2024屆四川省攀枝花市第十二中學(xué)生物高二第二學(xué)期期末教學(xué)質(zhì)量檢測模擬試題含解析

2024屆四川省攀枝花市第十二中學(xué)生物高二第二學(xué)期期末教學(xué)質(zhì)量檢測模擬試題注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于人體免疫的三道防線的說法正確的是A．人體的皮膚、黏膜及溶菌酶等殺菌物質(zhì)構(gòu)成人體的第一道防線B．體液中的殺菌物質(zhì)和淋巴細(xì)胞構(gòu)成人體的第二道防線C．第三道防線是由人體的免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫活性物質(zhì)構(gòu)成的D．人體的第一道防線屬于非特異性免疫，第二道防線和第三道防線屬于特異性免疫2．在遺傳學(xué)上，把遺傳信息沿一定方向的流動(dòng)叫做信息流。信息流的方向可以用下圖表示，則正確的是（）A．①和②過程都需要解旋酶和DNA聚合酶B．能進(jìn)行④或⑤過程的生物不含DNAC．①過程發(fā)生在細(xì)胞分裂的分裂期D．③過程不發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，場所是核糖體3．有關(guān)孟德爾豌豆雜交實(shí)驗(yàn)的敘述不正確的是A．實(shí)驗(yàn)過程中孟德爾運(yùn)用了假說——演繹法B．用自花花傳粉的豌豆做人工雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果既可靠又容易分析C．“成對的遺傳因子彼此分離”是孟德爾提出假說的主要內(nèi)容D．一對相對性狀的雜合子所產(chǎn)生的雌、雄配子的比例為1：14．人體對病原菌具有一定的防御功能，下列敘述錯(cuò)誤的是A．唾液中的溶菌酶可殺死病原菌B．口腔黏膜對病原菌有一定的屏障作用C．吞噬細(xì)胞對多種病原菌具有吞噬作用D．B細(xì)胞對病原菌的免疫應(yīng)答屬于細(xì)胞免疫5．利用人工合成的性引誘劑誘殺害蟲的雄性個(gè)體。該害蟲的種群密度將明顯減少，引起該現(xiàn)象的直接原因是()A．種群出生率下降 B．雌性個(gè)體也減少 C．種群性別比例失調(diào) D．雌蟲生殖能力下降6．將淀粉和瓊脂做成培養(yǎng)基，在上面選取5個(gè)圓點(diǎn)位置，分別用不同方法處理，并將此實(shí)驗(yàn)裝置放在37℃恒溫箱中，保溫處理24h后，將碘液滴在培養(yǎng)基的5個(gè)圓點(diǎn)上，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄于下表：請指出④和⑤所發(fā)生的顏色反應(yīng)，以及③接種的面包霉的分泌物分別是（）A．棕黃色、棕黃色、淀粉酶 B．藍(lán)黑色、棕黃色、麥芽糖酶C．棕黃色、藍(lán)黑色、淀粉酶 D．棕黃色、藍(lán)黑色、麥芽糖酶7．關(guān)于真核細(xì)胞中生命活動(dòng)與能量關(guān)系的敘述，錯(cuò)誤的是A．DNA復(fù)制需要消耗能量B．光合作用的暗反應(yīng)階段需要消耗能量C．物質(zhì)通過協(xié)助擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞時(shí)需要消耗ATPD．細(xì)胞代謝所需的ATP可在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生8．（10分）下列關(guān)于細(xì)胞器的敘述，正確的是（）A．溶酶體只能消化細(xì)胞內(nèi)衰老的細(xì)胞器 B．液泡與植物細(xì)胞的滲透作用有關(guān)C．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體是合成性激素的場所 D．線粒體能合成自身需要的全部蛋白質(zhì)二、非選擇題9．（10分）植物細(xì)胞受損后通常會釋放出酚氧化酶，使無色的酚氧化生成褐色的物質(zhì)。人們利用酚氧化酶的功能和特性加工制作商品。請分析回答問題：（1）植物細(xì)胞中的酚類物質(zhì)與酚氧化酶在細(xì)胞質(zhì)中是分隔開的，是因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)具有____________________系統(tǒng)。（2）把含有酚氧化酶的提取液作如下表的處理：步驟試管①酚氧化酶提取液的處理②加入緩沖液③加入酚類底物實(shí)驗(yàn)后的顏色A不作處理2mL2mL褐色B加入蛋白酶，10min2mL2mL無色C加入三氯乙酸（強(qiáng)酸），10min2mL2mL？酚氧化酶的作用機(jī)理是_____________________。實(shí)驗(yàn)后試管C中的顏色為__________________。試管A、B對照，說明酚氧化酶的化學(xué)本質(zhì)是_______________。試管A、C對照，能獲得的結(jié)論是_____________。（3）茶樹葉細(xì)胞中存在眾多種類的酚類物質(zhì)與酚氧化酶。顏色為綠色的茶制取過程中必須先進(jìn)行_______________（手工或機(jī)械揉搓；熱鍋高溫炒制；曬干、炒干）工藝過程，這一過程的原理是_______________。10．