第七章 甾體類化合物

第七章甾體類化合物(Steroids)

第一節(jié)概述

甾體類化合物(steroids)是廣泛存在于天然界中的一類結(jié)構(gòu)中具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾體母核天然化學成分。

一、甾體化合物的結(jié)構(gòu)與分類

天然甾體成分C17位均有側(cè)鏈，根據(jù)側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的不同分為：其中強心苷及甾體皂苷研究得比較成熟,藥用價值高。名稱A/BB/CC/DC17-取代基植物甾醇順、反反反8～10個碳的脂肪烴膽汁酸順反反戊酸C21甾醇反反順C2H5昆蟲變態(tài)激素順反反8～10個碳的脂肪烴強心苷順、反反順不飽和內(nèi)酯環(huán)蟾毒配基順、反反反六元不飽和內(nèi)酯環(huán)甾體皂苷順、反反反含氧螺雜環(huán)甾體生物堿二、甾體化合物的生物合成途徑

甾體化合物在植物體內(nèi)由甲戊二羥酸途徑合成：

甲戊二羥酸角鯊烯（squalene）2，3-氧化角鯊烯（2，3-oxidosqualene）羊毛甾醇（三萜）+CH3COOH

羊毛甾醇

甾醇類C21甾類[O]

甾體皂苷元

甲型強心苷元乙型強心苷元

+C3

三、甾體類化合物的顏色反響甾體類化合物在無水條件下用酸處理，經(jīng)加熱后能產(chǎn)生各種顏色反響。這類顏色反響的機理較復雜，1976年日本化學家建議此類反響的機理是甾類化合物與酸〔硫酸或Lewis酸〕作用，經(jīng)脫水、縮合、氧化等過程生成陽碳離子鹽有色物。3,5-膽甾二烯(Ⅰ)

3,3′-雙（2，4）膽甾二烯（Ⅱ）1.Liebermann-Burchard反響也可將樣品溶于冰乙酸，加硫酸-乙酐〔1:20〕試劑產(chǎn)生同樣的反響。2.Salkowski反響樣品（氯仿）+硫酸－乙酐（1：20）紅→紫→藍→綠→污綠

（最后褪色）3.Tschugaev反響4.Rosen-Heimer反響5.Kahlenberg反響第二節(jié)強心苷類化合物〔Cardiacglycosides〕強心苷〔Cardiacglycosides〕天然界存在的一類對心臟具有顯著生理活性的甾體苷類。從化學角度下定義，那么強心苷可定義為由強心苷元〔Cardiacaglycones〕與糖縮合而成的苷稱作強心苷。一、定義例：對強心苷的化學研究始于1808年，1869年別離出洋地黃的結(jié)晶，次年定出其結(jié)構(gòu)，至70年代分出570多種強心苷，140多種苷元。這類成分主要分布于夾竹桃科、玄參科、百合科……等十幾個科，以玄參科和夾竹桃科分布最多。動物中有些也有強心成分(如蟾蜍中的蟾酥)但不屬強心苷類。二、結(jié)構(gòu)類型

〔一〕苷元1、分類強心苷的苷元為甾體衍生物，其特點為在甾體C17側(cè)鏈上連有一個不飽和的內(nèi)酯環(huán)，按不飽和內(nèi)酯環(huán)的大小可將所有強心苷元分為兩大類結(jié)構(gòu)

甲型強心苷元〔發(fā)現(xiàn)最多〕五元不飽和內(nèi)酯環(huán)乙型強心苷元〔發(fā)現(xiàn)少〕六元不飽和內(nèi)酯環(huán)強心甾〔不包括紅線〕強心甾烯〔包括紅線〕其五元不飽和內(nèi)酯環(huán)可稱為：Δαβ-γ-內(nèi)酯〔Δ20(22)-五元內(nèi)酯環(huán)〕蟾蜍〔酥〕甾或海蔥甾〔不包括紅線〕蟾蜍〔酥〕甾二烯或海蔥甾二烯〔包括紅線〕其六元不飽和內(nèi)酯環(huán)可稱為：Δαβ,γδ－雙烯－δ-內(nèi)酯〔Δ20；22-六元內(nèi)酯環(huán)〕2、結(jié)構(gòu)特點順式（5β-H）多A/B環(huán)反式（5α-H）少B/C環(huán)反式C/D環(huán)順式（14β-H）（強心苷元及C21甾的C/D環(huán)多為順式）

