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文檔簡介
第一章緒論填空題1.微生物與人類關(guān)系的重要性,你怎么強調(diào)都不過分,微生物是一把十分鋒利的雙刃劍,它們給人類帶來巨大利益的同時也帶來“殘忍”的破壞。2.1347年的一場由鼠疫桿菌引起的瘟疫幾乎摧毀了整個歐洲,有1/3的人(約2500萬人)死于這場災(zāi)難。3.2003年SARS在我國一些地區(qū)迅速蔓延,正常的生活和工作節(jié)奏嚴重地被打亂,這是因為SARS有很強的傳染性,它是由一種新型的病毒所引起。4.微生物包括:無細胞結(jié)構(gòu)不能獨立生活的病毒、亞病毒(類病毒、擬病毒、朊病毒);具原核細胞結(jié)構(gòu)的真細菌、古生菌;具真核細胞結(jié)構(gòu)的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)單細胞藻類、原生動物等。8.19世紀中期,以法國的巴斯德和德國的柯赫為代表的科學(xué)家,揭露了微生物是造成腐敗發(fā)酵和人畜疾病的原因,并建立了分離、培養(yǎng)、接種和滅菌等一系列獨特的微生物技術(shù),從而奠定了微生物學(xué)的基礎(chǔ),同時開辟了醫(yī)學(xué)和工業(yè)微生物學(xué)等分支學(xué)科。巴斯德和柯赫是微生物學(xué)的奠基人。選擇題(4個答案選1)1.當(dāng)今,一種新的瘟疫正在全球蔓延,它是由病毒引起的(3)。(1)鼠疫(2)天花(3)愛滋?。ˋIDS)(4)霍亂2.微生物在整個生物界的分類地位,無論是五界系統(tǒng),還是三域(domain)系統(tǒng),微生物都占據(jù)了(4)的“席位”。(1)少數(shù)(2)非常少數(shù)(3)不太多(4)絕大多數(shù)7.巴斯德為了否定“自生說”,他在前人工作的基礎(chǔ)上,進行了許多試驗,其中著名的(3)無可辯駁地證實:空氣中確實含有微生物,它們引起有機質(zhì)的腐敗。(1)厭氧試驗(2)滅菌試驗(3)曲頸瓶試驗(4)菌種分離試驗8.柯赫提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——(2)。(1)巴斯德原則(2)柯赫原則(3)菌種原則(4)免疫原理10.我國學(xué)者湯飛凡教授的(2)分離和確證的研究成果,是一項具有國際領(lǐng)先水平的開創(chuàng)性成果。(1)鼠疫桿菌(2)沙眼病原體(3)結(jié)核桿菌(4)天花病毒是非題1.微生物是人類生存環(huán)境中必不可少的成員,有了它們才使得地球上的物質(zhì)進行循環(huán),否則地球上的所有生命將無法繁衍下去。(+)2.由于現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用,尤其是基因治療和基因工程藥物的產(chǎn)生,許多已被征服的傳染病,例如:肺結(jié)核、瘧疾、霍亂、天花等,不可能有“卷土重來”之勢。(-)3.當(dāng)今研究表明:所有的細菌都是肉眼看不見的。(-)5.巴斯德不僅用曲頸瓶實驗證明微生物非自然發(fā)生,推翻了爭論已久的“自生說”,而且做了許多其他重大貢獻,例如:證明乳酸發(fā)酵是由微生物引起的,首次制成狂犬疫苗,建立了巴氏消毒法等。(+)9.在基因工程的帶動下,傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵工業(yè)已從多方面發(fā)生了質(zhì)的變化,成為現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分。(+)問答題1.用具體事例說明人類與微生物的關(guān)系。答:微生物與人類關(guān)系的重要性,可以從它們在給人類帶來巨大利益的同時也可能帶來極大的危害兩方面進行分析。能夠舉例:面包、奶酪、啤酒、抗生素、疫苗、維生素及酶等重要產(chǎn)品的生產(chǎn);微生物使得地球上的物質(zhì)進行循環(huán),是人類生存環(huán)境中必不可少的成員;過去瘟疫的流行,現(xiàn)在一些病原體正在全球蔓延,許多已被征服的傳染病也有“卷土重來”之勢;食品的腐敗等等具體事例說明。2.為什么說巴斯德和柯赫是微生物學(xué)的奠基人?答:這是由于巴斯德和柯赫為微生物學(xué)的建立和發(fā)展做出了卓越的貢獻,使微生物學(xué)作為一門獨立的學(xué)科開始形成。巴斯德徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說;發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性,首次制成狂犬疫苗,進行預(yù)防接種;證實發(fā)酵是由微生物引起的;創(chuàng)立巴斯德消毒法等;可赫對病原細菌的研究做出了突出的成就;證實了炭疽病菌是炭疽病的病原體,發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌,提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——可赫原則,創(chuàng)建分離、純化微生物的技術(shù)等。3.為什么微生物學(xué)比動、植物學(xué)起步晚,但卻發(fā)展非常迅速?答:其原因從下列幾方面分析:微生物具有其他生物不具備的生物學(xué)特性;微生物具有其他生物共有的基本生物學(xué)特性;微生物個體小、結(jié)構(gòu)簡單、生長周期短,易大量培養(yǎng),易變異,重復(fù)性強等優(yōu)勢,十分易于操作。動、植物由于結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性及技術(shù)方法的限制而相對發(fā)展緩慢。微生物的廣泛的應(yīng)用性,能迅速地符合現(xiàn)代學(xué)科、社會和經(jīng)濟發(fā)展的需求。5.試述微生物學(xué)的發(fā)展前景。答:可從以下幾方面論述微生物學(xué)的發(fā)展前景:微生物基因組學(xué)研究將全面展開;以了解微生物之間、微生物與其他生物、微生物與環(huán)境的相互作用為研究內(nèi)容的微生物生態(tài)學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)、細胞微生物學(xué)等,將在基因組信息的基礎(chǔ)上獲得長足發(fā)展,為人類的生存和健康發(fā)揮積極的作用;微生物生命現(xiàn)象的特性和共性將更加受到重視;與其他學(xué)科實現(xiàn)更廣泛的交叉,獲得新的發(fā)展;微生物產(chǎn)業(yè)將呈現(xiàn)全新的局面。第二章原核微生物形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能名詞解釋
