農(nóng)藥分析課件

第一章農(nóng)藥分析取樣理論與方法分析采樣的理論與方法基本概念采樣理論（samplingtheory）

是指如何進(jìn)行試樣采集的數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)理論。怎樣通過局部采樣在統(tǒng)計(jì)意義上盡可能代表總體，是采樣理論和方法所研究的內(nèi)容。分析化學(xué)中常用的采樣方法包括固體物質(zhì)的采樣方法、動(dòng)態(tài)過程的采樣方法和質(zhì)量檢驗(yàn)的采樣方法。采樣常數(shù)（samplingconstants）為表征實(shí)驗(yàn)室樣本的均衡性，或考慮樣本的分隔效應(yīng)，Ingamell和Visman分別定義了幾個(gè)采樣常數(shù)，以便更好的描述采樣特征。

代表性采樣（representativesampling）

一般指特定的分析項(xiàng)目所涉及的采樣。如按照環(huán)保部門規(guī)定采集廢水。代表性采樣是分層采樣的特殊情況。這種情況可以對目標(biāo)成分提供總體均值的無偏估計(jì)。比如長江邊有由于個(gè)農(nóng)藥廠，采樣規(guī)定在工廠廢水排水口處進(jìn)行，或者在下游0.5km處進(jìn)行。若在上游采樣或者下游無限遠(yuǎn)處進(jìn)行，就沒有代表意義。分層采樣（stratifiedsampling）分析對象可以劃分成若干采樣單元時(shí)，隨機(jī)采樣可以是總體的全體采樣，也可以是分層或分步采樣。分層采樣是事先將分析對象劃分成不同的部分或?qū)?，然后對不同的層次進(jìn)行隨機(jī)采樣。比如對學(xué)生視力情況的采樣，必須分為小學(xué)生、中學(xué)生和大學(xué)生幾個(gè)層次。如果不分層次，籠統(tǒng)的在所有學(xué)生中采樣，就不能說明實(shí)際問題。系統(tǒng)采樣（systematicsampling）系統(tǒng)采樣指為檢驗(yàn)?zāi)承┫到y(tǒng)假設(shè)而采集的試樣。如生產(chǎn)或其它過程中成分隨時(shí)間、溫度的變化而在空間變化。一般是間隔一定的區(qū)間（時(shí)間、空間、區(qū)域）采樣。間隔不一定是等距的，有時(shí)事先可預(yù)期總體成分是不均勻的，系統(tǒng)采樣要盡量減少這種不均勻性的影響。又比如分析中國人民的學(xué)歷層次，大學(xué)和貧困山區(qū)是絕對不一樣，大學(xué)和貧困地區(qū)在中國所占比例也不一樣，采樣時(shí)就要考慮在大學(xué)中采集多少點(diǎn)（樣），貧困地區(qū)采集多少點(diǎn)（樣）。最小采樣數(shù)目（

minimumnumberofsamples）采樣理論中，在給定采樣方差的條件下的最小采樣量，以質(zhì)量計(jì)。比如一噸產(chǎn)品，分析其合格率，如果誤差規(guī)定不超過0.1%，應(yīng)該至少取多少克，才能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)；如如果誤差規(guī)定不超過1%，或者5%，應(yīng)該至少取多少克，才能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)采樣等概率的從整體中采集試樣。將分析對象全體劃分成不同編號(hào)的部分，再根據(jù)隨機(jī)數(shù)表進(jìn)行采樣。目標(biāo)總體：根據(jù)采樣與分析作出相應(yīng)結(jié)論的目標(biāo)對象。母總體：實(shí)際被采樣對象，二者很少一致。比如在中國1000所大學(xué)中調(diào)查學(xué)生的健康狀況，根據(jù)隨機(jī)數(shù)表進(jìn)行采樣，實(shí)際只有100所大學(xué)被抽樣調(diào)查。目標(biāo)總體是1000所大學(xué)，母總體是100所大學(xué)。分析取樣的重要性分析取樣是分析測試工作的第一步。分析測試結(jié)果的可靠性與采樣是否正確直接相關(guān)。分析測試的目的就是要根據(jù)從局部試樣測得的數(shù)據(jù)來獲取有關(guān)對象全體的無偏信息。怎樣使局部采樣在統(tǒng)計(jì)意義上盡可能代表整體，是采樣方法和理論研究的內(nèi)容。分析式樣的理論要求分析試樣從統(tǒng)計(jì)上應(yīng)該滿足如下要求：1、試樣均值應(yīng)能提供總體均值的無偏估計(jì)。2、樣本分析結(jié)果應(yīng)能提供總體方差的無偏估計(jì)。3、在給定的時(shí)間與人力消耗下，采樣方法應(yīng)給出盡可能精密的上述估計(jì)。4、標(biāo)準(zhǔn)偏差s2=[Σ（xi-X）2]/（n-1）上式中，xi為單次分析值；X為分析平均值；n為樣品個(gè)數(shù)。當(dāng)n趨近∞時(shí)，s趨近于σ?？偡讲畹臉?gòu)成如果ns個(gè)樣本被分析了na次，總方差σ02=σs2/ns+σa2/（ns

