動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)方法

第七章動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)方法一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備理論準(zhǔn)備：了解有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面的知識(shí)條件準(zhǔn)備：儀器、藥品、試劑、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室預(yù)實(shí)驗(yàn)：檢查各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是否完善，實(shí)驗(yàn)方法和步驟是否切實(shí)可行。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定1、小鼠抓取固定方法小鼠溫順，一般不會(huì)咬人，抓取時(shí)先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠籠或?qū)嶒?yàn)臺(tái)向后拉，在其向前爬行時(shí)，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頸部皮膚，將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，以無名指按住鼠尾，小指按住后腿即可2、大鼠的抓取與固定3、豚鼠的抓取與固定

1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳），4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體。4、家兔的抓取與固定兔的固定：一般采用臺(tái)式和馬蹄形。四肢用粗棉繩活結(jié)綁住，拉直四肢，將繩綁在兔臺(tái)四周的固定木塊上，頭以固定夾固定或用一根粗棉繩挑過兔門齒綁在兔臺(tái)鐵柱上；5、犬的抓取固定狗性兇惡，能咬人，因此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)第一個(gè)步驟就是要綁住狗嘴。馴服的狗綁嘴時(shí)可從側(cè)面靠近輕輕撫摸其頸背部皮毛，然后迅速用布帶縛住其嘴。方法是用布帶迅速兜住狗的下頜，繞到上頜打一個(gè)結(jié)，再繞回下頜下打第二結(jié)，然后將布帶引至頭后頸項(xiàng)部打第三個(gè)結(jié)，并多系一個(gè)活結(jié)（以備麻醉后解脫）。1）．頭部固定：固定狗頭需用一特制的狗頭固定器，狗頭固定器為一圓鐵圈，圈的中央有一弓形鐵，與棒螺絲相連，下面有一根平直鐵閂。操作時(shí)先將狗舌拉出，把狗嘴插入固定器的鐵圈內(nèi)，再用平直鐵閂橫貫于犬齒后部的上下頜之間，然后向下旋轉(zhuǎn)螺絲，使弓形鐵逐漸下壓在動(dòng)物的下頜骨上，把鐵柄固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的鐵柱上即可。2）.四肢固定：如采取仰臥位，四肢固定方法與家兔相同。犬的抓取與固定6、猴的抓取與固定7、小型豬的抓取與固定三實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)、標(biāo)記

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，為了觀察每個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的反應(yīng)情況，必須對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行編號(hào)、標(biāo)記。標(biāo)記的方法應(yīng)保證號(hào)碼清楚、耐久、簡便、易認(rèn)和適用。現(xiàn)介紹幾種常見標(biāo)記方法：染色法、標(biāo)牌法、烙印法、耳孔法。1．染色法染色法是用化學(xué)劑在動(dòng)物身體明顯部位如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染或用不同顏色等來區(qū)別各組動(dòng)物，是實(shí)驗(yàn)室最常用、最容易掌握的方法。

常用的編號(hào)標(biāo)記溶液有：①3％一5％苦味酸溶液，涂染成黃色；②2％硝酸銀溶液，涂染成咖啡色(涂后需光照10min)；③0.5％中性紅或品紅溶液，涂染成紅色；④煤焦油酒精溶液，涂染成黑色；⑤龍膽紫溶液，涂染成紫色。標(biāo)記時(shí)用標(biāo)記筆簽蘸取上述溶液，在動(dòng)物體表不同部位涂上斑點(diǎn)，以示不同號(hào)碼。

編號(hào)原則是：先左后右，從前到后。一般把涂在左前腳上的記為1號(hào)，左側(cè)腹部為2號(hào)，左后腿為3號(hào)，頭頂部為4號(hào)，腰背部為5號(hào)，尾基部為6號(hào)，右前腿為7號(hào)，右側(cè)腰部為8號(hào)，右后腿為9號(hào)。若動(dòng)物編號(hào)超過10或更大數(shù)字時(shí)，可使用上述兩種不同顏色的溶液，即把一種顏色作為個(gè)位數(shù)，另一種顏色作為十位數(shù)。這種交互使用可編到99號(hào)。例如把紅色的記為十位數(shù)，黃色記為個(gè)位數(shù)，那么右后腿黃斑，頭頂紅斑，則表示是49號(hào)鼠，其余類推。三、編號(hào)和標(biāo)記方法

染色法多用于實(shí)驗(yàn)周期較短，動(dòng)物數(shù)量不多的情況。這種方法標(biāo)號(hào)簡單，動(dòng)物無疼痛和損傷，但由于動(dòng)物之間互相摩擦、舔毛，尿、水浸潰被毛或脫毛，或因日久顏色自行消退等原因，不宜用于長期的實(shí)驗(yàn)。三、編號(hào)和標(biāo)記方法

