DB37-T 4485-2021 玉米種子活力測定 加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法

65.020.20CCS

B

2137 DB

37/T

4485—2021玉米種子活力測定 加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法Maize

seed

test

by

accelerated

test,

test,

soaking

test 山東省市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB

37/T

4485—2021 前言

................................................................................

III1

...............................................................................

12 規(guī)范性引用文件

.....................................................................

13 術語和定義

.........................................................................

14 縮略語

.............................................................................

25 測定原理

...........................................................................

25.15.25.35.4

加速老化法

.....................................................................

2抗冷法

.........................................................................

2冷浸法

.........................................................................

2破裂法

.........................................................................

36 測定方案

...........................................................................

36.16.26.36.4

總則

...........................................................................

3樣品

...........................................................................

3測定平臺

.......................................................................

3測定條件

.......................................................................

37 試材和設備

.........................................................................

37.1 試材

...........................................................................

37.2 設備

...........................................................................

38 試驗步驟

...........................................................................

48.18.28.38.4

加速老化法

.....................................................................

4抗冷法

.........................................................................

5冷浸法

.........................................................................

6破裂法

.........................................................................

79 試驗數(shù)據(jù)處理

.......................................................................

89.19.29.39.49.5

加速老化法

.....................................................................

8抗冷法

.........................................................................

8冷浸法

.........................................................................

8破裂法

.........................................................................

9重新試驗

.......................................................................

910 結果計算和表示

...................................................................

1010.1 加速老化法、抗冷法、冷浸法

...................................................

1010.2 破裂法

.......................................................................

1111 結果報告

.........................................................................

11附錄

A（資料性） 玉米種子活力測定（加速老化法、抗冷法、冷浸法）發(fā)芽試驗原始記錄表

....

12附錄

B（資料性） 玉米種子活力測定（破裂法）發(fā)芽試驗原始記錄表........................

13附錄

C（資料性） 玉米種子活力測定結果報告單..........................................

14DB

37/T

4485—2021參考文獻

.............................................................................

15IIDB

37/T

4485—2021 本文件按照GB/T

—《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實施。本文件由山東省農(nóng)業(yè)標準化技術委員會種植業(yè)分技術委員會歸口。IIIDB

37/T

4485—2021 1 范圍本文件規(guī)定了玉米(Zea

mays

L.)測定方案、測定程序和結果報告。本文件適用于普通玉米品種的種子活力測定，亦可作為特用玉米品種的種子活力測定推薦方法。2規(guī)范性引用文件文件。GB/T

農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 扦樣GB/T

農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 發(fā)芽試驗GB/T

8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示與判定GB/T

26462 種子發(fā)芽紙3 術語和定義GB/T

界定的以及下列術語和定義適用于本文件。3.1種子活力 seed

vigour在廣泛的田間條件下，決定種子迅速整齊出苗和長成正常幼苗潛在能力的總稱。3.2種子批 seed

同一來源、同一品種、同一年度、同一時期收獲和質(zhì)量基本一致、在規(guī)定數(shù)量之內(nèi)的種子。[來源：GB/T

3543.2—，3.3送驗樣品 submitted

送到種子檢驗機構檢驗、規(guī)定數(shù)量的樣品。[來源：GB/T

3543.2—，3.4試驗樣品（簡稱“試樣”）

working

sample在實驗室中從送驗樣品中分出的部分樣品，供測定某一檢驗項目之用。[來源：GB/T

3543.2—，3.5加速老化測定

aging

test發(fā)芽率。DB

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4485—20213.6抗冷測定 cold

test將試樣低溫發(fā)芽一定時間后轉(zhuǎn)適溫發(fā)芽試驗，定期統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。3.7冷浸測定 cold

soaking

test將試樣低溫水浴處理后進行標準發(fā)芽試驗，統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。3.8破裂測定 rupture

test在特定發(fā)芽溫度下，定時統(tǒng)計試樣種子已發(fā)生果種皮破裂和胚根鞘破裂的種子粒數(shù)，計算破裂率，包括果種皮破裂率、胚根鞘破裂率、果種皮胚根鞘破裂率和果種皮未破裂率。4 縮略語下列縮略語適用于本文件。AAT:

