實驗十：小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察課件

實驗八：小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察

【課前預(yù)習(xí)】實驗前給小鼠腹腔注射臺盼蘭淀粉肉湯的目的是什么？實驗?zāi)康?/p>

1、通過對小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞活動的觀察，加深理解細(xì)胞吞噬作用的過程及其意義。2、掌握小鼠腹腔注射給藥和頸椎脫臼處死方法。觀察機體的非特異性免疫現(xiàn)象。3．熟悉細(xì)胞吞噬作用的基本過程實驗原理細(xì)胞吞噬作用原來是單細(xì)胞動物攝取營養(yǎng)物質(zhì)的方式，也是原始防御作用。隨著動物界的進化，在高等動物中，則發(fā)展生成大小兩類吞噬細(xì)胞(即巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞)，專司吞噬作用，成為非特異免疫功能的重要組成部分。巨噬細(xì)胞由骨髓干細(xì)胞分化生成，然后進入血液到達(dá)各組織內(nèi)，并進一步分化為各種巨噬細(xì)胞。當(dāng)病原微生物或其它異物侵入機體時，能招引巨噬細(xì)胞，而巨噬細(xì)胞又有趨化性，能響應(yīng)招引因子的招引，產(chǎn)生活躍的變形運動，主動向病原體和異物移行，在接觸到病原體或異物時，即‘伸出偽足，將之包圍并內(nèi)吞人胞質(zhì)，形成吞噬體，繼而細(xì)胞質(zhì)中的初級溶酶體與吞噬泡發(fā)生融合，形成吞噬性溶酶體，通過其中水解酶等作用下，將病原體殺死，消化分解，最后將不能消化的殘渣排出細(xì)胞外。在機體的免疫過程中，巨噬細(xì)胞承擔(dān)著噬菌、殺菌、清除體內(nèi)被損傷和衰老的細(xì)胞，以及傳遞抗原信息，巨噬細(xì)胞將捕獲的抗原進行加工處理后，把降解的抗原信息傳遞給T、B淋巴細(xì)胞。巨噬細(xì)胞又是天然殺傷細(xì)胞（NKCell)的激活劑，而且對B淋巴細(xì)胞的激活、增殖和分化具有調(diào)節(jié)作用?！緦嶒炗闷贰?．材料：小白鼠、1%雞紅細(xì)胞懸液2．試劑：6%的淀粉肉湯（含臺盼藍(lán)），0.9%生理鹽水3．儀器設(shè)備：顯微鏡、注射器、注射針頭、吸管、試管架、解剖刀、解剖鑷、載玻片、蓋玻片、記號筆5、吸取的腹腔液與Hank’s液1：1混合，并且滴數(shù)滴于載玻片上，37OC溫育30分鐘。6、玻片取出，用生理鹽水沖洗，吹干，甲醇固定5分鐘。7、Gimasa染液染色，干燥后油鏡觀察?！緦嶒灲Y(jié)果】在高倍鏡下可見有許多較大的圓形和形狀不規(guī)則的巨噬細(xì)胞，因未染色細(xì)胞核不易見到，其胞質(zhì)中含有數(shù)量不等的蘭色圓形小顆粒（即吞入的含臺盼蘭的淀粉肉湯所形成）；還可見少量黃色橢圓形有明顯細(xì)胞核的雞紅細(xì)胞，慢慢移動玻片標(biāo)本，仔細(xì)觀察視野中的巨噬細(xì)胞表面，有的紅細(xì)胞已部分被吞入；有的巨噬細(xì)胞內(nèi)已吞入了一個或多個紅細(xì)胞形成吞噬泡。

巨噬細(xì)胞吞噬實驗示教照片

雞紅細(xì)胞巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞后的巨噬細(xì)胞

吞噬雞紅細(xì)胞后的巨噬細(xì)胞

【實驗報告】1．鏡