肽聚糖:肽聚糖是除古細菌外,有細胞壁的原核生物細胞壁的共有組分。它是由若干個肽聚糖單體聚合而成的多層網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)大分子化合物。肽聚糖單體含有四種成分:N-乙酰葡萄糖胺,N-乙酰胞壁酸,N-乙酰胞壁酸上的四肽和肽間橋。溶菌酶:作用于肽聚糖單體的雙糖單位中的β-1,4-糖苷鍵,并廣泛分布于卵清、人淚和鼻涕以及部分細菌和噬菌體中的一種酶,稱為溶菌酶。磷壁酸:是結(jié)合在G+細菌細胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。磷壁酸可分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩類。脂多糖:是位于G-細菌細胞壁最外一層較厚(8—10nm)的類脂多糖類物質(zhì),由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈3部分組成。填空題13.在細菌種,存在著4種不同的糖被形式,即莢膜、微莢膜、黏液層和菌膠團。14.細菌糖被的主要生理功能為保護作用、貯藏養(yǎng)料、滲透屏障、附著作用、堆積代謝廢物和信息識別等。15.細菌的糖被可被用于生產(chǎn)代血漿(葡聚糖)、用作鉆井液(黃原膠)、污水處理和用作菌種鑒定指標等實際工作中。16.判斷某細菌是否存在鞭毛,通??刹捎秒婄R觀察、鞭毛染色、半固體穿刺培養(yǎng)、菌落形態(tài)觀察等方法。17.放線菌是革蘭氏染色陽性的原核微生物,其中鏈霉菌屬是產(chǎn)生抗生素最多的一屬。選擇題(4個答案選1)1.G-細菌細胞壁的最內(nèi)層成分是(2)。(1)磷脂(2)肽聚糖(3)脂蛋白(4)LPS2.G+細菌細胞壁中不含有的成分是(4)。(1)類脂(2)磷壁酸(3)肽聚糖(4)蛋白質(zhì)3.肽聚糖種類的多樣性主要反映在(1)結(jié)構(gòu)的多樣性上。(1)肽橋(2)黏肽(3)雙糖單位(4)四肽尾4.磷壁酸是(3)細菌細胞壁上的主要成分。(1)分枝桿菌(2)古生菌(3)G+(4)G-5.在G-細菌肽聚糖的四肽尾上,有一個與G+細菌不同的稱作(3)的氨基酸。(1)賴氨酸(2)蘇氨酸(3)二氨基庚二酸(4)絲氨酸6.脂多糖(LPS)是G-細菌的內(nèi)毒素,其毒性來自分子中的(4)。(1)阿比可糖(2)核心多糖(3)O特異側(cè)鏈(4)類脂A7.用人為的方法處理G-細菌的細胞壁后,可獲得仍殘留有部分細胞壁的稱作(3)的缺壁細菌。(1)原生質(zhì)體(2)支原體(3)球狀體(4)L型細菌8.異染粒是屬于細菌的(1)類貯藏物。(1)磷源類(2)碳源類(3)能源類(4)氮源類9.最常見的產(chǎn)芽孢的厭氧菌是(2)。(1)芽孢桿菌屬(2)梭菌屬(3)孢螺菌屬(4)芽孢八疊球菌屬10.在芽孢的各層結(jié)構(gòu)中,含DPA—Ca量最高的層次是(3)。(1)孢外壁(2)芽孢衣(3)皮層(4)芽孢核心是非題1.古生菌也是一類原核生物。(+)2.G+細菌的細胞壁,不僅厚度比G-細菌的大,而且層次多、成分復(fù)雜。(-)3.在G+細菌和G-細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)中,甘氨酸五肽是其肽橋的常見種類。(-)4.磷壁酸只在G+細菌的細胞壁上存在,而LPS則僅在G-細胞壁上存在。(+)5.芽孢是細菌的內(nèi)生孢子,具有休眠、抵御不良環(huán)境和繁殖等功能。(-)問答題2.研究細菌芽孢有何理論和實際意義?答:(1)是研究生物抗逆性和休眠的生物學(xué)機制的良好材料。(2)是細菌分類、鑒定中的重要指標。(3)有利于提高菌種篩選效率。(4)有利于菌種的長期保藏。(5)為比較各種消毒滅菌方法的可靠性提供優(yōu)良的模式生物。3.什么叫“拴菌”試驗?試分析這項研究在思維方式和實驗方法上的創(chuàng)新點。答:“栓菌”試驗是為證明細菌鞭毛運動機制而設(shè)計的一個著名實驗。方法是:取一端長有單根鞭毛的細菌(如一些弧菌),使鞭毛的游離端被相應(yīng)抗體牢牢“栓”在載玻片上,然后在顯微鏡下觀察細胞在作打轉(zhuǎn)還是伸縮運動。結(jié)果發(fā)現(xiàn)是在不斷打轉(zhuǎn),從而確認細菌鞭毛的運動機制是旋轉(zhuǎn)式而非揮鞭式。思維方式的創(chuàng)新點:通過逆向思維,使原來無法觀察到的纖細的活鞭毛旋轉(zhuǎn),轉(zhuǎn)變成在顯微鏡下可清楚觀察到的細胞旋轉(zhuǎn)。實驗方法的創(chuàng)新點:采用特異抗體把單毛菌的鞭毛牢牢地“栓”在載玻片上,以實現(xiàn)固著鞭毛的作用。5.什么是菌落?試討論細菌的細胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性。答:菌落:細菌在固體培養(yǎng)基上生長發(fā)育,幾天內(nèi)即可由一個或幾個細胞分裂繁殖成千上萬個細胞,聚集在一起形成肉眼可見的群體,即為菌落。菌苔:將某一純種的大量細胞密集地接種到固體培養(yǎng)基表面,結(jié)果長成的菌落相互聯(lián)接成一片,即為菌苔。 由于菌落是微生物的巨大群體,因此,個體細胞形態(tài)的種種差別,必然會密切地反映在菌落的形態(tài)上。例如對長有鞭毛的細菌來說,其菌落就大而扁平、形狀不規(guī)則和邊緣多缺刻,運動能力強的細菌還會出現(xiàn)樹根狀的菌落;又如有莢膜的細菌,其菌落往往十分光滑,透明,形狀較大;又如對無鞭毛,不能運動的細菌尤其是各種球菌來說,形成的菌落較小,較厚,邊緣為圓形。名詞解釋
真菌:有線粒體,無葉綠體,沒有根、莖、葉分化,以無性和有性孢子進行繁殖的真核微生物。酵母菌:單細胞真菌。其特點:(見書47頁)菌絲:大多數(shù)霉菌和某些細菌的結(jié)構(gòu)單位,管形絲狀體。菌絲體:當(dāng)霉菌胞子落在適宜的基質(zhì)上后,就發(fā)芽生長并產(chǎn)生菌絲。由許多菌絲相互交織而成的一個菌絲集團稱菌絲體。填空題4.以下各類真核微生物的細胞壁主要成分分別是:酵母菌為葡聚糖,低等真菌為纖維素,高等真菌為幾丁質(zhì),藻類為纖維素。6.真核微生物包括真菌、原生動物和顯微藻類等幾個大類。7.酵母菌的繁殖方式分為有性繁殖和無性繁殖兩類,無性繁殖又可分為芽殖、裂殖兩種形式;有性繁殖時形成子囊孢子;霉菌在有性繁殖中產(chǎn)生的有性孢子種類有接合孢子、卵孢子、子囊孢子等,在無性繁殖中產(chǎn)生的無性孢子種類有孢子囊孢子、分生孢子和節(jié)孢子等。選擇題(4個答案選1)1.在真核微生物,例如(1)中常常找不到細胞核。(1)真菌菌絲的頂端細胞(2)酵母菌的芽體(3)曲霉菌的足細胞(4)青霉菌的孢子梗細胞2.在酵母菌細胞壁的4種成分中,賦予其機械強度的主要成分是(3)。(1)幾丁質(zhì)(2)蛋白質(zhì)(3)葡聚糖(4)甘露聚糖3.酵母菌的細胞壁可用由Helixpomatia(瑪瑙螺)胃液制成的(4)水解,從而形成酵母原生質(zhì)體。(1)纖維素酶(2)溶菌酶(3)淀粉酶(4)蝸牛消化酶是非題1.真核生物的細胞膜上都含有甾醇,而原核生物細胞膜上都不含甾醇。(-)2.同一種真菌,在其不同的生長階段中,其細胞壁的成分會發(fā)生明顯的變化。(+)3.在真菌中,有的細胞中找不到細胞核,菌絲尖端細胞就是一例。(+)5.酵母菌生活在無氧條件下進行發(fā)酵產(chǎn)能時,是沒有線粒體的,一旦把它轉(zhuǎn)移到有氧條件下,因呼吸產(chǎn)能的需要,就會形成大量的線粒體。(-)6.在真核微生物的葉綠體和線粒體中,存在著只有原核生物才有的70S核糖體。(+)問答題——2.試圖示Saccharomycescerevisiae的生活史,并說明其各階段的特點。答:特點:(1)一般情況下都以營養(yǎng)體狀態(tài)進行出芽繁殖;(2)營養(yǎng)體既能以單倍體(n)形式存在,也能以二倍體(2n)形式存在;(3)在特定的條件下才進行有性繁殖。3.霉菌的營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲各有何特點?以根霉、毛霉、青霉、曲霉為例來說明它們分別可分化出哪些特化構(gòu)造?(見書55—56頁)4.細菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類微生物的菌落有何不同?為什么?(見書59頁)第四章微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基名詞解釋生長因子:微生物生長不可缺少的微量有機物,包括維生素,氨基酸及堿基等。培養(yǎng)基:指由人工配制的,適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合營養(yǎng)料。