〔1〕甾核稠合方式：〔2〕三個側(cè)鏈：C10側(cè)鏈：多為－CH3,也有－CH2OH，－CHO，－COOH〔氧化產(chǎn)物〕，β－構(gòu)型。C13側(cè)鏈：為－CH3，β－構(gòu)型。

多為β－構(gòu)型C17側(cè)鏈：不飽和內(nèi)酯環(huán)

極少為α－構(gòu)型

（命名時標以17β-H，稱“17β-H某苷”）

〔3〕取代基及其位置：-OH：

多為β－構(gòu)型C3位：一般都有，常連糖成苷

少為α－構(gòu)型(命名時冠以表（epi－）字)C14位：多為-OH，均為β－構(gòu)型。

此外：1β，2α，5〔α或β〕，11〔α或β〕，12〔α或β〕，15β，16β位有時也有－OH取代。16β－OH有時與HCOOH，CH3COOH，異戊酸成酯。C=C：一般位于4〔5〕，5〔6〕，16〔17〕位。－O－〔環(huán)氧基〕：多位于7,8β，8,14β，11,12β位。C=O：多位于11，12，19位。

〔4〕命名：俗名法:按植物來源定為某某苷元。系統(tǒng)法命名法：按苷元分類，寫出某某苷元，然后再標明取代基的名稱，位置〔構(gòu)型〕。例如：

〔二〕糖組成強心苷的糖約20多種單糖，與其它苷類不大一樣，除常見的象glc這樣的羥基糖外，還有許多去氧糖，例如：6-去氧糖:

6－去氧糖甲醚：

2，6-二去氧糖〔α-去氧糖〕2，6-二去氧糖甲醚〔α-去氧糖〕：〔三〕成苷方式：按成苷糖的類型，糖與苷元之間，糖與糖之間的連接方式，可將強心苷的成苷方式分為三種類型：

I型：苷元-（2，6-去氧糖）x－（D-葡萄糖）y多II型：苷元-（6-去氧糖）x－（D-葡萄糖）yIII型：苷元-（D-葡萄糖）x例:

I型II型：III型：三、構(gòu)效關系

1．苷元結(jié)構(gòu)與強心作用的關系：

〔1〕C17所連不飽和內(nèi)酯環(huán)必須是β－構(gòu)型〔17α－H〕，不飽和內(nèi)酯環(huán)不能發(fā)生開環(huán)，氧化或雙鍵移位，否那么強心作用降低或消失?！?〕C/D環(huán)反式稠合〔C14-OH或H處于α－構(gòu)型〕，C14-OH發(fā)生脫水〔C8，C15〕，強心作用降低或消失?！?〕C10-CH3氧化成-CH2OH,-CHO,-COOH,強心作用或毒性稍有增加。2．糖對強心作用的影響：

甲型強心苷的毒性：

苷元<單糖苷>二糖苷>三糖苷單糖苷因水溶性低于二糖及三糖苷，而親脂性強，與心肌細胞膜的類脂質(zhì)親合力強，故毒性大。

苷元相同的單糖苷，糖越接近心肌正常代謝產(chǎn)物，那么毒性越強：葡萄糖苷＞甲氧基糖苷＞6-去氧糖苷＞2，6-去氧糖苷乙型強心苷：苷元>單糖>苷雙糖苷四、性質(zhì)和顏色反響：(一)性狀：多為無定形粉末或無色結(jié)晶，味苦〔C17位側(cè)鏈為α構(gòu)型者無苦味且不具旋光性〕。對粘膜具有刺激性。(二)溶解性：苷：可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等極性溶劑；微溶于乙酸乙酯、含醇氯仿；

