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第十一章生物性檢材個(gè)人識(shí)別

PERSONALIDENTIFICATION第一節(jié)概述第二節(jié)血痕檢驗(yàn)第三節(jié)精斑檢驗(yàn)第四節(jié)其他生物性檢材的檢驗(yàn)主講:泰山醫(yī)學(xué)院吳開柱第五節(jié)毛發(fā)檢驗(yàn)第六節(jié)骨骼檢驗(yàn)第七節(jié)牙齒檢驗(yàn)第八節(jié)其他組織檢驗(yàn)第九節(jié)個(gè)人識(shí)別的結(jié)果評(píng)估第一節(jié)概述分析生物性檢材以揭示個(gè)體身份的工作稱個(gè)人識(shí)別。生物性檢材:人體組織與器官,體液、分泌物、排泄物及由它們組成的生物性斑痕。一、生物性檢材意義為破案提供線索和證據(jù)。兇殺、搶劫、毆斗、強(qiáng)奸、盜竊

————財(cái)、色、仇交通事故多人死亡:安葬、撫恤無(wú)名尸、毀損碎尸、年幼失散兒童認(rèn)親、遺產(chǎn)繼承人的身份確定等。二、生物性檢材的特點(diǎn):

因環(huán)境條件的作用,使它具有某些不確定性,如是否為血,有時(shí)需要化驗(yàn)后才知道。三、分析生物性檢材的策略:

由簡(jiǎn)單到復(fù)雜。

四、生物性檢材的取材過程1.檢材的尋找:多在現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn),也可在罪犯、受害人身上發(fā)現(xiàn)。血痕:地面、兇器等處,地板縫、甲縫,魯米諾噴射假設(shè)為血痕那么發(fā)出熒光。精斑:衣褲、被褥、床單、衛(wèi)生紙,腹部、陰部、大腿等處。紫外線照射,精斑發(fā)出銀白色帶淡紫暈的熒光。毛發(fā):強(qiáng)奸案中內(nèi)衣、外陰、大腿間和床上等處。唾液:香煙頭、口香糖、牙簽、咬痕和飲料容器上。皮膚及其他組織碎片:甲縫內(nèi)、車輪和車底盤等處。

2.生物性檢材的收集:

首先要拍照、錄象、繪圖、測(cè)量和記錄其原始狀態(tài)。血液:尸體血液冷藏4℃,或紗布浸后涼干保存。整塊地剪、挖、刮取,盡量原樣。體液:

女尸,棉簽或紗布提取直腸、口腔或陰道分泌物?;铙w,咽拭子涼干后入信封。毛發(fā),用鑷子夾取。皮屑、碎骨、血肉和煙頭,帶手套用鑷子。

3.包裝和運(yùn)送:

盡早盡快,低溫或涼干。按檢材的性質(zhì)和特點(diǎn),用紙袋、紗布、玻璃瓶等分別包裝。注明名稱、來(lái)源、數(shù)量、采集日期等。附送對(duì)照標(biāo)本,血、毛發(fā)等。委托書:送檢機(jī)關(guān),送檢物品清單,案情介紹,目的和要求,發(fā)文日期,單位及聯(lián)系人。5.檢驗(yàn)程序和要求根據(jù)委托書驗(yàn)收檢材指定不同的檢驗(yàn)方案和步驟采取有效措施防止污染最后提交鑒定書,鑒定書由緒言〔送檢單位、日期、目的、案情摘要、檢材、送檢日期〕、檢驗(yàn)方法和結(jié)果、分析說(shuō)明和結(jié)論等。最后由二名以上鑒定人簽名,鑒定單位蓋章。剩余檢材應(yīng)妥善保管,或退還委托單位。第二節(jié)血痕檢驗(yàn)〔BLOODSTAINS〕血痕:血液在體外枯燥后形成的斑痕。要求是否是血。是人血還是動(dòng)物血個(gè)人識(shí)別〔遺傳標(biāo)記〕其他檢驗(yàn)程序①肉眼觀②預(yù)實(shí)驗(yàn)③確證實(shí)驗(yàn)④種屬鑒定⑤遺傳標(biāo)記測(cè)定性別鑒定⑥出血部位、出血量、血痕陳舊度等推斷。

