DB37-T 4484-2021 小麥種子活力測定 加速老化法、干旱脅迫法、鹽脅迫法

65.020.20CCS

B

2137 DB

37/T

4484—2021小麥種子活力測定 法、鹽脅迫法

vigour

test

by

accelerated

ageing

test,

test,

salt

stress

山東省市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB

37/T

4484—2021 前言

.................................................................................

II1

...............................................................................

12 規(guī)范性引用文件

.....................................................................

13 術(shù)語和定義

.........................................................................

14 縮略語

.............................................................................

25 測定原理

...........................................................................

25.1 加速老化法

.....................................................................

25.2 干旱脅迫法

.....................................................................

25.3 鹽脅迫法

.......................................................................

26 測定方案

...........................................................................

26.16.26.36.4

總則

...........................................................................

2樣品

...........................................................................

2測定平臺(tái)

.......................................................................

2測定條件

.......................................................................

27 試材和設(shè)備

.........................................................................

37.1 試材

...........................................................................

37.2 設(shè)備

...........................................................................

38 試驗(yàn)步驟

...........................................................................

38.1 加速老化法

.....................................................................

38.2 干旱脅迫法

.....................................................................

48.3 鹽脅迫法

.......................................................................

59 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

.......................................................................

69.19.29.39.4

加速老化法

.....................................................................

6干旱脅迫法

.....................................................................

7鹽脅迫法

.......................................................................

7重新試驗(yàn)

.......................................................................

810 結(jié)果計(jì)算和表示

....................................................................

911 結(jié)果報(bào)告

..........................................................................

9附錄

A（資料性） 小麥種子活力測定發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表..................................

11附錄

B（資料性） 小麥種子活力測定結(jié)果報(bào)告單..........................................

12參考文獻(xiàn)

.............................................................................

13DB

37/T

4484—2021 本文件按照GB/T

—《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實(shí)施。本文件由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)種植業(yè)分技術(shù)委員會(huì)歸口。IIDB

37/T

4484—2021 1 范圍本文件規(guī)定了小麥(Triticum

aestivum

種子活力測定干旱脅迫法、加速老化法、鹽脅迫法的測定原則、測定方案、測定程序和結(jié)果報(bào)告。本文件適用于冬小麥和春小麥品種的種子活力測定。2 規(guī)范性引用文件文件。GB/T

農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 扦樣GB/T

農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程

發(fā)芽試驗(yàn)GB/T

8170 數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示與判定GB/T

26462 種子發(fā)芽紙3術(shù)語和定義GB/T

界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1種子活力 seed

vigour在廣泛的田間條件下，決定種子迅速整齊出苗和長成正常幼苗潛在能力的總稱。3.2種子批 seed

同一來源、同一品種、同一年度、同一時(shí)期收獲和質(zhì)量基本一致、在規(guī)定數(shù)量之內(nèi)的種子。[來源：GB/T

3543.2—，3.3送驗(yàn)樣品 submitted

送到種子檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)、規(guī)定數(shù)量的樣品。[來源：GB/T

3543.2—，3.4試驗(yàn)樣品（簡稱“試樣”）

sample在實(shí)驗(yàn)室中從送驗(yàn)樣品中分出的部分樣品，供測定某一檢驗(yàn)項(xiàng)目之用。[來源：GB/T

3543.2—，3.5加速老化測定

ageing

test發(fā)芽率。3.6干旱脅迫測定drought

stress

testDB

37/T

4484—2021將試樣置于含高滲溶液的發(fā)芽床上進(jìn)行干旱脅迫發(fā)芽試驗(yàn)，定期統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。3.7鹽脅迫測定 salt

test將試樣置于含高鹽溶液發(fā)芽床上進(jìn)行鹽脅迫發(fā)芽試驗(yàn)，定期統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。4 縮略語下列縮略語適用于本文件。AAT:

加速老化測定（

Ageing

Test）DST:

干旱脅迫測定（

Stress

Test）SST:

鹽脅迫測定（Salt

Stress

Test）5 測定原理5.1 加速老化法因此，加速老化法能較好地預(yù)測田間出苗率和種子耐貯藏性。5.2 干旱脅迫法正常幼苗甚至喪失生活力。因此，干旱脅迫法能較好地預(yù)測田間出苗率。5.3 鹽脅迫法芽，而低活力種子則產(chǎn)生不正常幼苗甚至喪失生活力。因此，鹽脅迫法能較好地預(yù)測田間出苗情況。6 測定方案6.1 總則境發(fā)芽、數(shù)據(jù)分析的程序（干旱脅迫法、鹽脅迫法）進(jìn)行測定。按規(guī)定要求填報(bào)測定結(jié)果，測定報(bào)告應(yīng)注明測定方案所規(guī)定的條件。6.2 樣品送驗(yàn)樣品為小麥種子，重量應(yīng)不低于1

g。6.3 測定平臺(tái)人工氣候箱、光照培養(yǎng)箱、發(fā)芽室或其它能夠精準(zhǔn)控溫的發(fā)芽環(huán)境。6.4 測定條件DB

