齊魯醫(yī)學(xué)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要

臨床檢驗基礎(chǔ)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!臨床檢驗基礎(chǔ)是采用各種實驗室檢查方法和技術(shù)，對來自機體的血液、尿液、糞便以及分泌物和排泄物等標本進行一般性狀觀察，理學(xué)、化學(xué)、免疫學(xué)、病原學(xué)和顯微鏡等檢查，為疾病篩查和診斷提供簡便、快速的檢測結(jié)果。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!節(jié)概述血液生理概要標本采集、送檢、保存與處理

標本抗凝

血涂片的制備血細胞染色方法血細胞顯微鏡計數(shù)法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!一血液生理概要1.血液的組成血漿：血液加抗凝劑后分離出來的液體部分。血清：血液離休后自然凝固分離出來的液體。45%血塵55%8－9%91－92%臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!黏滯性血細胞比容（紅細胞數(shù)量）血漿粘度（血漿蛋白濃度）比密血液比密與紅細胞相關(guān)男1.055~1.063女1.051~1.060血漿比密與血漿蛋白相關(guān)1.025~1.030滲透壓血漿滲透壓290~310mOsm/（kg?H2O）PH7.35~7.45凝固性凝血因子激活

臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!二、血標本的采集??、送檢、保存與處理（一）血標本的采集

采血靜脈采血毛細血管采血普通采血法真空采血法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!靜脈采血法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!真空采血法（40年代，美國BD公司）

套筒式和頭皮靜脈式兩種優(yōu)點：

血樣無需容器之間的轉(zhuǎn)移，減少溶血現(xiàn)象，保持

血液標本的完整性，使檢驗結(jié)果更加準確，也有利于防止醫(yī)院內(nèi)血源性傳染病的交叉感染和環(huán)境

保護。缺點：

真空采血管價格較高注意:采血后,先拔下刺塞針端的采血試管,后拔穿刺針。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!II.持針器2008-10-212008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁![采血部位]WHO推薦采取毛細血管血以左手中指或無名指指尖內(nèi)側(cè)為宜1手指采血：

優(yōu)點：方便→獲較多血量→檢查結(jié)果比較恒定缺點：與靜脈血仍在某些差異。2耳垂采血：

優(yōu)點：痛感輕→方便→適用于反復(fù)采集

缺點：血循環(huán)差→受氣溫影響大檢查結(jié)果不恒定

RBC、WBC、Hb、Hct結(jié)果均比靜脈血高，特別是冬季。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!2008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁![注意事項]1、采血部位皮膚完整。2、無菌技術(shù)操作：防采血部位感染，一人一針防肝炎、艾滋病。3、采血針刺入皮膚應(yīng)深淺適中。4、多項檢查時，采血次序為：BPC計數(shù)→RBC計數(shù)、Hb測定→WBC計數(shù)與分類。5、取血用于自動化血細胞分析儀，要防止棉球纖維混入堵塞儀器。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!

1.血標本運輸2.血標本保存3.檢驗后標本處理

（二）血液標本運輸、保存與處理臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!2.乙二胺四乙酸（EDTA）鹽a.抗凝原理：螯合鈣離子b.使用方法：15g/L濃度EDTA和血液1：10適用范圍：對血細胞形態(tài)影響小,適合血常規(guī)檢查、Hct不適用于：影響血小板聚集和凝血因子功能,不宜凝血因子檢查和血小板功能試驗。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!優(yōu)點：抗凝能力強、不影響血細胞體積、不易溶血、能耐高溫。適用范圍：紅細胞檢驗（紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、紅細胞比積）和多種生化分析e.不適用于：

WBC和BPC計數(shù)、血涂片檢查、凝血功能檢驗。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!5.雙草酸鹽抗凝劑

a.抗凝原理：草酸鈣沉淀使用方法：草酸鉀0.8g,草酸銨1.2g（100ml）與血液1：10（80°C以下烘干）適用范圍：紅細胞檢驗（紅細胞比積、計數(shù)）

d.不適于:血小板計數(shù)和白細胞分類計數(shù),電解質(zhì)測定臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!小結(jié)血液是由血細胞和血漿組成的紅色、粘稠、不透明、帶腥味的混懸液。凡需血液量較少的檢驗項目，常用皮膚采血法，通常采手指血。采血時要注意采血部位要無病變，要擦去滴血，不能用力擠壓。凡需血液量較多的檢驗項目，要用靜脈采血法，其采血部位常用肘前靜脈。如需要抗凝抗凝血標本時，則需要根據(jù)檢驗項目的要求，采用枸櫞酸鈉、乙二胺四乙酸鹽和肝素等抗凝劑來阻止血液凝固。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!請您練習(xí)答案:皮膚采血法用注意什么問題?

