DB35T 2132-2023實(shí)驗(yàn)用秀麗隱桿線蟲(chóng) 飼育技術(shù)

35DB35/T2132—2023實(shí)驗(yàn)用秀麗隱桿線蟲(chóng)飼育技術(shù)ExperimentalCaenorhabditiselegans—Rearingtechnique2023-10-25發(fā)布2024-01-25實(shí)施福建省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I 4 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的1GB/T6682—2008分析實(shí)驗(yàn)室用3.2大腸埃希氏菌OP50EscherichiacoliOP50（E.coliOP50）3.424.2管理人員4.3飼育人員5.2設(shè)備及試劑耗材5.3區(qū)域布局5.4環(huán)境36.2保種7.2交配繁育4體中的比例為1‰～3‰。為獲取足夠的交配雄蟲(chóng)，宜將L4幼蟲(chóng)期線蟲(chóng)中的雌雄同體線蟲(chóng)置于30℃條件7.3繁育合格指標(biāo)％～每只雌雄同體蟲(chóng)自交產(chǎn)250～300只后代，雄蟲(chóng)和雌雄同體蟲(chóng)雜交產(chǎn)9558.2液體飼養(yǎng)）；——培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)注意觀察線蟲(chóng)生長(zhǎng)狀況，并8.3飼養(yǎng)的技術(shù)指標(biāo)——生長(zhǎng)溫度在15℃~25℃之間，最常使用的培養(yǎng)溫度是20℃;——相對(duì)濕度在40％～80%;6——固體飼養(yǎng)的線蟲(chóng)置于潔凈的恒溫培養(yǎng)箱中，液體飼養(yǎng)的線蟲(chóng)置于恒溫?fù)u床中，恒溫?fù)u床9.2微生物與寄生蟲(chóng)處理產(chǎn)生的生物廢棄物和污水按照SN/T4835的規(guī)定進(jìn)行無(wú)害化處理，其他實(shí)驗(yàn)室廢棄物按照相關(guān)規(guī)定7A.1.3恒溫?fù)u床搖床材質(zhì)無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)放射性。配有溫度控制系統(tǒng)，能夠在10℃~60℃溫度范圍內(nèi)調(diào)節(jié)箱內(nèi)溫A.1.5移液器A.1.6酒精燈A.1.7挑蟲(chóng)器A.1.10液氮罐A.2.1培養(yǎng)皿8無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)放射性、耐腐蝕、無(wú)菌。常用規(guī)格有96孔板、2無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)放射性、耐腐蝕、無(wú)菌。常用規(guī)格有A.2.5凍存管9），2.5g酪蛋白胨，17g瓊脂粉，3gNaCl，加入975mL的雙冷卻至55℃后，加入下列溶液（膽固醇溶液過(guò)濾除菌，其余溶液在121°C、0.107MPa滅1.86g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA?Na20.69g七水硫酸亞鐵（FeSO4?7H2O0.2g四水氯化錳），），），線蟲(chóng)是以O(shè)P50為食，OP50具有尿嘧啶缺陷，在NGM培養(yǎng)皿上不可無(wú)限生白桿菌LeucobacterVerde2微孢子蟲(chóng)Nematocidaparisii較小的體型、生長(zhǎng)緩慢、子代數(shù)明顯減少、注：被感染的線蟲(chóng)在顯微鏡下會(huì)呈現(xiàn)出特定的表型，能以此來(lái)