預(yù)試驗(yàn)陰性不是血痕或被壞陽(yáng)性可能是血痕確證試驗(yàn)〔有時(shí)可省〕肉眼檢驗(yàn)陰性不是血痕或量太少或被破壞

陽(yáng)性肯定是血痕種屬試驗(yàn)陰性不是人血或量太少或被破壞

陽(yáng)性肯定是人血痕各種動(dòng)物血鑒定個(gè)人識(shí)別非遺傳標(biāo)記測(cè)定出血部位出血時(shí)間出血量出血者年齡出血性別一人血或多人血遺傳標(biāo)記測(cè)定紅細(xì)胞血型血清型紅細(xì)胞酶型HLADNA多態(tài)性ABOMNPRhHpGcTfGmPGMEsDGLOIEAP

ABDRDQ

DNA指紋VNTRSTRRAPD血痕檢驗(yàn)〔BLOODSTAINS〕

血痕Hb或正鐵血紅素過氧化物酶活性過氧化氫水新生態(tài)氧無(wú)色化學(xué)物質(zhì)有色物質(zhì)氧化血痕預(yù)試驗(yàn)的根本原理:冰醋酸1滴3%過氧化氫1滴1-2分種不出現(xiàn)蘭色反響立即出現(xiàn)蘭色反響陽(yáng)性不出現(xiàn)陰性三、確證實(shí)驗(yàn):陽(yáng)性示HB或其衍生物。又名高山氏結(jié)晶實(shí)驗(yàn)血色原結(jié)晶實(shí)驗(yàn)〔hemochromogencrystaltest〕原理:HB在堿性溶液中分解為正鐵HB和變形珠蛋白,在復(fù)原劑作用下,正鐵血紅素復(fù)原為血紅素,后者與變形珠蛋白或其他含氮化合物結(jié)合,形成血色原結(jié)晶。方法:在檢材上參加1-2滴高山氏試劑,加微熱,室溫放涼后鏡檢,假設(shè)出現(xiàn)櫻桃紅色菊花狀、星狀或針狀結(jié)晶,陽(yáng)性。

四、種屬鑒定:確定是否為人血。免疫學(xué)方法環(huán)狀沉淀反響〔ringprecipitation〕:血痕浸出液與抗人血紅蛋白血清和抗人血清蛋白血清混合,在界面出現(xiàn)沉淀環(huán)。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn):血痕浸出液與辣根過氧化物酶標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體混合,低物顯色為陽(yáng)性反響。分子生物學(xué)方法:針對(duì)人類基因組中具有種屬特異性的DNA序列〔Alu序列〕,采用能特異擴(kuò)增的異物,通過PCR方法對(duì)血痕DNA擴(kuò)增,根據(jù)有無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物判斷是否是人血。種屬鑒定環(huán)狀沉淀反響沉淀反響免疫擴(kuò)散試驗(yàn)血清學(xué)方法對(duì)流電泳抗球蛋白消耗試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)方法生化方法血紅蛋白等電聚焦五、個(gè)人識(shí)別1.基因表達(dá)產(chǎn)物的遺傳標(biāo)記:血型測(cè)定〔吸附實(shí)驗(yàn)〕:血清與血凝塊混合一段時(shí)間后再測(cè)血清抗體的量。假設(shè)僅抗A減少—A型血,僅抗B減少—B型血,抗A、B均減少—AB型血,抗A、B均不減少—O型血。DNA多態(tài)性分析:

經(jīng)PCR擴(kuò)增特定人類STR基因座,產(chǎn)物與人類等位基因分型標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)照即可。性別鑒定:

PCR擴(kuò)增人類牙釉質(zhì)蛋白的基因X-Y染色體同源特異片段抗人血紅蛋白環(huán)狀沉淀反響(1、2號(hào)管陽(yáng)性.3號(hào)管陰性,4號(hào)管空白)1)紅細(xì)胞凝集反響陽(yáng)性(十)2)紅細(xì)胞凝集反響陰性(一)第三節(jié)精斑檢驗(yàn)(SEMINALSTAIN)一、肉眼檢查:灰白色〔深底〕,黃白色〔淺底〕新鮮精斑有特殊臭味,有硬感,在紫外線下,精斑中心銀白色熒光,周緣紫蘭色。二、預(yù)實(shí)驗(yàn)〔磷酸苯二鈉實(shí)驗(yàn)〕:查酸性磷酸酶,靈敏度高。原理:精液中的酸性磷酸酶,分解磷酸苯二鈉,產(chǎn)生萘酚,后者經(jīng)鐵氰化鉀作用與氨基安替比林結(jié)合,產(chǎn)生紅色醌類化合物。精斑預(yù)試驗(yàn)1.紫外線檢查原理:紫外線黃素銀白色熒光400-500nm方法及結(jié)果2.Acp實(shí)驗(yàn)原理