（14分）已知圖1為質(zhì)粒、圖2為含有目的基因的DNA片段，下表為有關(guān)限制酶的識別序列和切割位點(diǎn)。請回答下列問題：（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用______兩種限制酶切割，切割后的末端為______（填“黏性末端”、“平末端”或“黏性末端和平末端”），故應(yīng)選用___________酶來連接載體和目的基因。（2）為篩選出含有目的基因的大腸桿菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中添加___________。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體前，需要運(yùn)用PCR技術(shù)對含有目的基因的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增時(shí)需要用到___________（填酶的名稱）和圖2中的引物是___________。（4）在基因工程藥物的生產(chǎn)中，常選用大腸桿菌作受體細(xì)胞，其原因是______________________。11．（14分）內(nèi)皮抑素是從血管內(nèi)皮細(xì)胞瘤中分離出的一種內(nèi)源性血管生成抑制因子，能特異性地抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移。某小組為獲得內(nèi)皮抑素，構(gòu)建分泌型內(nèi)皮抑素基因表達(dá)載體，并在C6細(xì)胞（大鼠源性膠質(zhì)瘤細(xì)胞）中表達(dá)。具體操作如下：（1）構(gòu)建分泌型內(nèi)皮抑素基因表達(dá)載體①采用相關(guān)技術(shù)提取1日齡SD大鼠大腦半球組織中的總RNA，檢測RNA質(zhì)量和濃度。②內(nèi)皮抑素cDNA的獲得：以上述提取的RNA為模板，通過________過程獲得cDNA，并利用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增cDNA。PCR技術(shù)中除需目的基因作為模板外，還需要的條件有________和控制溫度等。③為避免目的基因和載體自身環(huán)化，酶切目的基因和載體時(shí)，可用________酶切割，以保證目的基因兩側(cè)和載體上具有________。（2）目的基因在C6細(xì)胞中表達(dá)（將目的基因?qū)隒6細(xì)胞中，并表達(dá)）①培養(yǎng)C6細(xì)胞時(shí)，為防止雜菌污染，可在培養(yǎng)基中加入一定量的________。②若要檢測目的基因是否成功整合到受體細(xì)胞的DNA上，可采用________技術(shù)。③導(dǎo)入C6細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)后，會使C6細(xì)胞在大鼠體內(nèi)的________可能會受到抑制。12．請回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)有關(guān)的問題。（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的營養(yǎng)成分常用的是________。（2）通常，制備培養(yǎng)基時(shí)，要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。其原因是________________。（3）將細(xì)菌接種到平板培養(yǎng)基上的常用方法是平板劃線法和________________。（4）單個(gè)細(xì)菌在平板上會形成菌落。研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。其原因是__________。（5）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前，需要經(jīng)過________處理。這樣可以殺死丟棄物中所有的微生物。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解題分析】人體的皮膚和黏膜構(gòu)成了人體的第一道防線，而體液中的溶菌酶等殺菌物質(zhì)構(gòu)成第二道防線，A錯(cuò)誤；體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細(xì)胞構(gòu)成人體的第二道防線，而淋巴細(xì)胞構(gòu)成第三道防線，B錯(cuò)誤；第三道防線主要是由人體的免疫器官（胸腺、骨髓等）、免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞）和免疫活性物質(zhì)（抗體和淋巴因子）等構(gòu)成的，C正確；人體的第一道防線和第二道防線屬于非特異性免疫，第三道防線屬于特異性免疫，D錯(cuò)誤。2、B【解題分析】①過程表示DNA自我復(fù)制，需要解旋酶和DNA聚合酶，不需要RNA聚合酶，A錯(cuò)誤；能進(jìn)行④或⑤過程的生物屬于RNA病毒，不含DNA，B正確；①過程發(fā)生在細(xì)胞分裂的分裂間期，C錯(cuò)誤；③過程為翻譯過程，mRNA上的密碼子和rRNA上的反密碼子的堿基互補(bǔ)配對，D錯(cuò)誤。3、D【解題分析】

