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畢業(yè)實(shí)習(xí)報(bào)告實(shí)習(xí)題目:地方連鎖店罰款法律系別:園藝與園林工程系專業(yè):11園林技術(shù)一班學(xué)號(hào):551030403122姓名:張三指導(dǎo)教師:李友職稱(職務(wù)):副教授提交日期:2014年5月20日馬鈴薯組織培養(yǎng)技術(shù)1.實(shí)習(xí)情況概述1.1實(shí)習(xí)目的:畢業(yè)實(shí)習(xí)是我們學(xué)習(xí)道路上的一個(gè)實(shí)踐過程,是檢驗(yàn)課堂理論學(xué)習(xí)、鍛煉學(xué)生的實(shí)踐
創(chuàng)新能力提高學(xué)生綜合素質(zhì)的重要途徑。雖然我們?cè)趯W(xué)校里已經(jīng)學(xué)到了專業(yè)的知識(shí),但我們的動(dòng)手能力還有所欠缺,所以為了鞏固知識(shí),強(qiáng)化動(dòng)手能力,讓專業(yè)知識(shí)與動(dòng)手能力相結(jié)合,可以讓自己以后更好的融入社會(huì),適應(yīng)社會(huì)。只有這樣,自己以后才會(huì)擁有自己想要的生活,報(bào)答關(guān)心自己的所有人。1.2實(shí)習(xí)時(shí)間:2013年2至6月1.3實(shí)習(xí)地點(diǎn):云南農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站馬鈴薯技術(shù)中心1.4實(shí)習(xí)崗位:接苗技術(shù)工2.實(shí)習(xí)的主要內(nèi)容和過程馬鈴薯,(學(xué)名:Solanumtuberosum,英文:Potato),多年生草本,但作一年生或一年兩季栽培。地下塊莖呈圓、卵、橢圓等形,有芽眼,皮紅、黃、白或紫色。地上莖呈棱形,有毛,奇數(shù)羽狀復(fù)葉。聚傘花序頂生,花白、紅或紫色;漿果球形,綠或紫褐色;種子腎形,黃色。多用塊莖繁殖,可入藥。茄科、茄屬作物,作為一種蔬菜,深受人們的喜愛。目前在我國(guó)的栽培面積大約有300多萬(wàn)公頃,已經(jīng)成為世界上栽培最多的國(guó)家之一,但在其繁殖過程中退化問題比較嚴(yán)重,癥狀是葉片卷縮,產(chǎn)量降低,實(shí)驗(yàn)研究表明,病毒浸染是其退化的根源。因此生產(chǎn)無(wú)毒基礎(chǔ)種成了在馬鈴薯生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),常用的馬鈴薯脫毒技術(shù)是莖尖脫毒技術(shù)2.1緩沖間2.1.1進(jìn)入組織室必須在紅外線以外更換專用拖鞋。2.1.2每個(gè)工作人員有自己專用的拖鞋,不得混亂穿用,工作服,鞋子按規(guī)定的位置擺放整齊。2.1.3注意檢查個(gè)人衛(wèi)生,不得留長(zhǎng)指甲,衣服不得有明顯污漬。特別是衣領(lǐng)和袖子部位。所以,每天我們上班都會(huì)在緩沖間里做好充足的工作準(zhǔn)備,一是更換鞋子衣服,二是吧手洗干凈,三是戴好相應(yīng)的帽子等。因?yàn)榻M培是一個(gè)很清潔的工作,所以這些準(zhǔn)備是必不可少少的。這也讓我們認(rèn)識(shí)到個(gè)人衛(wèi)生是非常重要的。2.2培養(yǎng)基的配制從緩沖間進(jìn)來,就來到了培養(yǎng)基配制室,在培養(yǎng)基配制室里,我的工作就是配制培養(yǎng)基,配制培養(yǎng)基的整個(gè)過程如下:2.2.1先在鍋內(nèi)倒入所需配制培養(yǎng)基容量三分之一的水進(jìn)行加熱。2.2.2調(diào)節(jié)這部分水的PH值至5.2-6.0之間。稱量并加入所需數(shù)量的瓊脂,繼續(xù)加熱至鍋內(nèi)的水沸騰,然后加入各種母液和糖并加水定容到所需刻度。2.2.3調(diào)節(jié)ph值到所需數(shù)值。在調(diào)節(jié)過程中要充分?jǐn)嚢?,同時(shí)緩慢,少量加入所需的酸堿,避免加入過多后反復(fù)調(diào)節(jié),導(dǎo)致培養(yǎng)基不易凝固。2.2.4培養(yǎng)基分裝。在分裝過程中經(jīng)常攪拌培養(yǎng)基。是培養(yǎng)基混合均勻,如有培養(yǎng)基粘在瓶口以及瓶子外部,用潔凈抹布擦拭干凈。