Acp

磷酸苯二鈉萘酚+氨基安替比林結(jié)果鐵氫化鉀紅色醌類床單上的精斑酸性磷酸酶試驗(yàn)(由左至右為:強(qiáng)陽(yáng)性、陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性三、確證實(shí)驗(yàn)精子檢出法:一個(gè)完整典型精子、幾個(gè)典型精子頭部,可確診。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn):精斑中P30抗原與抗-P30血清反響出現(xiàn)沉淀。四、種屬鑒定:P30抗原僅在人中存在。

精蟲〔美藍(lán)—品紅染色×400)五、精斑的個(gè)人識(shí)別ABO血型的檢測(cè)〔中和實(shí)驗(yàn)〕原理:精液、唾液與血液在同一個(gè)體具有相同的遺傳標(biāo)記,故血痕檢測(cè)的各種個(gè)人識(shí)別方法可用于精斑檢測(cè)。DNA分析:特點(diǎn):精子細(xì)胞核含二硫基交聯(lián)蛋白組成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),可抵抗去污劑〔SDS〕、蛋白酶K的水解作用,但在復(fù)原劑DTT的作用下,將-S-S-復(fù)原成-SH,方消化核蛋白釋放DNA。DNA分析:混合斑〔精子、陰道上皮細(xì)胞SDS、蛋白酶K完整精子DNA〔陰道上皮細(xì)胞〕DDT二次消化SDS、蛋白酶DNA〔精子〕第五節(jié)毛發(fā)的檢驗(yàn)毛發(fā)是重要的檢材:易脫落,留在現(xiàn)場(chǎng),毛發(fā)成分角蛋白理化性質(zhì)穩(wěn)定,可長(zhǎng)久保存,肇事車輛上常有受害者毛發(fā)可個(gè)人識(shí)別要求:是否毛發(fā),是人毛或動(dòng)物毛,是人體何部位毛發(fā),自然脫落或暴力拔脫,個(gè)人識(shí)別。1.與其他纖維的鑒別:肉眼觀:毛根、毛干、毛尖顯微結(jié)構(gòu):毛小皮〔形成特征紋理〕、皮質(zhì)、髓質(zhì)燃燒后灰塵、氣味〔3%-5%硫,硬角蛋白〕2.人毛與動(dòng)物毛的鑒別:人毛髓質(zhì)不興旺,斷續(xù)、缺如,較狹窄而皮質(zhì)較寬,毛小皮鱗片薄短呈細(xì)波紋形橫紋;動(dòng)物毛髓質(zhì)興旺,呈連續(xù)狀,較寬但皮質(zhì)較窄,毛小皮鱗片厚粗呈粗鋸齒狀。3.部位的鑒定:最長(zhǎng)的是頭發(fā)和胡須,較粗的是胡須,平均直徑0.15mm。頭發(fā)呈圓形或橢圓形,陰毛、腋毛呈長(zhǎng)橢圓形,胡須呈不規(guī)那么的三角形。人頭發(fā)毛干及小皮花紋長(zhǎng)發(fā)辮毛尖呈掃帚狀燙發(fā)所致無(wú)干內(nèi)空泡牛毛小皮花紋綿羊毛小皮花紋豬毛小皮花紋貓毛干貓毛小皮花紋四、脫落和損傷:自然脫落者,毛根部枯燥萎縮,呈棍棒狀,內(nèi)腔下方呈閉縮狀,人工拔脫者,毛根部濕潤(rùn),內(nèi)腔下方呈開放狀,同時(shí)毛根部周圍附著毛囊殘片,未角化的毛根含巰基,可與亞硝基氰化鈉溶液作用而成紅色,自然脫落者無(wú)此反響。毛發(fā)損傷可推斷兇器:銳利刀刃切斷毛發(fā),斷端整齊、銳利推剪切斷毛發(fā),斷端不規(guī)那么凹凸鈍器打擊毛干壓榨呈扁平狀高熱使毛發(fā)變色、失去光澤、角質(zhì)膨脹,出現(xiàn)空泡、蜷縮、炭化1)自然脫落之頭發(fā)毛囊(2)暴力拔下之頭發(fā)毛囊自然脫落及暴力拔下的毛囊特征緩慢拉斷之毛發(fā)斷端鈍器打擊致毛干局部變形砍斷之毛發(fā)斷端剪斷之毛發(fā)斷端剪后四周的毛端人陰毛毛干(橢圓形〕五、個(gè)人識(shí)別形態(tài)學(xué):黑種人頭發(fā),密螺旋狀、黑色黃種人頭發(fā),直筒狀白種人頭發(fā),波浪狀,色淺淡儀器分析:通過中子活化分析測(cè)定毛發(fā)中的微量元素含量。男性氯、硫、鐵高于女性,而鈣、鎂、鋅低于女性??捎糜诙疚锖糠治龇肿由飳W(xué)方法:對(duì)于有毛囊的毛發(fā),可行PCR為根底的DNA分析,而僅有毛干無(wú)毛囊的檢材,那么行線立體DNA〔mtDNA〕序列分析。mtDNA對(duì)陳舊骨、牙、嚴(yán)重腐敗或燃燒的殘骸,檢出率比核DNA高。人類mtDNA序列,又稱Anderson序列或劍橋序列。第六節(jié)骨骼檢驗(yàn)要求:是否是骨骼是人骨骼還是動(dòng)物骨骼是一人骨或多人骨人骨的個(gè)人識(shí)別〔遺傳標(biāo)記〕死亡時(shí)間的推測(cè)和死亡時(shí)間的鑒定。二、種屬鑒定:大體形態(tài)上,人骨:形態(tài)規(guī)那么,同心圓骨板排列整齊,骨單位之間界線清楚。動(dòng)物骨:形態(tài)不規(guī)那么,同心圓骨板排列不整齊,骨單位之間界線不清楚。還可用DNA分析或抗人血清作沉淀反映來(lái)區(qū)別人或動(dòng)物三、一人骨或多人骨