加速老化測定（

Ageing

Test）CT:

抗冷測定（Cold

Test）CST:

冷浸測定（Cold

Test）RT:

破裂測定（Rupture

Test）TR:

果種皮破裂（

）CR:

胚根鞘破裂（

）TU:

果種皮破裂（

Unrupture）TRP:

果種皮破裂率（Testa-pericarp

Rupture

Percentage）CRP:

胚根鞘破裂率（Coleorhiza

Rupture

）TRCRP：果種皮胚根鞘破裂率（

Percentage）TUP：果種皮未破裂率（

Unrupture

Percentage）5 測定原理5.1 加速老化法因此，加速老化法能較好地預測田間出苗率和種子耐貯藏性。5.2抗冷法春田間逆境條件，觀察種子發(fā)芽成苗的能力。高活力種子經(jīng)一定條件的低溫處理后仍能形成正常幼苗，而低活力種子則不能形成正常幼苗甚至喪失生活力。因此，抗冷法能較好地預測田間出苗率。5.3 冷浸法地預測田間出苗率。DB

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4485—20215.4 破裂法萌發(fā)事件。因此，破裂法能快速反映種子活力狀況，較好地預測田間出苗率。6 測定方案6.1總則定、冷浸測定）和低溫發(fā)芽、萌發(fā)事件統(tǒng)計、數(shù)據(jù)分析的程序（破裂測定）進行測定。按規(guī)定要求填報測定結果，測定報告應注明測定方案所規(guī)定的條件。6.2 樣品送驗樣品為玉米種子，重量應不低于1

g。6.3 測定平臺人工氣候箱、光照培養(yǎng)箱、發(fā)芽室或其它能夠精準控溫的發(fā)芽環(huán)境。6.4 測定條件種子活力測定應在有利于正確實施測定的控制條件下進行，包括但不限于下列條件：——種子檢驗員具備熟悉所使用測定方法的知識和技能；——所有儀器與使用的技術相適應，并已經(jīng)過定期維護、驗證和校準。7 試材和設備7.1 試材7.1.1老化盒：

mm×

mm×30

mm

等規(guī)格。7.1.2 尼龍網(wǎng)袋：150

mm×100

、400

mm×150

等規(guī)格。7.1.3 置種板：可輔助玉米種子置床，每次可平行或交錯置種

7.1.4 數(shù)種板：可輔助數(shù)取一定數(shù)目的玉米種子。7.1.5

mm×250

mm

mm×

mm

5

mm鋪設。7.1.6 自封袋：

450

mm×

mm）等規(guī)格。7.1.7發(fā)芽盒（盤）：450

mm×

mm×90

等規(guī)格。7.1.8 發(fā)芽紙：GB/T

26462，

mm×

等規(guī)格。7.1.9 試劑藥品：次氯酸鈉溶液等。7.1.10 筆、酒精、砂子、噴壺等。7.2 設備7.2.1 人工老化處理設備：種子老化箱等。7.2.2 發(fā)芽設備：人工氣候箱、光照培養(yǎng)箱、發(fā)芽室、恒溫循環(huán)槽或其它能夠精準控溫發(fā)芽的設備。DB

37/T

4485—20217.2.3 消毒干燥設備：高壓蒸汽滅菌鍋、電熱鼓風干燥箱等。8試驗步驟8.1 加速老化法8.1.1試樣準備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒10

，消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍，拭去種子表面浮水，備用。包衣種子可先柔性清洗后消毒，或無須消毒處理。8.1.2試驗材料準備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用；發(fā)芽盒（盤）：將發(fā)芽盒（盤）清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風干備用。8.1.3加速老化測定45

于98

%72

h

用。2380

mm×

mm

×

mm×90

mm2

cm～

cm。種子置床后，加蓋1張潤濕的發(fā)芽紙，蓋上發(fā)芽盒（盤）蓋，貼好標簽并標注品種名稱、樣品編號、重復次數(shù)、置床時間等基本信息，放入人工氣候箱。按照GB/T

