球孢白僵菌殺線蟲活性物質分離純化研究的中期報告

球孢白僵菌殺線蟲活性物質分離純化研究的中期報告【摘要】筆者對球孢白僵菌分離得到的殺線蟲活性物質進行了中期研究。首先采用溶劑萃取法對發(fā)酵液進行初步分離，得到了水相和有機相兩種提取物。然后利用層析技術對有機相提取物進行進一步純化，得到了三個主要組分，經質譜分析證實為殺線蟲活性物質。此外，還對純化后的樣品進行了理化性質和殺線蟲活性的測定，并對結果進行了分析。實驗結果表明，球孢白僵菌分離得到的殺線蟲活性物質具有很高的殺線蟲活性和穩(wěn)定性，具有良好的應用前景?！娟P鍵詞】球孢白僵菌；殺線蟲活性物質；溶劑萃取法；層析技術；純化；理化性質；殺線蟲活性1.研究背景球孢白僵菌是一種廣泛存在于自然界中的土壤真菌，常被用作生物殺蟲劑的有效成分。近年來，研究人員發(fā)現球孢白僵菌可以分泌出具有殺線蟲活性的物質，具有廣泛的殺線蟲應用前景。因此，本研究旨在分離純化球孢白僵菌殺線蟲活性物質，并對其進行理化性質和殺線蟲活性的測定與研究。2.實驗材料與方法2.1實驗菌株本研究采用球孢白僵菌作為實驗菌株。2.2培養(yǎng)條件球孢白僵菌在PotatoDextroseAgar（PDA）平板培養(yǎng)基上進行預培養(yǎng)，然后接種進LiPDA培養(yǎng)基中進行發(fā)酵，培養(yǎng)條件為28℃，pH為6.5，培養(yǎng)時間為7d。2.3提取與分離收獲平板培養(yǎng)的轉化液，采用1：2（體積比）的甲醇-乙酸乙酯混合液溶解，搖勻（200r/min，4℃），靜置分層。化學藥品超純級甲醇、鹽酸、氫氧化鈉、乙酸乙酯、醋酸。2.4高效液相色譜-質譜分析（HPLC-MS）通過HPLC-MS對分離得到的殺線蟲活性物質進行組分分析。3.實驗結果3.1溶劑萃取法初步分離采用溶劑萃取法對發(fā)酵液進行初步提取，得到了水相和有機相兩種提取物。水相提取物未見殺線蟲活性，有機相提取物顯示出強烈的殺線蟲活性。3.2層析技術進一步純化對有機相提取物進行層析技術進一步分離純化，得到了三個主要組分，并經質譜分析確定為殺線蟲活性物質。3.3理化性質測定對純化得到的殺線蟲活性物質進行理化性質測定，包括熔點、溶解度、分子量等。結果表明，該物質具有較好的熱穩(wěn)定性和溶解性，并具有一定的分子量。3.4殺線蟲活性測定采用不同濃度的殺線蟲活性物質對線蟲進行處理，測定不同濃度下線蟲的死亡率和生長指數。結果表明，殺線蟲活性物質對線蟲有較強的毒性效果，并且對線蟲生長也有一定的抑制作用。4.結論與展望通過對球孢白僵菌分離得到的殺線蟲活性物質進行中期研究，成功地對該物質進行了初步的分離、純化和理化性質及殺線蟲活性的測定與分析。實驗結果表明，該物質具有較高的殺線蟲活性和穩(wěn)定性，具有