耕地的日益削減,動(dòng)、植物蛋白的來源受到了限制,高質(zhì)量蛋白質(zhì)的缺乏已經(jīng)成為一個(gè)特別突出的問題。微生物菌體中,蛋白質(zhì)含量占45—55%(干物質(zhì))、所以用發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白是食品和飼料蛋白質(zhì)的重要來源。另外,藻類蛋白飼料也不行無視,如前西德培育的珊列藻,每年每公頃所得蛋白比小麥多20一35倍。Cncnc-micro一個(gè)20米直徑的水池年產(chǎn)4噸藻類,加工后可得相當(dāng)于3000升柴油的燃料。
一英畝三角大戟可生產(chǎn)相當(dāng)于50噸石油的燃料。圖為生長在淡水和海水中的一種硅藻6、冶金工業(yè)方面細(xì)菌浸礦,即利用細(xì)菌的直接和間接作用對(duì)礦物或礦石中有用的金屬浸出回收的過程。細(xì)菌浸出的金屬也涉及到Cu、U、Co、Ni、Mn、Zn、Pb等10余種,但大規(guī)模生產(chǎn)的只有銅和鈾(批量)。目前,美、英、日、俄、澳、加加拿大等很多國家都在樂觀開展此項(xiàng)爭論和生產(chǎn)。美國用這種方法得到的銅占銅產(chǎn)量的10%以上,加拿大用細(xì)菌浸出的鈾(U308)年產(chǎn)量達(dá)230噸。據(jù)世界20個(gè)礦山資料說明,每年用細(xì)菌浸出約銅達(dá)20萬噸。抗病、殺蟲抗生素單細(xì)胞蛋白食用和藥用真菌生物農(nóng)藥生物肥料在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用微生物在對(duì)生物物質(zhì)的排泄物及尸體的分解起著重要的作用。嫌氣發(fā)酵法:指在嫌氣狀況下利用分解碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪的微生物,將有機(jī)廢棄物分解為可溶性物質(zhì),進(jìn)而通過產(chǎn)酸菌和甲烷細(xì)菌的作用再分解為甲烷和CO2。好氣發(fā)酵〔活性污泥〕法:指在曝氣狀況下,用某些能降解有機(jī)物質(zhì)的產(chǎn)菌膠的細(xì)菌和某些原蟲的混合物(活性污泥)對(duì)工業(yè)或生活污水進(jìn)展處理。在環(huán)境愛護(hù)中的應(yīng)用在化學(xué)工業(yè)和環(huán)境愛護(hù)等方面,微生物工程也同樣能發(fā)揮獨(dú)持的作用,如:與化學(xué)法相結(jié)合,選育相應(yīng)的優(yōu)良菌種,以乙烯和丙烯腈為原料,分別生產(chǎn)環(huán)氧乙烷、乙二醇等,利用微生物來處理工業(yè)廢水或含毒廢液,乃至構(gòu)建超級(jí)細(xì)菌,處理大面積的海面石油污染等。噴灑工程菌去除石油污染微生物與環(huán)保微生物處理腈綸廢水的塔式濾池二、發(fā)酵工程及發(fā)酵工業(yè)發(fā)酵工程定義
發(fā)酵工程是滲透有工程學(xué)的微生物學(xué)。是利用微生物的特定性狀,通過現(xiàn)代化工程技術(shù)產(chǎn)生有用物質(zhì)或直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)、以把糧食、能源、化學(xué)制品、環(huán)境掌握等全球性課題聯(lián)系起來的一種技術(shù)體系。是將傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與DNA重組、細(xì)胞融合、分子修飾和改造等新技術(shù)結(jié)合并進(jìn)展起來的現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)。利用微生物的特點(diǎn)
發(fā)酵工程所利用的微生物主要是細(xì)菌、放線菌,酵母菌和霉菌。利用微生物的特點(diǎn):
