水解酪蛋白肽粉（酶解酪蛋白肽粉）

1本標準規(guī)定了即水解酪蛋白肽粉的定義和分類、技術(shù)要求、生產(chǎn)加工衛(wèi)生要求、試驗方法、檢驗規(guī)程、標簽、包裝、運輸、貯存、附錄A和附錄B等要求。本標準適用于以酪蛋白為為原料，經(jīng)蛋白酶酶解、滅酶、殺菌、過濾（沉淀）、噴霧干燥（干燥）、包裝等工藝加工得到的水解酪蛋白肽粉（酶解蛋白肽粉），主要作為食品工業(yè)配料使用。。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2760食品安全國家標準食品添加劑使用標準GB4789.2食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定GB4789.3食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數(shù)GB4789.4食品安全國家標準食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗GB4789.10食品安全國家標準食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB4789.15食品安全國家標準食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數(shù)GB5009.3食品安全國家標準食品中水分的測定GB5009.4食品安全國家標準食品中灰分的測定GB5009.5食品安全國家標準食品中蛋白質(zhì)的測定GB5009.12食品安全國家標準食品中鉛的測定GB7718食品安全國家標準預(yù)包裝食品標簽通則GB14881食品安全國家標準食品生產(chǎn)通用衛(wèi)生規(guī)范GB1886.174食品安全國家標準食品添加劑食品工業(yè)用酶制劑GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB28050食品安全國家標準預(yù)包裝食品營養(yǎng)標簽通則GB31638食品安全國家標準酪蛋白JJF1070定量包裝商品凈含量計量檢驗規(guī)則國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令〔2005〕第75號3定義和分類下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1水解酪蛋白肽粉以酪蛋白為為原料，經(jīng)蛋白酶酶解、滅酶、殺菌、過濾（沉淀）、噴霧干燥（干燥）、包裝等工藝加工得到的水解酪蛋白肽粉（酶解蛋白肽粉）4技術(shù)要求4.1原輔料要求4.1.1酪蛋白：應(yīng)符合GB31638的規(guī)定。24.1.2蛋白酶：應(yīng)符合GB1886.174的規(guī)定。4.1.3其他原料和輔料應(yīng)符合相應(yīng)標準和有關(guān)規(guī)定。4.2感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定表1感官要求項目要求外觀具有產(chǎn)品品種應(yīng)有的外觀特征色澤具有產(chǎn)品品種應(yīng)有的色澤滋味及氣味具有產(chǎn)品品種應(yīng)有的滋味及氣味，無異味性狀具有產(chǎn)品品種應(yīng)有的性狀，無結(jié)塊雜質(zhì)無肉眼可見的外來雜質(zhì)4.3理化指標應(yīng)符合表2的規(guī)定表2理化指標項目指標水分/%≤7灰分/%≤粗蛋白（以干基計）含量/%≥肽含量/%≥活性肽（LCSMT-1+LCSMT-2）含量/%≥5鉛（以Pb計）/（mg/kg）≤0.34.4微生物指標應(yīng)符合表3的規(guī)定表3微生物指標項目采樣方案及限量ncmM大菌落總數(shù)/CFU/g5250000大腸菌群/CFU/g52霉菌/CFU/g≤沙門氏菌/25g500-金黃色葡萄球菌/CFU/g51備注1.樣品的采樣及處理按GB4789.1執(zhí)行；2.n為同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品數(shù)量；c為最大可允許超過m值的樣品數(shù)；m為微生物指標可接受水平的限量值；M為微生物指標的最高安全限量值。4.5食品添加劑要求食品添加劑的品種和使用量應(yīng)符合GB2760的要求。