依替米星的體外抗菌活性及聯(lián)合抑菌效果研究

依替米星的體外抗菌活性及聯(lián)合抑菌效果研究

依米星是慶大霉素c1a的乙基化衍生物。本研究比較了依替米星與其他抗菌藥物對臨床常見病原菌的體外抗菌活性,并測試了依替米星與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物對甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)和銅綠假單胞菌(PAE)的體外協(xié)同作用,目的在于指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理應(yīng)用依替米星治療病原菌感染。1材料和方法1.1藥敏試驗(yàn)檢測共收集2005年1-8月北京協(xié)和醫(yī)院門診及各病房分離出的連續(xù)非重復(fù)菌株1559株,其中ESBLs通過美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所/美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(CLSI/NCCLS)推薦的四紙片確證試驗(yàn)檢出,耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)、甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)通過紙片法藥敏中頭孢西丁的敏感性檢出。所有菌株均經(jīng)常規(guī)生化鑒定或BBLCrystal及BDPhoenix自動化鑒定系統(tǒng)鑒定。進(jìn)行聯(lián)合抑菌試驗(yàn)的30株MSSA和30株銅綠假單胞菌為臨床分離的隨機(jī)選取菌株。1.2菌株來源及標(biāo)本來源此次研究菌株的科室分布來自兒科、重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)、門診和急診、呼吸內(nèi)科及外科病房等科室。菌株的標(biāo)本來源為:痰液、尿液、血液等標(biāo)本。具體見表1。1.3抗菌藥物膠片依替米星(杭州愛大制藥有限公司,純度0.66),頭孢他啶(葛蘭素史克制藥有限公司,純度0.8945),哌拉西林(齊魯制藥廠,純度0.894)?？咕幬锛埰?依替米星(中國藥品生物制品檢定所)、青霉素、哌拉西林、氨芐西林、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢曲松、左氧氟沙星、慶大霉素、阿米卡星、頭孢噻肟/克拉維酸、頭孢他啶/克拉維酸、頭孢西丁紙片均為英國Oxoid公司的產(chǎn)品。M-H瓊脂,陽離子調(diào)整的M-H肉湯(Ca2+濃度為22.5mg/L,Mg2+濃度為11.25mg/L)。1.5聯(lián)合抑菌試驗(yàn)首先依照CLSI/NCCLS推薦的方法進(jìn)行微量肉湯稀釋法,測定依替米星、哌拉西林對30株MSSA的單藥最低抑菌濃度(MIC)值,以及依替米星、頭孢他啶對30株銅綠假單胞菌的單藥MIC值。棋盤法聯(lián)合抑菌試驗(yàn)在調(diào)整陽離子濃度的M-H肉湯(CAMHB)中進(jìn)行,分別測定依替米星/哌拉西林對MSSA的抑菌效應(yīng)以及依替米星/頭孢他啶對銅綠假單胞菌的抑菌效應(yīng)。接種菌量為5×105CFU/ml?？咕幬镌O(shè)置濃度為(1/32~4)×MIC,37℃孵育24h,以肉眼未見菌生長的兩藥最低濃度組合讀取各藥的聯(lián)合MIC。藥物相互作用效應(yīng)通過計(jì)算最小部分抑菌濃度(FIC)指數(shù)來判斷:FIC=(A藥聯(lián)合用時(shí)的MIC/A單藥用時(shí)的MIC)+(B藥聯(lián)合用時(shí)的MIC/B單藥用時(shí)的MIC);FIC≤0.5為協(xié)同效應(yīng),0.5<FIC≤1為相加效應(yīng),1<FIC≤2為無關(guān)作用,FIC>2為拮抗效應(yīng)。2結(jié)果2.1抗病性的分離率2.2基糖苷類藥物的敏感性大腸埃希菌對3種氨基糖苷類藥物的敏感性依次為阿米卡星>依替米星>慶大霉素。克雷伯菌屬對3種氨基糖苷類藥物的敏感性依次為阿米卡星>依替米星>慶大霉素。腸桿菌屬對3種氨基糖苷類藥物的敏感性依次為阿米卡星>依替米星>慶大霉素。