na）

σs2和σa2分別表示采樣方差和分析方差。假設(shè)：σa2

=ασs2

上式變成：σ02=σs2/ns+（α/na）×（σs2/ns

）結(jié)論1、對于給定的α、ns和na，總方差隨采樣方差增加而增加；2、對于給定的總分析次數(shù)nans，如果不考慮成本，隨機(jī)采樣總是數(shù)越多越好。如6個(gè)樣本進(jìn)行2次分析比4個(gè)樣本進(jìn)行3次分析的總方差要小。3、隨機(jī)采樣的總方差α是的線性函數(shù)。Α是很小數(shù)，即分析測試的方差比采樣方差小得多時(shí)，（α/ns

）×（σs2/ns

）比起σs2/ns

來就可以忽略。即分析誤差下降到采樣誤差的1/3或更低時(shí)，寧可采用快速簡便的、精密度不高，但能與采樣誤差匹配的方法進(jìn)行。最小采樣數(shù)目估計(jì)利用小樣本采樣的各種方差所得估計(jì)值來進(jìn)行最小采樣數(shù)目估計(jì)是建立在t—統(tǒng)計(jì)（學(xué)生分布）基礎(chǔ)上的.

μ=x±（ts0）/（n）1/2

s0是總標(biāo)準(zhǔn)偏差σ0的估計(jì)值.n=（ts0）2/（x-μ）2=（ts0）2/e02對參數(shù)t查表時(shí)先取n=∞

作為自由度來確定t值。用此t值根據(jù)n=（ts0）2/（x-μ）2=（ts0）2/e02計(jì)算出n的值后再查新的t值，如此循環(huán)，直到n收斂于一個(gè)常數(shù)。采樣常數(shù)Ingamell采樣常數(shù)為表征混合得很好的實(shí)驗(yàn)室樣本的均勻性,Ingamell定義了采樣常數(shù)ks。ks=R2mR為相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，R=（ss/x）×

100,x為平均值，m為被分析樣本的質(zhì)量。ks的物理意義是保證采樣相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1﹪時(shí)的必須樣本質(zhì)量（ss/x=0.01，R=1，

ks=m

）。上式可以改寫為：

R2

=ks/m；ks為常數(shù)，采樣的相對偏差與采樣質(zhì)量成反比。ks越小，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差越小，樣本混合程度越好。對于分層測定的非均勻樣本，不同層次當(dāng)有不同的Ingamell采樣常數(shù)。農(nóng)藥分析對象殘留分析1.受農(nóng)藥污染的產(chǎn)品部分：果、糧、菜，肉、禽、蛋、乳、中藥材，各種加工食品等。2.農(nóng)藥污染的環(huán)境部分：植物秸稈、土壤、水質(zhì)、大氣等。商品農(nóng)藥分析：有效成分分析。毒理分析*：動(dòng)物的器官內(nèi)的農(nóng)藥及其代謝物分析環(huán)境保護(hù)：副產(chǎn)物、農(nóng)藥添加劑及代謝產(chǎn)物分析。

農(nóng)藥的采樣基本要求代表性,多樣性.產(chǎn)品不均衡性來自生產(chǎn)、運(yùn)輸、存放差異，形態(tài)與組成差異。少量式樣代表整批物料平均成分才使得取樣有意義。㈠液樣大槽：在不同深度取樣，然后混均勻小容器：每個(gè)容器取樣，然后混均勻㈡氣樣大氣：距地50—180cm高度采樣（與呼吸空氣同高度）煙道廢氣：空瓶或大注射器采樣。有害成分用吸收劑吸收濃縮后分析農(nóng)藥的采樣方法