2．掛牌法將號(hào)碼壓在金屬號(hào)碼牌上，最好用鋁牌，可以反復(fù)使用不生銹。將金屬牌固定在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物耳朵上作為標(biāo)記。使時(shí)，先將號(hào)碼牌的尖端避開耳朵中央動(dòng)脈過耳殼，再由耳朵內(nèi)側(cè)面將其折曲固定，一般用于兔、豚鼠標(biāo)記。猴、貓等動(dòng)物有時(shí)可攔頸部或籠箱上。用于犬的金屬號(hào)碼牌較大，且牌上穿有小孔，可固定在犬鏈條上作標(biāo)記。三、編號(hào)和標(biāo)記方法3．烙印法烙印法是用刺號(hào)鉗將號(hào)烙壓在動(dòng)物無體毛或明顯部位，如耳、面鼻和四肢部位等。另外，有時(shí)用燒紅的鐵烙在動(dòng)物(多半用于大、中型動(dòng)物）體表明顯的部位，燒烙出號(hào)碼，然后用以酒精為溶劑的染料涂布。此類方法應(yīng)注意烙號(hào)部位的污染和預(yù)防感染。三、編號(hào)和標(biāo)記方法

4．耳孔法耳孔法是專用于動(dòng)物編號(hào)而直接在動(dòng)物耳朵上打孔的方法，由打孔的位置和孔的數(shù)量來標(biāo)記。用剪刀++將耳緣剪缺口也可代替此方法。打孔應(yīng)注意防止孔口愈合，可使用滑石粉涂抹在打孔局部。一般來說，小型動(dòng)物適宜用耳孔法和染色法，中型動(dòng)物適用掛牌法和烙印法。

四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛的去除方法動(dòng)物的被毛常常因?yàn)闀?huì)影響實(shí)驗(yàn)的操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察，因此實(shí)驗(yàn)中通常去除或剪短動(dòng)物的被毛。去除被毛的方法有四種：剪毛、拔毛、剃毛和脫毛。1、剪毛法一般將動(dòng)物固定后，用彎頭手術(shù)剪緊貼手術(shù)者左手繃緊的動(dòng)物皮膚，依次將所需實(shí)驗(yàn)部位的被毛剪去?？上却旨?，然后再細(xì)剪，不可用手提著動(dòng)物剪被毛，這樣易剪破皮膚。剪下的毛集中放在一個(gè)容器內(nèi)，不要遺留在手術(shù)臺(tái)周圍，避免注射器等夾毛。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛的去除方法2、拔毛法兔耳緣靜脈注射或取血時(shí)以及大鼠、小鼠作尾靜脈注射時(shí)，需用拇指、食指將局部被毛輕輕拔去，需要時(shí)在拔毛處涂抹一些液體石蠟油或凡士林使血管清晰明顯以利于操作。3、剃毛法將所需剃毛的部位的被毛先用剪刀粗剪一遍，然后用溫肥皂水，將此部位潤濕，用剃刀順被毛方向剃毛。或者使用電動(dòng)剃毛推，逆被毛方向剃毛。這種方法常用于豚鼠等動(dòng)物。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛的去除方法4、脫毛法脫毛是指用化學(xué)脫毛劑將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛脫去，適用于無菌手術(shù)的準(zhǔn)備以及觀察動(dòng)物皮膚血液循環(huán)和病理變化。方法：將需脫毛部位的被毛先用彎頭剪子剪去，盡量剪短，不要剪破皮膚。然后用溫水將該部位潤濕，再用紗布包扎棉球的小棒蘸脫毛劑，在需要脫毛部位涂一薄層。經(jīng)2-3min后，用溫水洗去該部位脫下的毛，自然涼干備用，不要用紗布去擦，以免損傷皮膚。常用的脫毛劑配方：（1）硫化鈉3g、肥皂粉1g、淀粉7g，加水適量調(diào)成糊狀。（2）硫化鈉8g、淀粉7g、糖4g、硼砂1g,加水75ml。（3）硫化鈉8g,溶于100ml水中以上三種配方適合于家兔、大鼠、小鼠等小動(dòng)物的脫毛。（4）硫化鈉10g、生石灰15g，溶于100ml水中，此配方適用于犬等大動(dòng)物的脫毛。五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉在一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，特別是手術(shù)等實(shí)驗(yàn)，為減少動(dòng)物的掙扎和保持其安靜，并便于操作，常對動(dòng)物采用必要的麻醉。由于動(dòng)物種屬間的差異等情況，所采用的麻醉方法和選用的麻醉劑亦有不同。(一)常用的麻醉劑動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為三類，即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。1．揮發(fā)性麻醉劑這類麻藥包括乙醚、氯仿等。乙醚吸入麻醉適用于各種動(dòng)物，其麻醉量和致死量差距大，所發(fā)安全度亦大，動(dòng)物麻醉深度容易掌握，而且麻醉后蘇醒較快。其缺點(diǎn)是對局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，再通過神經(jīng)反射可影響呼吸、血壓和心跳活動(dòng)，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醚時(shí)必需有人照看，以防麻醉過深而出現(xiàn)上情況。2．非揮發(fā)性麻醉劑這類麻醉劑種類較多，包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉等巴比妥類的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長的麻醉時(shí)間，麻醉過程較平衡，動(dòng)物無明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點(diǎn)是蘇醒較慢。