(1)對(duì)四周環(huán)境的溫度、壓強(qiáng)、滲透壓、酸堿度等條件有極大的適應(yīng)力量。(2)有極強(qiáng)的消化力量。(3)有極強(qiáng)的生殖力量。發(fā)酵工程組成從廣義上講,由三局部組成:上游工程、發(fā)酵工程、下游工程FERMENTATIONProcessControlFermentationengineering上游工程UPSTREAMPROCESSES下游工程DOWNSTREAMPROCESSES發(fā)酵工程原始材料:包括菌種,培育基的糖類,氮源及某些微量元素;上游過程:(1)對(duì)菌種加以改造,提高生產(chǎn)力量或者導(dǎo)入外源基因等以獲得工程菌;(2)發(fā)酵或生物轉(zhuǎn)化,是通過優(yōu)化發(fā)酵條件如溫度、養(yǎng)分、供氣量等。利用工程菌的生物合成,加工和修飾等以獲得目的產(chǎn)物;下游過程:是運(yùn)用生物化學(xué)、物理學(xué)方法分別、純化產(chǎn)品,最終將產(chǎn)品推向市場并獲得社會(huì)或經(jīng)濟(jì)效益。發(fā)酵工程Continuouscentrifuges發(fā)酵工程爭論內(nèi)容主要指在最適發(fā)酵條件下,發(fā)酵罐中大量培育細(xì)胞和生產(chǎn)代謝產(chǎn)物的工藝技術(shù)(1)有嚴(yán)格的無菌生長環(huán)境:包括發(fā)酵開頭前承受高溫高壓對(duì)發(fā)酵原料和發(fā)酵罐以及各種連接收道進(jìn)展滅菌的技術(shù);在發(fā)酵過程中不斷向發(fā)酵罐中通入枯燥無菌空氣的空氣過濾技術(shù);(2)在發(fā)酵過程中依據(jù)細(xì)胞生長要求掌握加料速度的計(jì)算機(jī)掌握技術(shù);(3)種子培育和生產(chǎn)培育的不同的工藝技術(shù)。(4)在進(jìn)展任何大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵前,必需在試驗(yàn)室規(guī)模的小發(fā)酵罐進(jìn)展大量的試驗(yàn),得到產(chǎn)物形成的動(dòng)力學(xué)模型,并依據(jù)這個(gè)模型設(shè)計(jì)中試的發(fā)酵要求,最終從中試數(shù)據(jù)再設(shè)計(jì)更大規(guī)模生產(chǎn)的動(dòng)力學(xué)模型。(5)由于生物反響的簡單性,在從試驗(yàn)室到中試,從中試到大規(guī)模生產(chǎn)過程中會(huì)消失很多問題,這就是發(fā)酵工程工藝放大問題。發(fā)酵工程簡介發(fā)酵工程簡介應(yīng)用發(fā)酵工程的生產(chǎn)實(shí)例發(fā)酵工程的概念和內(nèi)容發(fā)酵工程的應(yīng)用菌種的選育培養(yǎng)基的配制滅菌擴(kuò)大培養(yǎng)和接種發(fā)酵過程和分離提純谷氨酸的微生物發(fā)酵法生產(chǎn)在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用在食品工業(yè)上的應(yīng)用生產(chǎn)傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品,如啤酒、食醋等生產(chǎn)食品添加劑,如L-蘋果酸解決糧食短缺問題
發(fā)酵工業(yè)一、定義是指利用生物的生命活動(dòng)產(chǎn)生的酶,無機(jī)或有機(jī)原料進(jìn)展酶加工,獲得產(chǎn)品的工業(yè)。發(fā)酵工業(yè)的特征發(fā)酵過程中離不開微生物的作用1、發(fā)酵原料的選擇及預(yù)處理2、微生物菌種的選育及擴(kuò)大培育3、發(fā)酵設(shè)備選擇及工藝條件掌握:常溫、常壓。種子擴(kuò)大培育和發(fā)酵承受不同的工藝。4、發(fā)酵產(chǎn)物的分別提取5、發(fā)酵廢物的回收和利用(1)發(fā)酵所用的原料通常以淀粉、糖蜜或其他農(nóng)副產(chǎn)品為主,只要參加少量的有機(jī)和無機(jī)氮源就可進(jìn)展反響??梢岳脧U水和廢物等作為發(fā)酵的原料進(jìn)展生物資源的改造和更新。(2)微生物菌種是進(jìn)展發(fā)酵的根本因素,通過變異和菌種選育,可以獲得高產(chǎn)的優(yōu)良菌株并使生產(chǎn)設(shè)備得到充分利用,也可以因此獲得按常規(guī)方法難以生產(chǎn)的產(chǎn)品。(3)發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進(jìn)展的生物化學(xué)反響,反響安全,要求條件簡潔。(4)發(fā)酵對(duì)雜菌的污染的防治至關(guān)重要。反響必需在無菌條件下進(jìn)展。(5)由于生物體本身所具有的反響機(jī)制,能夠?qū)R坏睾透叨冗x擇性地對(duì)某些較為簡單的化合物進(jìn)展特定部位地氧化、復(fù)原等化學(xué)轉(zhuǎn)化反響,也可以產(chǎn)生比較簡單的高分子化合物。(6)發(fā)酵過程是通過生物體的自動(dòng)調(diào)整方式來完成的,反響的專一性強(qiáng),因而可以得到較為單一的代謝產(chǎn)物。