基因工程和細(xì)胞工程

明師教育-明師教育-明師教育-明師教育-時(shí)間：45分鐘 分值：100分一、選擇題(每題5分，共50分)再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是(雙選)()BPCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列C．PCRDNA聚合酶解析PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的PCR反應(yīng)在高溫條件下答 藥物，首先要做的是()ADNABDNACP1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽解析由題中信息“Pl的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物的脫氧核苷酸序列(基因)C。答 ()B答B(yǎng)答 是()Dα－萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑解析本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。在愈傷組織中，因植物細(xì)胞αB項(xiàng)錯(cuò)誤。答 示。下列敘述錯(cuò)誤的是()答 答 AT解析①是從已免疫的小鼠脾臟D項(xiàng)正確。答 芥酸會(huì)降低菜籽的品質(zhì)。油菜有兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(Hh，G和據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是)D．F1減數(shù)分裂時(shí)，HG基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會(huì) 類激素來誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化，故A項(xiàng)正確；③過程是利用植物花藥離體培養(yǎng)獲得④由其獲得的植株為單倍體植株，故B項(xiàng)正確；圖中的三種途徑中，利用花粉培H、h和G、g分別是兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因，故兩者是位于非同源染色體上的，在減數(shù)分裂時(shí)，HGD答案B，而列操作正確的是()mRNADNA，再擴(kuò)增基因BBBCDNABDB答 可以利用mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因后再進(jìn)一步擴(kuò)增，A項(xiàng)正；因?yàn)殚_藍(lán)色花的矮牽牛基因B的序列是已知的，所以該目的基因宜采用化學(xué)方獲取，B項(xiàng)錯(cuò)目的基因必須與運(yùn)載體結(jié)合后才能導(dǎo)入受體細(xì)胞，答 單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲XB淋巴細(xì)胞③將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)④篩X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞⑥從小鼠腹水中提取抗體⑦利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合解析B答 () 答 二、非選擇題(50分(TMV)TMVTMV具有抗感染性。煙草是TMV的煙草，主要流程如下圖所示?？茖W(xué)家首先從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取抗TMV基因轉(zhuǎn)錄的RNA，然后合成目 基因，重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細(xì)胞的方法

答 (1)逆轉(zhuǎn)卡那霉素抗 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(1)由圖可知，①表示逆轉(zhuǎn)錄(或反轉(zhuǎn)錄)。(2)由圖示⑤培養(yǎng)基中含有卡答 (1)逆轉(zhuǎn)卡那霉素抗 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(4)抗原—抗體雜交過程①所需的酶 DNAPCR擴(kuò)增，得到兩親1～4PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1～4中一定是雜種植株的有 對(duì)雜種植株進(jìn) 接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株解析 本題考查植物細(xì)胞工程染色體變異的實(shí)驗(yàn)鑒定以及高抗性的雜種植株的篩選等相關(guān)知識(shí)。(1)去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理(2)葉肉細(xì)胞含有葉綠體因此通過G誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體以此作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用，因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，使原生質(zhì)體處于等滲溶液中，以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)要判斷染色體變異的類型，應(yīng)剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)1、24既有1、24一定為雜種植株。(6) 保持原生質(zhì)體完整 細(xì)胞雙親(或花椰菜和黑芥 解 漂1、2、13(18HSV－1HSV－1。在制備抗HSV－1－－l蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗 體內(nèi)產(chǎn)生 反應(yīng)，再從小鼠 中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B 中使其增殖，再 中提取、純化獲得通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV－1蛋白，其原 解析(1)制備單克隆抗體時(shí)，需要先給小鼠注射特定抗原(HSV－1蛋白)，HSV－1BB淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)，最終獲答案(1)HSV－1蛋白體液免疫(其他合理答案也可)脾臟(其他合理答案也可)骨髓瘤無限增殖且產(chǎn)生專一抗體(其他合理答案也可)腹腔純度高特異性強(qiáng)(其他合理答案也可MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為(1)(1) 若用限制酶SmaⅠ完全切割圖①中DNA片段，產(chǎn)生的末端是 若圖①中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)?種不同長(zhǎng)度的DNA片段。若將圖②中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重 分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中的目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原 答 (1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核(2) 537bp、790bp、661 (1)在一條脫氧核苷酸鏈上相鄰兩個(gè)脫氧核苷酸之間通過3,5-磷酸二DNA片段會(huì)形成三個(gè)小的DNA片段，按切割位點(diǎn)計(jì)算分別是：534bp＋3bp＝537bp；796bp－3bp－3bp＝790bp；658bp＋3bp＝661bp。(3)雜合子基因型為Dd。用SmaⅠ切割基因D，會(huì)形成537bp、790bp、661bp三種類型。題圖①中虛線方框內(nèi)C—G被T—A替換，失去了一個(gè)酶切位點(diǎn)，則會(huì)被切割成534bp＋796bp－3bp＝1327bp，和658bp＋3bp＝661bp。所以一共會(huì)得到4種類型的片段(4)如果要獲得完整的目的基因可用BamHⅠ和MboⅠ切割但是MboⅠ會(huì)破壞抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，質(zhì)粒會(huì)失去標(biāo)記基因，無法篩