生物樣本庫(kù)的建設(shè)

生物樣本庫(kù)建設(shè)定義生物樣本庫(kù)biologicalspecimenbank,BSB標(biāo)準(zhǔn)化地收集、保存用于各種研究的正?；虿±順?biāo)本，包括人體器官組織、全血、血漿、血清、生物體液或經(jīng)處理過(guò)的生物樣本〔DNA、RNA、蛋白等〕以及與這些生物樣本相關(guān)的臨床、病理、治療、隨訪、知情同意等資料及其質(zhì)量控制、信息管理與應(yīng)用系統(tǒng)。生物樣本庫(kù)政策法規(guī)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)

倫理標(biāo)準(zhǔn)ISO標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室平安臨床實(shí)驗(yàn)室倫理運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)操作標(biāo)準(zhǔn)〔SOPs〕質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)樣本采集樣本處理樣本質(zhì)量檢驗(yàn)樣本儲(chǔ)存樣本運(yùn)輸DNA質(zhì)量鑒定、RNA質(zhì)量鑒定、蛋白質(zhì)質(zhì)量鑒定知情同意書(shū)質(zhì)量審查樣本運(yùn)輸樣本轉(zhuǎn)移協(xié)議倫理委員會(huì)倫理審查ISO15189:2003醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求CNAS-CL02醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力的認(rèn)可準(zhǔn)那么ISO/IEC17025:2005檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求CNAS-CL01檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)那么ISO9001:2023/GBT19001-2023質(zhì)量管理系統(tǒng)要求GB/T1.1-2023標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)那么：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)規(guī)那么ISO標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室平安GB19489-2023實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求

CNAL/AC30-2005實(shí)驗(yàn)室生物平安認(rèn)可準(zhǔn)那么WS/T233-2002微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物平安通用準(zhǔn)那么GB50346-2004生物平安實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)已建立實(shí)驗(yàn)室生物平安管理體系臨床實(shí)驗(yàn)室GB/T20468-2006臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)定室內(nèi)質(zhì)量控制指南GB/T20469-2006臨床實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)總那么GB/T20470-2006臨床實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評(píng)價(jià)要求WS/T102-1998臨床檢驗(yàn)工程分類(lèi)與代碼WS/T224-2002真空采血管及其添加劑WS/T225-2002臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理WS/T227-2002臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫(xiě)要求WS/T228-2002定量臨床檢驗(yàn)方法的初步評(píng)價(jià)WS/T230-2002臨床診斷中聚合酶鏈反響〔PCR〕技術(shù)應(yīng)用WS/T249-2005臨床實(shí)驗(yàn)室廢物處理原那么WS/T250-2005臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的要求WS/T251-2005臨床實(shí)驗(yàn)室平安準(zhǔn)那么WS/T255-2005臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)參考測(cè)量實(shí)驗(yàn)室赫爾辛基宣言涉及人類(lèi)為研究對(duì)象的生物醫(yī)學(xué)研究了國(guó)際倫理方針指南關(guān)于DNA序列申請(qǐng)專(zhuān)利的聲明：專(zhuān)利關(guān)于早期發(fā)布原始序列數(shù)據(jù)有關(guān)專(zhuān)利申請(qǐng)問(wèn)題的聲明關(guān)于DNA取樣的聲明：控制與獲取世界人類(lèi)基因組