冬蟲夏草的人工栽培程序

冬蟲夏草的人工栽培程序1.菌種感染蟲草的必須是有性生殖孢子，即子囊孢子；蟲草菌的分離方法有組織分離法、稀釋分離法等。稀釋分離法適用于蟲草子囊孢子的分離，可進行單孢分離。組織分離法最常用。蟲草菌種分離培養(yǎng)基為：蛋白胨10克，葡萄糖100克，酵母膏1克，硫酸鎂O.5克，磷酸二氫鉀1克，瓊脂20克，蒸餾水1000毫升，維生素液20毫升。維生素液配制方法為：鹽酸硫胺素100毫克，核黃素25毫克，吡哆醇25毫克，泛酸鈣100毫克，對氨基苯甲酸25毫克，氯化膽堿100毫克，肌醇100毫克，煙酰胺100毫克，葉酸2.5毫克，生物素1毫克，蒸餾水500毫升，過濾滅菌后，取一定體積加入已滅過菌的培養(yǎng)基。組織分離方法為：取蟲草尚未成熟且顏色正常的子座或具有外膜包裹的菌核，表面消毒后，在無菌條件下切去外層，再切取內部白色組織l毫米左右大小，壓碎后將碎粒涂于培養(yǎng)基表面，20C培養(yǎng)，一般4個月后可得到母種。冬蟲夏草子囊抱子懸浮液制備：用無菌的不易透水的紙制小口袋，套于天然生長或人工栽培的尚未成熟的蟲草子座上，待子座成熟，子囊孢子彈射附著于紙袋內壁上。取附有子囊孢子的紙袋100個，浸于1:10的土壤浸液中（取土樣1000克，以采集到蟲草的土壤為好，加水1000毫升，高壓蒸氣121°C滅菌30分鐘，冷卻后雙層濾紙過濾，濾液酸堿度調至pH6.0）,2小時后用小刀仔細把子囊孢子從小袋上刮出，收集于離心管中，1000轉/分離心10分鐘，棄去上清液，用無菌土壤浸出液離心洗滌5次，沉淀懸浮于土壤浸出液中，即為蟲草子囊孢子懸浮液。將冬蟲夏草菌種接種到含有葡萄糖（10克）、蛋白胨（10克）、含脂蠶蛹（10克）、全脂奶粉（10克）、磷酸二氫鈉（1.5克）、磷酸二氫鉀（1.5克）、瓊脂（20克）和蒸餾水（1000毫升）的培養(yǎng)基上，26C培養(yǎng)3天即可長出白色絨狀菌絲體。冬蟲夏草菌絲體在這種培養(yǎng)基上生長良好。.蝙蝠蛾4-5齡幼蟲感染率最高，老熟幼蟲和3齡以下幼蟲不被感染。幼蟲蛻皮和活動進食增加感染的機會，幼蟲體內的微量元素、氨基酸組成對蟲草菌的侵染有影響。冬蟲夏草寄主蝙蝠蛾幼蟲為乳黃色，頭殼紅紫色，一般生長在海拔4000米左右的高山草甸地帶。這里氣候多變，常有雨雪，氣溫在0-23C,20厘米深處的地溫為5-75C，空氣相對濕度為50%-70%,土壤含水量40%-60%。蝙蝠蛾幼蟲多分布于陽光充足、排水良好、環(huán)境潮濕的地勢和地貌上。1年中的7-9月土壤中都可找到該蟲，一般在土壤10厘米以下深處越冬。蝙蝠蛾整個生活史中，幼蟲期最長，至少經歷2年時間才能化蛹。扁輻蛾幼蟲主要取食莎草料篙草屬植物和蓼科珠芽蓼、頭花蓼、小大黃，以及豆科黃茋屬植物和薔薇科金臘梅等。飼養(yǎng)蟲草昆蟲可在野外飼養(yǎng)，也可在人工飼養(yǎng)室進行。可在自然或人工條件下栽培幼蟲喜食的珠芽蓼等植物，也可用配合飼料來飼養(yǎng)。.野外栽培先制備蟲草菌子囊孢子懸浮液，用微型噴霧裝置把子囊孢子噴散到蟲草蝙蝠蛾幼蟲主體上。為了獲得較大的感染機會，還要在幼蟲的食物中混入蟲草菌菌絲體。一般可通過蟲體殼顏色的變化來判斷幼蟲是否已感染。幼蟲感染幾天后，主體的外殼會出現(xiàn)很明顯的褪色現(xiàn)象，由深褐色轉為淡黃色；已感染蟲草菌的幼蟲，動作逐漸遲緩，最終死亡僵化。將已接種的幼蟲放置到幼蟲自然生存環(huán)境中，讓蟲草菌利用蟲體內營養(yǎng)生長繁殖，長出子座，第2年夏天人工采集己長出子座的主體，即冬蟲夏草。.室內栽培室內設立多層木架立體栽培，每層用10-15厘米寬的木板在架的四周框住，并鋪上7厘米厚的砂土，砂土濕度保持在40%左右。將蟲草菌子囊孢子懸浮液適當稀釋，再將適齡幼蟲置于木架砂土層上，用噴霧器將子囊孢子懸液均勻噴散在蟲體上，用樹葉遮蓋。然后用孢子懸液噴灑樹葉，每天噴2次，連續(xù)噴2天。噴灑時間選擇傍晚、陰天效果更好。開始7天每天檢查，觀察幼蟲是否入土，并觀察幼蟲是否已被感染。至收獲季節(jié)（6-7月），翻開遮蔭物，采集已露出砂土面的子座和蟲體。5.瓶式栽栽容器為廣口瓶。培養(yǎng)料為菜園土加15%的泥土，或黃泥土加10%的泥砂。培養(yǎng)料的pH為6-7。將培養(yǎng)料充分拌均后裝瓶，不要裝得太緊，廣口瓶裝至瓶肩。裝完后集中在一起，放到蔭蔽的地方，用樹葉遮蓋每個容器口。將適齡幼蟲集中接種，接種過的幼蟲放入容器內，開始7天每天檢查，觀察幼蟲是否入土，是否已被感染，防止幼蟲爬出瓶外。到夏季7-8月扒開泥土，采集已長出子座的冬蟲夏草。6.無蟲栽培不采用蟲體，可用下述培養(yǎng)料栽培：麩皮75%，米糠10%,蔗糖2%,維生素0.1%，蠶蛹粉5%,尿素0.1%，木屑6%,硫酸鎂1%,料水比1:1.2-1.3,pH5-6;蛋白胨1%,葡萄糖10%,酵母膏0.1%，