㈢固體試樣原則1、大小塊按比例選取。2、總量越大，取樣量越多。3、按取樣單位取樣。100-200噸為一單位，堆成長方錐臺(tái)，如右上圖。倉庫、車、船采樣：每10、20或50包中取一包（參考總量、均勻度、價(jià)值、來源而定）再從每包不同位置取少量，得到原始樣。大車皮：四角、中心、底部取樣。取樣后破碎、研細(xì)、縮減。用于分析樣品20-30g

副本樣品30-100g（保存）縮減樣品用四方法樣品堆成圓臺(tái)，如圖，取對角線上兩份。反復(fù)四分法、至所需重量。取樣量q=kd2試樣最少量=經(jīng)驗(yàn)系數(shù)×粒度2（mm）粒度直徑越大，K值越大，試樣最少量越大。農(nóng)藥的采樣試樣處理篩分：用標(biāo)準(zhǔn)篩確定細(xì)粒與大塊比例篩號(hào)：每英寸上篩孔數(shù)（濕樣先烘干后篩）100目篩：1600孔/cm2

孔徑0.15mm

篩法：由大孔到小孔、自然通過、不壓不拍。

商品農(nóng)藥

采樣法

有國標(biāo)GB1605-79農(nóng)藥的采樣的代表性1、售出或購入商品農(nóng)藥代表平均質(zhì)量2、

分析結(jié)果只代表本批質(zhì)量，應(yīng)注明廠名、品名、批號(hào)、生產(chǎn)日期、取樣日期。3、

用規(guī)定取樣器、取樣管取樣。

4、

原料200件以下按5%采樣，200以上按3%采樣。采樣位置

：上、中、下各位置。縮分：每件取樣不少于0.1kg。5、

乳油與液體：盡量混均勻。或取重量或取體積

每批一樣，

每樣不少于0.5kg6、

粉劑：一次取夠、不縮分，不少于0.2kg（可濕性）

所有樣

應(yīng)注意保存、防止失真。農(nóng)藥殘留分析采樣一、土壤采樣耕層土壤多點(diǎn)采樣

、混合均勻。樣點(diǎn)選擇因素：面積大小、地形、地勢、灌溉條件、施藥狀況。樣點(diǎn)分布：對角線、梅花形、棋盤式、蛇形、交叉間隔根際土：視不同作物、根系而異。一般以植株髓部為中心，莖圍為半徑確定范圍；深度以縱向延伸端為限。

須根系（水稻、小麥）：d=15—20cm，土快連稻根取出。剝下根際土，多點(diǎn)混合。直根系（棉花）：倒圓錐形土壤，多點(diǎn)混合剖面土分析分析目的：觀察農(nóng)藥垂直分布，滲漏及地下水源污染狀況。采樣方法：確定代表性樣點(diǎn)后挖長×寬×高=1×1.5×1.5m坑，由下至上逐層采樣，每層1—2kg。土壤樣品處理：風(fēng)干、選取、貯存。剔除動(dòng)植物殘?bào)w、石、沙后混均勻。四分法縮合，留1—2kg，裝樣、風(fēng)干、標(biāo)簽。風(fēng)干法：陰涼通風(fēng)處攤于盤或聚乙烯膜；半干時(shí)