不溶于乙醚、苯、石油醚等極性小的溶劑；

弱親酯性苷：略溶于氯仿-乙醇〔2：1〕強親酯性苷：略溶于乙酸乙酯、含水氯仿、氯仿-乙醇〔3：1〕苷元：易溶于乙酸乙酯、氯仿等弱極性溶劑；難溶于水、丙酮等極性溶劑；在分析苷解釋某些強心苷的溶解性使，還必須注意以下幾點：

1、苷元相同，非去氧糖多，水溶解性大例如：原生苷＞次級苷；2、分子中羥基多〔非締合羥基〕，水溶性大例如：烏本苷＞洋地黃苷；3.分子中羥基發(fā)生締合，水溶性減小例如：毛花洋地黃苷C＞毛花洋地黃苷B原因：

〔三〕脫水反響在酸性條件下強心苷元往往會脫水生成脫水苷元〔3～5％酸〕，特別是強心苷元的假設3-OH或16-OH氧化成－C=O，促進5,14-OH脫水烯酮結(jié)構(gòu)烯酮結(jié)構(gòu)〔四〕水解反響：強心苷的水解方法及水解產(chǎn)物也較多，按大類分，可將水解方法分為二大類：1．酸水解：

〔1〕溫和酸水解法：〔主要用于I型強心苷〕用0.02～0.05mol/LHCl或硫酸由于條件溫和，苷元不會發(fā)生脫水反響，并僅選擇性地水解α-去氧糖苷鍵，因此常得到α-去氧糖的單糖,連有glc雙糖，三糖等低聚糖。例：

〔2〕強烈酸水解：一般多用3～5％的酸，長時間加熱或同時加壓，I、Ⅱ、Ⅲ型強心苷均可水解。

〔3〕氯化氫-丙酮法〔Mannich和Siewert法〕1942年

Mannich和Siewert法主要用于Ⅱ型苷中的單糖苷，Ⅱ型苷中的多糖苷難溶于丙酮可用丁酮，環(huán)己酮或丙酮——二氧六環(huán)混合溶劑代替丙酮溶劑。此法不能適用所有的Ⅱ型苷，如黃夾次苷乙用此法水解只能得到縮水苷元。2．酶水解法：〔1〕與苷共存與植物體的酶：僅能水解葡萄糖，而不能水解去氧糖，而且對葡萄糖的水解選擇性也很高例如:〔2〕其它生物中的水解酶：

另外，無論是哪一種酶，水解不具乙?；腔盏乃俣?gt;具有乙?；腔铡Ｒ倚蛷娦能毡燃仔蛙找姿?。

3．堿水解法：

〔1〕?；乃猓撼Ｓ盟怩；膲A有：

NaHCO3、K2CO3:脫α-去氧糖上的?；釩a(OH)2、Ba(OH)2:α-去氧糖，α-羥基糖，苷元上?；?/p>

NaOH堿性太強，使內(nèi)酯開環(huán)故不常用。

〔2〕內(nèi)酯環(huán)的水解：但在強心苷的醇液內(nèi)參加NaOH或KOH，內(nèi)酯開環(huán)后常發(fā)生異構(gòu)化反響，不再有可逆的酸化環(huán)合反響了例：

開鏈型異構(gòu)化苷乙型強心苷堿性條件下C21－H轉(zhuǎn)移至C22，雙鍵轉(zhuǎn)移至20（21）皂化開環(huán)開鏈型異構(gòu)化苷C14－OH質(zhì)子對C21進行親電加成內(nèi)脂型異構(gòu)化苷甲型強心苷