3543.4，25

0.5

℃標準發(fā)芽7

d統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。75

%2

mm×

mm紙邊距5

cm1關信息后，垂直放入人工氣候箱（紙卷種孔端朝下）。按照GB/T

3543.4，25

℃±

℃標準發(fā)芽7

d統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。同時按照GB/T

，對未老化處理種子進行標準發(fā)芽測定，25

℃±

℃標準發(fā)芽7

d統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。8.1.4 檢查管理36

h和發(fā)芽4

d時分別檢查1次老化和發(fā)芽環(huán)境，若有問題及時進行相應維護。老化處理：溫度和濕度檢測；溫度保持在45

℃±

℃范圍，相對濕度不低于98

%。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持濕潤。發(fā)芽溫度檢查：溫度保持在25

℃±

℃范圍內(nèi)。種子檢查：發(fā)霉的種子應及時取出洗滌去霉。當發(fā)霉種子超過5

%時，應更換發(fā)芽床，以免霉菌因素影響測定結果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子，應及時去除并做好相應記載。8.1.5 數(shù)據(jù)記錄DB

37/T

4485—2021按照

3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實、不正常幼苗和死種子的鑒定標準進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，根據(jù)正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。8.2 抗冷法8.2.1 試樣準備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒10

，消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍，拭去種子表面浮水后，備用。包衣種子可先柔性清洗表面包衣后消毒，或無須消毒處理。8.2.2 試驗材料準備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用。發(fā)芽盒（盤）：將發(fā)芽盒（盤）清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風干備用。130

℃±3

℃高溫烘干滅菌4

h孔徑

mm篩子過篩，除雜質(zhì)，備用。8.2.3 抗冷測定按采取卷紙、紙砂上或紙砂間置床方式對玉米種子進行抗冷測定。75

%2

mm×

mm距5

cm1

℃避光發(fā)芽7

d25

℃±

℃發(fā)芽4

d（

h光暗交替）統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。2

mm×255

mm×

mm×90

mm置塑料框架內(nèi)，整平床面），床厚5

，置種板輔助平行置種，種胚與砂床緊密接觸，種孔朝向一致，紙邊距5

cm10

℃±

℃避光發(fā)芽7

d后，轉(zhuǎn)

0.5

℃發(fā)芽4

d（12

h光暗交替）統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。

%2380

mm×255

mm5

mm板輔助交錯置種，種孔朝向一致，紙邊距5

。種子置床后加蓋1張潤濕的發(fā)芽紙，將紙床（或夾樣品10

℃±0.5

℃避光發(fā)芽7

d后，轉(zhuǎn)25

℃±

℃發(fā)芽4

d（12

h光暗交替）統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。8.2.4 檢查管理在種子發(fā)芽期間，應進行適當?shù)臋z查管理，以維持原有發(fā)芽條件。10

℃±

℃發(fā)芽4

d和

0.5

℃發(fā)芽2

d分別檢查1次發(fā)芽環(huán)境，若有問題及時進行相應維護。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持發(fā)芽床濕潤。10

℃±

25

0.5

內(nèi)。DB

37/T

4485—20215

%以免霉菌因素影響檢測結果。如發(fā)現(xiàn)腐爛死亡種子，應及時去除并做好相應記載。8.2.5 數(shù)據(jù)記錄按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實、不正常幼苗和死種子的鑒定標準進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，根據(jù)正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。8.3 冷浸法8.3.1 試樣準備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒10

min，消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍，拭去種子表面浮水后，備用。包衣種子可先柔性清洗表面包衣然后消毒，或無須消毒處理。8.3.2 試驗材料準備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用。發(fā)芽盒（盤）：將發(fā)芽盒（盤）清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風干備用。8.3.3冷浸測定采取紙間（卷紙）置床方式對玉米種子進行冷浸測定?？梢赃x擇置床前冷浸或置床后冷浸。4

