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血清〔漿〕脂類及脂蛋白測(cè)定——1整理ppt血脂的組成:甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯)磷脂膽固醇和膽固醇酯非酯化脂肪酸〔游離脂肪酸〕等2整理ppt血脂的運(yùn)輸形式—脂蛋白1、定義:指血漿脂質(zhì)與載脂蛋白組成的可溶性的生物大分子。3整理ppt磷脂膽固醇載脂蛋白甘油三酯膽固醇酯2、結(jié)構(gòu):脂蛋白微粒外表核心4整理ppt5整理ppt3、分類(1)按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM6整理ppt(2)按電泳時(shí)區(qū)帶的泳動(dòng)位置不同CMHDLVLDLLDLCMβ-LP前β-LPα-LP+α-LP前β-LPβ-LPCM7整理ppt臨床血脂測(cè)定的常見工程:8整理ppt實(shí)驗(yàn)51:
磷鎢酸-鎂沉淀法測(cè)定高密度脂蛋白膽固醇〔HDL-C〕9整理ppt提取HDL測(cè)定膽固醇實(shí)驗(yàn)原理:10整理ppt
超速離心法層析法電泳法☆沉淀法提取HDL的方法:11整理ppt沉淀法原理:ApoB+多陰離子化合物沉淀↓12整理ppt硫酸葡聚糖--Mg2+肝素--Mn2+磷鎢酸--Mg2+多陰離子〔polyanion〕化合物13整理ppt過(guò)氧化物酶膽固醇+O2
膽甾烯酮+H2O2H2O2+酚+4-氨基安替比林
亞胺醌
+H2O膽固醇測(cè)定〔酶法〕:14整理ppt試劑:沉淀劑酶試劑參考血清〔TC測(cè)定用的定值血清〕15整理ppt操作步驟:
取血清和沉淀劑各200μl,充分混勻,置室溫放置10min后,2500r/min,15min,吸取上清液按表進(jìn)行操作。1、提取HDL16整理ppt加入物(μl)空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管上清液——50參考血清—50—蒸餾水50——酶試劑200020002000混勻,37℃水浴15min;空白管調(diào)零,0.5cm比色杯,500nm比色。2、測(cè)定膽固醇17整理ppt計(jì)算:參考值:HDL-C(mmol/L)測(cè)定管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×=定值血清膽固醇濃度5.170.9~2.0mmol/L218整理ppt本卷須知:1、血清標(biāo)本要及時(shí)測(cè)定——〔在室溫條件下,各型脂蛋白之間會(huì)發(fā)生脂質(zhì)交換〕;——〔游離的膽固醇會(huì)不斷酯化〕。2、離心過(guò)程中防止溫度過(guò)高〔室溫15~25℃〕,離心后放置時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。——〔溫度過(guò)高使沉淀不完全〕。19整理ppt臨床意義:
具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用,是冠心病的保護(hù)因素。20整理ppt21整理ppt磷酸甘油氧化法測(cè)定血清甘油三酯〔TG〕實(shí)驗(yàn)49:
22整理ppt甘油三酯(TG)的結(jié)構(gòu):23整理ppt甘油三酯測(cè)定的方法:化學(xué)法酶法
24整理ppt化學(xué)法〔KOH〕〔過(guò)碘酸〕皂化氧化抽提甘油甲醛顯色25整理ppt甘油三酯甘油甲醛變色酸紫紅色26整理ppt甘油三酯3-磷酸甘油+ADP+ATPO2、H2O+磷酸二羥丙酮+H2O2甘油
+脂肪酸+酚、4-氨基安替比亞胺醌
+H2OLPLGKGPOPOD☆酶法〔磷酸甘油氧化酶法〕27整理ppt試劑:酶試劑2.26mmol/L的三油酸甘油酯標(biāo)準(zhǔn)液28整理ppt操作:加入物(μl)空白管標(biāo)準(zhǔn)管(×2)測(cè)定管(×2)上清液——20參考血清—20—酶試劑20002000200037℃水浴10min;空白管調(diào)零,0.5cm比色杯,500nm比色。29整理ppt計(jì)算:TG(mmol/L)測(cè)定管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×=標(biāo)準(zhǔn)液濃度參考值:0.56~1.70mmol/L2.26mmol/L30整理ppt臨床意義:增高:
與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切、家族性的脂代謝紊亂、糖尿病等。降低:
營(yíng)養(yǎng)不良、消化吸收綜合征、消耗性疾病等。31整理ppt本卷須知:標(biāo)本:標(biāo)本要求是餐后12-14h的空腹血液——〔血清TG易受飲食影響〕。標(biāo)本存放不宜超過(guò)3天——〔防止TG水解而釋放出甘油〕。試劑:酶試劑應(yīng)4℃避光保存,出現(xiàn)紅色不可再用。32整理ppt免疫透射比濁法測(cè)定血清載脂蛋白A1和載脂蛋白B實(shí)驗(yàn)53:
33整理ppt抗原抗原抗體復(fù)合物抗體+
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