DB33-T 2300-2020 單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)技術規(guī)范

ICS

65.150CCS

B

51DB33 DB33/T

2300—2020單胞藻規(guī)模化培養(yǎng)技術規(guī)范Technical

large-scale

cultivation

microalgae 浙江省市場監(jiān)督管理局發(fā)

布DB33/T

2300—2020 本標準按照GB/T

1.1—2020《標準化工作導則

第1草。本標準由浙江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本標準由浙江省水產(chǎn)標準化技術委員會歸口。本標準起草單位：浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所，浙江永興水產(chǎn)種業(yè)有限公司，寧波大學。本標準主要起草人：柯愛英、徐繼林、周朝生、肖國強、蔡景波、黃振華、曾國權、胡園、朱潔、吳越、王瑤華。DB33/T

2300—20201 范圍本標準規(guī)定了單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)的培養(yǎng)條件和設施、培養(yǎng)方法、日常管理、收獲和保存等內容。本標準適用于水產(chǎn)苗種培育和養(yǎng)殖生產(chǎn)中的單胞藻培養(yǎng)。2規(guī)范性引用文件標準。GB

11607 漁業(yè)水質標準NY

5051 無公害食品

淡水養(yǎng)殖用水水質NY

5052 無公害食品海水養(yǎng)殖用水水質3術語與定義

下列術語和定義適用于本標準。指數(shù)生長期細胞迅速生長繁殖，藻細胞數(shù)量隨著培養(yǎng)時間的延長呈幾何級數(shù)遞增的時期。一級培養(yǎng)以0.3

L～

L廣口瓶或三角燒瓶作培養(yǎng)容器，嚴格消毒，用濾紙封口的培養(yǎng)方式。二級培養(yǎng)用容積為50

L～

L白塑料桶、尼龍袋、光生物反應器等作為培養(yǎng)容器，嚴格消毒，連續(xù)充氣的培養(yǎng)方式。3.4三級培養(yǎng)采用育苗場現(xiàn)有的水泥培養(yǎng)池、帆布池等作為培養(yǎng)容器，消毒，連續(xù)充氣的培養(yǎng)方式。4 培養(yǎng)條件和設施4.1 培養(yǎng)用水海水應符合GB

11607、NY

5052規(guī)定。淡水應符合GB

11607、NY

5051規(guī)定。4.2 設施設備DB33/T

2300—2020明亮，通風條件好，配備顯微鏡、生物培養(yǎng)箱、空調、冰箱等設備。配套供水、供氣、供電設施。4.3 培養(yǎng)容器一級培養(yǎng)的容器主要有

L～

L10

L～20

L玻璃廣口瓶、

L～100

L白色塑料桶、光生物反應器等；三級大面積培養(yǎng)主要采用水泥池、帆布池等。5 培養(yǎng)方法5.1 器具消毒5.1.1 高溫消毒法 培養(yǎng)用的玻璃器皿和金屬工具適用于煮沸消毒、烘箱干燥消毒、高壓滅菌等高溫消毒； 培養(yǎng)用的充氣管、散氣石適用于煮沸消毒。消毒的方法見附錄