℃冷浸處理3

d2

×

mm泡后，置種板輔助交錯置種，種孔朝向一致，紙邊距5

cm。種子置床后加蓋1張潤濕的發(fā)芽紙，將紙床25

0.5

℃發(fā)芽7

d（

h光暗交替）統(tǒng)計正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。2380

mm×255

5

cm14

℃冷浸處理3

d25

℃±0.5

℃發(fā)芽7

d（12

h發(fā)芽率。8.3.4 檢查管理在種子冷浸和發(fā)芽期間，應進行適當?shù)臋z查管理，以維持原有冷浸和發(fā)芽條件。冷浸1

d和發(fā)芽4

d分別檢查1次冷浸和發(fā)芽環(huán)境，若有問題及時進行相應維護。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持濕潤。發(fā)芽溫度檢查：冷浸溫度保持在4

℃范圍內(nèi)，發(fā)芽溫度保持在25

0.5

℃范圍內(nèi)。種子檢查：發(fā)霉的種子應及時取出洗滌去霉。當發(fā)霉種子超過5

%時，應更換發(fā)芽床，以免霉菌因素影響測定結果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子，應及時去除并做好相應記載。DB

37/T

4485—20218.3.5 數(shù)據(jù)記錄按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實、不正常幼苗和死種子的鑒定標準進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，根據(jù)正常幼苗數(shù)，計算發(fā)芽率。8.4 破裂法8.4.1 試樣準備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒10

，消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍，拭去種子表面浮水后，備用。包衣種子可先柔性清洗表面包衣然后消毒，或無須消毒處理。8.4.2 試驗材料準備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用；發(fā)芽盒（盤）：將發(fā)芽盒（盤）清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風干備用。8.4.3 破裂測定15

℃±

20

0.5

℃。15

℃：置床

h±15

（5

d±15

）統(tǒng)計果種皮破裂種子數(shù)、胚根鞘破裂種子數(shù)和果種皮未破裂種子數(shù)。20

h±15

（3

d±

min裂種子數(shù)。2380

mm×

mm

×

mm×90

mm2

cm～2.5

1胚根鞘破裂率。75

%2

mm×

mm面，除去余液和紙間氣泡后，置種板輔助交錯置種，種孔朝向一致，紙邊距5

cm。種子置床后加蓋1張和果種皮未破裂種子數(shù)，計算果種皮破裂率、胚根鞘破裂率、果種皮胚根鞘破裂率和果種皮未破裂率。8.4.4 檢查管理2

d1問題及時進行相應維護。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持濕潤。發(fā)芽溫度檢查：發(fā)芽溫度保持在選定測定溫度（15

℃±

20

℃±0.5

℃）范圍內(nèi)。種子檢查：發(fā)霉的種子應及時取出洗滌去霉。當發(fā)霉種子超過5

%時，應更換發(fā)芽床，以免霉菌因素影響測定結果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子，應及時去除并做好相應記載。耐貯藏性等級85

65

30

29

DB

37/T

4485—20218.4.5數(shù)據(jù)記錄按照表1玉米種子活力測定破裂法鑒定標準對果種皮破裂、胚根鞘破裂和果種皮未破裂事件進行鑒胚根鞘破裂率、果種皮胚根鞘破裂率和果種皮未破裂率。表1 玉米種子活力測定破裂法鑒定標準表1 玉米種子活力測定破裂法鑒定標準9.1加速老化法分別計算加速老化測定各重復（粒種子）的發(fā)芽率，按照GB/T

8170，求得四次重復的平均值，老化發(fā)芽率與標準發(fā)芽率的比值記為加速老化相對發(fā)芽率。加速老化發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%標準發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%加速老化相對發(fā)芽率=（加速老化發(fā)芽率/標準發(fā)芽率）×

%反之則弱。依照加速老化相對發(fā)芽率大小可將玉米種子耐貯藏性分為耐（A）、中耐（B）、弱（C不耐（D）4個等級。玉米種子批耐貯藏性評價見表2。表2 玉米種子批耐貯藏性評價表2 玉米種子批耐貯藏性評價100GB/T

8170抗冷測定發(fā)芽率?？估錅y定發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%9.3冷浸法100GB/T