1、孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律用了假說——演繹法，其基本步驟：提出問題→作出假說→演繹推理→實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證(測交實(shí)驗(yàn))→得出結(jié)論。2、孟德爾獲得成功的原因：(1)選材：豌豆，豌豆是嚴(yán)格的自花傳粉且閉花受粉的植物，自然狀態(tài)下為純種；品系豐富，具多個(gè)可區(qū)分的性狀，且雜交后代可育，易追蹤后代的分離情況，總結(jié)遺傳規(guī)律。(2)由單因子到多因子的科學(xué)思路(即先研究1對相對性狀，再研究多對相對性狀)。(3)利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。(4)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)程序和方法。(5)具有熱愛科學(xué)和鍥而不舍的精神。3、孟德爾遺傳定律只適用于進(jìn)行有性生殖的生物的核基因的遺傳。4、測交的定義是孟德爾在驗(yàn)證自己對性狀分離現(xiàn)象的解釋是否正確時(shí)提出的，為了確定子一代是雜合子還是純合子，讓子一代與隱性純合子雜交，這就叫測交，在實(shí)踐中，測交往往用來鑒定某一顯性個(gè)體的基因型和它形成的配子類型及其比例?！绢}目詳解】A.孟德爾豌豆雜交實(shí)驗(yàn)研究的過程所使用的科學(xué)研究方法是假說-演繹法，A正確；B.用自花授粉，閉花傳粉的豌豆做人工雜交試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果可靠且又容易分析，B正確；C.“成對的遺傳因子彼此分離”是孟德爾提出假說的主要內(nèi)容，C正確；D.一對相對性狀的雜合子所產(chǎn)生的雌配子或雄配子中，雌配子數(shù)目比雄配子數(shù)目少，D錯(cuò)誤。故選D。4、D【解題分析】

唾液中的溶菌酶的主要作用是水解病原菌，A正確；

口腔黏膜對病原菌的作用是一道物理屏障，B正確；

吞噬細(xì)胞不具有特異性識別作用，對多種病原菌具有吞噬作用，C正確；

B細(xì)胞對病原菌的免疫應(yīng)答屬于體液免疫，D錯(cuò)誤。

故選D。

5、A【解題分析】

由題文和選項(xiàng)的描述可知：該題考查學(xué)生對種群的數(shù)量特征以及其關(guān)系的相關(guān)知識的識記和理解能力?！绢}目詳解】利用人工合成的性引誘劑誘殺害蟲雄性個(gè)體，導(dǎo)致害蟲種群的性別比例失調(diào)，使很多雌性個(gè)體不能完成交配，進(jìn)而引起種群的出生率下降，所以該害蟲的種群密度明顯減少的直接原因是種群出生率下降，A正確，C錯(cuò)誤；誘殺害蟲雄性個(gè)體，對雌性個(gè)體的減少沒有影響，B錯(cuò)誤；雄性個(gè)體數(shù)量減少對雌蟲的生殖能力沒有影響，D錯(cuò)誤。【題目點(diǎn)撥】以題意“誘殺害蟲雄性個(gè)體”為切入點(diǎn)，從中抽提出關(guān)鍵信息：雄性個(gè)體數(shù)減少→性別比例失調(diào)→多數(shù)雌性個(gè)體不能完成交配→出生率下降→種群密度將明顯減少，據(jù)此分析各選項(xiàng)。6、C【解題分析】