3．中藥麻醉劑

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)也用到象洋金花和東莨菪堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才能理想，故在使用過程中不能得到普及，因而，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室不選用這類麻醉劑進(jìn)行麻醉。

（二）動(dòng)物的麻醉方法1．全身麻醉（1）吸入法用一塊圓玻璃板和一個(gè)鐘罩或一個(gè)密閉的玻璃箱作為揮發(fā)性麻醉劑的容器，多選用乙醚作麻藥。麻醉時(shí)用幾個(gè)棉球，將乙醚倒可其中，迅速放入鐘罩或箱內(nèi)，讓其揮發(fā)，然后把待麻醉動(dòng)物投入，約隔4-6分鐘即可麻醉，麻醉后應(yīng)立即取出，并準(zhǔn)備一個(gè)蘸有乙醚的棉球小燒杯，在動(dòng)物麻醚變淺時(shí)給套在鼻上使其補(bǔ)吸麻藥。（2）腹腔和靜脈給藥麻醉法非揮發(fā)性和中藥麻醉劑均可用作腹腔和靜脈注射麻醉，操作簡便，是實(shí)驗(yàn)室最常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠，較大的動(dòng)物如兔、狗等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別，所以在腹腔和靜脈麻醉時(shí)，一定控制藥物的濃度和注射量。2．局部麻醉⑴貓的局部麻醉一般應(yīng)用0.5-1.0%鹽酸普魯卡因注射，粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可卡因。⑵兔在眼球手術(shù)時(shí)，可于結(jié)膜囊滴入0.02%鹽酸可卡因溶液，數(shù)秒鐘即可出現(xiàn)麻醉。⑶狗的局部麻醉用0.5-1%鹽酸普魯卡因注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可卡因。3．麻醉注意事項(xiàng)⑴動(dòng)物應(yīng)禁食8小時(shí)以上、不能使用瀉劑、準(zhǔn)確稱量動(dòng)物體重、麻醉劑量受個(gè)體差異影響。（2）靜脈注射必須緩慢，同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對皮膚夾捏的反應(yīng)，當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí)，立即停止注射。配制的藥液濃度要適中，不可過高，以兔麻醉過急；但也不能過低，以減少注入溶液的體積。（3）麻醉時(shí)需注意保溫。麻醉期間，動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能往往受到抑制，出現(xiàn)體溫下降，可影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。此時(shí)常需采取保溫措施。保溫的方法有，實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈，電褥，臺(tái)燈照射等。無論用哪種方法加溫都應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的肛門體溫而定。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常體溫：貓為38.6℃±1.0℃，兔為38.4℃±1.0℃，大鼠為39.3℃±0.5℃。（4）作慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥途徑和方法經(jīng)口給藥：飼料、飲水、灌胃注射給藥：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、腦內(nèi)注射等吸入給藥：鼻腔吸入小鼠灌胃：一次灌注藥量0.1-0.3ml/10g

灌胃針制作：用12號(hào)針頭，磨頓針尖，再稍彎曲，針長：5-7cm，直徑：0.9-1.5mm大鼠灌胃一次灌胃量：1-2ml/100g

大鼠灌胃針：針長：6-8cm

直徑：1-2mm家兔灌胃一次灌胃量：80-150ml/只開口器：灌胃管：14號(hào)導(dǎo)尿管皮下注射小鼠尾靜脈注射大鼠淺背側(cè)跖靜脈注射豚鼠耳緣靜脈注射、跖靜脈注射兔耳緣靜脈注射犬靜脈注射：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)正中靜脈、后肢內(nèi)側(cè)大隱靜脈、頸外靜脈豬靜脈注射小鼠腦內(nèi)注射大鼠腦內(nèi)注射家兔椎管內(nèi)注射小鼠呼吸道給藥大鼠呼吸道給藥七、各種檢驗(yàn)標(biāo)本采集方法血液采集方法糞、尿液采集方法其他檢驗(yàn)標(biāo)本采集方法血液采集方法