4.6凈含量要求應(yīng)符合國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令〔2005〕第75號《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》的規(guī)定。35生產(chǎn)加工衛(wèi)生要求生產(chǎn)加工過程的衛(wèi)生要求符合GB14881的規(guī)定。6試驗方法6.1感官檢驗取約5g被測樣品于潔凈容器中，置于明亮處，迎光觀察其色澤及雜質(zhì)；在室溫下，嗅其氣味，品嘗其滋味。6.2理化指標檢驗按GB5009.3規(guī)定的方法測定。6.2.2灰分按GB5009.4規(guī)定的方法測定。6.2.3粗蛋白按GB5009.5規(guī)定的方法測定。6.2.4肽含量按附錄A規(guī)定的方法測定。6.2.5活性肽（LCSMT-1+LCSMT-2）含量按附錄B規(guī)定的方法測定。6.2.6鉛按GB5009.12規(guī)定檢測方法測定。6.3微生物指標檢驗6.3.1菌落總數(shù)按GB4789.2第二法規(guī)定的檢測方法測定。6.3.2大腸菌群按GB4789.3規(guī)定的方法測定。6.3.3霉菌按GB4789.15規(guī)定的方法測定。6.3.4沙門氏菌按GB4789.4規(guī)定的方法測定。6.3.5金黃色葡萄球菌按GB4789.10中第二法規(guī)定的方法測定。6.4凈含量檢驗按JJF1070規(guī)定的方法測定。7檢驗規(guī)程7.1原輔料入庫檢驗原輔料必須經(jīng)企業(yè)質(zhì)檢部門按要求進行驗收，合格后方可入庫使用。7.2組批同一生產(chǎn)日期、同一條生產(chǎn)線生產(chǎn)的同一品種的產(chǎn)品為一批。7.3抽樣在成品庫內(nèi)從每批產(chǎn)品隨機抽取12個樣品，6個用于檢驗，6個用于留樣備用。47.4出廠檢驗7.4.1產(chǎn)品出廠前對產(chǎn)品進行檢驗，檢驗結(jié)果符合本標準要求的產(chǎn)品方可出廠。7.4.2感官要求、凈含量、水分、灰分、粗蛋白、菌落總數(shù)、大腸菌群為每批必檢項目。7.5型式檢驗7.5.1型式檢驗應(yīng)不少于每半年進行一次，發(fā)生下列情況之一時亦應(yīng)進行型式檢驗：a.新產(chǎn)品試制定型鑒定時；b.更換主要設(shè)備時；c.停產(chǎn)三個月或以上，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；d.出廠檢驗與上次型式檢驗有較大差異時；e.食品安全監(jiān)督檢驗機構(gòu)提出要求時。7.5.2型式檢驗項目包括標準中4.2、4.3、4.4、4.6規(guī)定的全部項目。7.6判定規(guī)則7.6.1檢驗結(jié)果全部符合本標準要求，則判定該批產(chǎn)品合格。7.6.2檢驗結(jié)果微生物限量不符合本標準要求，則判定該批產(chǎn)品不合格，且不得復(fù)檢。7.6.3檢驗結(jié)果中除微生物限量外的其他指標不符合本標準要求時，應(yīng)重新按7.3抽樣方案加倍取樣復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果全部符合要求時，做合格評論。如復(fù)檢仍有指標不符合本標準要求時，則整批產(chǎn)品不合格。8標簽、包裝、運輸和貯存8.1標簽8.1.1標簽應(yīng)符合GB7718，GB28050的規(guī)定。8.2包裝8.2.1包裝材料和容器應(yīng)符合相關(guān)標準的要求。8.3運輸和貯存8.3.1產(chǎn)品運輸過程中避免日曬、雨淋、重壓，產(chǎn)品應(yīng)在陰涼及清潔、避光、干燥、通風、無蟲害、無鼠害的倉庫內(nèi)貯存，不應(yīng)與有毒、有害、有異味、易揮發(fā)、易腐蝕的物品混裝貯存和運輸。5附錄A肽含量的測定方法A1原理調(diào)酪蛋白的等電點，除去高分子蛋白，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)水解物可溶于溶液中（其中包含肽及游離氨基酸）。樣品經(jīng)酸化后，濾液中的蛋白質(zhì)含量減去游離氨基酸含量即為肽含量。A2試劑實驗用水應(yīng)符合GB/T6682中二級用水的規(guī)格，使用試劑除特殊規(guī)定外，均為分析純。A.2.1三氯乙酸：150g/LaA.2.2硫酸銅(CuSO4·5H2O)。A.2.3硫酸鉀。A.2.4硫酸：密度為1.8419g/L。