8170冷浸發(fā)芽率。冷浸發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%50

50

99989796959310911011891112871313841514811815782116732417672918563519514620DB

37/T

4485—20219.4破裂法分別計算破裂測定各重復（100粒種子）的果種皮破裂率（）、胚根鞘破裂率（CRP）、（果種皮胚根鞘破裂率（TRCRP）和果種皮未破裂率（TUP），按照GB/T

8170，求得四次重復的平均值，通過CRP和TRCRP指標評價種子活力。果種皮破裂率=(果種皮破裂種子數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100

%胚根鞘破裂率=(胚根鞘破裂種子數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100

%果種皮胚根鞘破裂率=[(果種皮破裂種子數(shù)+胚根鞘破裂種子數(shù))/供檢種子總數(shù)]×100

%果種皮未破裂率=(果種皮未破裂種子數(shù)/供檢種子粒數(shù))×

%9.5 重新試驗參考GB/T

，當試驗出現(xiàn)下列情況時，應重新試驗?；蚣埳伴g進行重新試驗。如有必要，應增加種子之間的距離。當發(fā)現(xiàn)實驗條件、幼苗鑒定或計數(shù)有差錯時，應采用同樣方法進行重新試驗。當一次試驗的四次重復間的差距超過表3最大容許差距時，應采用同樣的方法進行重新試驗。如果第二次結果與第一次結果相一致，即其差異不超過表4中所示的容許差距，則將兩次試驗的平均數(shù)填報在結果單上。如果第二次結果與第一次結果不相符合，其差異超過表4所示的容許差距，則采用同樣的方法進行第三次試驗，填報符合要求的結果平均數(shù)。表3表3 同一發(fā)芽試驗四次重復間的最大容許差距（

%顯著水平的兩尾測定）

50

50

989591108511771760255142DB

37/T

4485—2021表4同一或不同實驗室來自相同或不同送驗樣品間發(fā)芽試驗的容許差距（表4同一或不同實驗室來自相同或不同送驗樣品間發(fā)芽試驗的容許差距（2.5

%顯著水平的兩尾測定）10.1 加速老化法、抗冷法、冷浸法按照GB/T

的百分率總和必須為100（玉米種子活力測定種苗鑒定標準見表5修約進入最大值中。表5表5玉米種子活力測定種苗鑒定標準（簡化版）DB

37/T

4485—202110.2 破裂法參考GB/T

3543.4，對試樣的測定結果進行填報。果種皮破裂種子、胚根鞘破裂種子和果種皮未破100（玉米種子活力測定破裂法鑒定標準見表1中。11 結果報告11.1 種子活力測定結果報告應包含以下信息：——標題；——測定機構的名稱與地址，進行測定的地點；——測定證書或報告的唯一性標識和每頁及總頁數(shù)的標識；——委托方的名稱和地址；——被測定種子樣品的說明和明確標識；——測定種子樣品的特性和狀態(tài)；——測定種子樣品的接收和進行測定的日期；——對所采用測定方法的標識的明確說明；——涉及的扦樣程序；——對測定方法的任何偏離、增加或減少以及其他任何與特定的檢驗有關的信息；——測定、檢查和導出的結果，以及對結果失效的證明；——對估算的測定結果不確定度的說明；——對測定證書或報告內(nèi)容負責人員的簽字、職務或等效標識，以及簽發(fā)日期；——委托測定，作出本結果僅對所測定樣品有效的聲明；——未經(jīng)測定機構書面批準，不得復制測定證書或報告（完整復制除外）的聲明。11.2

A。其中任何一項結果為零，則將符號“0.0”填入該格中。同時還須填報采用的標準和發(fā)芽前處理和方法。11.3 玉米種子活力測定（破裂法）發(fā)芽試驗原始記錄表編寫格式可參考附錄

B。裂種子的百分率。假如其中任何一項結果為零，則將符號“同時還須填報采用的標準和發(fā)芽前處理和方法。11.4 玉米種子活力測定結果報告單編寫格式可參考附錄

C。同時還須填報采用的種子活力測定方法及發(fā)芽方式和條件。11