關(guān)于血液采集的幾個(gè)問題采血量10％-10％規(guī)則，實(shí)際上，大多數(shù)動(dòng)物的血容量不到體重的10％，大鼠為50-70ml/kg；一般單次采血量不高于全身血容量的10％，短期的反復(fù)采血（間隔24h)，每次采血量不宜超過全血量的1％，每周采血8％，其血紅蛋白需數(shù)周才能恢復(fù)至正常濃度。200g大鼠，按6％，全血容量12ml，單次采血1.2ml是安全的，反復(fù)采血每次不宜超過0.12ml。采血對機(jī)體的影響血糖水平、皮質(zhì)類固醇激素、催乳激素、腎上腺素、生長激素、胰島素、血管緊張肽酶原和血清酶類。低于10％的血量喪失，動(dòng)物通常無明顯臨床癥狀；15-20％的血量喪失動(dòng)物出現(xiàn)動(dòng)脈壓和心血輸出量下降；血液進(jìn)一步喪失，則心輸出量、血壓和組織灌流量均下降，嚴(yán)重時(shí)發(fā)展為失血性休克，甚至威脅生命。介入性采血對動(dòng)物的影響不僅是血容量的喪失，血液喪失的比率、采血位置和方法、技術(shù)人員的熟練程度、麻醉的種類、動(dòng)物的年齡和性別、動(dòng)物的營養(yǎng)和健康狀況均為重要因素。心臟采血主要用于小動(dòng)物，如，大鼠、豚鼠、兔等。最好用于末次采血。側(cè)臥位大鼠乙醚麻醉-----以手指感覺心跳最明顯的位置----在第4－6肋間進(jìn)針----抽吸。注意：1、如果采血后還需動(dòng)物存活，局部剪毛、消毒。垂直胸壁刺入，心跳最明顯位置、深度。2、如果只吸出少量血，可能為心房，輕輕抽出，重刺，不能超過2－3次。抽吸要緩慢，2ml/min為宜。仰臥位眶后穿刺術(shù)適用于小鼠、大鼠小鼠：乙醚麻醉-----刺破結(jié)膜------采血-----紗布按壓止血大鼠：乙醚麻醉------大鼠固定于平面上-----牽拉結(jié)膜令眼球凸出-----將毛細(xì)管從內(nèi)眼角向球后刺入------試管收集血液-----抽出毛細(xì)管、紗布止血注意：乙醚麻醉時(shí)間短，取出后應(yīng)迅速進(jìn)行操作；刺入毛細(xì)管的同時(shí)要輕輕旋轉(zhuǎn)，若未采出血液，則將管子拔出一段距離，同時(shí)旋轉(zhuǎn)；技術(shù)不熟練副作用較大：眶后血腫伴眼壓高、疼痛；視神經(jīng)和其他球內(nèi)結(jié)構(gòu)損傷導(dǎo)致視覺缺陷、甚至失明。頸靜脈采血可用于大鼠、兔、犬、豬、猴、羊。大鼠：在不麻醉、皮膚切開時(shí)需技術(shù)熟練，不常用。兔：常用于全身放血，如免疫后的抗體提取，需麻醉、局部皮膚切開，頸靜脈套管連接。豬：頸靜脈穿刺，需技術(shù)熟練。犬、猴：充分保定，不常用。隱靜脈采血可用于各種動(dòng)物，但以大動(dòng)物常用，如，犬、猴、牛、馬等。犬：將犬固定于保定架上或側(cè)臥保定-----肢端1／3處可見清晰的從前側(cè)方向后走向的隱靜脈-----采血局部剪毛、消毒-----左手握緊剪毛段上部使靜脈充盈（也可助手協(xié)助）-----右手持空針刺入靜脈采血-----放松左手、紗布按壓止血。前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血與上述方法相同。豚鼠：刀片切開、采少量血。尾部采血主要用于小鼠、大鼠腹側(cè)尾動(dòng)脈采血：1－1.5ml大鼠置固定器中或乙醚麻醉-----背側(cè)臥-----用手壓住距尾尖5cm處至動(dòng)脈清晰可見-----在按壓手指前1-2cm處進(jìn)針-----采血后紗布按壓止血注意：乙醚麻醉優(yōu)于水合氯醛和烏拉坦，后者降低血壓，引起血流減少；

將尾浸于溫水（45oC）中數(shù)分鐘可使血管擴(kuò)張

和軟化皮膚，對老齡大鼠必要.

