lab3雙層瓊脂擴(kuò)散法篩選抗菌活性菌株應(yīng)用護(hù)理課件

Lab3雙層瓊脂擴(kuò)散法篩選抗菌活性菌株應(yīng)用護(hù)理課件目錄CONTENTS雙層瓊脂擴(kuò)散法介紹抗菌活性菌株篩選過程Lab3雙層瓊脂擴(kuò)散法的實(shí)驗(yàn)步驟抗菌活性菌株的應(yīng)用護(hù)理Lab3雙層瓊脂擴(kuò)散法的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)01CHAPTER雙層瓊脂擴(kuò)散法介紹雙層瓊脂擴(kuò)散法是一種通過在瓊脂培養(yǎng)基中插入帶有抗菌藥物的紙片，觀察抑菌圈大小的方法，用于篩選具有抗菌活性的菌株。原理基于不同菌株對(duì)藥物的敏感程度不同，在藥物紙片周圍形成不同的抑菌圈。通過測(cè)量抑菌圈的直徑，可以評(píng)估菌株對(duì)抗菌藥物的敏感性。雙層瓊脂擴(kuò)散法的原理0102雙層瓊脂擴(kuò)散法的應(yīng)用范圍可用于臨床實(shí)驗(yàn)室、獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室、食品工業(yè)等領(lǐng)域，對(duì)病原菌進(jìn)行快速檢測(cè)和抗菌藥物敏感性評(píng)估。適用于各種細(xì)菌的抗菌藥物敏感性試驗(yàn)，如革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、厭氧菌等。操作簡(jiǎn)便、快速、成本低廉，可同時(shí)檢測(cè)多種抗菌藥物，適用于大量樣品的快速篩選。優(yōu)點(diǎn)結(jié)果受人為因素影響較大，準(zhǔn)確性不如其他定量方法，無法準(zhǔn)確測(cè)定最小抑菌濃度等藥理學(xué)參數(shù)。缺點(diǎn)雙層瓊脂擴(kuò)散法的優(yōu)缺點(diǎn)02CHAPTER抗菌活性菌株篩選過程從不同的環(huán)境、生物樣本中收集可能具有抗菌活性的菌種。收集具有抗菌活性的菌種采用甘油管藏、濾紙片法、液體石蠟法等保存方法，確保菌種活性。菌種保存方法菌種收集與保存篩選出對(duì)常見致病菌具有抗菌活性的菌種?？咕V抗菌強(qiáng)度安全性根據(jù)抑菌圈大小、透明圈與抑菌圈比例等指標(biāo)評(píng)估抗菌強(qiáng)度。確保篩選出的菌種無毒或低毒，不會(huì)對(duì)人類健康造成威脅。030201菌種篩選標(biāo)準(zhǔn)在兩層瓊脂培養(yǎng)基之間接種待測(cè)菌種，觀察抑菌圈的形成。雙層瓊脂擴(kuò)散法在含有待測(cè)菌種的培養(yǎng)基中加入指示菌，搖床培養(yǎng)后觀察抑菌效果。搖瓶試驗(yàn)通過劃線分離待測(cè)菌種，觀察是否出現(xiàn)透明圈。平板劃線法菌種篩選方法使用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈的直徑，評(píng)估抗菌活性。抑菌圈測(cè)量將篩選出的抗菌活性菌株進(jìn)行抗菌效果比較，選出效果最佳的菌株?？咕Ч容^進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證篩選結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。重復(fù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證篩選結(jié)果評(píng)估03CHAPTERLab3雙層瓊脂擴(kuò)散法的實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)試劑各種抗菌藥物溶液。1.制備雙層瓊脂培養(yǎng)基按照配方配制瓊脂培養(yǎng)基，加熱溶解后，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，冷卻凝固后形成底層瓊脂。實(shí)驗(yàn)材料雙層瓊脂培養(yǎng)基、抗菌活性菌株、接種環(huán)、恒溫培養(yǎng)箱、無菌操作臺(tái)等。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備將各種抗菌藥物溶解于適宜溶劑中，制備成一定濃度的抗菌藥物溶液。2.制備抗菌藥物溶液3.接種菌株4.添加抗菌藥物溶液5.培養(yǎng)在無菌操作臺(tái)中將抗菌活性菌株接種到底層瓊脂上，用接種環(huán)輕輕劃線。將抗菌藥物溶液均勻滴加到已接種菌株的底層瓊脂上，形成上層瓊脂。將培養(yǎng)皿放入恒溫培養(yǎng)箱中，保持適宜的溫度和濕度，培養(yǎng)一定時(shí)間。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備3.