碎、剔、薄層翻，細(xì)度60—40目。作物取樣禾本科作物：分析區(qū)采10—24點(diǎn)，5—10kg，混合均勻，縮合成1—2kg，風(fēng)干、脫殼；破碎至40—60目，分別測殼、米（面）。果實(shí)采樣；一區(qū)內(nèi)采至少10顆樹之果；每樹分上、下、內(nèi)、外側(cè)均勻采摘大小相近之果實(shí)1—5kg，縮合，取3份，1—5kg/份，袋裝。記區(qū)、日期，快速分析或低溫冷藏。參考文獻(xiàn)1.四川農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)研究所編《農(nóng)藥分析》，石油化學(xué)工業(yè)出版社，1976，2.中國農(nóng)業(yè)研究院植物保護(hù)研究所，農(nóng)牧漁業(yè)部農(nóng)業(yè)檢定所，商業(yè)部農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料局合編《農(nóng)藥分析》，化學(xué)工業(yè)出版社，1988，33.默濤，陳鶴鑫、陸貽通編《農(nóng)藥殘留量分析方法》，上海科學(xué)技術(shù)出版社，1992，44.中華人民共和國國家進(jìn)出口商檢局編，《農(nóng)藥殘留量氣相色譜法》，中國對外經(jīng)濟(jì)貿(mào)易出版社，1986，95.《農(nóng)藥殘留影響及其測定方法》，上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，1980，16.樊德方主編，《農(nóng)藥殘留量分析與檢測》上海科技出版社7.《中國農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)匯編》植保與農(nóng)藥部分，中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，19988.涂思龍，張鳴鳳，鐘明主編《食品、醫(yī)藥、有機(jī)化學(xué)產(chǎn)品分析測試大全》，下，中國社會(huì)出版社，2000，5。參考文獻(xiàn)9.[美]M.B.Jacobss,李穎川譯,《食品化學(xué)分析》，輕工出版社,1966,-——農(nóng)藥殘留物測定10、[英]G.J.DicksandP.V.Nichalas,無錫輕工學(xué)院譯，《食品分析的氣相色譜法》，輕工出版社，1987。11、《AOAC分析方法手則》下冊（AssociationofofficialAnalyticalchemists）,1984,4th,中國光學(xué)學(xué)會(huì)光譜專業(yè)委員會(huì)評，1986，212、陳萬義主編，《農(nóng)藥生產(chǎn)與合成》，化學(xué)工業(yè)出版社，2002.613、（各種分析方法參考）《分析方法手則》1——5冊一冊：基礎(chǔ)知識(shí)與安全知識(shí)二冊：化學(xué)分析三冊：電化學(xué)與光化學(xué)分析杭大化學(xué)系分析化學(xué)教研室編四冊：

色譜分析五冊：色譜與核磁共振成都科技大學(xué)近代分析教研室14、周同惠主編，化學(xué)計(jì)量學(xué)，北京，化學(xué)工業(yè)出版社，2000。15、汪爾康主編，分析化學(xué)新進(jìn)展，北京，科學(xué)出版社。16、余中建，李松蘭，張殿坤，現(xiàn)代有機(jī)分析，天津，天津科學(xué)出版社，1994期刊類《農(nóng)藥》沈陽化工研究院主辦《世界農(nóng)藥》上海農(nóng)藥研究所主辦《農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)》，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)主辦第二章

農(nóng)藥的分離與純化方法分離純化是農(nóng)藥分析必不可少的過程不管是商品農(nóng)藥樣品還是殘留農(nóng)藥樣品都不是純的農(nóng)藥成分。對于這些樣品的分析，首先要進(jìn)行一定的分離純化步驟，使農(nóng)藥和雜質(zhì)盡可能分離，達(dá)到分析結(jié)果準(zhǔn)確的目的。不同的農(nóng)藥樣品有不同的純化方法。選擇分離方法的依據(jù)是樣品中農(nóng)藥的性質(zhì)和雜質(zhì)的性質(zhì)差別來選擇分離純化的方法農(nóng)藥分析——分離、提純的方法和原理