①所選擇采血部位的皮膚應(yīng)完好。②嚴格消毒皮膚，防止采血部位感染。③皮膚消毒后，待乙醇揮發(fā)干后再刺針。④如血流不暢，切不可用力擠壓勉強采血，而應(yīng)重新針刺。⑤出血不止時，可用消毒干棉球壓迫至血不再流出為止，必要時應(yīng)在報告單上注明，提醒臨床醫(yī)生注意。⑥進行多項細胞檢查要分項采血時，采血的次序為：血小板計數(shù)、紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!請您練習(xí)答案:請說出枸櫞酸鈉的抗凝原理、用途及其用量？枸櫞酸鈉能與血液中的鈣離子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。主要用于血沉、凝血象和血小板功能檢查。凝血象檢查常用0.109mol/L的水溶液，與血液之比通常為1：9。魏氏法血沉測定用濃度為0.105mol/L，與血液比例為1:4（V：V）。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!教學(xué)目標1.敘述載玻片的清潔方法、血涂片的制備方法及合格血片的標準。2.闡述瑞氏染色的原理、染液成分、染色方法、注意事項和染色結(jié)果的判斷。3.知道吉姆薩染色法和混合染色法。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!四血涂片的制備血涂片染色顯微鏡檢查用途：細胞形態(tài)檢查，細胞數(shù)量評估，網(wǎng)織紅、異常細胞、寄生蟲檢驗。血膜過厚：細胞重疊縮小血膜過?。杭毎植疾粍?，白細胞多集中于邊緣臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!操作推片載玻片25°--30°30°--45°血液推玻片載玻片制備過程：臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!造成血膜薄的原因示意圖角度小血滴小血膜薄角度小速度慢血膜薄<25°臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!堿性染料：為陽離子染料，能接受質(zhì)子，染細胞核的染料。如亞甲藍、天青。酸性染料：為陰離子染料，能釋放質(zhì)子。主要有熒烷-氧雜蒽染料和偶氮染料兩類，能結(jié)合細胞的堿性成分并染色，如血紅蛋白、嗜酸性顆粒成分等。3.復(fù)合染料：同時具有陰、陽離子型的染料如瑞氏染料（一）染料（天然染料和人工染料）

發(fā)色基團和助色基團使生物學(xué)染色劑產(chǎn)生顏色和被染組織親合。五細胞常用的染色方法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!

瑞氏染色法（一）染色原理分兩相進行，相是酸性伊紅與細胞中的堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結(jié)合；堿性亞甲藍與細胞中的酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、嗜堿性顆粒、血小板結(jié)合。第二相是亞甲藍和伊紅結(jié)合在適宜條件下形成紫色的亞甲藍-伊紅復(fù)合物，結(jié)果使白細胞核染色質(zhì)成紫色（瘧原蟲的染色質(zhì)成紅色），中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區(qū)成紫色。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!

（二）試劑

1.Wright染液瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml

磷酸鹽緩沖液（PBS）：（PH6.4－6.8）磷酸二氫鉀（無水）0.3g，磷酸氫二鈉（無水）0.2g,蒸餾水加到1000ml。配好后用磷酸鹽溶液校正pH，塞緊瓶口備用。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!注意事項：

a.血膜要干透后才能染色，否則染色時易脫落b.染色時間與染液濃度、室溫及細胞多少有關(guān)，一般染液淡、染色時間長些效果好。c.染液不能過少，以防蒸發(fā)沉淀。d.沖洗時不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖，防染料沉著。沖洗時間也不能長。e.染色過淡，可復(fù)染。f.染色過深可用水沖洗或浸泡，還可用甲醇脫色臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!

姬姆薩染色法（一）染色原理：基本成分仍然是伊紅和亞甲藍，改進了染料的質(zhì)量，使細胞核著色好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞漿和中性顆粒染色較差。（二）試劑Giemsa甲醇純甘油（三）染色方法1.甲醇固定干燥血膜3-5min2.將血膜在染液中浸染10-30min3.流水沖洗,待干后鏡檢臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!六血細胞顯微鏡計數(shù)法原理：將待測標本經(jīng)過適當稀釋（或濃縮），有時還需將標本進行染色后，充入計數(shù)池，在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的細胞，再換算成每升標本內(nèi)的細胞數(shù)。優(yōu)點：操作簡便、設(shè)備簡單、價廉缺點：影響因素多、費時、費力臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!教學(xué)目標掌握：

血液標本采集的方法及評價，抗凝劑的選擇應(yīng)用，血涂片制備方法和染色原理，血細胞顯微鏡計數(shù)方法。熟悉：

血液生理概述和標本保存。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!2.血液的理化性質(zhì)血量：正常人血液量70±10ml/kg體重，成人4~5L，占體重的6%~8%。顏色：動脈血鮮紅色HbO2↑靜脈血暗紅色Hbred↑貧血病人紅色變淺CO、氰化物中毒櫻紅色紅細胞懸浮穩(wěn)定性唾液酸根形成Zeta電位

臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!3.血液的功能運輸功能協(xié)調(diào)功能維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定防御功能臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!