A。5.1.2 化學藥品消毒法 酒精消毒適用于手、鑷子、瓶口的消毒。 玻璃缸、水泥池、管道等消毒。消毒方法見附錄

A。5.2 培養(yǎng)用水消毒5.2.1 加熱消毒法 一級培養(yǎng)用的水經(jīng)砂濾、脫脂棉過濾，煮沸

5

分鐘～10

分鐘，冷卻后使用。 二級培養(yǎng)用水經(jīng)砂濾、

目篩絹袋過濾煮沸

5

分鐘～

5.2.2 漂白粉或漂白片消毒容積

L～

L

塑料桶，加水后用漂白片消毒，有效氯濃度為

mg/L～

mg/L，中和去除余氯后使用。 水泥池加水后潑灑

目過濾過的漂白水，有效氯濃度為

mg/L～30

mg/L，中和去除余氯后使用。 光生物反應器直接注入有效氯濃度為

50

mg/L～

mg/L

漂白水消毒，中和去除余氯后使用。光生物反應器長期培養(yǎng)藻類后消毒采用鹽酸

1000

mg/L+250

mg/L

次氯酸鈉混合消毒液在緩沖罐里，用水泵循環(huán)到管道里，消毒混合液可以重復使用。5.3 接種5.3.1藻種質量藻種應無污染，無雜藻、藻細胞無附壁。5.3.2 接種濃度接種時間宜在早上6：00～10：00進行，藻種在指數(shù)生長后期，一級培養(yǎng)接種濃度為1：5～1：10；二級培養(yǎng)接種濃度1：10～1：50；三級培養(yǎng)根據(jù)天氣、生產(chǎn)需要來接種，接種濃度1：15～1：30。5.4 培養(yǎng)條件水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)見附錄B。5.5培養(yǎng)液常用培養(yǎng)液配方見附錄C、附錄D。6 日常管理DB33/T

2300—20206.1 觀察與處理6.1.1 觀察有無附壁、沉淀、菌膜和敵害生物，如發(fā)現(xiàn)異常應立即舍棄，并及時重新接種培養(yǎng)。6.1.2 一級培養(yǎng)4

6

5

天～7

天用完。6.1.3 二級培養(yǎng)氣量微沸、封口，定期用漂白水培養(yǎng)場所進行消毒。6.1.4 三級培養(yǎng)控溫，用遮光簾或遮陽布等設施，調節(jié)光照，充氣微沸。6.2 記錄和補充培養(yǎng)液次接種、培養(yǎng)液添加進行記錄。7 收獲和保存7.1 收獲于指數(shù)生長期收獲。7.2 保存培養(yǎng)的單胞藻利用目尼龍篩網(wǎng)富集、暗沉淀、加

g/L～1.0

g/L明礬或氫氧化鈣收集藻類，冷藏或冷凍保存，以備隨時投喂使用。8 技術模式圖單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)技術模式圖見附錄E。項目名稱煮沸烘箱干燥高壓滅菌高錳酸鉀漂白粉或漂白片鹽酸

120

121

20

10

mg/L

10

10

mg/L

12

120

121

20

10

mg/L

10

10

mg/L

12

10

mg/L

10

10

mg/L

12

10

mg/L

10

10

mg/L

12

10

mg/L

10

10

mg/L

12

DB33/T

2300—2020AA附 錄A（資料性）單胞藻培養(yǎng)常用消毒方法單胞藻培養(yǎng)常用消毒方法見表表A.1 單胞藻培養(yǎng)常用消毒方法PH適溫范圍（℃）7.010.0251510007.010.0282010006.5101050006.5101050007.010.0201510007.010.0201530007.010.0101030007.0151030007.010.0101030007.0351030007.0108030007.010.0301010007.010.0101010007.010.0301010006.0104510007.0103630005.0-7.5101000-10000DB33/T

2300—2020BB附錄B（資料性）水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)見表B.1。表B.1表B.1

水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)

mg

mg

mg100.0050.0020.0015.0010.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.505EDTA20.0010.0010.0010.00

B10.10.05

B20.00050.00051.00

90.0050.0020.0020.004.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.505EDTA20.0010.0010.0010.00

B10.10.001

B20.00050.0000081.0010.0010.0010.00

100.0020.0020.0020.004.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.501.00.250.25EDTA20.0010.0020.0020.00

B10.10.001

B20.00050.0000081.00

DB33/T

2300—2020CC附錄C（資料性）常用海洋微藻培養(yǎng)液配方常用海洋微藻培養(yǎng)液配方見表。表C.1表C.1

常用海洋微藻培養(yǎng)液配方mg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/L1%ml200103080251000.5+2DB33/T

2300—2020D附 錄 D（資料性）常用淡水藻類水生

4

號培養(yǎng)液配方常用淡水藻類水生4號培養(yǎng)液配方見表D.1。表表D.1

常用淡水藻類水生4號培養(yǎng)液配方將保種室中培養(yǎng)的藻種擴種到0.3

經(jīng)過脫脂棉過濾煮沸，培養(yǎng)液水燒

20

毒或漂白消