鑒別培養(yǎng)基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基:一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。加富培養(yǎng)基:為了分離某類微生物而專門設(shè)計的、加入了助長該類微生物的營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。促進擴散:營養(yǎng)物通過與細胞膜上載體蛋白(也稱作透過酶permease)的可逆性結(jié)合來加快其傳遞速度。主動運輸:營養(yǎng)物質(zhì)在運進微生物細胞時,需要載體蛋白參與,需要消耗能量,并可以以逆營養(yǎng)物濃度梯度進行運輸?shù)倪\輸方式。這是微生物中存在的一種主要運輸方式。基團移位:基團移位是另一種類型的主動運輸,它與主動運輸方式的不同之處在于它有一個復(fù)雜的運輸系統(tǒng)來完成物質(zhì)的運輸,而物質(zhì)在運輸過程中發(fā)生化學(xué)變化。填空題2.微生物生長繁殖所需六大營養(yǎng)要素是碳源、氮源、能源、水、無機鹽、生長因子。4.氮源物質(zhì)主要有蛋白質(zhì)(肽、氨基酸)、氨及銨鹽、硝酸鹽、分子氮(N2)等,常用的速效氮源如玉米漿、(NH4)2SO4,有利于菌體生長;遲效氮源如黃豆餅粉、玉米餅粉它有利于代謝產(chǎn)物積累。5.無機鹽的生理作用包括酶活性中心組分、維持細胞結(jié)構(gòu)和生物大分子穩(wěn)定、調(diào)節(jié)滲透壓、調(diào)節(jié)滲透壓、控制氧化還原電位和作為能源物質(zhì)。6.生長因子主要包括維生素、氨基酸和嘌呤和嘧啶,其主要作用是作為酶的輔基或輔酶、合成細胞結(jié)構(gòu)及組分的前體。7.根據(jù)碳源、能源和電子供體性質(zhì)的不同,微生物的營養(yǎng)類型可分為光能無機自養(yǎng)、光能有機異養(yǎng)、化能無機自養(yǎng)和化能有機異養(yǎng)。8.選用和設(shè)計培養(yǎng)基所要遵循的原則包括目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適宜和經(jīng)濟節(jié)約。9.按用途分,培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)、加富、鑒別和選擇等4種類型。10.營養(yǎng)物質(zhì)進入細胞的方式有單純擴散、促進擴散、主動運輸和基團移位。選擇題(4個答案選1)1.在含有下列物質(zhì)的培養(yǎng)基中,大腸桿菌首先利用的碳物質(zhì)是(2)。(1)蔗糖(2)葡萄糖(3)半乳糖(4)淀粉2.在工業(yè)生產(chǎn)中為提高土霉素產(chǎn)量,培養(yǎng)基中可采用的混合氮源是(3)。(1)蛋白胨/酵母浸膏(2)黃豆餅粉/花生餅粉(3)玉米漿/黃豆餅粉(4)玉米漿/(NH4)2SO43.下列物質(zhì)可用作生長因子的是()。(1)葡萄糖(2)纖維素(3)NaCl(4)葉酸4.藍細菌和藻類屬于(1)型的微生物。(1)光能無機自養(yǎng)(2)光能有機異養(yǎng)(3)化能無機自養(yǎng)(4)化能有機異養(yǎng)5.大腸桿菌屬于(4)型的微生物。(1)光能無機自養(yǎng)(2)光能有機異養(yǎng)(3)化能無機自養(yǎng)(4)化能有機異養(yǎng)6.實驗室培養(yǎng)細菌常用的培養(yǎng)基是(1)。(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(2)馬鈴薯培養(yǎng)基(3)高氏一號培養(yǎng)基(4)查氏培養(yǎng)基7.用來分離產(chǎn)胞外蛋白酶菌株的酪素培養(yǎng)基是一種(4)。(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(2)加富培養(yǎng)基(3)選擇培養(yǎng)基(4)鑒別培養(yǎng)基8.下列培養(yǎng)基中(4)是合成培養(yǎng)基。(1)LB培養(yǎng)基(2)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(3)麥芽汁培養(yǎng)基(4)查氏培養(yǎng)基9.培養(yǎng)百日咳博德氏菌的培養(yǎng)基中含有血液,這種培養(yǎng)基是(2)。(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(2)加富培養(yǎng)基(3)選擇培養(yǎng)基(4)鑒別培養(yǎng)基10.用來分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源,這種培養(yǎng)基是一種(3)。(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(2)加富培養(yǎng)基(3)選擇培養(yǎng)基(4)鑒別培養(yǎng)基11.一般酵母菌適宜的生長pH為(1)。(1)5.0—6.0(2)3.0—4.0(3)8.0—9.0(4)7.0—7.512.一般細菌適宜的生長pH為(4)。(1)5.0—6.0(2)3.0—4.0(3)8.0—9.0(4)7.0—7.513.水分子可通過(2)進入細胞。(1)主動運輸(2)單純擴散(3)促進擴散(4)基團轉(zhuǎn)位14.需要載體但不能進行逆濃度運輸?shù)氖牵?)。(1)主動運輸(2)單純擴散(3)促進擴散(4)基團轉(zhuǎn)位15.被運輸物質(zhì)進入細胞前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的是(4)。(1)主動運輸(2)單純擴散(3)促進擴散(4)基團轉(zhuǎn)位是非題1.所有碳源物質(zhì)既可以為微生物生長提供碳素來源,也可以提供能源。(-)2.某些假單胞菌可以利用多達90種以上的碳源物質(zhì)。(+)3.以(NH4)2SO4為氮源培養(yǎng)微生物時,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH升高。(-)4.培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型微生物的培養(yǎng)基必須同時加入維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶。(-)5.培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以由簡單的無機物組成。(+)6.為使微生物生長旺盛,培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好。(-)7.在促進擴散過程中,載體蛋白對被運輸物質(zhì)具有較高的專一性,一種載體蛋白只能運輸一種物質(zhì)。(-)8.在主動運輸過程中,細胞可以消耗代謝能對營養(yǎng)物質(zhì)進行逆濃度運輸,當(dāng)被運輸物質(zhì)胞外濃度高于胞內(nèi)濃度時,主動運輸就不需要消耗代謝能。(-)問答題2.如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物,你該如何設(shè)計實驗?