A.2.5酸溶液：20g/L。A.2.6氫氧化鈉溶液：400g/L。A.2.7鹽酸：優(yōu)級純。A.2.8硫酸標準滴定溶液[c(1/2H2SO4)=0.0500mol/L]或鹽酸標準滴定溶液[c(HCl)＝0.0500mol/L]。A.2.9混合指示液：1份1g/L甲基紅乙醇溶液與5份1g/L溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合?；?份1g/L甲基紅乙醇溶液與1份1g/L亞甲基藍乙醇溶液臨用時混合。A.2.10混合氨基酸標準液：0.0025mol/L。A.2.11pH2.2的檸檬酸鈉緩沖液：稱取19.6g檸檬酸鈉(Na3C6H5O7·2H2O)，加人16.5mL濃鹽酸并加水稀釋到1000mL，用濃鹽酸或500g/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至2.2。A.2.12pH3.3的檸檬酸鈉緩沖液：稱取19.6g檸檬酸鈉，加人12mL濃鹽酸并加水稀釋到1000mL，用濃鹽酸或500g/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至3.3。A.2.13pH4.0的檸檬酸鈉緩沖液：稱取19.6g檸檬酸鈉，加人9mL濃鹽酸并加水稀釋到1000mL，用濃鹽酸或500g/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至4.0。A.2.14pH6.4的檸檬酸鈉緩沖液：稱取19.6g檸檬酸鈉和46.8g氯化鈉(優(yōu)級純)，加水溶解并稀釋到1000mL，用濃鹽酸或500g/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.4。A.2.15pH5.2的乙酸鋰溶液：稱取氫氧化鋰(LiOH·H2O)168g，加人冰乙酸(優(yōu)級純)279mL，加水稀釋到1000mL，用濃鹽酸或500g/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.2。A.2.16茚三酮溶液：取150mL二甲基亞砜(C2H6OS)和50mL乙酸鋰溶液，加人4g水合茚三酮6(C9H4O3·H2O)和0.12g還原茚三酮(C18H10O6·2H2O)攪拌至完全溶解。操作步驟A.3.1前處理方法準確稱取樣品1.000g（精確至0.001g加入50mL水使其完全溶解，調(diào)pH至4.6，5000r/min離心10min，上清液作為備用液。A.3.2蛋白質(zhì)量含量測定將A.3.1得到的上清液，按照GB/T22492附錄B.4.1.2~B.4.1.6測定蛋白質(zhì)含量。A.3.3游離氨基酸含量的測定將A.3.1得到的上清液，吸取按照GB/T22492附錄B.4.2測定游離氨基酸含量。A.4結(jié)果計算試樣中多肽含量按式（B.1）計算：式中：X——試樣中多肽的含量，單位為克每百克(g/l00g)；X1——試樣中上清液中蛋白質(zhì)的含量，單位為克每百克(g/l00g)；X2——試樣中游離氨基酸的含量，單位為克每百克(g/l00g)；A.5重復(fù)性在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過兩次測定結(jié)果算術(shù)平均值的12%。740020004002000附錄B活性肽含量的測定方法B1檢測條件純度大于95%標準品（合成）：LCSMT-1、LCSMT-2；乙腈、TFA（HPLC級，公司）；實驗用水為超純水；樣品為牛乳經(jīng)過分離噴霧干燥制得的粉末。高效液相色譜（LC-15A，日本島津公司）色譜柱：WelchC18柱（4.6mm×250mm，5um，Ultimate）根據(jù)設(shè)置好的液相條件進行HPLC分析，條件如下：流動相：A泵：超純水（含0.1%TFA）；B泵：乙腈（含0.1%TFA）流速：1mL／min進樣量：20uL檢測器：SPD-10A柱溫：28℃洗脫條件（乙腈濃度10%-20%（0.01-10min20%-30%（10-40min30%-90%（40-48min90%（48-53min）。B2色譜圖mAU89/556559933.533.50102030活性肽LCSMT-1標準品液相圖譜827.870/1618263040030020027.870/161826304003002000mAU250 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