農(nóng)藥分離的主要類別原藥分析：各種農(nóng)藥異構(gòu)體及有效成分含量。殘留分析：土、水、動(dòng)植物體中農(nóng)藥殘留量分析。原藥的一般組成原藥（固體）：含填料，加工成粉劑，可濕粉劑顆粒時(shí)加入。加入目的：原藥粉，不易粉碎；農(nóng)藥藥效高,單位面積用量少，加入填料后易稀釋。加入成分：藥石、粘土、碳酸鹽類。原藥（液體）：含溶劑、助劑、乳化劑、非有效成分（合成副產(chǎn)物、降解成分等）。農(nóng)藥分析對象與特點(diǎn)原藥分析對象：主要對有效成分分析。原藥分析的特點(diǎn)：含量高，有固定的提純與分析方法。殘留分析對象：對人、畜、環(huán)境有害成分。殘留分析特點(diǎn)：殘留量少，組成復(fù)雜。要提取、富集，分離提純。分離提純與分析方法靈活多樣。共同點(diǎn)：基本原理和方法一致。分離提純（富集）——物理和化學(xué)方法；分析類別：定性分析、定量分析固體農(nóng)藥的純化方法簡介固體農(nóng)藥（有效成分）制標(biāo)準(zhǔn)樣時(shí)用重結(jié)晶法提純。提純原理：在某一種溶劑中，固體農(nóng)藥的溶解度隨溫度變化有較大的變化。在較高溫度時(shí)的飽和溶液趁熱過濾除不溶性雜質(zhì)。母液放冷，在較低溫度時(shí)農(nóng)藥以晶體析出，過濾，可溶性雜質(zhì)留在母液中而除去。（可反復(fù)重結(jié)晶直到提純農(nóng)藥熔點(diǎn)不變?yōu)橹梗Ｖ亟Y(jié)晶的關(guān)鍵因素關(guān)鍵：選合適溶劑。重結(jié)晶溶劑具備條件：a.不與被提純成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)b.被提純物與雜質(zhì)要有顯著溶解度差c.被提純物在該溶劑中溶解度隨溫度變化變化大d.溶劑沸點(diǎn)適中（不高也不低）如沒有合適的純?nèi)軇﹦t用混合溶劑重結(jié)晶?；旌先軇┑倪x擇方法1、確定兩種溶劑可以互相混溶，而且一種是被提純農(nóng)藥的良好溶劑，一種是不良溶劑。如乙醇和水；苯和乙醇；丙酮和三氯甲烷等。2、取0.02g—0.03g樣品溶解于一定量（1mL）的良好溶劑中（試管），然后在不斷搖動(dòng)下緩慢滴加不良溶劑，直到出現(xiàn)渾濁為止。3、記下不良溶劑的體積，計(jì)算得到混合溶劑的組成比例，通過重復(fù)試驗(yàn)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。重結(jié)晶的一般操作步驟1、制成飽和熱溶液（接近溶劑的沸點(diǎn)）2熱過濾（除不溶雜質(zhì)）。3、自然冷卻結(jié)晶4、過濾晶體與洗滌。5、干燥6、標(biāo)準(zhǔn)品多次重結(jié)晶，直到m.p不變?yōu)橹怪亟Y(jié)晶操作要點(diǎn)1、制成飽和熱溶液視被提純物質(zhì)多少選用適當(dāng)容積的燒瓶，將被提純物質(zhì)放入燒瓶，裝好回流裝置。在不超過溶劑沸點(diǎn)的熱浴溫度下緩慢滴加溶劑，并攪動(dòng)，使溶質(zhì)在接近容積沸點(diǎn)時(shí)剛好溶解，立刻停止滴加溶劑。記下溶劑的體積與溶質(zhì)的質(zhì)量。2（用保溫漏斗）熱過濾。或者將熱的布氏漏斗和濾紙用熱溶劑潤濕后減壓過濾。重結(jié)晶操作要點(diǎn)3、結(jié)晶：濾液自然冷卻結(jié)晶（易揮發(fā)溶劑或者易于吸潮的溶劑應(yīng)密閉結(jié)晶）。如果冷至室溫不結(jié)晶，則可以放入晶種或用玻棒擦容器器壁；或放入冰箱進(jìn)行結(jié)晶（注意冰箱溫度應(yīng)該在溶劑凝固點(diǎn)之上）。4、過濾與洗滌晶體：減壓過濾、用低溫、少量溶劑洗滌。注意：減壓過濾應(yīng)該在布氏漏斗完全沒有液滴滴下為止。5、干燥a、低熔點(diǎn)固體、不吸潮物質(zhì)，可以在空氣中干燥。b、高熔點(diǎn),熱穩(wěn)定的物質(zhì)用烘箱中干燥c、熱不穩(wěn)定，或吸潮、空氣中不穩(wěn)定的物質(zhì)，低于m.p20—30℃，真空干燥。干燥程度與純度檢驗(yàn)檢驗(yàn)干燥程度一般用恒重法檢驗(yàn)，即稱重后再干燥一段時(shí)間，看重量是否發(fā)生變化。也可以用熔點(diǎn)法檢驗(yàn)干燥程度。純度檢驗(yàn)一般用熔點(diǎn)法。一種是與標(biāo)準(zhǔn)樣品同時(shí)測熔點(diǎn)進(jìn)行比較；另一種是測一次熔點(diǎn)后再重結(jié)晶一次，再干燥測熔點(diǎn)，兩次熔點(diǎn)不變化則物質(zhì)已經(jīng)提純。純度檢驗(yàn)還可以用薄層法檢驗(yàn)，液相色譜或者氣相色譜更好。液體農(nóng)藥分離提純方法