答:(1)從苯含量較高的環(huán)境中采集土樣或水樣;(2)配置培養(yǎng)基,制備平板,一種僅以苯作為唯一碳源(A),另一種不含任何碳源作為對照(B);(3)將樣品進行梯度稀釋,涂布A平板;(4)將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng),觀察是否有菌落產(chǎn)生;(5)將A平板上的菌落編號并分別轉(zhuǎn)接至B平板,置于相同溫度條件下培養(yǎng)(在B平板上生長的菌落,是可利用空氣中CO2的自養(yǎng)型微生物);(6)挑取在A平板上生長而不在B平板上生長的菌落,在一個新的A平板上劃線、培養(yǎng),獲得單菌落,初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物;(7)將初步確定的目標菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中進行搖瓶發(fā)酵實驗,利用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解利用苯的情況。3.某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細菌,在酪素培養(yǎng)基平板上發(fā)現(xiàn)有幾株菌的菌落周圍有蛋白水解圈,是否能僅憑蛋白水解圈與菌落直徑比大,就斷定該菌株產(chǎn)胞外蛋白酶的能力就大,而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種,為什么?答:不能。因為,(1)不同微生物的營養(yǎng)需求、最適生長溫度等生長條件有差別,在同一平板上相同條件下的生長及生理狀況不同;(2)不同微生物所產(chǎn)蛋白酶的性質(zhì)(如最適催化反應(yīng)溫度、pH、對底物酪素的降解能力等)不同;(3)該學(xué)生所采用的是一種定性及初步定量的方法,應(yīng)進一步針對獲得的幾株菌分別進行培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件優(yōu)化,并在分析這些菌株所產(chǎn)蛋白酶性質(zhì)的基礎(chǔ)上利用搖瓶發(fā)酵實驗確定蛋白酶高產(chǎn)菌株。5.現(xiàn)擬從自然界中分離篩選出產(chǎn)蛋白酶的芽孢桿菌,請結(jié)合所學(xué)知識設(shè)計分離篩選的試驗方案。答題要點:(1)應(yīng)該到富含蛋白質(zhì)的地方采集含分離樣品。(2)根據(jù)該菌的耐熱特性可采用將含菌樣品加熱80℃處理10min后,殺死不耐熱雜菌,濃縮芽孢桿菌。(3)可采用劃線分離、稀釋分離、刮棒連續(xù)涂布等純培養(yǎng)物分離方法。(4)初步判斷所獲得純培養(yǎng)物為芽孢桿菌。(5)可采用酪素鑒別培養(yǎng)基根據(jù)水解圈篩選產(chǎn)蛋白酶芽孢桿菌。4.有一種子培養(yǎng)基配方如下﹕葡萄糖2.0g、尿素0.5g、玉米漿1.0g、K2HPO40.1g、MgSO40.05g、水100ml,pH6.8,試回答下列問題﹕(1)該培養(yǎng)基適宜于培養(yǎng)哪一類型的微生物?為什么?(2)按培養(yǎng)基中營養(yǎng)物的來源分類,屬于哪一類培養(yǎng)基?為什么?(3)該培養(yǎng)基中各組分分別起什么作用?(4)若要配制此種斜面培養(yǎng)基200mL,應(yīng)如何操作?答:(1)此培養(yǎng)基適于培養(yǎng)細菌。因pH6.8適于培養(yǎng)細菌和放線菌,但放線菌能直接利用可溶性淀粉為碳源,不必采用葡萄糖。(2)屬半合成培養(yǎng)基。因培養(yǎng)基中,一部分采用天然材料,另一部分用已知的化學(xué)藥品組成。(3)該培養(yǎng)基中葡萄糖為碳源,尿素為氮源,玉米漿為生長因子、K2HPO4和MgSO4為無機鹽類。(4)操作過程:準確稱量葡萄糖4g、尿素1g、玉米漿2g、磷酸氫二鉀0.2g于500ml燒杯中→加入約190ml水溶解→調(diào)節(jié)pH6.8→加硫酸鎂0.1g→定容至200ml→校正pH值→分裝試管→擱置斜面→包扎滅菌。5.現(xiàn)有一培養(yǎng)基配方如下:可溶性淀粉5g、蛋白胨1.5g、磷酸二氫鉀0.5g、硫酸鎂0.1g、瓊脂2.0g,水100ml,pH5.0,試回答下列問題:(1)按營養(yǎng)物質(zhì)來源分類,屬何種類型培養(yǎng)基?為什么?(2)此培養(yǎng)基適于培養(yǎng)哪類微生物?為什么?(3)簡述配制200ml該斜面培養(yǎng)基的操作過程。答:(1)屬半合成培養(yǎng)基。因培養(yǎng)基中,一部分采用天然材料,另一部分用已知的化學(xué)藥品組成。(2)此培養(yǎng)基適于培養(yǎng)霉菌。因pH5.0適于培養(yǎng)霉菌和酵母菌,但酵母菌不能直接利用可溶性淀粉為碳源。(3)操作過程:準確稱量可溶性淀粉10g、蛋白胨3g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.2g、瓊脂4g于500ml燒杯中→加入200ml水溶解→調(diào)節(jié)pH5.0→加熱融解→補足水分→分裝試管→滅菌→擺斜面。第五章微生物的新陳代謝名詞解釋分解代謝:分解代謝指細胞將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì),并在這個過程中產(chǎn)生能量。合成代謝:合成代謝指細胞利用小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子的過程,并在這個過程中消耗能量。發(fā)酵:廣泛的發(fā)酵,泛指任何利用好氧性或厭氧性微生物來生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物或食品、飲料的一類生產(chǎn)方式。微生物生理學(xué)上的發(fā)酵又稱狹義的發(fā)酵,是指在無氧等外源氫受體的條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力未經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交某一內(nèi)源性中間代謝物接受,以實現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。底物水平磷酸化:物質(zhì)在生物氧化過程中,常生成一些含有高能鍵的化合物,而這些化合物可直接偶聯(lián)ATP的合成,這種產(chǎn)生ATP等高能分子的方式稱為底物水平磷酸化。呼吸:微生物在降解底物的過程中,將釋放的電子交給NAD(P)+、FAD或FMN等電子載體,再經(jīng)電子傳遞系統(tǒng)傳給外源電子受體,從而生成水或其他還原型產(chǎn)物并釋放出能量的過程。氧化磷酸化:物質(zhì)在生物氧化的過程中形成的NADH和FADH2可通過位于線粒體內(nèi)膜和細菌質(zhì)膜上的電子傳遞系統(tǒng)將電子傳遞給氧或其他氧化型物質(zhì),在這個過程中偶聯(lián)著ATP的合成,這種產(chǎn)生的方式稱為氧化磷酸化.一分子NADH和FADH2可分別產(chǎn)生3個和2個ATP.次級代謝:微生物在一定的生長時期(對數(shù)生長后期或穩(wěn)定期),以初級代謝產(chǎn)物為前體,合成一些對微生物生命活動無明確功能的物質(zhì)的過程。這一過程的產(chǎn)物,即為次級代謝產(chǎn)物。填空題1.代謝是細胞內(nèi)發(fā)生的全部生化反應(yīng)的總稱,主要是由分解代謝和合成代謝兩個過程組成。微生物的分解代謝是指大分子物質(zhì)在細胞內(nèi)降解成小分子物質(zhì)并產(chǎn)生能量的過程;合成代謝是指利用小分子物質(zhì)在細胞內(nèi)合成大分子物質(zhì),并消耗能量的過程。4.酵母菌和八疊球菌的乙醇發(fā)酵是指葡萄糖經(jīng)EMP途徑分解為丙酮酸后,進一步形成乙醛,乙醛還原生成乙醇;運動發(fā)酵單胞菌的乙醇發(fā)酵是利用ED途徑分解葡萄糖為丙酮酸,最后生成乙醇。