與人權(quán)宣言涉及人體的生物醫(yī)學(xué)研究倫理審查方法〔試行〕人類(lèi)基因治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原那么關(guān)于利益共享的聲明關(guān)于基因治療的聲明關(guān)于人類(lèi)基因組數(shù)據(jù)庫(kù)的聲明國(guó)際涉及人類(lèi)的生物醫(yī)學(xué)研究倫理準(zhǔn)那么人類(lèi)遺傳數(shù)據(jù)國(guó)際宣言綱要人體生物醫(yī)學(xué)研究國(guó)際倫理指南倫理物流術(shù)語(yǔ)液氮生物容器中國(guó)民用航空危險(xiǎn)品運(yùn)輸管理規(guī)定危險(xiǎn)物品航空平安運(yùn)輸技術(shù)細(xì)那么運(yùn)輸組織機(jī)構(gòu)樣本庫(kù)管理委員會(huì)專(zhuān)家委員會(huì)倫理委員會(huì)樣本庫(kù)職能部門(mén)樣本庫(kù)負(fù)責(zé)人業(yè)務(wù)主管質(zhì)量主管專(zhuān)職技術(shù)人員所有從業(yè)人員應(yīng)取得《崗前培訓(xùn)考核合格證》生物樣本庫(kù)工作流程標(biāo)本采集標(biāo)本處理入庫(kù)登記標(biāo)本儲(chǔ)存質(zhì)控YesNo銷(xiāo)毀《廢棄物處置操作程序》抽檢NoYes標(biāo)本使用使用申請(qǐng)標(biāo)本發(fā)放剩余標(biāo)本回收數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)本采集生物標(biāo)本采集和儲(chǔ)存研究成功的關(guān)鍵要求根據(jù)所采樣本的類(lèi)型和所分析的物質(zhì)而定在采集和儲(chǔ)存過(guò)程中不能受到“污染〞儲(chǔ)存的生物標(biāo)本在任何時(shí)候進(jìn)行檢測(cè)都可以獲得一致的結(jié)果所有的生物標(biāo)本都應(yīng)有詳細(xì)的背景材料和鑒別標(biāo)識(shí)標(biāo)本采集舉例尿液標(biāo)本晨尿濃縮尿，適用于尿常規(guī)檢查隨機(jī)尿僅適用于門(mén)診、急診尿常規(guī)過(guò)篩檢驗(yàn)空腹尿糖尿病患者餐前尿糖測(cè)定餐后尿餐后兩小時(shí)采集，適用于糖尿病患者病理性蛋白尿、糖尿檢查12h尿晚上8點(diǎn)排空尿液后12小時(shí)內(nèi)采集的所有尿液。用于尿沉渣計(jì)數(shù)、尿微量白蛋白排泄率測(cè)定等12h禁水尿晚8時(shí)開(kāi)始禁飲，次日早8時(shí)排空膀胱后再次留取的尿液，適用于尿滲透壓檢測(cè)24h尿上午8時(shí)排盡后，收集接下來(lái)24小時(shí)內(nèi)排出的所有尿液，記錄總尿量，用于體內(nèi)代謝產(chǎn)物的定量檢測(cè)，如尿蛋白、尿糖、尿肌酐、尿鈣、尿兒茶酚胺、檢查等培養(yǎng)用尿留尿前先清洗外陰，消毒尿道口后，以無(wú)菌容器只接留中段尿10ml，用于微生物檢查標(biāo)本采集尿液標(biāo)本的保存-最好不超過(guò)2h尿液化學(xué)物質(zhì)和有形成份不穩(wěn)定，排出后即開(kāi)始發(fā)生物理和化學(xué)變化，如膽紅素、尿膽原被氧化，細(xì)菌生長(zhǎng)，尿素酵解生成氨使尿pH升高，尿液有形成份破壞，葡萄糖被細(xì)菌利用而降低。尿液保存常用方法有兩種：1.冷藏法：4℃條件下不超過(guò)8h可抑制微生物生長(zhǎng)，維持尿液pH恒定，使尿中有形成份的形態(tài)根本不變，但是可導(dǎo)致磷酸鹽和尿酸鹽析出形成沉淀，影響尿沉渣檢查。標(biāo)本采集尿液標(biāo)本的保存-最好不超過(guò)2h尿液化學(xué)物質(zhì)和有形成份不穩(wěn)定，排出后即開(kāi)始發(fā)生物理和化學(xué)變化，如膽紅素、尿膽原被氧化，細(xì)菌生長(zhǎng)，尿素酵解生成氨使尿pH升高，尿液有形成份破壞，葡萄糖被細(xì)菌利用而降低。尿液保存常用方法有兩種：2.化學(xué)防腐法：①甲苯：〔一般用量為1.0～2.0ml甲苯/100ml尿液〕，防止細(xì)菌污染，通常用于尿酮體、尿糖，尿蛋白質(zhì)等測(cè)定②甲醛：每100ml尿液加40%甲醛0.5ml，可抑制細(xì)菌生長(zhǎng)并固定尿中有形成份，適用于尿液中細(xì)胞與管型的測(cè)定；③麝香草酚：用10%的麝香草酚異丙醇溶液，到達(dá)抑菌及保護(hù)代謝物的作用，適用于尿鉀、鈉、鈣等測(cè)定④濃鹽酸：每100ml尿標(biāo)本中參加濃鹽酸1ml即可，使尿液維持在pH2.0左右。主要可用于17-羥皮質(zhì)類(lèi)因醇、17-酮類(lèi)固醇、兒茶酚胺、VMA等定量測(cè)定等。標(biāo)本采集樣本采集操作規(guī)程血液糞便尿液口腔拭子唾液陰道拭子皮膚拭子標(biāo)本采集標(biāo)本運(yùn)送血液標(biāo)本采集后應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場(chǎng)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，注意是否存在干擾血凝塊。