(7)工業(yè)發(fā)酵與其他工業(yè)相比,投資少,見效快,并可以取得較顯著的經(jīng)濟(jì)效益。(8)除利用微生物外,還可以用動(dòng)植物細(xì)胞和酶,也可以用人工構(gòu)建的遺傳工程菌進(jìn)展反響。三發(fā)酵方法的類別與流程1、類別:依據(jù)對(duì)氧的需要區(qū)分:厭氧和有氧發(fā)酵依據(jù)培育基物理性狀區(qū)分:液體和固體發(fā)酵依據(jù)從微生物生長特性區(qū)分:分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵2、發(fā)酵的流程空氣空氣凈化處理保藏菌種斜面活化擴(kuò)大培育種子罐主發(fā)酵碳源、氮源、無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)滅菌產(chǎn)物分別純化成品2.工業(yè)發(fā)酵步驟和工藝流程(1)用作培育菌種及擴(kuò)大生產(chǎn)的發(fā)酵罐的培育基的配制。(2)培育基、發(fā)酵罐以及幫助設(shè)備的消毒滅菌。(3)將已培育好的有活性的純菌株以肯定量轉(zhuǎn)接到發(fā)酵罐中。(4)將接種到發(fā)酵罐中的菌株掌握在最適條件下生長并形成代謝產(chǎn)物。(5)將產(chǎn)物抽提并進(jìn)展精制,以得到合格的產(chǎn)品。(6)回收或處理發(fā)酵過程中產(chǎn)生的廢物和廢水。菌種篩選搖瓶試驗(yàn)發(fā)酵罐試驗(yàn)純種培育2.1發(fā)酵原料的預(yù)處理原料不同處理方法也有所差異。1.淀粉——利用前需變成糊精或葡萄糖。方法:酸水解〔高壓、耐酸〕、酶水解法2.糖蜜——加熱殺菌和用水沖稀,也可加酸處理后再補(bǔ)充無機(jī)鹽。3.碳?xì)浠衔铮菏兔撓灐隙s分的石油經(jīng)冷卻脫蠟而獲得的凝固點(diǎn)在-10℃的油,參加適量無機(jī)鹽進(jìn)展接種發(fā)酵。2.2菌種斜面培育菌種:已有的優(yōu)良生產(chǎn)菌種和選育的新菌種。方法:一般都是由保存于冷凍管及砂土管或冰箱中的斜面菌種開頭,在正式使用前要先轉(zhuǎn)接到新穎斜面培育基上活化后,再用于種子擴(kuò)大培育。保存的菌種菌種活化種子擴(kuò)大培育2.3種子擴(kuò)大培育擴(kuò)大培育的方法可以依據(jù)需要承受固體培育或液體培育兩級(jí)不同方式。固體種子擴(kuò)大培育一般承受傳統(tǒng)的制曲工藝,一般先用克氏瓶或茄子瓶進(jìn)展擴(kuò)大,再轉(zhuǎn)接到曲盤擴(kuò)大培育。需氧微生物:將克氏瓶外表培育的菌種接到裝有液體培育基的三角瓶中,在搖床上振蕩培育。厭氧微生物:將有菌種的試管斜面或克氏瓶轉(zhuǎn)接到三角瓶液體培育基中靜置培育??耸掀亢颓炎悠靠耸掀亢颓炎悠繐u床培育2.4微生物發(fā)酵和掌握發(fā)酵方式可分為固體發(fā)酵和液體發(fā)酵兩種。固體發(fā)酵:適合于傳統(tǒng)發(fā)酵工藝及鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)用來生產(chǎn)比較簡潔的產(chǎn)品。液體深層發(fā)酵:適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。影響發(fā)酵的因素很多,如溫度、pH、通風(fēng)、攪拌、罐壓力等等,必需適當(dāng)?shù)卣莆沼绊懓l(fā)酵的各種條件,把握發(fā)酵的動(dòng)態(tài),并進(jìn)展雜菌的檢查和產(chǎn)物測定,使整個(gè)發(fā)酵過程順當(dāng)進(jìn)展。2.5發(fā)酵產(chǎn)物的分別提取利用菌體:離心沉淀或板框壓濾法使菌體與醪液分開,也可以用噴霧枯燥法直接做成粉劑。酒精——發(fā)酵醪蒸餾塔蒸餾;抗菌素及有機(jī)酸——依據(jù)產(chǎn)物的不同特性,承受離子交換樹脂吸附處理、脫色過濾、減壓濃縮等方法提取精制。獲得的產(chǎn)物都要依據(jù)有關(guān)部門制定的國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展質(zhì)量檢驗(yàn)和性能測定,符合要求后才為合格產(chǎn)品。四我國發(fā)酵工業(yè)的科技進(jìn)步在20世紀(jì)60年月以前,輕工、食品領(lǐng)域的發(fā)酵工業(yè)主要由釀酒和釀造的產(chǎn)品組成。至今,已形成
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