尾側(cè)靜脈采血：大鼠，0.5-1ml

大鼠置固定器中-----以手指、橡膠繩或曲別針對位根部施壓-----采血部位消毒-----以空針刺入側(cè)面尾靜脈-----放開止血帶、血液流出（去除針頭的空針連接口讓血液自然流出可減少溶血----拔出針頭、紗布止血尾靜脈切口采血：小鼠、大鼠，0.1-0.2ml

固定器固定，在距尾尖1cm處消毒后，以刀片在尾側(cè)面切口可取少量血液，通常輕壓即可止血，但化學(xué)燒灼是需要的（高錳酸鉀或三氯化鐵）。

斷尾采血：大鼠、小鼠，<0.5ml

固定器固定，在距尾尖5mm處消毒，全切斷尾，以手指從尾根部向尾尖部輕輕按摩，可促進(jìn)血液流出。

注意：以上三種方法在采血前以溫水加熱幾分鐘，均可促進(jìn)血液流出。

斷尾采血時(shí)按摩尾部可引起炎性細(xì)胞增多，反復(fù)斷尾可導(dǎo)致軟骨損傷，甚至尾椎創(chuàng)傷，從而引起疼痛、甚至肉芽腫。耳部采血：兔、豚鼠、豬兔耳緣靜脈采血：5－10ml

兔以保定器固定-----耳緣靜脈擬采血部位剪毛----75％酒精消毒-----以空針刺入采血-----采血后紗布按壓止血注意：若使血管充分?jǐn)U張，通常于采血前輕揉兔耳；阻止靜脈回流；也可以熱水溫敷；若為末次采血，也可以二甲苯擴(kuò)張血管。

兔耳中動(dòng)脈采血：10－15ml

注意：兔動(dòng)脈機(jī)械性刺入可導(dǎo)致痙攣性收縮，有時(shí)出現(xiàn)較長時(shí)間不出血，一般在采血前兔耳熱敷，充血后迅速采血。豚鼠：剪耳采血，少量。豬：耳靜脈采血，少量。摘眼球采血小鼠取全身血液時(shí)，通常采用眼球摘除法。斷頭采血某些藥理實(shí)驗(yàn)、檢測某些與采血應(yīng)激有關(guān)的血液指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常采用此方法。有斷頭剪刀、斷頭器。糞、尿采集方法大小鼠少量糞尿采集法利用大小鼠捉拿應(yīng)激時(shí)，排出的少量糞尿進(jìn)行采集；也可以乙醚綿球在動(dòng)物鼻前晃動(dòng)，刺激少量排尿。大小鼠代謝籠法將動(dòng)物限定于有金屬底網(wǎng)的籠具中，將籠具放置于一個(gè)漏斗的頂端，排出的尿液落于漏斗的側(cè)壁，流入收集器中，糞便落入另一個(gè)收集器中使糞尿分開。在設(shè)計(jì)精細(xì)的代謝龍中，還有使飼料和飲水不污染糞尿的設(shè)置。

導(dǎo)尿管法大動(dòng)物常用，如，犬、豬、猴等。由于羊尿道的特殊結(jié)構(gòu)，使這一方法不適用。膀胱穿刺術(shù)大動(dòng)物常用，以注射器直接刺入膀胱抽取尿液；小動(dòng)物若在解剖時(shí)，也可采用此法。其他檢驗(yàn)標(biāo)本的采集腦脊液的采集犬、兔的腦脊液采集常采用腰椎穿刺，在第7腰椎間隙，確保刺入蛛網(wǎng)膜下腔，需熟練技術(shù)。大鼠腦脊液采集法大鼠麻醉后，頭頸部剪毛消毒，皮膚切開，枕大孔直接穿刺抽取腦脊液。腹水采集大小鼠移植性腫瘤的腹水癌、腹水試驗(yàn)時(shí)，腹部消毒，在腹部左側(cè)上方以注射器抽取，注意速度。也可麻醉后，腹部消毒，切開腹壁暴露腹膜，穿刺抽取腹水。骨髓采集大、小鼠骨髓的采集動(dòng)物處死后，剝離胸骨或股骨，以咬骨剪剪斷，以Hank’s液沖出骨髓，也可將骨髓擠于有稀釋液的玻片上，混勻后涂片，晾干后染色檢查。犬、豬、猴等大動(dòng)物骨髓采集活體穿刺法。動(dòng)物麻醉后，固定，局部脫毛、消毒，操作者以左手將穿刺點(diǎn)皮膚繃緊，右手持針垂直刺入，穿入牢固后，輕輕左右旋轉(zhuǎn)，當(dāng)穿刺