4.乙酰解法將強心苷溶于醋酐,參加ZnCl2催化裂解苷鍵的方法稱乙酰解。例如：從洋地黃屬植物purpurea〔紫花洋地黃種子〕中提取的兩種強心苷吉托司廷和新吉托司廷中的葡萄糖的連接方式確定下來，將此化合物進行乙酰解：(五)強心苷的顏色反響一類成分顏色常常與其特有的結(jié)構(gòu)和基團有關，強心苷的結(jié)構(gòu)有甾核，不飽和內(nèi)酯環(huán)，去氧糖，因此強心苷的顏色反響很多根據(jù)反響作用的部位可分為:甾體母核

α,β-不飽和內(nèi)酯環(huán)顏色反應

α-去氧糖

〔1〕.醋酐-濃H2SO4反響(Liebermann-Burchard)反響1、甾核的反響分子中雙鍵越多，反響越快?！?〕Tshugaev反響

B環(huán)有雙鍵作用更快。(3)H3PO4反響(4)Salkowski反響不同的強心苷UV不同：洋地黃毒苷元類的苷：黃橙色熒光羥基洋地黃毒苷元類的苷：亮蘭綠色熒光異羥基洋地黃毒苷元類的苷：灰蘭色熒光(6)三氯化銻或五氯化銻反響例：洋地黃毒苷0.75γ〔μg〕，紙上，可見：紅蘭灰UV：紅羥基洋地黃毒苷0.75γ，紙上，可見：紫灰UV：蘋果綠乙型強心苷類也顯色以上甾核反響在1976年前無人解釋機理，1976年日本人(YoshihisaKurasawa,chem.pharm.bull.1976,24,487)建議此類反響立即為：例:膽甾醇與三氯化銻作用:2、C17位上不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反響乙型強心苷在堿性醇溶液中，不能產(chǎn)生活性亞甲基，無此類反響.〔1〕Legal反響(亞硝酰鐵氰化鈉試劑反響)假設將反響改在pH11的緩沖液中進行，顯色穩(wěn)定，并在470nm處有最大吸收〔kedde改進此法〕，此法機理可能是：(2)間二硝基苯試劑〔Raymond反響〕機理：〔3〕3，5-二硝基苯甲酸試劑反響(Kedde反響)可用于強心苷PC和TLC顯色劑，顯色后褪色。

〔4〕堿性苦味酸試劑反響(Baljet反響)3、α-去氧糖的反響α-去氧糖的反響于1895年就有人建立〔keller〕，可對此類大局部的反響機理的解釋目前還沒有?！?〕Keller-Kiliani〔K-K〕反響此法為keller和kiliani于1895～1896年建立，后來J.vonEww和T.Reichstein于1948年對K-K反響進行了改進，稱：Eww和Reichstein改進法〔modifiedprocedure〕試劑A：5％Fe2(SO)31ml,冰醋酸99ml試劑B：5％Fe2(SO)31ml,濃硫酸99ml

方法：此反響是游離α-去氧糖的特征反響，在此反響條件下能水解處游離α-去氧糖的強心苷都是陽性。α-去氧糖連有glc等羥基糖的二或三糖苷是陰性〔因難水解出α-去氧糖〕用此K-K反響為陰性，不一定沒有α-去氧糖存在?！?〕呫(tie)噸氫醇〔Xanthydrol〕反響連α-去氧糖的分子都是呈陽性，靈敏,可用于定量。

機理：(4)對硝基苯肼反響凡連α-去氧糖的分子都顯陽性

(5)對-二甲氨基苯甲醛反響凡連α-去氧糖的分子都顯陽性

對-二甲氨基苯甲醛試劑:1%對二甲氨基苯甲醛的乙醇溶液4ml，加濃鹽酸1ml機理:可能由于α-去氧糖經(jīng)鹽酸的催化作用后分子重排，再與對-二甲氨基苯甲醛縮合顯色。