主要根據(jù)骨骼的解剖學(xué)結(jié)構(gòu)、定位、數(shù)目、排列及各骨的連接吻合情況和有無(wú)重復(fù)骨等進(jìn)行鑒定。細(xì)小骨片難以判定時(shí),可以通過DNA分析加以區(qū)別。四、個(gè)人識(shí)別〔一〕形態(tài)觀察測(cè)量方法:人骨的性別鑒定,以骨盆最為明顯,其次是顱骨。男性骨盆狹小而高,骨質(zhì)較重,入口縱經(jīng)大于橫經(jīng),出口狹小,盆腔漏斗狀,恥骨角小于90度,髂翼位置垂直;女性骨盆寬大而矮,骨質(zhì)較輕,入口縱經(jīng)小于橫經(jīng),出口寬大,盆腔圓桶狀,恥骨角大于90度,髂翼位置水平。男性眉弓明顯突起,外表多有小孔。額結(jié)節(jié)不明顯,有上眉間窩,枕外隆凸粗大,乳突大。女性眉弓突起不明顯,外表幾無(wú)小孔。額結(jié)節(jié)明顯,無(wú)上眉間窩,枕外隆凸較小,乳突小。人骨的年齡測(cè)定:主要根據(jù)四肢骨骨化中心的時(shí)間和骨骺的愈合程度。從骨骼推算身高:全身骨骼的高度再加上5cm軟組織厚度,即為死者的身高?!睵201公式〕〔二〕圖象分析方法面貌復(fù)原,又稱復(fù)容法〔facialconstruction〕面貌雕塑法顱骨側(cè)面描記法顏面影象復(fù)原形態(tài)圖法顱像重合:顱骨照片與生前照片重疊,觀測(cè)審定線和標(biāo)志點(diǎn)是否完全重合一致。〔三〕分子生物學(xué)方法:PCR或mtDNA識(shí)別個(gè)體。第七節(jié)牙齒檢驗(yàn)要求:是否為人牙推斷年齡牙齒的個(gè)人生活特征個(gè)人識(shí)別一、種屬鑒定:人類的食物較軟,咀嚼器官退化,齒槽緊縮,牙齒小,尖齒明顯縮小,齒弓呈弧形食肉類動(dòng)物尖牙興旺,食草類動(dòng)物側(cè)切牙和磨牙興旺。二、年齡推斷:20歲以下,根據(jù)牙齒發(fā)育與萌出的情況推斷:嬰幼兒月齡=乳牙萌出數(shù)+6

掉牙始于6-7歲,換牙結(jié)束14歲左右第三磨牙萌出,男26-28歲,女22-25歲20歲以后,根據(jù)牙齒的磨耗程度和結(jié)構(gòu)的改變等判定年齡:牙齒磨耗度分為六級(jí)。

Ⅰ度:牙尖有磨損;Ⅱ度:牙尖磨平;

Ⅲ度:牙本質(zhì)點(diǎn)狀暴露,牙尖大部磨去;

Ⅳ度:牙本質(zhì)片狀暴露;

Ⅴ度:牙本質(zhì)全部暴露;Ⅵ度:髓腔暴露。個(gè)體生活

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