液體農(nóng)藥分離提純一般首先考慮蒸餾法蒸餾法原理：依液體混合物中各組分沸點(diǎn)不同而分離。關(guān)鍵：控制溫度緩慢上升，收集不同溫度范的圍餾份。蒸餾方法分類：常壓蒸餾適用于b.p較低，在b.p時(shí)不分解的物質(zhì)。減壓蒸餾適用于b.p較高，或在b.p發(fā)生分解的物質(zhì)。水蒸氣蒸餾適用于不與水反應(yīng)，b.p較高的物質(zhì)。常壓蒸餾注意事項(xiàng)

１.正確裝置，不扭不歪，不漏２.溫度計(jì)水銀球位置３.加沸石４.容器中液體體積５.熱源選擇６.餾出速度v=2—３D/S液體的干燥溶劑含水，干燥劑脫水后再蒸餾（干燥劑不可進(jìn)入蒸餾體系）（容量與速度）脫水劑（干燥劑）種類及性能：CaO中、堿性化合物可用，脫水力高。CaCl2

鹵烴、烴、酯、醚可用（醇、酸不可用，發(fā)生反應(yīng)）脫水力高。Na2SO4

多數(shù)溶劑可用，脫水能力不高。K2CO3

堿性化合物、醇、酯脫水力較高。P2O5

鹵烴、烴（醇、酸不可用發(fā)生反應(yīng)），脫水力高。NaOH飽和烴、肼、胺（酸性物質(zhì)不可用）分子篩多數(shù)可用，脫水力高。減壓蒸餾原理減壓蒸餾的原理液體的沸點(diǎn)隨液面壓強(qiáng)降低而降低。減壓蒸餾前要對沸點(diǎn)和壓強(qiáng)進(jìn)行估算，可以通過如下途徑進(jìn)行估算。1、查T-P關(guān)系圖如右圖，從左到右三根線分別為A、B、C。A線上標(biāo)有減壓的沸點(diǎn)數(shù)據(jù)，B線是正常壓強(qiáng)沸點(diǎn)刻度，C線是壓強(qiáng)刻度（mmHg).ABC沸點(diǎn)低沸點(diǎn)低壓強(qiáng)小壓強(qiáng)大用

近似公式估算2、用

近似公式

lgP=A+B/TP蒸汽壓;T絕對溫度;A、B為常數(shù)（可以通過化合物物理性質(zhì)手冊或者化工手冊查閱）減壓蒸餾裝置儀器：克萊森燒瓶、真空尾接管（單口接頭）帶橡皮套的毛細(xì)管、容積=1/2V、不用平底接受器減壓泵（水泵7-20mmHg）機(jī)械泵（油泵）0.1mmHg（要連接吸收裝置）裝置如右下圖減壓蒸餾裝置圖注意：負(fù)壓與正壓操作一樣要帶護(hù)目鏡防爆！減壓蒸餾操作步驟1、查蒸餾系統(tǒng)可否達(dá)應(yīng)有真空度

開始：關(guān)安全瓶活塞，擰緊毛細(xì)管上橡皮套螺絲夾，開動(dòng)抽氣泵，看壓力計(jì)指示數(shù)據(jù)是否達(dá)到要求。

停止：慢慢打開安全瓶活塞，直到壓力與外界平衡為止,擰松毛細(xì)管上螺絲夾，關(guān)閉抽氣泵。2、加液料、關(guān)活塞、開抽氣、調(diào)毛細(xì)（氣泡與線）、達(dá)到所需壓力后（平衡、穩(wěn)定）再

加熱。3、熱源溫度高于b.p20-30℃，壓力不穩(wěn)則調(diào)熱源，使餾出速度V=0.5—1D/S4、多組分蒸餾、餾出溫度上升時(shí)轉(zhuǎn)換接收器（使用多頭接受器）。5、蒸餾完后先撤除熱源、再慢慢開活塞