五、提取別離無論提取別離哪一種成分，我們都要考慮“兩個分開〞的問題，即把所要的成分與不要的成分〔雜質(zhì)〕分開,把這一類成分中的各個單體分開，同時還要注意所要成分不能發(fā)生任何結(jié)構(gòu)上的變化。因此在設計提取別離方案時常常要考慮“雜質(zhì)〞，“所要成分的混合程度〞和“成分的穩(wěn)定性〞這三個因素的影響。提取別離強心苷也是這樣，要考慮這三個影響因素。雜質(zhì):多為糖類、皂苷、色素、鞣質(zhì)、油脂等成分，量大，水溶性雜質(zhì)〔皂苷還可增加脂溶性強心苷在水中的溶解度，乳化、助溶作用〕溶解度與強心苷相似，純化困難。強心苷多為中性，故不能用黃酮〔如蘆丁〕那樣的堿溶酸沉法純化去雜質(zhì)。混合程度：多為幾個到幾十個單體苷混合共存，結(jié)構(gòu)性質(zhì)相似，可借別離利用的性質(zhì)少?！菜釅A性，特殊官能團不可能利用，只有溶解度即極性可能利用〕別離困難穩(wěn)定性差：易酶解，遇酸堿易產(chǎn)生脫水，異構(gòu)化，水解反響，提取別離時必須謹慎〔保酶，殺酶，酸堿處理要溫和〕提取別離的影響因素：〔一〕提取主要利用強心苷的溶解度進行。〔溶于水，甲醇，乙醇，含醇的氯仿〕最常用甲醇或70%～80%乙醇提?。涸蘸痛紊找灿杏煤嫉腃HCl3提?。捍紊?、脂溶性苷提原生苷：先殺酶，再提取。提次生苷：先酶解，再提取?！捕臣兓?〕溶劑法多用于去油脂(種子)和葉綠素(葉)這樣一些脂溶性雜質(zhì),方法為:此法大量生產(chǎn)多采用。2、鉛鹽法皂苷多用于去鞣質(zhì)水溶性雜質(zhì)

酸性樹脂水溶性色素3、吸附法

4、提取純化參考流程含強心苷植物由于含雜質(zhì)較多，因此純化處理往往不是一步就可到達目的的，常要用幾步綜合處理才能去掉大局部雜質(zhì)，常見流程如下：經(jīng)此流程拿到得粗總苷，除其中某一個化合物的含量特別高，可用重結(jié)晶的方法得到單體之外，一般必須經(jīng)進一步的別離方能得到單體?！踩硠e離：1．萃取法：

利用各單體苷在兩相溶劑中的分配系數(shù)不同進行別離。例：毛花洋地黃總苷中苷A、B、C的別離：水MeOHCHCl3苷A不溶〔1：16000〕1：201：225苷B幾不溶1：201：550苷C不溶〔1：18500〕1：201：1750苷C在CHCl3中溶解度最小2.逆流分配法〔CCD法〕實際上是一種相對運動的兩相萃取分配，可以將分配系數(shù)很相近的化合物分開。