標(biāo)本運(yùn)送過(guò)程中要注意樣本的包裝、溫度要求及處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性，標(biāo)本管在運(yùn)送過(guò)程中要保持管口封閉，向上垂直放置，防止劇烈振動(dòng)尿液標(biāo)本從流取到檢驗(yàn)應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成，如不能及時(shí)送檢分析，必須加防腐劑或冷藏不超過(guò)8小時(shí)細(xì)菌檢查標(biāo)本應(yīng)采用消毒容器，防止細(xì)菌污染，室溫條件不超過(guò)2小時(shí)或4℃冷藏保存。標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本處理和保存標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)處理、分裝后保存血液標(biāo)本處理操作規(guī)程DNA提取和純化操作規(guī)程：血液、糞便、棉拭子、唾液RNA提取和純化操作規(guī)程：血液、棉拭子蛋白質(zhì)提取和保存操作規(guī)程標(biāo)本處理和保存血液標(biāo)本處理操作規(guī)程全血、血清、血漿、干血片、血凝塊、白細(xì)胞血清：指全血不經(jīng)抗凝處理，在凝固過(guò)程中，血漿中除去纖維蛋白原別離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿血漿：離開(kāi)血管的全血經(jīng)抗凝處理后，通過(guò)離心沉淀，所獲得的不含細(xì)胞成分的液體，其中含有纖維蛋白原。全血：由液態(tài)血漿和血細(xì)胞組成標(biāo)本處理和保存血液標(biāo)本處理操作規(guī)程全血標(biāo)本的保存生化檢驗(yàn)：盡可能在2小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)或別離血清/血漿，不能及時(shí)別離或檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)4℃低溫冷藏，不能超過(guò)24小時(shí)。操作時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，防止劇烈振蕩，防止溫度變化過(guò)大或凍融，易導(dǎo)致溶血。DNA檢測(cè)：4℃保存不超過(guò)7天，-20℃保存不超過(guò)一年，-80℃長(zhǎng)期保存RNA檢測(cè)：采集后應(yīng)盡快別離血細(xì)胞、血清/血漿，或參加RNA抑制劑〔如trizol〕，-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月，-80℃保存不超過(guò)半年。標(biāo)本處理和保存血液標(biāo)本處理操作規(guī)程血清的別離采血時(shí)應(yīng)采用無(wú)抗凝劑的采血管；采血后，室溫〔22～25℃〕放置30～60min，加促凝劑時(shí)凝集加快〔5～15min)，1000～1200g離心10min，吸取上層淡黃色上清液。有凝膠屏障的別離管可保存在4℃，24小時(shí)內(nèi)吸取上層血清；無(wú)凝膠屏障的必須立即吸取上層血清。保存條件常溫下不超過(guò)8小時(shí)；4℃不超過(guò)48小時(shí)；48小時(shí)以上的應(yīng)置于-20℃保存；提取RNA的應(yīng)立即置于-80℃保存。防止反復(fù)凍融。標(biāo)本處理和保存血液標(biāo)本處理操作規(guī)程血漿的別離采血時(shí)應(yīng)采用有抗凝劑的采血管；采血后，1000～1200g離心10min，吸取上層淡黃色上清液。有凝膠屏障的別離管可保存在4℃，24小時(shí)內(nèi)吸取上層血清；無(wú)凝膠屏障的必須立即吸取上層血清。保存條件常溫下不超過(guò)8小時(shí)；4℃不超過(guò)48小時(shí)；48小時(shí)以上的應(yīng)置于-20℃保存；提取RNA的應(yīng)立即置于-80℃保存。防止反復(fù)凍融。質(zhì)量控制標(biāo)本入庫(kù)前應(yīng)經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制，符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本才能入庫(kù)①符合標(biāo)本采集、處理的要求，檢查采集和處理記錄②標(biāo)本信息采集表填寫(xiě)完整③標(biāo)本運(yùn)送符合要求，交接運(yùn)送記錄完整④標(biāo)本管無(wú)空管、無(wú)破損、良好密封，標(biāo)簽清晰完整、無(wú)脫落⑤檢查標(biāo)本是否受到污染，核酸質(zhì)量標(biāo)本入庫(kù)編號(hào)原那么總原那么：唯一性、共享性輔原那么：在滿足總原那么根底上，盡量精簡(jiǎn)，編號(hào)長(zhǎng)度盡量保持統(tǒng)一生物樣本庫(kù)信息表標(biāo)本入庫(kù)標(biāo)本編號(hào)原那么總原那么：唯一性、共享性輔原那么：在滿足總原那么根底上，盡量精簡(jiǎn)，編號(hào)長(zhǎng)度盡量保持統(tǒng)一舉例：2023年收到的第102份標(biāo)本，類(lèi)型是糞便，目的用于結(jié)腸道菌群分析1700102D15W212023年收到的第256份標(biāo)本，類(lèi)型是血清，目的用于心梗的研究1700256G01BS1標(biāo)本使用使用申請(qǐng)：填寫(xiě)《標(biāo)本申請(qǐng)單》標(biāo)本發(fā)放：填寫(xiě)《標(biāo)本使用登記表