37/T

4484—2021種子活力測定應(yīng)在有利于正確實(shí)施測定的控制條件下進(jìn)行，包括但不限于下列條件：——種子檢驗(yàn)員具備熟悉所使用測定方法的知識(shí)和技能；——所有儀器與使用的技術(shù)相適應(yīng)，并已經(jīng)過定期維護(hù)、驗(yàn)證和校準(zhǔn)。7 試材和設(shè)備7.1試材7.1.1 老化盒：

mm×

mm×30

mm

等規(guī)格。7.1.2 尼龍網(wǎng)袋：150

mm×100

、400

mm×150

等規(guī)格。7.1.3 置種板：可輔助小麥種子置床，每次可平行或交錯(cuò)置種

7.1.4 數(shù)種板：可輔助數(shù)取一定數(shù)目的小麥種子。7.1.5 自封袋：

450

mm×

mm）等規(guī)格。7.1.6 發(fā)芽盒（盤）：120

mm×

mm×50

等規(guī)格。7.1.7 發(fā)芽紙：GB/T

26462，

mm×

mm、

mm×

mm

等規(guī)格。7.1.8試劑藥品：次氯酸鈉溶液、聚乙二醇

6000（Polyethylene

，）、氯化鈉（NaCl）等。7.1.9 其它：其它發(fā)芽裝置、溫濕度計(jì)、玻璃棒、三角瓶、鑷子、蒸餾水、標(biāo)簽紙、紗布、油性記號(hào)筆、酒精等。7.2設(shè)備7.2.1人工老化處理設(shè)備：種子老化箱等。7.2.2發(fā)芽設(shè)備：人工氣候箱、光照培養(yǎng)箱、發(fā)芽室、恒溫循環(huán)槽或其它能夠精準(zhǔn)控溫發(fā)芽的設(shè)備。7.2.3消毒干燥設(shè)備：高壓蒸汽滅菌鍋、電熱鼓風(fēng)干燥箱等。8 試驗(yàn)步驟8.1 加速老化法8.1.1 試樣準(zhǔn)備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒5

min3消毒，或無須消毒處理。8.1.2 試驗(yàn)材料準(zhǔn)備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用。發(fā)芽盒：將發(fā)芽盒清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風(fēng)干備用。8.1.3加速老化測定41

℃±0.3

98

%，加速老化處理72

h，取出，薄攤，回干（自然晾干或在不高于60

℃的條件下烘干），備用。2110

mm×

mm120

mm×120

mm×50

mm1

cm～1.5

cm。DB

37/T

4484—2021種子置床后，蓋上發(fā)芽盒蓋，貼好標(biāo)簽并標(biāo)注品種名稱、樣品編號(hào)、重復(fù)次數(shù)、置床時(shí)間等基本信息，后，放入人工氣候箱。按照GB/T

3543.4，20

℃±

℃標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。2110

mm×

mm120

mm×120

mm×50

mm1

cm～1.5

cm。1GB/T

，

0.5

8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。75

%2

mm×

mm紙邊距5

cm1關(guān)信息后，垂直放入人工氣候箱（紙卷種孔端朝下）。按照GB/T

3543.4，20

℃±0.5

℃標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。同時(shí)按照GB/T

3543.4，對(duì)未老化處理的試樣種子進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽測定。20

0.5

℃發(fā)芽8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。8.1.4 檢查管理36

h和發(fā)芽4

d分別檢查1次老化和發(fā)芽環(huán)境，若有問題及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。老化處理：溫度保持在41

℃±

℃范圍內(nèi)，相對(duì)濕度不低于98

%。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持濕潤。發(fā)芽溫度檢查：溫度保持在20

℃±

℃范圍內(nèi)。種子檢查：發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5

%時(shí)，應(yīng)更換發(fā)芽床，以免霉菌因素影響測定結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子，應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。8.1.5數(shù)據(jù)記錄按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，根據(jù)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。8.2干旱脅迫法8.2.1 試樣準(zhǔn)備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒5

min3或無須消毒處理。8.2.2試驗(yàn)材料準(zhǔn)備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用。發(fā)芽盒：將發(fā)芽盒清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風(fēng)干備用。配制夠量的15