抗菌藥物溶液應(yīng)準(zhǔn)確滴加在上層瓊脂上，避免過多或過少。1.所有操作均需在無菌操作臺(tái)中進(jìn)行，避免雜菌污染。實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)2.接種環(huán)在使用前后均需進(jìn)行灼燒滅菌。4.培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫培養(yǎng)箱的溫度和濕度穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)操作0103020405在培養(yǎng)一定時(shí)間后，觀察上層瓊脂中抗菌活性菌株的生長(zhǎng)情況，記錄抑菌圈的大小和形態(tài)。根據(jù)抑菌圈的大小和形態(tài)，分析各種抗菌藥物對(duì)不同抗菌活性菌株的抑菌效果，為后續(xù)的抗菌藥物篩選和應(yīng)用提供依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與記錄結(jié)果分析結(jié)果觀察04CHAPTER抗菌活性菌株的應(yīng)用護(hù)理避免頻繁凍融為了保持菌種的活性，應(yīng)避免頻繁凍融。在運(yùn)輸和使用過程中，應(yīng)盡量減少菌種的凍融次數(shù)，以免影響其抗菌活性。低溫保存抗菌活性菌株應(yīng)在-70℃以下的低溫條件下保存，以保持其活性。在運(yùn)輸過程中，應(yīng)使用干冰或液氮等低溫物質(zhì)進(jìn)行保溫，確保菌種活性不受影響。防止污染在保存和運(yùn)輸過程中，應(yīng)采取措施防止菌種受到污染。使用的容器應(yīng)密封性好，并定期檢查其密封性，以確保菌種的純度和活性?？咕钚跃甑谋４媾c運(yùn)觀察與檢測(cè)在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期觀察菌種的生長(zhǎng)情況，并記錄生長(zhǎng)曲線、抑菌圈等數(shù)據(jù)。通過檢測(cè)抗菌活性，評(píng)估菌種的抗菌效果。準(zhǔn)備培養(yǎng)基在使用抗菌活性菌株之前，需要準(zhǔn)備適宜的培養(yǎng)基。根據(jù)菌種的不同，選擇適合的培養(yǎng)基配方，并進(jìn)行滅菌處理。接種菌種將保存的抗菌活性菌株按照規(guī)定的接種方法接種到培養(yǎng)基中。接種時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。培養(yǎng)條件將接種后的培養(yǎng)基放置在適宜的溫度和濕度條件下進(jìn)行培養(yǎng)。根據(jù)菌種的不同，選擇適宜的培養(yǎng)條件，以保證菌種的正常生長(zhǎng)和抗菌活性的發(fā)揮?？咕钚跃甑氖褂梅椒ㄗ裱踩僮饕?guī)程01在使用抗菌活性菌株時(shí)，應(yīng)遵循安全操作規(guī)程，采取必要的防護(hù)措施，如佩戴口罩、手套等，以避免直接接觸和吸入菌種。注意過敏反應(yīng)02在使用抗菌活性菌株時(shí)，應(yīng)注意過敏反應(yīng)的可能性。如有過敏癥狀，應(yīng)立即停止使用并就醫(yī)。避免交叉污染03在使用抗菌活性菌株時(shí)，應(yīng)避免交叉污染。使用的工具、容器等應(yīng)保持清潔，并定期滅菌處理。同時(shí)，應(yīng)避免不同菌種之間的交叉污染，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性?？咕钚跃甑淖⒁馐马?xiàng)05CHAPTERLab3雙層瓊脂擴(kuò)散法的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作過程中需佩戴實(shí)驗(yàn)服和口罩，以防止菌株污染和交叉感染。實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)保持清潔，定期消毒，避免細(xì)菌滋生。實(shí)驗(yàn)廢棄物應(yīng)按照醫(yī)療廢棄物處理規(guī)定進(jìn)行無害化處理，防止環(huán)境污染。實(shí)驗(yàn)安全注意事項(xiàng)在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)確保所有器具滅菌徹底，避免污染。在接種細(xì)菌時(shí)，應(yīng)遵循無菌操作原則，避免交叉感染。在配置培養(yǎng)基和試劑時(shí)，應(yīng)按照規(guī)定的比例和順序進(jìn)行，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)對(duì)