2.2.5確保瓶蓋吻合,如有不好的瓶子不得投入使用。2.2.6整個(gè)操作過程中若有培養(yǎng)基灑在工作臺(tái)面或地面需立即清洗干凈。2.2.7對(duì)每個(gè)批次的瓊脂必須首先進(jìn)行用量測(cè)試,確保最少的使用量。2.3滅菌室培養(yǎng)基的配制室和滅菌室在一條線上的,把培養(yǎng)基配制好,接下來就必須把培養(yǎng)基拿來滅菌,如果不及時(shí)的滅菌,培養(yǎng)基就會(huì)長(zhǎng)霉。所以,做好各種準(zhǔn)備后,我們就會(huì)用滅菌鍋進(jìn)行滅菌。首先把控制閥調(diào)節(jié)至加熱檔,3檔位壓力開關(guān)調(diào)節(jié)到0.14mpa檔位。隨后進(jìn)行通電加熱。為了節(jié)約能源,及時(shí)把培養(yǎng)基裝入鍋內(nèi),并保證最大效率,利用滅菌鍋內(nèi)部空間,把培養(yǎng)基裝入鍋內(nèi)的同時(shí),每鍋必須貼入4個(gè)滅菌指示條。裝滿培養(yǎng)基后旋緊鍋蓋,把控制匣旋轉(zhuǎn)到消毒檔進(jìn)行加熱。然后當(dāng)溫度升到121攝氏度,壓力升到0.11mpa是開始計(jì)時(shí),計(jì)時(shí)30分鐘后滅菌結(jié)束。斷開電源把控制閥旋轉(zhuǎn)到慢排位置,滅菌鍋消毒室壓力將為0mpa時(shí),把培養(yǎng)基從鍋內(nèi)抬出,并立即送入培養(yǎng)基儲(chǔ)藏室擺放。最后出鍋時(shí)注意觀察滅菌指示條是否正常變色,若有為變色我們會(huì)報(bào)告主管,主管進(jìn)行處理,但你不會(huì)發(fā)生這種情況。2.4洗滌間在洗滌間里,其實(shí)我們的工作很簡(jiǎn)單,就是把我們每天接苗,或是撿出來的霉瓶拿出來清洗就是了,洗瓶的工作很辛苦,一洗,二漂,三擺放。就三步,可很辛苦,但這是我們的工作,我們還是能堅(jiān)強(qiáng)的面對(duì)。2.5接種室接種室是我們接種無(wú)菌馬鈴薯的地方。在這里,我們主要的工作那就是對(duì)無(wú)菌苗的接種。把準(zhǔn)備工作做好以后,我們就開始消毒接種了。一般來說,
莖尖分生組織由于彼此重疊的葉原基的嚴(yán)密保護(hù),
只要仔細(xì)解剖,
不進(jìn)行表面消毒也能得到無(wú)菌的外植體,
但分生組織不帶菌,
并不等于包在它外面的葉片及其下部的莖段不帶菌,
將外植體從超凈臺(tái)外面的空間拿進(jìn)去可能會(huì)帶進(jìn)一些菌。因此,
在切取外植體之前仍需對(duì)莖芽進(jìn)行表面消毒。常用的消毒方法是,
先剝?nèi)ゴ笕~片,
用自來水沖洗干凈,在75%
酒精中浸泡30
秒鐘左右,
用1%
一3%
次氯酸鈉或5%
一7%
的漂白粉溶液消毒10
一20
分鐘或用0.1%氯化汞
消毒數(shù)分鐘最后用無(wú)菌水沖洗材料4
一5
次。接種時(shí),
先把解剖顯微鏡置于超凈工作臺(tái),
然后把莖芽置于解剖鏡下,左手用一把鑷子將它按住,
右手用解剖針將葉片和葉原基剝掉。當(dāng)形似一個(gè)閃亮半圓球的頂端分生組織充分暴露出來后,
用鋒利的長(zhǎng)頸刀片將分生組織切下來,
一般以0.2一0.3
毫米,
帶1
一2個(gè)葉原基為好,
然后再用刀片將其接種到培養(yǎng)基上。把獲得的小苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基Ⅰ上,每瓶接三十株,部分以原球莖接入瓶中,在此時(shí),原球莖與小苗應(yīng)分開接,不要接在一個(gè)瓶中,避免生長(zhǎng)時(shí)因遮光而生長(zhǎng)得不好以及方便管理。工作結(jié)束后,我們把剩余培養(yǎng)基母瓶整齊擺放在培養(yǎng)室內(nèi)指定位置,母瓶擺放在頂層,每筐必須貼上標(biāo)簽,并注明接種人的編號(hào),日期,品種。2.6培養(yǎng)室培養(yǎng)室是培養(yǎng)無(wú)菌苗的地方,所以我們?cè)谂囵B(yǎng)室里要做的就是正確統(tǒng)計(jì)生產(chǎn)數(shù)量,并做好記錄。保證每層在顯眼的地方有兩個(gè)標(biāo)簽,注明接種人員,編號(hào),接種時(shí)間。隨時(shí)觀察瓶苗的長(zhǎng)勢(shì),并調(diào)整相應(yīng)的光照強(qiáng)度,確保瓶苗得到充足的光照隨時(shí)保持門窗的關(guān)閉,下午可以適時(shí)打開窗子,保持室內(nèi)通風(fēng)干燥。