5.同型乳酸發(fā)酵是指葡萄糖經(jīng)EMP途徑降解為丙酮酸,丙酮酸在乳酸脫氫酶的作用下被NADH還原為乳酸。異型乳酸發(fā)酵經(jīng)PK、HK和HMP途徑分解葡萄糖,代謝終產(chǎn)物除乳酸外,還有乙醇或乙酸。6.產(chǎn)能代謝中,微生物通過底物水平磷酸化和氧化磷酸化將某種物質(zhì)氧化而釋放的能量儲存在ATP等高能分子中;光合微生物則通過光合磷酸化將光能轉(zhuǎn)變成為化學(xué)能儲存在ATP中。底物水平磷酸化既存在于發(fā)酵過程中,也存在于呼吸作用過程中。7.呼吸作用與發(fā)酵作用的根本區(qū)別是呼吸作用中電子載體不是將電子直接傳遞給底物降解的中間產(chǎn)物,而是交給電子傳遞系統(tǒng),逐步釋放出能量后再交給最終電子受體。8.無氧呼吸的最終電子受體不是氧,而是外源電子受體,像NO3-、NO2-、SO42-、S2O32-、CO2等無機化合物,或延胡索酸等有機化合物。9.化能自養(yǎng)微生物氧化無機物而獲得能量和還原力。能量的產(chǎn)生是通過氧化磷酸化形式,電子受體通常是O2。電子供體是H2、NH4+、H2S和Fe2+,還原力的獲得是逆呼吸鏈的方向進行傳遞,消耗能量。11.Staphylococcusaureus肽聚糖合成分為3個階段:細胞質(zhì)中合成的“Park”核苷酸(UDP—N—乙酰胞壁酸五肽),在細胞膜中進一步合成肽聚糖單體分子,然后在細胞膜外壁引物存在下合成肽聚糖。青霉素在細胞膜外抑制轉(zhuǎn)肽酶的活性從而抑制肽聚糖的合成。12.微生物將空氣中的N2還原為NH3的過程稱為生物固氮。該過程中根據(jù)微生物和其他生物之間相互的關(guān)系,固氮體系可以分為共生固氮體系、自生固氮體系和聯(lián)合固氮體系3種。13.次級代謝是微生物生長至指數(shù)期后期或穩(wěn)定期,以初級代謝產(chǎn)物為前體,合成一些對微生物自身生命活動無明確生理功能的物質(zhì)的過程。次級代謝產(chǎn)物大多是分子結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物,如抗生素、激素、生物堿、毒素、色素及維生素等多種類別。選擇題(4個答案選1)1.化能自養(yǎng)微生物的能量來源于(2)。(1)有機物(2)還原態(tài)無機化合物(3)氧化態(tài)無機化合物(4)日光2.下列葡萄糖生成丙酮酸的糖酵解途徑中,(1)是最普遍的、存在與大多數(shù)生物體內(nèi)的一條主流代謝途徑。(1)EMP途徑(2)HMP途徑(3)ED途徑(4)WD途徑3.下列葡萄糖生成丙酮酸的糖酵解途徑中,(3)是存在于某些缺乏完整EMP途徑的微生物中的一種替代途徑,產(chǎn)能效率低,為微生物所特有的。(1)EMP途徑(2)HMP途徑(3)ED途徑(4)WD途徑4.酵母菌和運動發(fā)酵單胞菌乙醇發(fā)酵的區(qū)別是(1)。(1)糖酵解途徑不同(2)發(fā)酵底物不同(3)丙酮酸生成乙醛的機制不同(4)乙醛生成乙醇的機制不同5.同型乳酸發(fā)酵中葡萄糖生成丙酮酸的途徑是(1)型的微生物。(1)EMP途徑(2)HMP途徑(3)ED途徑(4)WD途徑6.ATP或GTP的生成與高能化合物的酶催化轉(zhuǎn)換相偶聯(lián)的產(chǎn)能方式是(2)。(1)光合磷酸化(2)底物水平磷酸化(3)氧化磷酸化(4)化學(xué)滲透假說7.下列代謝方式中,能量獲得最有效的方式是(2)。(1)發(fā)酵(2)有氧呼吸(3)無氧呼吸(4)化能自養(yǎng)8.青霉素抑制金黃色葡萄球菌肽聚糖合成的(2)。(1)細胞膜外的轉(zhuǎn)糖基酶(2)細胞膜外的轉(zhuǎn)肽酶(3)細胞質(zhì)中的“Park”核苷酸合成(4)細胞膜中肽聚糖單體分子的合成9.以下哪個描述不符合次級代謝及其產(chǎn)物(2)。(1)次級代謝的生理意義不像初級代謝那樣明確(2)次級代謝產(chǎn)物的合成不受細胞的嚴密控制(3)發(fā)生在指數(shù)期后期和穩(wěn)定期(4)質(zhì)粒與次級代謝的關(guān)系密切10.下面對于好氧呼吸的描述(4)是正確的。(1)電子供體和電子受體都是無機化合物(2)電子供體和電子受體都是有機化合物(3)電子供體是無機化合物,電子受體是有機化合物(4)電子供體是有機化合物,電子受體是無機化合物11.無氧呼吸中呼吸鏈末端的氫受體是(4)。(1)還原型無機化合物(2)氧化型無機化合物(3)某些有機化合物(4)氧化型無機化合物和少數(shù)有機化合物12.硝化細菌是:(2)。(1)化能自養(yǎng)菌,氧化氨生成亞硝酸獲得能量(2)化能自養(yǎng)菌,氧化亞硝酸生成硝酸獲得能量(3)化能異養(yǎng)菌,以硝酸鹽為最終的電子受體(4)化能異養(yǎng)菌,以亞硝酸鹽為最終的電子受體是非題1.無氧呼吸和有氧呼吸一樣也需要細胞色素等電子傳遞體,也能產(chǎn)生較多的能量用于生命活動,但由于部分能量隨電子轉(zhuǎn)移傳給最終電子受體,所以生成的能量不如有氧呼吸產(chǎn)生的多。(+)2.由于微生物的固氮酶對氧氣敏感,不可逆失活,所以固氮微生物一般都是厭氧或兼性厭氧菌。(-)3.光能營養(yǎng)微生物的光合磷酸化沒有水的光解,不產(chǎn)生氧氣。(-)4.次級代謝的生理意義不像初級代謝那樣明確,但是某些次級代謝產(chǎn)物對于該微生物具有特殊的意義,如與孢子的啟動形成有關(guān)。(+)5.由于藍細菌的光合作用產(chǎn)生氧氣,所以藍細菌通常都不具有固氮作用。(-)6.底物水平磷酸化只存在于發(fā)酵過程中,不存在于呼吸作用過程中。(-)7.底物水平磷酸化既存在于發(fā)酵過程中,也存在于呼吸作用過程中。(+)8.發(fā)酵作用的最終電子受體是有機化合物,呼吸作用的最終電子受體是無機化合物。(+)9.氧化磷酸化只存在于有氧呼吸作用中,不存在于發(fā)酵作用和無氧呼吸作用中。(-)10.發(fā)酵作用是專性厭氧菌或兼性厭氧菌在無氧條件下的一種有機物生物氧化形式,其產(chǎn)能機制都是底物水平磷酸化反應(yīng)。(+)11.青霉素抑制肽聚糖分子中肽橋的生物合成,因此對于生長旺盛的細胞具有明顯的抑制作用,而對于休止細胞無抑制作用。(+)問答題1.比較酵母菌和細菌的乙醇發(fā)酵。答:主要差別是葡萄糖生成丙酮酸的途徑不同。酵母菌和某些細菌(胃八疊球菌、腸桿菌)的菌株通過EMP途徑生成丙酮酸,而某些細菌(運動發(fā)酵單胞菌、厭氧發(fā)酵單胞菌)的菌株通過ED途徑生成丙酮酸。丙酮酸之后的途徑完全相同。2.試比較底物水平磷酸化、氧化磷酸化和光合磷酸化中ATP的產(chǎn)生。答:底物水平磷酸化,發(fā)酵過程中往往伴隨著一些高能化合物的生成,如EMP途徑中的1,3-二磷酸甘油酸和磷酸烯醇式丙酮酸。這些高能化合物可以直接偶聯(lián)ATP或GTP的生成。底物水平磷酸化可以存在于發(fā)酵過程中,也可以存在于呼吸過程中,但產(chǎn)生能量相對較少。氧化磷酸化,在糖酵解和三羧酸循環(huán)過程中,形成的還原力,通過電子傳遞系統(tǒng)將電子傳遞給電子受體(氧或其他氧化性化合物),同時偶聯(lián)ATP合成的生物過程。光合磷酸化,光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能的過程。主要分為光和細菌所特有的環(huán)式光合磷酸化和綠色植物、藻類和藍細菌所共有的產(chǎn)氧型非環(huán)式光合磷酸化作用。3.比較自生和共生生物固氮體系及其微生物類群。答:共生固氮體系:根瘤菌與豆科植物共生;弗蘭克氏菌與非豆科樹木共生;藍細菌與某些植物共生;藍細菌與某些真菌共生。自生固氮體系:好氧自生固氮菌;厭氧自生固氮菌;兼性厭氧自生固氮菌;大多數(shù)光合菌(藍細菌,光合細菌)。4.如何利用營養(yǎng)缺陷突變株進行賴氨酸發(fā)酵工業(yè)化生產(chǎn)?