銅綠假單胞菌對3種氨基糖苷類藥物的敏感性依次為阿米卡星>依替米星≈慶大霉素,依替米星敏感率為59.8%,略高于左氧氟沙星(57.8%)。鮑氏不動桿菌對所有測試抗菌藥物的敏感性均較低,依替米星的敏感率為14.9%,略高于慶大霉素。MRSA和MRCNS對依替米星敏感率高于慶大霉素,其敏感率為18.9%和85.1%;MSSA和MSCNS對依替米星活性>95.0%,高于慶大霉素、左氧氟沙星。腸球菌屬對依替米星的敏感率較低,為9.4%。見表3。2.3菌株協(xié)同試驗(yàn)結(jié)果30株MSSA對依替米星MIC分布:1株為0.064μg/ml、17株為0.25μg/ml、8株為0.5μg/ml,1、4、16、32μg/ml各1株;30株MSSA對哌拉西林MIC分布:18株為1~16μg/ml、9株為32~64μg/ml、3株為128~256μg/ml。30株銅綠假單胞菌對依替米星MIC分布:19株為1~8μg/ml、6株為16μg/ml、3株為32μg/ml、2株為>256μg/ml;30株銅綠假單胞菌對頭孢他啶MIC分布:10株為2~8μg/ml、2株為16μg/ml、18株為32~256μg/ml。依替米星/哌拉西林對MSSA聯(lián)合抑菌效果以及依替米星/頭孢他啶對銅綠假單胞菌聯(lián)合抑菌效果:兩組協(xié)同率均達(dá)90.0%,相加率均為10.0%?？咕幬锝M合中聯(lián)合MIC的分布及與單藥MIC的比較,聯(lián)合后各藥的MIC50、MIC90及MIC均值均有顯著的降低。抗菌藥物聯(lián)合用藥與單藥MIC的分布比較見表4。3依替米星的臨床療效氨基糖苷類抗菌藥物為臨床常用的廣譜抗菌藥物,目前由于病原菌耐藥性的發(fā)展,特別是各種氨基糖苷鈍化酶的出現(xiàn),使得臨床迫切需要對酶更穩(wěn)定、毒性更低的新氨基糖苷類抗菌藥物。依替米星為乙基慶大霉素C1a,根據(jù)此次樣本量較大的紙片法藥敏分析,發(fā)現(xiàn)依替米星對克雷伯菌屬、ESBLs陰性大腸埃希菌、腸桿菌屬、變形菌屬、MSSA、MRCNS、MSCNS均保持了較高的體外抗菌活性,且對銅綠假單胞菌也有較好的抗菌活性;在氨基糖苷類藥物中,其敏感率高于慶大霉素,稍遜于阿米卡星。李家泰等對依替米星體外藥效研究時(shí)發(fā)現(xiàn),依替米星對耐藥菌感染的療效可能優(yōu)于慶大霉素和小諾米星,特別是對MRSA,有66.0%的菌株可被依替米星≤8μg/ml抑制。但在本次藥敏紙片法顯示,依替米星對ESBLs陽性大腸埃希菌和MRSA的活性較低(敏感率:ESBLs陽性大腸埃希菌為37.1%,MRSA為18.9%)。鮑氏不動桿菌和腸球菌屬對氨基糖苷類藥物耐藥率普遍較高,依替米星也不例外。在對依替米星的體內(nèi)抗菌療效觀察中,陳雪華等組織上海市11所醫(yī)院共350例進(jìn)行了依替米星治療細(xì)菌性感染的臨床研究,發(fā)現(xiàn)其治療細(xì)菌性感染有效率為87.7%,痊愈率為52.7%;其中治療下呼吸道感染有效率為88.3%,痊愈率49.0%;細(xì)菌清除率90.1%,不良反應(yīng)率為3.43%。宋毅等對使用依替米星的患者進(jìn)行了不良反應(yīng)調(diào)查分析,發(fā)現(xiàn)總不良反應(yīng)率為5.03%,其中聽力平衡異常發(fā)生率為0.567%,肝功異常發(fā)生率為0.140%,腎功異常發(fā)生率為0.425%。說明依替米星是一個高效、安全、具有較高臨床推廣價(jià)值的藥物。國內(nèi)外對氨基糖苷類藥物和β-內(nèi)酰胺類藥物聯(lián)合的研究起步較早,目前認(rèn)為此組合對大部分菌株體現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)。其機(jī)制可能為β-內(nèi)酰胺類藥物對細(xì)菌細(xì)胞壁的破壞作用,促進(jìn)氨基糖苷類藥物進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)。依替米星與哌拉西林對MSSA的聯(lián)合抑菌效應(yīng)以及依替米星與頭孢他啶對銅綠假單胞菌的聯(lián)合抑菌效應(yīng)均十分理想,兩個抗菌藥物組合的協(xié)同率均達(dá)90.0%,聯(lián)合后各抗菌藥物的MIC50及MIC90MIC50、MIC9075.0%~87.5%。因此,依替米星與β-內(nèi)酰胺類藥物聯(lián)合治療病原菌特別是耐藥菌的感染有較好的應(yīng)用前景。共分離病原菌1559株