還有一個(gè)很累的就是我們必須一個(gè)星期打掃一次培養(yǎng)架。到星期五以后,我們還要檢查瓶苗污染情況,及時(shí)清除污染并做好記錄。只有這樣才能讓苗舒適的生長(zhǎng)。3.常見問題及其解決措施3.1在我們整個(gè)生產(chǎn)的過程中,往往會(huì)出現(xiàn)這樣的一些情況,我們也叫常見的問題:3.1.1污染污染對(duì)于馬鈴薯組培來說,是非常常見的,也是很難控制的。污染的主要來源主要是:瓶苗在轉(zhuǎn)接之前由于植株生長(zhǎng)過密致使被污染的母瓶難以剔除造成交叉污染污染率迅速擴(kuò)大。3.1.2植株變黃主要是在高密度下植株之間的競(jìng)爭(zhēng)更加激烈光照、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)都難以滿足植物的正常需求隨著植株的生長(zhǎng)有些植株開始變黃3.2對(duì)于污染和植株變黃,我們的解決措施是:及時(shí)轉(zhuǎn)接。要降低污染除了一般措施如接種室、緩沖間、培養(yǎng)室及培養(yǎng)基貯藏室定期消毒強(qiáng)化接種人員的“無(wú)菌操作”,及時(shí)轉(zhuǎn)接可同時(shí)減少以上問題的發(fā)生率。隨時(shí)觀察種苗的生長(zhǎng)狀況在種苗的長(zhǎng)勢(shì)較好、生長(zhǎng)密度有利于觀察瓶苗是否已污染時(shí)盡快轉(zhuǎn)接這樣截?cái)辔廴驹?,縮短光照時(shí)間,可以減少植株變黃。4.實(shí)習(xí)體會(huì)和收獲對(duì)于這段時(shí)間的實(shí)習(xí),我學(xué)到了很多,在學(xué)??梢运瘧杏X的我,來到上班這里,有了很大的改變,每天必須按時(shí)起床,每天都要上著很無(wú)聊的班。也不知道什么時(shí)候是個(gè)盡頭。很想回到在學(xué)校里面的日子啊??缮罹褪沁@樣,現(xiàn)在的我們已經(jīng)不再是從前?,F(xiàn)在的我們,應(yīng)該想的更多,做的更多。從技術(shù)角度寫。從技術(shù)角度寫。在這次實(shí)習(xí)中,我大概已經(jīng)把自己所學(xué)的專業(yè)知識(shí)相結(jié)合了,比如說在整個(gè)的工作過程中,會(huì)遇到相應(yīng)的實(shí)際性問題,我也學(xué)會(huì)了去解決。比如:在MS培養(yǎng)基出現(xiàn)了大規(guī)模的細(xì)菌性污染,發(fā)現(xiàn)這是由于滅菌不徹底所引起的,還有氫氧化鈉的濃度有問題;這時(shí)首先考慮的就是滅菌的時(shí)間要適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng),或者是滅菌的條件相對(duì)要穩(wěn)定,或者是冷空氣當(dāng)時(shí)沒有排凈,滅菌時(shí)間盡管一樣的,但是冷空氣沒有排干凈,最后壓力是有了,但溫度沒達(dá)到,最后達(dá)不到滅菌的效果;配置氫氧化鈉時(shí)數(shù)據(jù)要精確,PH試紙應(yīng)該放在背陰的地方。還有培養(yǎng)基出現(xiàn)大批量稀,引起這些問題的原因也有很多,比如煮培養(yǎng)基時(shí)瓊脂沒加夠,調(diào)Ph值時(shí)不準(zhǔn)確,還有滅菌時(shí)間過長(zhǎng)過滅菌結(jié)束后沒及時(shí)拿出。洗好的瓶子又被污染了,造成此問題的主要原因是洗瓶時(shí)沒處理好,還有污染瓶拿出來后沒經(jīng)過滅菌就拿來洗了。另外,由于我們所在的工作場(chǎng)地規(guī)模不大,設(shè)施不夠健全,給工作帶來了一些麻煩,還好有領(lǐng)導(dǎo)很積極的幫助,存在的問題一一解決了。我想能夠運(yùn)用自己所學(xué)的知識(shí)來解決實(shí)際生產(chǎn)中的問題是我這次實(shí)習(xí)最大收獲。5.工作總結(jié)在云南農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站馬鈴薯技術(shù)中心的這段日子里,自己學(xué)到了很多,在技術(shù)上,我把知識(shí)和技術(shù)融合了,在工作生活
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