例:黃花夾竹桃總苷中苷中A、B、C的別離3.色譜法

經(jīng)典方法不能別離的強心苷，可用色譜法別離。吸附或分配色譜均可用與別離強心苷。吸附色譜用于別離苷元或者親酯性苷〔單糖苷或次級苷〕。固定相：硅膠，氧化鋁移動相：苯-甲醇，氯仿-甲醇，乙酸乙酯-甲醇等。分配色譜均用于別離弱親酯性苷固定相：硅膠，硅藻土味單體的正相色譜移動相：氯仿-甲醇-水，乙酸乙酯-甲醇-水或用液滴逆流色譜法〔DCCC法〕，多用氯仿-甲醇-水〔故此法太昂貴，我們國內(nèi)少用?！?四)提取別離實例：1.去乙酰毛花洋地黃毒苷C〔丙〕〔西地藍〕的提制：去乙酰毛花洋地黃毒苷C，即為臨床運用的“西地藍〞。無色晶體，mp256℃～268℃〔分解〕［α］20D+12.2°〔75％乙醇〕溶解性：水甲醇乙醇氯仿乙醚〔1：500〕〔1：200〕〔1：2500〕微溶幾不溶去乙酰毛花洋地黃毒苷C是由毛花洋地黃〔DigitalislanataEhrh〕〔玄參科〕的葉中提制，其過程可分為三大步：“總苷的提取〞，“苷C的別離〞，“苷C去乙?；??！?〕總苷的提取毛花洋地黃葉中含強心苷多大30多種，由五種苷元組成，共有5種原生苷〔毛花洋地黃苷A、B、C、D〕，其他均為次生苷，結(jié)構(gòu)如下：除強心苷外還有雜質(zhì)：葉綠素、樹脂、皂苷、蛋白質(zhì)、色素、糖以及酶要從這么多的雜質(zhì)中將總苷質(zhì)量好本錢低地大規(guī)模生產(chǎn)提出來難度較大，因此解放前我國強心苷都靠進口，解放后50年代才提取出國產(chǎn)的洋地黃毒苷?？傑仗崛」に嚕骸?〕別離苷C粗總苷的極性為:苷C＞苷B＞苷A

由上表可見苷C在氯仿中溶解度遠低于苷A、苷B，據(jù)此可得苷C的別離工藝：〔3〕去乙?；ㄑ蟮攸S苷C也用強心作用，但要做成針劑那么必須去乙?；黾铀苄?。2、黃花夾竹桃中強心苷的提取別離：

黃夾苷A,B為原生苷，可直接提取，而其次生苷必須先酶解再提苷。

〔1〕黃夾苷A與B的提取別離：(2)強心靈的生產(chǎn)工藝流程：

單乙酰黃夾次苷B強心靈黃夾次苷A黃夾次苷B

強心靈效價比原生苷高5倍。白色混晶，無臭，味極苦，刺激粘膜。易溶甲醇，乙醇，氯仿，丙酮，微溶乙醚，水，不溶苯，石油醚。六、鑒定方法：

〔一〕色譜法：主要是TLC和PC，多用分配色譜：

〔二〕波譜特征：1.UV：強心苷中能有UV吸收的主要是內(nèi)酯環(huán)：

甲型強心苷：λmaxΔ16(17)與Δαβ共軛，270，強吸收Δ14(15),16(17)，330，強吸收孤立－C=O〔C11,C12,C19等〕，300，小峰成肩峰乙型強心苷：λmax：295-300nm，logε約3.93Δ22〔23〕λmax出現(xiàn)紅移。孤立－C=O吸收在此區(qū)域出峰，而被掩蓋。2、IR：

也主要是不飽和內(nèi)酯環(huán)上羰基的吸收。

甲型強心苷元：〔溶劑CS2〕υc=o:1800-1700cm-1兩個吸收峰1780非正常峰可因測定溶劑〔介質(zhì)〕的極性增大而消失。例：去葡萄糖桂竹香毒苷：υmax(氯仿)：1780cm-1，1740cm-1，改用KBr壓片1780cm-1峰消失乙型強心苷元：在1800～1700cm－1處：υc=o也有二個吸收峰，但因是Δαβ，γδ所至。因此-C=O的鍵力常數(shù)進一步降低，一般移動40cm-1。如嚏根草苷元：υmax(氯仿)：1718cm-1〔正?！?，1740cm-1〔非正?！辰璐丝膳c甲型苷區(qū)別3、NMR:

1H-NMR:強心苷的1H-NMR由于甾核的脂肪H太多，一般難以全部解析的〔δ0.9～2.6左間位置堆積如“干草堆〞〕，主要苷元上的幾個特征質(zhì)子的信號:(2)C10-CH3及C13-CH3