試題分析：酶的作用具有專一性，一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)，淀粉酶催化淀粉水解，蔗糖酶催化蔗糖水解但不能催化淀粉水解，碘遇淀粉變藍(lán)色，因此可以用碘液檢測淀粉是否發(fā)生了水解；酶的活性還受溫度、酸堿度的影響。解：④實(shí)驗(yàn)方法是淀粉和瓊脂做成培養(yǎng)基上加新鮮的唾液，新鮮的唾液中含有唾液淀粉酶，能催化淀粉水解，因此加上碘液后出現(xiàn)棕黃色；⑤實(shí)驗(yàn)方法是淀粉和瓊脂做成培養(yǎng)基上加蔗糖酶溶液，蔗糖酶催化蔗糖水解，但不能催化淀粉水解，加碘液后碘與淀粉變藍(lán)色；③實(shí)驗(yàn)方法是淀粉和瓊脂做成培養(yǎng)基上接種面包霉，加碘液出現(xiàn)棕黃色，說明淀粉水解，面包霉的分泌物是淀粉酶。故選C?？键c(diǎn)：酶的特性。7、C【解題分析】本題C項(xiàng)出現(xiàn)知識性錯(cuò)誤體現(xiàn)在：協(xié)助擴(kuò)散和自由擴(kuò)散都是順濃度梯度進(jìn)行的被動(dòng)運(yùn)輸，不需要耗能，只有主動(dòng)運(yùn)輸才會耗能。A項(xiàng)中DNA的復(fù)制需要消耗能量用于斷開氫鍵來解開螺旋，B項(xiàng)中提到的暗反應(yīng)需要光反應(yīng)提供的能量ATP和還原劑[H]，要記住光反應(yīng)和暗反應(yīng)的聯(lián)系，D項(xiàng)考查呼吸作用的場所，有氧呼吸和無氧呼吸第一階段都發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，能產(chǎn)生少量ATP。【考點(diǎn)定位】本題主要考查ATP的產(chǎn)生和利用相關(guān)知識，有一定的綜合性，屬中檔題8、B【解題分析】

溶酶體：分解衰老、損傷的細(xì)胞器，吞噬并殺死侵入細(xì)胞的病菌；液泡：調(diào)節(jié)植物細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境，使細(xì)胞保持堅(jiān)挺；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：蛋白質(zhì)的加工和脂質(zhì)的合成車間；核糖體：蛋白質(zhì)的合成場所。線粒體：含有DNA，有氧呼吸的主要場所?！绢}目詳解】A、溶酶體含多種水解酶，不僅能分解衰老、損傷的細(xì)胞器，還能吞噬并殺死侵入細(xì)胞的病菌，A錯(cuò)誤；B、成熟植物細(xì)胞滲透作用取決于液泡與外界溶液的濃度差，B正確；C、核糖體是合成蛋白質(zhì)的場所，而性激素的本質(zhì)是固醇，由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成，C錯(cuò)誤；D、線粒體含有少量DNA和核糖體，是半自主性細(xì)胞器，能夠合成部分自身所需的蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。故選B?！绢}目點(diǎn)撥】答題關(guān)鍵在于掌握細(xì)胞器的功能，易錯(cuò)點(diǎn)是線粒體為半自主性細(xì)胞器，只能合成部分蛋白質(zhì)，大部分蛋白質(zhì)需要核基因控制合成。二、非選擇題9、生物膜顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能無色蛋白質(zhì)強(qiáng)酸使酶失去活性熱鍋高溫炒制高溫使酚氧化酶失活【解題分析】

酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有生物催化能力的有機(jī)物，大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA；酶的催化具有高效性（酶的催化效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于無機(jī)催化劑）、專一性（一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行）、需要適宜的溫度和pH值（在最適條件下，酶的催化活性是最高的，低溫可以抑制酶的活性，隨著溫度升高，酶的活性可以逐漸恢復(fù)，高溫、過酸、過堿可以使酶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使酶永久性的失活）?！绢}目詳解】（1）細(xì)胞中具有生物膜系統(tǒng)，將細(xì)胞中的酚類物質(zhì)與酚氧化酶在細(xì)胞質(zhì)中分隔開。

（2）酶促進(jìn)反應(yīng)的機(jī)理是能顯著降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能；C試管加入強(qiáng)酸使酶失活，不能使無色的酚氧化生成褐色的物質(zhì)，故C試管中為無色；B試管用蛋白酶處理，也不會變色，酚氧化酶被蛋白酶水解了，說明酚氧化酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)；A、C試管對照，強(qiáng)酸條件下，酚氧化酶也會失去作用，所以強(qiáng)酸使酶失去活性。