在微生物中,以天冬氨酸為原料,通過分支代謝合成賴氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸(見下圖)。為了解除正常的代謝調(diào)節(jié)以獲得賴氨酸的高產(chǎn)菌株,工業(yè)上選育了谷氨酸棒桿菌的高絲氨酸缺陷型菌株作為賴氨酸的發(fā)酵菌種。這個菌種由于不能合成高絲氨酸脫氫酶,故不能合成高絲氨酸,也就不能產(chǎn)生蘇氨酸和甲硫氨酸。在添加適量高絲氨酸(或蘇氨酸和甲硫氨酸)的條件下,在含有較高糖和銨鹽的培養(yǎng)基上,能產(chǎn)生大量的賴氨酸。5.對于分支合成途徑,怎樣才能使之積累大量的未端產(chǎn)物?試以圖表示并說明之。答:對于分支合成途徑,為了獲得大量某末端產(chǎn)物,可選育抗該末端產(chǎn)物類似物的營養(yǎng)缺陷型突變菌株。如下圖分支途徑,若要獲得高產(chǎn)的G,可選育:缺失酶C的D營養(yǎng)缺陷型(匯流);抗G的結(jié)構(gòu)類似物G,的突變株(消除反饋調(diào)控)。第六章微生物的生長及其控制名詞解釋恒濁器:根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度,并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速,以取得菌體密度高、生長速度恒定的微生物細胞的連續(xù)培養(yǎng)器。恒化器:通過保持培養(yǎng)基中某種必需營養(yǎng)物質(zhì)的濃度基本恒定的方式,使微生物的生長速度恒定的培養(yǎng)系統(tǒng)。菌落形成單位:采用平板計數(shù)或菌落計數(shù)法時,由于不能絕對保證一個菌落只是由一個活細胞形成,計算出的活細胞數(shù)稱為菌落形成單位。巴斯德消毒法:在低于沸點的溫度下短時間加熱處理以殺死牛奶或飲料中的病原微生物的方法稱為巴斯德消毒法。抗生素:抗生素是由某些生物合成或半合成的次級代謝產(chǎn)物或衍生物,能抑制其他微生物生長或殺死其他微生物??勾x藥物:能對代謝的某個關(guān)鍵酶產(chǎn)生競爭抑制而阻斷代謝途徑的化合物。抗代謝物通常與酶的正常底物或中間產(chǎn)物很類似,它與酶的正常底物或中間產(chǎn)物競爭酶的活性部位使反應(yīng)停止,從而阻斷代謝途徑。填空題1.一條典型的生長曲線至少可分為遲緩期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定生長期和衰亡期4個生長時期。2.測定微生物的生長量常用的方法有單細胞計數(shù)、細胞物質(zhì)的重量和代謝活性。而測定微生物數(shù)量變化常用的方法有培養(yǎng)平板計數(shù)法、膜過濾法、液體稀釋法和顯微鏡直接計數(shù)法;以生物量為指標來測定微生物生長的方法有比濁法、重量法和生理指標法。3.獲得細菌同步生長的方法主要有(1)機械法和(2)環(huán)境條件控制法,其中(1)中常用的有離心法、過濾分離法和硝酸纖維素濾膜法。4.控制連續(xù)培養(yǎng)的方法有恒濁法和恒化法。5.影響微生物生長的主要因素有營養(yǎng)物質(zhì)、水活性、溫度、pH和氧等。6.對玻璃器皿、金屬用具等物品可用高壓蒸汽滅菌法或干熱滅菌法進行滅菌;而對牛奶或其它液態(tài)食品一般采用超高溫瞬時滅菌,其溫度為135—150℃,時間為2—6s。7.通常,細菌最適pH的范圍為6.5—7.5,酵母菌的最適pH范圍為4.5—5.5,霉菌的最適pH范圍是4.5—5.5。8.殺滅或抑制微生物的物理因素有溫度、輻射作用、過濾、滲透壓、干燥和超聲波等。9.抗生素的作用機制有抑制細菌細胞壁合成、破壞細胞質(zhì)膜、作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化和抑制蛋白質(zhì)和核酸合成。10.抗代謝藥物中的磺胺類是由于與對氨基苯甲酸相似,從而競爭性地與二氫葉酸酶結(jié)合,使其不能合成葉酸。選擇題(4個答案選1)1.代時為0.5h的細菌由103個增加到109個時需要多長時間?(3)。(1)40h(2)20h(3)10h(4)3h2.某細菌2h中繁殖了5代,該菌的代時是(2)。(1)15min(2)24min(3)30min(4)45min3.代時是指(4)。(1)培養(yǎng)物從接種到開始生長所需要的時間(2)從對數(shù)期結(jié)束到穩(wěn)定期開始的間隔時間(3)培養(yǎng)物生長的時間(4)細胞分裂繁殖一代所需要的時間4.如果將處于對數(shù)期的細菌移至相同組分的新鮮培養(yǎng)基中,該批培養(yǎng)物將處于哪個生長期?(4)(1)死亡期(2)穩(wěn)定期(3)延遲期(4)對數(shù)期5.細菌細胞進入穩(wěn)定期是由于:①細胞已為快速生長作好了準備;②代謝產(chǎn)生的毒性物質(zhì)發(fā)生了積累;③能源已耗盡;④細胞已衰老且衰老細胞停止分裂;⑤在重新開始生長前需要合成新的蛋白質(zhì)(2)。(1)1,4(2)2,3(3)2,4(4)1,56.對生活的微生物進行計數(shù)的最準確的方法是(4)。(1)比濁法(2)顯微鏡直接計數(shù)(3)干細胞重量測定(4)平板菌落計數(shù)7.用比濁法測定生物量的特點是(4)。(1)只能用于測定活細胞(2)易于操作且能精確測定少量的細胞(3)難于操作但很精確(4)簡單快速,但需要大量的細胞8.下列哪種保存方法會降低食物的水活度?(1)。(1)腌肉(2)巴斯德消毒法(3)冷藏(4)酸泡菜9.細胞復(fù)制時所有的細胞組分都按比例有規(guī)律地增加的現(xiàn)象是(4)。(1)對數(shù)生長(2)二分裂(3)最大生長(4)平衡生長10.過氧化氫酶能解除(4)的毒性。(1)超氧化物自由基(2)過氧化物(3)三線態(tài)氧(4)過氧化氫11.最適生長溫度低于20℃的微生物被稱為(4)。(1)耐冷菌(2)嗜溫菌(3)耐熱菌(4)嗜冷菌12.只能用高壓滅菌才能殺死的是(3)。(1)結(jié)核分支桿菌(2)病毒(3)細菌的內(nèi)生孢子(4)霉菌孢子13.常用的高壓滅菌的溫度是(1)。(1)121℃(2)200℃(3)63℃(4)100℃14.巴斯德消毒法可用于(4)的消毒。(1)啤酒(2)葡萄酒(3)牛奶(4)以上所有15.(2)能通過抑制葉酸合成而抑制細菌生長。(1)青霉素(2)磺胺類藥物(3)四環(huán)素(4)以上所有是非題1.在群體生長的細菌數(shù)量增加一倍所需時間為代時。(-)2.樣品稀釋10-3后,從中取出0.1ml涂布在瓊脂平板上培養(yǎng),長出36個菌落,因此樣品中的細菌數(shù)為36000個/ml。(-)3.最初細菌數(shù)為4個,增殖為128個需經(jīng)過5代。(+)4.一般顯微鏡直接計數(shù)法比稀釋平板涂布法測定出的菌數(shù)多。(+)5.在一密閉容器中接種需氧菌和厭氧菌,需氧菌首先生長。(+)6.分子氧對專性厭氧微生物的抑制和致死作用,是因為這些微生物內(nèi)缺乏超氧化物歧化酶和過氧化氫酶。(+)7.對熱敏感的溶液可采用巴斯德消毒法來滅菌。(-)8.四環(huán)素能抑制細菌細胞壁的合成,青霉素能抑制細菌蛋白質(zhì)的合成。(-)問答題2.封閉系統(tǒng)中單細胞微生物的生長經(jīng)歷哪幾個生長期?以圖表示并指明各期的特點。如何利用微生物的生長規(guī)律來指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)?答:分延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。特點:(1)延滯期生長速率常數(shù)R為零;細胞形態(tài)變大或增大;細胞內(nèi)的RNA尤rRNA其是含量增高;合成代謝十分活躍;對外界不良條件反應(yīng)敏感。