中國藥典與美英藥典微生物限度比較

中國藥典與美英藥典微生物限度檢查法的比較

蘇德模.1.收載的檢查工程

CPBPUSP需氣菌+++真菌+++大腸埃希菌+++沙門菌+++銅綠色假單胞菌+++金黃色葡萄球菌+++梭菌++

大腸菌群+++腸桿菌科及其他某些革蘭陰性桿菌

+腸道菌、腸桿菌科支原體

+

分枝桿菌

+

病毒的其他因子

+

活螨+

.2.檢驗量CP取10g或10ml供試品BP、USP10g或10ml供試品數(shù)份

.

CPBPUSP一般制劑0.9%的氯化鈉溶液pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液其他合適培養(yǎng)基pH7.2磷酸鹽緩沖液,大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基,乳糖液體培養(yǎng)基非水溶性的制劑（膏劑、油劑）司盤80、單硬脂酸甘油酯、吐溫-80十四烷酸異丙酯5克吐溫-20或吐溫-80十四烷酸異丙酯吐溫-20其他助溶劑其他不溶于水的膜劑腸溶膠囊制備供試液最終pH調(diào)至7.0氣霧劑制備法樣品加稀釋劑至培養(yǎng)基時間不超過1hr3.供試液制備

.

4.制劑抑菌作用確實定〔陽性對照試驗〕*0.4%l卵磷脂，4.0%吐溫

CPBPUSP控制菌陽性菌加量10~102個102個105~106個需氣菌及真菌計數(shù)50~100回收率大小于70%判斷是否有抑菌作用25~200個金葡、白念、枯草、大腸菌在有無制劑存在下生長的稀釋級差別大小判斷是否有抑菌作用根據(jù)控制菌陽性菌生長的結(jié)果判斷

抑菌作用處理方法

中和法+++*稀釋法+++薄膜過濾法+++離心沉淀法+

.5.需氣菌和真菌計數(shù)

CPBPUSP方法

平皿法++（澆碟、涂抹）+試管法

++薄膜過濾法++

培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂大豆酪蛋白消化瓊脂大豆酪蛋白消化瓊脂

玫瑰紅鈉瓊脂含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂沙氏葡萄糖瓊脂.5.需氣菌和真菌計數(shù)(續(xù))稀釋級的選擇3個連續(xù)稀釋級1個2個培養(yǎng)溫度30~35℃23~28℃30~35℃20~25℃30~35℃20~25℃培養(yǎng)時間（天）

需氣菌2(5~7)52~3真菌3(5~7)55~7計數(shù)結(jié)果

需氣菌真菌一般30~30030~100不生長按〈10個/1g或ml報告〈300〈10030~300不生長按〈10個/1g或ml報告結(jié)果報告1g或ml1g或ml1g或ml.6.大腸埃希菌

CPBPUSP方法MI法I法IMViC法檢驗量（g或ml）1110稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖液體培養(yǎng)基預(yù)增菌

大豆酪胨肉湯35~37℃18~48h

增菌BL增菌培養(yǎng)基35~37℃18~24hM-I35~37℃5、24h

Mac肉湯43~45℃18~24h乳糖液體培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離Mac.瓊脂平板35~37℃18~72hMac、EMB瓊脂平板35~37℃24~48h生化試驗MI及IMViC++

.7.大腸菌群

CPBPUSP檢驗量（g或ml）11

稀釋劑pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯

預(yù)增菌

35~37℃2~5h

增菌0.1g,0.01g0.001gBL培養(yǎng)基35~37℃18~24h0.1g,0.01g,0.001g乳糖肉湯培養(yǎng)基35~37℃24~48h

分離EMB或Mac.C瓊脂平板35~37℃18~24hVRB.瓊脂平板35~37℃18~24h

生化試驗+-

.8.銅綠假單胞菌

CPBPUSP檢驗量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.2磷酸鹽緩沖液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基增菌膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃18~48h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板35~37℃18~24h

Cetrimide瓊脂，培養(yǎng)18~72h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基41~43℃18~48h。薄膜過濾大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基18~48h，Cetrimide瓊脂平板Cetrimide瓊脂35~37℃72h生化試驗5種1種（42±1）3種.9.金黃色葡萄球菌

CPBPUSP檢驗量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液

大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基

增菌營養(yǎng)肉湯（或含亞碲酸甲）培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃18~48hh大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離甘露醇氯化鈉瓊脂平板、卵黃氯化鈉瓊脂平板35~37℃24~48hBP瓊脂平板35~37℃18~72hVJ(甘露醇氯化鋰)瓊脂、MS(甘露醇氯化鈉)瓊脂、BP瓊脂平板35~37℃24~48h凝固酶試驗+凝固酶、DNA酶+.10.沙門菌

CPBPUSP檢驗量1（g或ml）10（g或ml）10（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液、pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液

乳糖液體培養(yǎng)基增菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪胨肉湯35~37℃18~24h乳糖液體培養(yǎng)基35~37℃培養(yǎng)二次增菌TTB培養(yǎng)基35~37℃18~24h四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基41~43℃18~24hSC、TTB液體培養(yǎng)基35~37℃12~24h分離EMB、Mac.C、DHL、SS瓊脂平板35~37℃18~24hDC、XLD、BG.瓊脂平板35~37℃18~72hBG、XLD、BS瓊脂平板35~37℃24~48h生化試驗+++.11梭菌

CPBPUSP檢驗量（g或ml）11010

稀釋劑09%無菌氯化鈉溶液pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯

加熱處理1份80℃10min另1份不加熱1份80℃10min另1份不加熱

增菌100ml0.1%葡萄糖庖肉培養(yǎng)基35~37℃72~96h100ml梭菌增菌培養(yǎng)基35~37℃厭氧48h

分離含慶大霉素哥倫比亞瓊脂平板35~37℃48~72h含和不含慶大霉素哥倫比亞瓊脂平板35~37℃48h

過氧化氫酶試驗++

.12.結(jié)果判斷及復(fù)試

CPBPUSP控制菌一次檢出為準一次檢出為準不符合標準規(guī)定，取大于25g的樣品復(fù)試需氣菌和真菌第一次試驗結(jié)果超過規(guī)定的標準，重新抽樣復(fù)試兩次，三次結(jié)果平均值報告測定結(jié)果在規(guī)定的限度標準5倍以內(nèi)均為合格同上.微生物限度標準1.收載方式

CPBPUSP各論項下+++制劑通則++

專論+++.2.制劑通那么中規(guī)定微生物限度的劑型CPBPUSP注射液1、植入劑1、酊劑、栓劑、軟乳糊劑2、眼用劑2、糖漿、氣粉噴霧2膜、口服液混懸乳劑、散劑2、滴耳2、滴鼻、洗沖灌腸劑2、搽涂摸劑、凝膠劑、貼劑無微生物限度：片、膠囊、丸、顆粒中藥除膏藥、橡膠膏劑、巴布膏劑外藥典均有規(guī)定膠囊劑、口膠劑、顆粒劑、搽劑、泡騰劑1、灌洗劑1、滴鼻劑2、口服液、口服散劑、注射液1、直腸制劑、棒劑1