%的PEG-6000溶質(zhì)150

g1

000

，備用。8.2.3 干旱脅迫測定DB

37/T

4484—2021采取紙上或紙間（蓋紙和卷紙）置床方式對(duì)小麥種子進(jìn)行干旱脅迫測定。2

mm×110

），疊放入發(fā)芽盒（

mm×

mm×50

mm）內(nèi)，加入PEG-60001

cm～1.5

cm，箱，20

0.5

℃發(fā)芽8

d（12

h光暗交替）統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。2

mm×110

），疊放入發(fā)芽盒（

mm×

mm×50

mm）內(nèi)，加入PEG-60001

cm～1.5

cm。種子置床后加蓋1張20

℃±

℃發(fā)芽8

d（

h苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。75

%2

mm×

mmPEG-60005

cm1張PEG-6000或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相關(guān)信息后，垂直放入人工氣候箱中（紙卷種孔端朝下），20

℃±0.5

℃發(fā)芽8

d（12

h光暗交替）統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。同時(shí)按照GB/T

3543.4，對(duì)試樣種子進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽測定。20

0.5

℃發(fā)芽8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。8.2.4 檢查管理4

d檢查1題及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持濕潤。發(fā)芽溫度檢查：溫度始終保持在20

℃±

℃范圍內(nèi)。種子檢查：發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5

%時(shí)，應(yīng)更換發(fā)芽床，以免霉菌因素影響測定結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子，應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。8.2.5 數(shù)據(jù)記錄按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，根據(jù)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。8.3 鹽脅迫法8.3.1 試樣準(zhǔn)備粒，4

%的次氯酸鈉溶液浸泡消毒5

min3或無須消毒處理。8.3.2試驗(yàn)材料準(zhǔn)備發(fā)芽紙：將發(fā)芽紙

1

℃高壓蒸汽滅菌20

后，烘干備用。發(fā)芽盒：將發(fā)芽盒清洗干凈后，用75

%的酒精溶液擦拭消毒，風(fēng)干備用。配制夠量的200

NaCl溶液。參考配制方法：稱取NaCl溶質(zhì)11.7

g，溶于蒸餾水中，定容至1

000

，備用。DB

37/T

4484—20218.3.3 鹽脅迫測定采取紙上或紙間（蓋紙和卷紙）置床方式對(duì)小麥種子進(jìn)行鹽脅迫測定。2110

mm×

mm

mm×120

mm

NaCl1～1.5

cm人工氣候箱，20

0.5

℃發(fā)芽8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。蓋紙發(fā)芽：取2張發(fā)芽紙（110

mm×

mm），疊放入發(fā)芽盒（

mm×120

mm×50

mm）內(nèi)，加入200

mmol/L

NaCl溶液，充分潤濕，用無菌紗布輕拭床面，除去余液和紙間氣泡后，置種板輔助置種，紙邊距1

cm～

cm1張NaCl20

0.5

℃發(fā)芽8

d（12

h光暗交替）統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。75

%2

mm×

mm在發(fā)芽紙一角較小區(qū)域標(biāo)識(shí)樣品信息（或備樣品信息防水條），用200

NaCl溶液充分潤濕，用5

cm置床后加蓋1張NaCl溶液潤濕的發(fā)芽紙，將紙床（或夾樣品信息防水條）疏松卷起，紙卷兩端整平，并20

℃發(fā)芽8

d（

h苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。同時(shí)按照GB/T

，對(duì)試樣種子進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽測定。20

0.5

℃發(fā)芽8

d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。8.3.4 檢查管理4

d1問題進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。發(fā)芽床檢查：發(fā)芽床始終保持濕潤。發(fā)芽溫度檢查：溫度始終保持在20

℃±

℃范圍。種子檢查：發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5

%時(shí)，應(yīng)更換發(fā)芽床，以免霉菌因素影響測定結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子，應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。8.3.5 數(shù)據(jù)記錄按照GB/T

3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，根據(jù)正常幼苗數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率。9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理9.1 加速老化法分別計(jì)算加速老化測定各重復(fù)（粒種子）的發(fā)芽率，按照GB/T

8170，求得四次重復(fù)的平均值，老化發(fā)芽率與標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率的比值記為加速老化相對(duì)發(fā)芽率。加速老化發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%加速老化相對(duì)發(fā)芽率=（加速老化發(fā)芽率/標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率）×

%90

70

50

30

29

85

65

30

29

100

DB

37/T

4484—2021反之則弱。由于小麥種子有后熟特性，可能存在少量加速老化相對(duì)發(fā)芽率大于

%的現(xiàn)象。當(dāng)加速老化相對(duì)發(fā)芽率大于100

%85

%A）、中耐（B）、弱（C）、不耐（D）、需后熟處理（E）5個(gè)等級(jí)。小麥種子批耐貯藏性評(píng)價(jià)見表1。表1 小麥種子批耐貯藏性評(píng)價(jià)表1 小麥種子批耐貯藏性評(píng)價(jià)100GB/T