（3）高溫可以改變酶的空間結(jié)構(gòu)使其失活，綠茶制取過程中必須先進(jìn)行熱鍋高溫炒制以防變色?！绢}目點(diǎn)撥】此題主要考查酶的概念以及酶的特性，意在考查學(xué)生對基礎(chǔ)知識的理解掌握，難度適中。10、BclI和SmaI黏性末端和平末端T4DNA連接酶四環(huán)素Taq酶引物甲和引物丙大腸桿菌為單細(xì)胞生物，繁殖快，遺傳物質(zhì)較少【解題分析】

用圖1中的質(zhì)粒和圖2中的目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用BamHⅠ切割，因?yàn)锽amHⅠ切割會切斷四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因，也不能用HindⅢ，因?yàn)槠錈o法切割質(zhì)粒，因此可選擇BclI和SmaI，BclI切割產(chǎn)生黏性末端，SmaI切割產(chǎn)生平末端，形成重組質(zhì)粒還需要用到DNA連接酶；由于選擇BclI和SmaI進(jìn)行切割，破壞了氨芐青霉素抗性記憶，因此標(biāo)記基因?yàn)樗沫h(huán)素抗性基因，為了篩選得到目的菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素；PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，需要的條件有：模板DNA（目的基因所在的DNA片段）、原料（四種脫氧核苷酸）、一對引物（單鏈的脫氧核苷酸序列）、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。大腸桿菌是原核細(xì)胞，容易培養(yǎng)、繁殖速度快，當(dāng)處于對數(shù)期時(shí)，細(xì)菌代謝旺盛，個(gè)體的形態(tài)和生理特性比較穩(wěn)定，因此常作為基因工程受體細(xì)胞?！绢}目詳解】（1）應(yīng)選用BclI和SmaI兩種限制酶切割，切割后產(chǎn)生的末端為黏性末端和平末端，要形成重組質(zhì)粒還需用T4DNA連接酶來連接載體和目的基因。（2）形成的重組質(zhì)粒中標(biāo)記基因?yàn)樗沫h(huán)素抗性記憶，因此應(yīng)在培養(yǎng)基中添加四環(huán)素。（3）運(yùn)用PCR技術(shù)對含有目的基因的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）和引物，圖2中的引物應(yīng)選引物甲和引物丙。（4）在基因工程藥物的生產(chǎn)中，常選用大腸桿菌作受體細(xì)胞，其原因是大腸桿菌是原核生物，具有繁殖快、遺傳物質(zhì)相對較少等特點(diǎn)，因此常作為基因工程中的受體細(xì)胞。【題目點(diǎn)撥】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求學(xué)生識記基因工程的原理及操作工具和操作步驟，能正確構(gòu)建基因表達(dá)載體，能夠識記原核生物經(jīng)常作為受體細(xì)胞的原因，同時(shí)掌握PCR的原理和方法，意在考查學(xué)生對于生物學(xué)原理的實(shí)際運(yùn)用能力。11、逆轉(zhuǎn)錄熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）、兩種引物、四種脫氧核苷酸不同的限制性核酸內(nèi)切（限制）不同的黏性末端抗生素DNA分子雜交增殖和遷移【解題分析】

基因工程的基本步驟是：①目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。④目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測，檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體DNA是否插入目的基因，可以用DNA分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可以用分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可以用抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【題目詳解】（1）構(gòu)建分泌型內(nèi)皮抑素基因表達(dá)載體①采用相關(guān)技術(shù)提取1日齡SD大鼠大腦半球組織中的總RNA，檢測RNA質(zhì)量和濃度。②內(nèi)皮抑素cDNA的獲得：遺傳信息從RNA到DNA的過程叫逆轉(zhuǎn)錄。以上述提取的RNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA，并利用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增cDNA。PCR技術(shù)中除需目的基因作為模板外，還需要的條件有熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）、兩種引物、四種脫氧核苷酸和控制溫度等。③為避免目的基因和載體自身環(huán)化，酶切目的基因和載體時(shí)，可用雙酶切法，即不同的限制性核酸內(nèi)切（限制）酶切割，以保證目的基因兩側(cè)和載體上具有