壓力平衡后關(guān)氣泵與打開毛細(xì)管夾。

可旋轉(zhuǎn)多用接頭旋轉(zhuǎn)濃縮蒸餾法

用于提取液濃縮。壓力400—600mmHg,蒸餾瓶50—160轉(zhuǎn)/分。旋轉(zhuǎn)使溶劑在瓶壁形成一層薄膜，擴(kuò)大蒸餾面積，提高蒸餾速度。操作步驟：1、裝好儀器2、調(diào)熱浴溫度高于b.p10℃以上3、冷卻水接蛇形冷凝管（低于b.p20℃）4、接真空泵（不低于300mmHg）5、加熱、開自動(dòng)加液旋塞，液自動(dòng)流入蒸餾瓶（可隨時(shí)加料）。6、開動(dòng)電機(jī)、使旋轉(zhuǎn)。結(jié)束：關(guān)電機(jī)

除熱源

關(guān)加液旋塞

壓力平衡后停止抽氣。

水蒸汽蒸餾水蒸氣蒸餾主要是用于那些沸點(diǎn)比較高，容易熱分解，或者與其他有機(jī)物性成不容易分離的糊狀物中的成分。水蒸氣蒸餾原理：混合體系中總的蒸汽壓等于各組分蒸汽分壓之和。當(dāng)被蒸餾體系接近100℃時(shí)，水的蒸汽壓接近1atm，故被蒸餾的物質(zhì)蒸汽可以和水蒸氣合計(jì)等于1atm，從而在接近100℃的溫度從混合物被蒸餾出來。被蒸餾物質(zhì)必須滿足的條件：不與水反應(yīng)；在100℃時(shí)不低與5mmHg的蒸汽壓水蒸氣蒸餾操作水蒸氣蒸餾操作與常壓蒸餾操作類似，其裝置比常壓蒸餾裝置多一個(gè)水蒸氣發(fā)生器。水蒸氣發(fā)生器T形管安全管三、柱層析柱層析技術(shù)是分離混合物的重要方法，簡單實(shí)用。架設(shè)一個(gè)帶活塞的玻璃柱，填入吸附劑，就可以用于分離混合物。柱色譜的幾種技術(shù)指標(biāo)直徑與長度比：1：10~1：40短而粗的柱子，分離快，分離效果差長而細(xì)的柱子，分離慢，分離效果好色譜柱的分離效果還與吸附劑和洗脫劑的選擇、柱子的裝填質(zhì)量有關(guān)。柱層析原理與分類簡介原理：當(dāng)混合物被束縛在色譜柱的固定相上后，流動(dòng)相自上而下流經(jīng)固定相，帶動(dòng)被分離組分向下移動(dòng)。與固定相作用力大的組分在流動(dòng)過程中留在了后面，與固定相作用力小的組分在流動(dòng)過程中跑在了前面（略），混合物因而被分離。柱層析分類：吸附、分配、凝膠吸附色譜柱：吸附劑固體表面吸附各種成分。分配色譜柱：惰性載體表面涂高沸點(diǎn)液體，被分離物在淋洗劑與高沸點(diǎn)液體之間溶解分配。凝膠色譜柱：多凝膠填粒、淋洗，凝膠網(wǎng)眼大小篩分不同尺寸的分子吸附柱的裝填要求吸附劑要裝填均實(shí)，淋洗劑才會(huì)等速水平下降，分離效果才會(huì)好。干裝：吸附劑通過漏斗直接裝入盛有洗脫劑的色譜柱（邊裝邊敲），最后應(yīng)使吸附劑上有一薄層溶劑。為保持柱上有平整表面，最上層可加一些石英砂。濕裝：先裝洗脫劑于柱內(nèi)，加用淋洗劑調(diào)成糊狀的吸附劑，使慢慢沉降。最后應(yīng)使吸附劑上有一薄層溶劑。亦應(yīng)邊加邊敲。吸附劑的分類吸附劑種類：氧化鋁、硅膠、弗羅里硅土、纖維素、氧化鎂、碳酸鈣、火性碳等為常用品種。吸附劑的要求：要對被吸附物有一定的作用，與被吸附物，淋洗劑無化學(xué)反應(yīng)。吸附能力：與顆粒粗細(xì)有關(guān)，粗則流速快，分離效果差；粗則流速慢，分離效果好。氧化鋁分為酸性、中性、堿性三種酸性——１％HCl浸泡，蒸餾水洗至pH4—４.５，用于分離酸性物質(zhì)中性——pH為７.５左右，用于分離中性物質(zhì)堿性——pH９—１０，用于分離堿性物質(zhì)或烴類。吸附劑的活性吸附劑活性與含水量有關(guān)，含水量越低活性越高。