C10-CH3

δ:1.00左右，各出一個單峰，δ值與甾核上的C5、C14構(gòu)型有關：C13-CH3A/B環(huán)反式：

19-CH3:δ:0.792低18-CH3:δ:0.692高

19-CH3δ:0.767高18-CH3

δ:0.992低

19-CH3:δ:0.925低18-CH3:δ:0.692高

19-CH3δ:0.900高18-CH3

δ:0.992低A/B環(huán)順式：

天然強心苷C/D均為順式〔14β-H〕,18-CH3較19-CH3低場出信號〔3〕C10-CHO:δ10.0-9.50S(4)C10-CH2-O-CO-CH3:-CH2-:δ4.50-4.00qJ=12Hz〔ABq型〕因C10為*C,-CH2-的二個H同時-OOC-CH3體積大，旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生位阻，因此磁不等價。(5)C16-2H及C17-H：C16-2H：無含氧取代2.5-2.0m

C17-H:無含氧取代2.8m或ddJ＝9.5Hz鄰位雙鍵的吸電作用(6)C3-H:δ3.90m成苷低移(7)糖的質(zhì)子信號常見糖的特征同其它苷類化合物。去氧糖特征為：①6-去氧糖C5上的甲基呈雙峰〔J=6.5Hz〕或多重峰處于高場δ1.0～1.5之間。②α-去氧糖的端基質(zhì)子與α-羥基糖不同，呈四重峰〔dd峰〕，C2上的兩個質(zhì)子處于高場區(qū)，通過去偶實驗或1H-1H相關譜可以相互確認歸屬。③含有甲氧基的糖，其甲氧基以單峰出現(xiàn)在δ3.50左右。第三節(jié)甾體皂苷一、概述1.定義是一類由螺甾烷類化合物〔spirostane)與糖結(jié)合的寡糖苷。2.分布主要分布于薯蕷科、百合科、玄參科、龍舌蘭科等植物中。3.生物活性防治心腦血管疾病抗腫瘤降血糖免疫調(diào)節(jié)地奧心血康膠囊——含8種從黃山藥中提取的甾體皂苷，對冠心病、心絞痛療效顯著。心腦舒通——由蒺藜果實中提取的總甾體皂苷，具有擴冠、改善冠脈循環(huán)作用。甾體皂苷I和甾體皂苷IV，對P388和KB細胞有顯著抑制作用。云南白藥---重樓二、化學結(jié)構(gòu)1.甾體皂苷元的根本骨架甾體皂苷元為螺甾烷(spirostane)的衍生物2.結(jié)構(gòu)特點苷元：27個碳原子A，B，C，D，E，F(xiàn)六個環(huán)

A/B順、反，B/C反，C/D反C22

是E環(huán)和F環(huán)共有碳原子，以螺縮酮的形式相連E，F(xiàn)環(huán)中三個手性C:*C20、*C22、*C25甾體皂苷元可同時擁有多個羥基，且C3羥基多為β-取向。甾體皂苷元可能含有雙鍵和羰基，一般羰基處于C12位，雙鍵處在C5-C6間

3.甾體皂苷元的分類

根據(jù)C25的構(gòu)型和F環(huán)的環(huán)合狀態(tài)不同分類(1)螺甾烷醇類(spirostanols)C25為S構(gòu)型(2)異螺甾烷醇類(isospirostanols)C25為R構(gòu)型(3)呋甾烷醇類(furostanols)F環(huán)為開鏈衍生物(4)變形螺甾烷醇類(pseudo-spirostanols)

F環(huán)為五元四氫呋喃環(huán)衍生物(1)螺甾烷醇類(spirostanols)C25為S構(gòu)型C25甲基在環(huán)平面上的直立鍵時為β型，25S型〔25-L，neo型〕劍麻皂苷元(2)異螺甾烷醇類(isospirostanols)C25為R構(gòu)型C25甲基在環(huán)平面下的平伏鍵時為α型，25R〔25-D，iso型〕薯蕷皂苷元(3)呋甾烷醇類(furostanols)F環(huán)為開鏈衍生物薤(xie)白苷丁F環(huán)裂解的甾體皂苷的顯色反響對Ehrlich試劑〔對鹽酸二甲氨基苯甲醛試劑〕顯紅色反響，對茴香醛〔Anisaldehyde〕試劑顯黃色閉環(huán)的甾體皂苷只茴香醛對試劑顯色，對E試劑不顯色呋甾烷醇皂苷與螺甾烷醇皂苷比較皂苷類型E試劑A試劑溶血與膽甾醇反應抗菌呋甾烷醇紅色黃色