8170標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率的比值記為干旱脅迫相對(duì)發(fā)芽率。干旱脅迫發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%干旱脅迫相對(duì)發(fā)芽率=（干旱脅迫發(fā)芽率/標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率）×

%照干旱脅迫相對(duì)發(fā)芽率大小可將小麥種子發(fā)芽耐旱或抗旱性分為極強(qiáng)（A）、強(qiáng)（B）、中等（C）、弱（D）、極弱（E）5個(gè)等級(jí)。小麥種子批發(fā)芽耐旱或抗旱性評(píng)價(jià)見表2。表2 小麥種子批發(fā)芽耐旱或抗旱性評(píng)價(jià)表2 小麥種子批發(fā)芽耐旱或抗旱性評(píng)價(jià)100GB/T

8170發(fā)芽率的比值記為鹽脅迫相對(duì)發(fā)芽率。鹽脅迫發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×100

%50

50

9998979695931091101189111287131384151481181578211680

60

40

20

19

DB

37/T

4484—2021標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率=（正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù)）×

%鹽脅迫相對(duì)發(fā)芽率=（鹽脅迫發(fā)芽率/標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率）×100

%AB（C）、弱（D）、極弱（E）5個(gè)等級(jí)。小麥種子批發(fā)芽耐鹽或抗鹽性評(píng)價(jià)見表3。表3 小麥種子批發(fā)芽耐鹽或抗鹽性評(píng)價(jià)表3 小麥種子批發(fā)芽耐鹽或抗鹽性評(píng)價(jià)參考GB/T

，當(dāng)試驗(yàn)出現(xiàn)下列情況時(shí)，應(yīng)重新試驗(yàn)?；蚣埳伴g進(jìn)行重新試驗(yàn)。如有必要，應(yīng)增加種子之間的距離。當(dāng)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件、幼苗鑒定或計(jì)數(shù)有差錯(cuò)時(shí)，應(yīng)采用同樣方法進(jìn)行重新試驗(yàn)。當(dāng)一次試驗(yàn)的四次重復(fù)間的差距超過表4最大容許差距時(shí)，應(yīng)采用同樣的方法進(jìn)行重新試驗(yàn)。如果第二次結(jié)果與第一次結(jié)果相一致，即其差異不超過表5中所示的容許差距，則將兩次試驗(yàn)的平均數(shù)填報(bào)在結(jié)果單上。如果第二次結(jié)果與第一次結(jié)果不相符合，其差異超過表5所示的容許差距，則采用同樣的方法進(jìn)行第三次試驗(yàn)，填報(bào)符合要求的結(jié)果平均數(shù)。表4表4同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距（

%顯著水平的兩尾測定）50

50

98959110851177176025514250

50

672918563519514620DB

37/T

4484—2021表

4同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距（表

4同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距（

%顯著水平的兩尾測定）（續(xù)）表5同一或不同實(shí)驗(yàn)室來自相同或不同送驗(yàn)樣品間發(fā)芽試驗(yàn)的容許差距（2.5

%顯著水平的兩尾測定）按照GB/T

3543.4，對(duì)試樣的測定結(jié)果進(jìn)行填報(bào)。正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗百分率總和必須為，平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù)，修約進(jìn)入最大值中。11 結(jié)果報(bào)告11.1種子活力測定結(jié)果報(bào)告應(yīng)包含以下信息：——標(biāo)題；——測定機(jī)構(gòu)的名稱與地址，進(jìn)行測定的地點(diǎn)；——測定證書或報(bào)告的唯一性標(biāo)識(shí)和每頁及總頁數(shù)的標(biāo)識(shí)；——委托方的名稱和地址；——被測定種子樣品的說明和明確標(biāo)識(shí)；——測定種子樣品的特性和狀態(tài)；——測定種子樣品的接收和進(jìn)行測定的日期；——對(duì)所采用測定方法的標(biāo)識(shí)的明確說明；——涉及的扦樣程序；——對(duì)測定方法的任何偏離、增加或減少以及其他任何與特定的檢驗(yàn)有關(guān)的信息；——測定、檢查和導(dǎo)出的結(jié)果，以及對(duì)結(jié)果失效的證明；——對(duì)估算的測定結(jié)果不確定度的說明；——對(duì)測定證書或報(bào)告內(nèi)容負(fù)責(zé)人員的簽字、職務(wù)或等效標(biāo)識(shí)，以及簽