摘除腎上腺的影響

實驗三摘除腎上腺的影響及腎上腺皮質素的作用一、 目的觀察和比較摘除腎上腺后小鼠某些生理機能的變化及腎上腺皮質素的替代作用，探討腎上腺對小白鼠水鹽代謝及應激能力等方面的作用。二、 原理腎上腺由皮質和髓質構成，切除腎上腺髓質并不危及生命，動物可在平靜的環(huán)鏡中長期生存，腎上腺皮質是維持生命所必需的，腎上源皮質分泌鹽皮質激素，糖皮質激素和少量性激素。摘除腎上腺的動物可迅速表現出皮質功能失調的現象，如食欲下降，體溫降低，停止生長或體重減輕以及對有害刺激的耐力一應激能力的下降等，一般在正常生活條件下，被摘除腎上腺的小白鼠只能存活幾天到十幾天。三、 實驗用品成年的、性別相同、體重相近的健康小白鼠，常規(guī)小動物手術器械2套，半導體點溫計一臺，蛙板2塊、1ml注射器2只、乙醚、75%酒精、2%碘酊、青霉素小瓶2只，消毒棉球、縫針、絲線、小白鼠飼養(yǎng)盒、飲水瓶、生理鹽水、天平，平皿等。四、 實驗內容（一）動物分組每組取小白鼠9只，將其分成3組：1、 手術對照組：3只，作摘除腎上腺的手術對照。2、 給藥對照組：3只，摘除腎上腺。3、 給藥實驗組：3只，摘除腎上腺后皮下注入皮質素，觀察皮質素的替代作用。觀察和喂養(yǎng)最好分盒進行，每盒只飼養(yǎng)一只。如條件不具備亦可按動物分組飼養(yǎng)，每盒三只。（二）手術操作（腎上腺摘除術）1、 將手術器械、縫針、絲線浸泡在75%中消毒待用。2、 將動物置于干燥的容器（燒杯、棉紗缸等均可）向其內投入一浸有乙醚的棉球，蓋上蓋，觀察動物的呼吸和運動，當見動物由興奮狀態(tài)進人昏倒狀態(tài)、呼吸變慢變淺時，立即將動物取出，用棉繩或膠布條將其腹臥固定于蛙板中央。3、 手術的皮膚切口在背部正中最后肋骨至骨盆之間，用毛剪將切口周圍皮毛剪凈、消毒。4、 從最后胸椎間后沿背部正中線切開皮膚l厘米，從切口處向左右做純性分離。5、 向左側推動切口（左側手術），于肋骨后緣和背最長肌外緣間用眼科鑷分離肌肉（或用眼科剪剪一小口），然后用攝子擴創(chuàng)，可見暗紅色的腎臟，在腎臟的前內上方即可找到由脂肪組織包裹著的粉紅色的腎上腺，大小與半個大米粒近似。6、 為了摘除完全，先用眼科鑷子夾起腎臟和腎上腺之間的脂肪組織。然后在鑷子和腎臟之間剪斷或用鑷子整個摘除，放于平皿檢驗其是否腎上腺及完整與否。腎上腺和腎臟是腹膜外器官，注意小心保護腹膜。腹腔臟器溢出不僅造成手術上的不便且對動物存活也極為不利。操作中還要防止造成氣胸，對腎上腺周圍的實質性臟器如腎臟、肝臟、脾臟等也勿傷害。7、 用同樣的方法摘除右側腎上腺，右側腎臟和腎上腺的位置略高于左側。8、 二側腎上腺均摘除后，分別縫合二側肌肉，然后縫合皮膚術部碘酊消毒。9、 稱重、編號手術對照組與其它二組不同的只是找到腎上腺后不摘除，僅用鑷子觸動一下即可。（三）、實驗內容：1、觀察摘除腎上腺對小白鼠水鹽代謝等方面的影響。每只飼養(yǎng)盒配備二只飲水瓶。一只盛自來水，一只盛生理鹽水?？勺杂娠嬎腿∈?，飲水和食物要定量放入。記錄其耗食量和二種不同的水之消耗量。用半導體點溫計測量小白鼠心前區(qū)的皮溫。每只動物要建立一張卡片記錄上述變化。例如：卡片號手術對照組/動物第 號體重（g）體溫(°C)耗食量（g）耗水量（ml）行為自來水鹽水術前術后第一天術后第二天術后第三天術后第四天術后第五天結論備注2、 給藥實驗組的動物在術后每日皮下注入250ug的可的松；給藥對照組注入等量的生理鹽水。連續(xù)觀察五日后，將各組每項指標的平均變化量記入下表：3、 觀察摘除腎上腺對小白鼠應激能力的影響游泳實驗手術后第五日晚將各級動物之食物全部撤掉。進行禁食，次日將三組動物分別投入4的冷水中.記錄各自的游泳時間，待其溺水下沉后，將其取出。觀察其恢復情況。耐寒能力的測定\觀測指標^動物WbTb耗食量耗水量行為手術對照組自來水鹽水給藥對照組給藥實驗組結論將二組動物同時移入4C的冷室中，停止給藥，保證動物飲水和食物，每日觀測一次，記錄其死亡情況。最后對死亡動物和存活動物要檢驗其腎上腺是否摘除干凈。五