(2)指數(shù)期生長速率常數(shù)最大;細胞進行平衡生長;酶系活躍,代謝旺盛。(3)穩(wěn)定期生長速率常數(shù)R等于零;細胞內(nèi)開始積聚糖原、異染顆粒和脂肪等內(nèi)含物;芽孢桿菌一般在這時開始形成芽孢;有的微生物開始合成抗生素等次生代謝產(chǎn)物。(4)衰亡期整個群體呈現(xiàn)負生長狀態(tài);細胞形態(tài)發(fā)生多形化;有的發(fā)生自溶;有的微生物進一步合成或釋放次生代謝物;芽孢桿菌開始釋放芽孢利用微生物的生長規(guī)律指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)體現(xiàn)在以下幾個方面:(1)在工業(yè)發(fā)酵和科學(xué)研究中遲緩期會增加生產(chǎn)周期而產(chǎn)生不利影響,因此需采取必要措施來縮短遲緩期。(2)對數(shù)期的培養(yǎng)物由于生活力強,因而在生產(chǎn)上普遍用作“種子”;對數(shù)期的培養(yǎng)物也常常用來進行生物化學(xué)和生理學(xué)的研究。(3)穩(wěn)定期是積累代謝產(chǎn)物的重要階段,可以延長穩(wěn)定期以獲得更多的菌體或代謝產(chǎn)物。3.大腸桿菌在37℃的牛奶中每12.5min繁殖一代,假設(shè)牛奶消毒后,大腸桿菌的含量為1個/100ml,請問按國家標準(30000個/ml),該消毒牛奶在37℃下最多可存放多少時間?==nlgNt-lgN0lg2G=/nlgNt-lgN0t1-t0=t1-t0lg2×n=lg3000000-lg10.301×12.5=269min=4.5h4.說明溫度對微生物生長的影響,詳述溫度對微生物生長的影響的具體表現(xiàn).。答:微生物的生長具有相當(dāng)高的溫度依賴性,有最低、最適和最高生長溫度這幾個基本溫度。最適溫度總是更靠近最高生長溫度而不是最低生長溫度。溫度對微生物生長的影響的具體表現(xiàn)在:(1)影響酶活性;(2)影響細胞質(zhì)膜的流動性;(3)影響物質(zhì)的溶解度。5.近年來是什么原因?qū)е驴股夭幻舾械目剐跃甑脑龆啵看穑褐饕幸韵?個原因:(1)細胞質(zhì)膜透性改變使藥物不能進入細胞;(2)藥物進入細胞后又被細胞膜中的移位酶等泵出胞外;(3)細菌產(chǎn)生了能修飾抗生素的酶使之失去活性;(4)藥物作用靶發(fā)生改變從而對藥物不再具有敏感性;(5)菌株改變代謝途徑以繞過受藥物抑制的過程或增加靶代謝物的產(chǎn)物。第七章病毒與亞病毒名詞解釋烈性噬菌體:感染細胞后能迅速引起宿主細胞破裂釋放子代噬菌體的噬菌體。溶源性:感染宿主細胞后不能完成復(fù)制循環(huán),噬菌體基因組長期存在于宿主細胞內(nèi),沒有成熟噬菌體產(chǎn)生。溫和噬菌體:噬菌體感染細胞后,將其核酸整合(附著)到宿主的核DNA上,并且可以隨宿主DNA的復(fù)制而進行同步復(fù)制,在一般情況下,不引起寄主細胞裂解的噬菌體。前噬菌體:附著或整合在寄主細胞染色體上的溫和噬菌體的DNA。溶源性細菌:細胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體基因組的細菌。誘發(fā)裂解:用某些適量的理化因子如紫外線、絲裂霉素C等處理溶源性細菌能導(dǎo)致前噬菌體活化,產(chǎn)生具有感染力的噬菌體粒子,結(jié)果使整個細胞裂解并釋放出大量噬菌體。溶源轉(zhuǎn)變:當(dāng)正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時,因噬菌體基因整合到宿主的基因組上,而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象,稱溶源轉(zhuǎn)變。填空題1.從原核生物中分離的病毒統(tǒng)稱噬菌體,它們包括噬菌體、噬藍(綠)藻體和支原體噬菌體等。2.螺旋對稱病毒體的直徑是由蛋白質(zhì)亞基的大小決定的,而其長度則是由病毒核酸分子的長度所決定的。3.由一步生長曲線可獲得病毒繁殖的兩個特征性數(shù)據(jù),即潛伏期和裂解量。前者為病毒吸附于細胞到子代病毒釋放所需的最短的時間,后者為每個受染細胞釋放的子代病毒的平均數(shù)目。4.病毒的復(fù)制過程依其發(fā)生事件順序分為以下吸附、侵入、增殖、成熟(裝配)和裂解(釋放)5個階段。5.溶源性轉(zhuǎn)變是指原噬菌體所引起的溶源性細菌除免疫性外的其他表型的改變,包括細胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變。6.亞病毒包括類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA和朊病毒。選擇題(4個答案選1)1.病毒顯著區(qū)別于其他生物的特征是(2)。(1)具有感染性(2)獨特的繁殖方式(3)體積微小(4)細胞內(nèi)寄生2.描述螺旋對稱殼體特征的參數(shù)有(2)。(1)核酸的相對分子質(zhì)量(2)螺旋長度與直徑(3)螺旋的外觀(4)蛋白質(zhì)亞基大小3.溫和性噬菌體基因組在溶源性細菌內(nèi)可以下列狀態(tài)存在(2)。(1)復(fù)制、表達產(chǎn)生子代病毒(2)整合于宿主染色體或質(zhì)粒形式(3)自發(fā)或經(jīng)誘導(dǎo)進入裂解循環(huán)(4)產(chǎn)生成熟的病毒顆粒是非題1.病毒是一種原始的生命形式。(-)2.病毒只含有一種核酸,DNA或是RNA。(+)3.病毒幾乎可以感染所有的細胞生物,但就某一種病毒而言,它僅能感染一定種類的微生物、植物或動物。(+)4.以高濃度的噬菌體懸液接種細菌平板,經(jīng)過一定時間培養(yǎng)后可形成單個噬菌斑。(-)5.在拓撲等價多面體中,在表面積一定時以二十面體容積為最大,故病毒殼體多取二十面體對稱結(jié)構(gòu)。(+)6.由一步生長試驗所得病毒的裂解量等于穩(wěn)定期病毒效價與潛伏期病毒效價之比。(+)7.溶源性細菌對其他噬菌體的再感染均具有特異性的免疫力。(-)問答題1.病毒區(qū)別于其他生物的特點是什么?答題要點:結(jié)構(gòu)簡單,獨特的繁殖方式,絕對的細胞內(nèi)寄生,生命形式的二重性。2.病毒殼體結(jié)構(gòu)有哪幾種對稱形式?答題要點:螺旋對稱、二十面體對稱、復(fù)合對稱。3.什么叫烈性噬菌體?簡述其裂解性生活史。答題要點:在短時間內(nèi)連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解5個階段而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體稱為烈性噬菌體。4.什么是一步生長曲線?它可分幾期?各期有何特點?答題要點:定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的曲線,稱為一步生長曲線。分為潛伏期、裂解期、平穩(wěn)期3個時期。5.什么是效價?其測定方法有幾?試簡述測定噬菌體效價的雙層平板法。答題要點:病毒粒的計量單位為效價,不同種類病毒的效價有著不同的測定方法。測定方法:雙層平板法、電鏡計數(shù)等。(雙層平板法測定方法見書72頁)第八章微生物的遺傳變異和育種名詞解釋質(zhì)粒:凡游離于原核生物基因組以外,具有獨立復(fù)制能力的小型閉合環(huán)狀的dsDNA分子,即cccDNA,就是典型的質(zhì)粒。光復(fù)活作用:把經(jīng)紫外線照射后的微生物立即暴露于可見光下時,可明顯降低其死亡率的現(xiàn)象營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后,由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長,這類突變菌株稱為營養(yǎng)缺陷型突變株,簡稱營養(yǎng)缺陷型?;蛑亟M:兩個獨立基因組內(nèi)的遺傳基因,通過一定的途徑轉(zhuǎn)移到一起,形成新的穩(wěn)定基因組的過程,稱為基因重組。