無

不反應

無螺甾烷醇

無黃色

有形成復合物

有(4)變形螺甾烷醇類(pseudo-spirostanols)F環(huán)為五元四氫呋喃環(huán)異紐替皂苷元紐替皂苷元三、甾體皂苷的理化性質(zhì)1.性狀

苷元：較好晶形。皂苷：多為無定形粉末，味苦而辛辣，對人體粘膜有強烈的刺激性；皂苷多具旋光性，多為左旋。

2.溶解性皂苷一般可溶于水，易溶于熱水、稀醇，幾乎不溶或難溶于石油醚、苯、乙醚等親脂性溶劑。3.外表活性及溶血作用甾體皂苷多具有發(fā)泡性，其水溶液振蕩后產(chǎn)生持久性泡沫。甾體皂苷具有溶血作用?！镒ⅲ篎環(huán)裂解的雙糖鏈皂苷無溶血作用。4.甾體皂苷可與甾醇形成分子復合物甾體皂苷的乙醇溶液可被甾醇〔常用膽甾醇〕沉淀。除膽甾醇外，凡有C3位β－OH的甾醇都可與皂苷生成難溶性分子復合物。分子復合物用乙醚回流，膽甾醇溶，而皂苷不溶〔可別離〕三萜皂苷與甾醇形成的分子復合物不及甾體皂苷穩(wěn)定?！铮篎環(huán)裂解的雙糖鏈皂苷不能和膽甾醇形成復合物。5.顏色反響甾體皂苷與醋酐－濃硫酸的顏色反響，最后出現(xiàn)綠色。三萜皂苷三氯醋酸加熱到100℃顯色甾體皂苷加熱到60℃就顯色。6.其他能與堿式醋酸鉛產(chǎn)生沉淀與三萜類比較相似，親水性稍弱1、提取方法2種酸水解苷元有機溶解提取

總皂苷提取酸水解苷元有機溶解提取四、甾體皂苷的提取與別離2、別離方法〔1〕膽甾醇沉淀法粗薯蕷皂苷元—溶于乙醇—飽和膽甾醇水溶液—沉淀完全—過濾—水洗、乙醇洗、乙醚洗沉淀—乙醚回流提取—殘留物〔即較純薯蕷皂苷元〕?！?〕色譜法硅膠柱色譜反相硅膠高速逆流色譜五、甾體皂苷元的波譜特征〔一〕UV(nm)孤立雙鍵205-225孤立羰基285，-不飽和酮240共軛雙鍵235〔二〕IR甾體皂苷元含有螺縮酮結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈，在IR中幾乎都能顯示出四個特征吸收帶，A帶最強

980cm-1(A)920cm-1(B)900cm-1(C)860cm-1(D)★注意：F環(huán)開裂的甾體類無此特征吸收。在25S皂苷或皂苷元中，吸收強度B帶>C帶。在25R皂苷或皂苷元中，吸收強度B帶<C帶。

可區(qū)別C25位二種立體異構(gòu)體?！踩?H-NMR

在高場區(qū)有四個甲基的特征峰18，19-CH3：1.0(S)；19-CH3>18-CH321，27-CH3：1.0(d)；21-CH3>27-CH3假設C25位有OH取代，那么27-CH3為單峰。第四節(jié)其他甾類化合物一、C21甾體化合物〔一〕定義C21甾是一類含有21個碳原子的甾體衍生物，常以孕甾烷為母體結(jié)構(gòu)。孕甾烷〔二〕結(jié)構(gòu)特點A/B反；B/C反；C/D順。C5、C6位大多有雙鍵；C20位可能