靜脈采血法(venipunctureforbloodcollection)凡需血量較多的檢查＞0.5ml如：ESR、Hct、凝血因子的測定等。[部位]淺表靜脈均可,常用肘部靜脈，不明顯時可用手背、踝部，幼兒可用頸外靜脈。[體位]坐位或臥位[捆扎時間]＜1min臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!二、靜脈采血法【采血方法】準備→選擇靜脈→消毒→扎壓脈帶→穿刺、松壓脈帶→抽血→拔針止血→注入試管。如以下視頻所示臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!普通采血法1.避免溶血,器具干燥,避免氣泡2.先拔針頭,再緩緩注入試管3.與抗凝劑混勻時輕輕顛倒4.嚴格消毒5.抽血時只能外抽不能內(nèi)推臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁!

I.采血針2008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁!

III.真空采血管2008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁!

血量＜0.1ml的檢驗項目：RBC計數(shù)、WBC計數(shù)、BPC計數(shù)、Hb測定等

毛細血管采血法Skinpunctureforbloodcollection臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁!3、其他部位：拇指、拇趾或足底外側(cè)緣采血——半歲以下嬰幼兒皮膚完整處——嚴重?zé)齻遊采血針]三棱針或?qū)Ｓ玫摹安裳槨睘楹?，使用前者?yīng)高壓滅菌，一人一針。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁!兩種采血方法的優(yōu)缺點比較毛細血管采血靜脈采血缺點限制了重復(fù)實驗和追加實驗，標本量少，局部炎癥可得假結(jié)果，組織液可混入不同抗凝劑的使用，改變血液性質(zhì)，影響有形成分的形態(tài)優(yōu)點價廉、快速、操作簡便，標本可直接測定標本代表性大，無組織液影響，適于臨床研究，可重復(fù)實驗和追加其他實驗臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁!

三、血標本的抗凝1、枸櫞酸鈉（檸檬酸鈉）a.抗凝原理：螯合鈣離子使用方法配成109mmol/L的濃度和血液1：9

配成105mmol/L的濃度和血液1：4

化學(xué)名：3-羥基-3-羧基戊二酸（三鈉鹽）c.適用范圍：止血學(xué)檢驗、血沉、輸血保養(yǎng)液（毒性?。ヾ.不適用于：血細胞計數(shù)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁!3.肝素（含硫酸基團的粘多糖）抗凝原理：低濃度時抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用，加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶，從而阻止凝血酶形成，還能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用；高濃度時阻斷凝血酶和纖維蛋白的反應(yīng)。

b.適用方法：1g/L濃度的肝素鈉與血液1：10臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁!4.草酸鈉（乙二酸的鈉鹽）a.抗凝原理：草酸鈣沉淀b.使用方法：草酸鈉0.1mol/L和血液1：9c.適用范圍：止血學(xué)檢驗。d.不適用于：對凝血因子V保護功能差，影響PT測定；沉淀物影響自動凝血儀的使用。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁!

物理方法抗凝

脫纖維蛋白：

將血液注入有玻璃珠的器皿中，轉(zhuǎn)動，纖維蛋白纏繞凝固于玻璃球，使血液不能凝固。適用于免疫學(xué)檢驗和紅斑

性狼瘡細胞檢查。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁!請您練習(xí)請說出靜脈采血的步驟？答案:準備→選擇靜脈→消毒→扎壓脈帶→穿刺、松壓脈帶→抽血→拔針止血→注入試管。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁!請您練習(xí)請將下列抗凝方法和適宜的項目用線連接起來。枸櫞酸鈉血細胞比容測定乙二胺四乙酸鹽紅斑狼瘡細胞的檢驗

肝素凝血象脫纖維法一般血液學(xué)檢查臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁!良好血涂片的標準厚薄適宜,頭體尾分明，細胞分布均勻,血膜邊緣整齊兩側(cè)兩端留有空隙良好血涂片尾體頭臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁!1.玻片清潔：

a新玻片處理：用鹽酸浸泡24小時。

b用過玻片處理：用洗滌劑清洗。

c使用中玻片處理：只能持玻片邊緣，保持清潔、干燥、中性、無油膩。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁!角度大

角度大速度快血膜厚血滴過大,血膜過厚造成血膜厚的原因示意圖臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁!血膜分布不均：主要由于以下原因所致:推片用力不均,血膜成厚薄相間的梯形玻片不清潔有油跡血膜出現(xiàn)空泡區(qū)推片邊緣不齊血膜出現(xiàn)線條樣缺損臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第54頁!（二）細胞染色原理：1.物