轉(zhuǎn)化:受體菌直接吸收了來自供體菌的DNA片段,通過交換,把它整合到自己的基因組中,從而獲得了供體菌的部分遺傳性狀的現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)導(dǎo):通過缺陷噬菌體的媒介,把供體細胞的DNA片段攜帶到受體細胞中,從而使后者獲得了前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。轉(zhuǎn)染:如果把噬菌體或其他病毒的DNA(或RNA)抽提出來,讓它去感染感受態(tài)的宿主細胞,并進而產(chǎn)生正常的噬菌體或病毒后代,這種現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)染接合:供體菌(“雄性”)通過性菌毛與受體菌(“雌性”)直接接觸,把F質(zhì)?;蚱鋽y帶的不同長度的核基因組片段傳遞給后者,使后者獲得若干新遺傳性狀的受體細胞,稱為接合。加上誘變育種:填空題1.Griffith是第一個發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的。并將引起轉(zhuǎn)化的遺傳物質(zhì)稱為轉(zhuǎn)化因子。2.Avery和他的合作者分別用降解DNA、RNA和蛋白質(zhì)的酶作用于有毒的S型細胞抽提物,然后分別與無毒的R型細胞混合,結(jié)果發(fā)現(xiàn),只有DNA被酶解而遭到破壞的抽提物無轉(zhuǎn)化活性,說明DNA是轉(zhuǎn)化所必須的轉(zhuǎn)化因子。3.細菌在一般情況下是一套基因,即單倍體;真核微生物通常是有兩套基因又稱二倍體。4.Col質(zhì)粒首先發(fā)現(xiàn)于大腸桿菌中而得名,該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因,大腸菌素是一種細菌蛋白,只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株,而宿主不受其產(chǎn)生的細菌素的影響。5.當(dāng)DNA的某一位置的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變時,并不意味著一定會產(chǎn)生突變,因為細胞內(nèi)存在一系列的修復(fù)系統(tǒng),能清除或糾正不正常的DNA分子結(jié)構(gòu)和損傷,從而阻止突變的發(fā)生。6.營養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學(xué)研究中重要的選擇標記和育種的重要手段,由于這類突變型在選擇培養(yǎng)基(或基本培養(yǎng)基)上不生長,所以是一種負選擇標記,需采用影印平板的方法進行分離。7.兩株多重營養(yǎng)缺陷型菌株只有在混合培養(yǎng)后才能在基本培養(yǎng)基上長出原養(yǎng)型菌落,而未混合的兩親菌株均不能在基本培養(yǎng)基上生長,說明長出的原養(yǎng)型菌落是兩菌株之間發(fā)生了遺傳交換和重組所致。8.在普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給體染色體的任何部分到受體細胞中;而在局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體總是攜帶同樣的片段到受體細胞中。9.為了提高誘變效率,常用物理、化學(xué)兩種誘變劑交替使用,待誘變的菌株或孢子懸液一定要混勻,使其能均勻接觸誘變劑。10.原生質(zhì)體融合技術(shù)主要包括原生質(zhì)體的制備、原生質(zhì)體的融合、原生質(zhì)體的再生和融合子選擇等步驟。選擇題(4個答案選1)1.F/是攜帶有宿主染色體基因的F因子,F(xiàn)/×F-的雜交與F+×F-不同的是給體的部分染色體基因隨F/一起轉(zhuǎn)入受體細胞,并且不需要整合就可以表達,實際上是形成一種部分二倍體,此時的受體細胞也就變成了(2)。(1)F+(2)F/(3)F-(4)F2.絲狀真菌遺傳學(xué)研究主要是借助有性過程和準性生殖過程,準性生殖的過程可出現(xiàn)很多新的(2),因此可成為遺傳育種的重要手段,其次,在遺傳分析上也是十分有用的。(1)減數(shù)分裂(2)基因組合(3)生殖現(xiàn)象(4)有性生殖3.誘變育種是指利用各種誘變劑處理微生物細胞,提高基因的隨機(3),通過一定的篩選方法獲得所需要的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌株。(1)重組頻率(2)融合頻率(3)突變頻率(4)調(diào)控頻率4.在營養(yǎng)缺陷型突變株中,生物合成途徑中某一步發(fā)生酶缺陷,合成反應(yīng)不能完成。通過外加限量的所要求的營養(yǎng)物,克服生長的障礙,而又使最終產(chǎn)物不致于積累到引起(1)的濃度,從而有利于中間產(chǎn)物或某種最終產(chǎn)物的積累。(1)反饋調(diào)節(jié)(2)突變(3)生長增加(4)基因重組5.采用接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和原生質(zhì)體融合等遺傳學(xué)方法和技術(shù)使微生物細胞內(nèi)發(fā)生基因重組,以增加優(yōu)良性狀的組合,或者導(dǎo)致多倍體的出現(xiàn),從而獲得優(yōu)良菌株,這種育種方法被稱為(2)重組育種。(1)誘變(2)體內(nèi)基因(3)體外基因(4)融合基因是非題1.1956年,H.FraenkelConrat用煙草花葉病毒所進行的拆分與重建實驗,結(jié)果也證明DNA是遺傳物質(zhì)的基礎(chǔ)。(-)2.同時具有細菌和真核生物基因組結(jié)構(gòu)特征的古生菌對研究生命的起源和進化無疑是十分重要的,而許多古生菌特有的基因?qū)殚_發(fā)新的藥物和生物活性物質(zhì),或在工業(yè)中實施新的技術(shù)開拓廣闊的前景。(+)3.質(zhì)粒作為細胞中的主要遺傳因子,攜帶有在所有生長條件下所必需的基因。(-)4.F質(zhì)粒是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象有關(guān)的質(zhì)粒,攜帶F質(zhì)粒的菌株稱為Hfr,F(xiàn)質(zhì)粒整合到宿主細胞染色體上的菌株稱之為F+。(-)5.F+×F-的接合作用中,是F因子向F-細胞轉(zhuǎn)移,含F(xiàn)因子的宿主細胞的染色體DNA也被轉(zhuǎn)移,雜交的結(jié)果仍是給體細胞為F+細胞,受體細胞為F-細胞。(-)6.轉(zhuǎn)導(dǎo)可分為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)兩種類型,在普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給體染色體的任何部分到受體細胞中;而在局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體總是攜帶同樣的片段到受體細胞中。(+)問答題3.根據(jù)突變的光復(fù)活修復(fù)作用、原理,你認為在進行紫外線誘變處理時,應(yīng)注意什么?為了使被誘變的細胞能均勻地受到紫外線照射,你將如何做?答:把經(jīng)紫
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