如：氧化鋁依含水量分為五級(jí)，含水量分別為０；３％；６％；１０％；１５％硅膠五級(jí)對應(yīng)含水量為０；５％；１５％；２５％；３８％一般制備方法：３５０——４００℃烘至無水（３小時(shí)）加入相應(yīng)水量得相應(yīng)級(jí)別。吸附力與分子極性有關(guān)。極性越強(qiáng)吸附力越大。淋洗劑選擇極性遞增順序：Cl-Br-I-<C=C<-OCH3<<—CO2R<C=O<--CHO<-SH<-NH2<-OH<-CO2H吸附力與淋洗劑性質(zhì)有關(guān)。選淋洗劑時(shí)應(yīng)考慮被洗脫物質(zhì)的極性與溶解度。極性大的化合物用極性大的淋洗劑洗脫；極性小的化合物用小極性淋洗劑洗脫；幾種極性差別大的混合物用幾種不同極性的淋洗劑分批洗脫。亦可以用混合淋洗劑。淋洗劑洗脫能力淋洗劑洗脫能力依以下順序遞增：正己烷〈CCl4〈C6H5-CH3〈C6H6〈CH2Cl2〈CHCl3〈Et2O〈CH3CO2C2H5〈Me2CO〈C3H7OH〈MeOH〈H2O淋洗要點(diǎn)：連續(xù)不斷，不快不慢，吸附劑不露出液面。淋洗速度V=1—２滴/S為宜?？靹t交換不平衡；慢則具有大表面的吸附劑使某些成分破壞。淋洗曲線淋洗曲線：分段收集標(biāo)準(zhǔn)品洗脫液進(jìn)行含量分析，繪成的淋洗劑體積—樣品含量曲線。目的—使要收集的組分盡可能收集完全，對于無色化合物應(yīng)該用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。分段收集洗脫液進(jìn)行含量分析，繪成曲線。依此確定淋洗過程應(yīng)收集的洗脫液體積，同時(shí)還可以確定淋洗所需溶劑。含量％淋洗劑體積常見吸附劑的處理中性氧化鋁：５５０℃活化４h，使用前130℃活化5h，可保一周，過期重新活化；８００℃時(shí)中性變堿性。氧化鋁吸附色素最佳。硅膠：水玻璃加鹽酸，沉淀脫水得無定形多孔物質(zhì)。表面Si-OH稱硅醇，與不飽和化合物或極性基形成氫鍵而吸附；Si-O-Si氧橋可水解，稱溶解度，pH=９以上顯著，故不可用強(qiáng)堿性淋洗液；硅膠層析性能與多孔骨架及坑穴體系密切相關(guān)，加熱有變?；罨瘻囟炔怀^２００℃。130℃活化２h備用。用于有機(jī)氯農(nóng)藥分離?；旌衔絼┲没旌衔絼┭b柱柱可以用于純化多種雜質(zhì)的樣品。不同的農(nóng)藥樣品的提純用不同的混合柱。常見混合柱如下?；钚蕴肌趸V，用于有機(jī)磷農(nóng)藥分離?；钚蕴迹w維素，由于有機(jī)磷，有機(jī)氯農(nóng)藥分離。弗羅里硅土—中性氧化鋁—酸性硅藻土，用于植物食品中有機(jī)氦農(nóng)藥凈化；活性碳—中性氧化鋁，CHCl3淋洗由于提純有機(jī)磷農(nóng)藥。分配柱與凝膠滲透柱層析法分配柱層析法：把有機(jī)氯農(nóng)藥從極性小的農(nóng)藥樣品中分配到極性大的溶劑中去。主要分離含脂肪、蠟質(zhì)試樣的有機(jī)氯。凝膠滲透柱層析法：用凝膠sephadexLH-20作有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分離凈化。被純化物質(zhì)的分子量范圍：有機(jī)磷200-400；色素500-900。用118g葡聚糖LH-20裝柱。乙醇或丙酮淋洗；淋洗速度V=4.5ml/h。多數(shù)有機(jī)磷（殘留水平0.05—0.005ppm）淋洗體積在305—428ml；回收率可達(dá)66-98%。薄層色譜薄層色譜是比柱色譜更加應(yīng)用廣泛的分離分析手段。薄層色譜用于分離提純具有簡單快速的特點(diǎn)。但是其分離容量不及柱色譜大，分離效果也不及柱色譜好。薄層分類：吸附與分配色譜，分配色譜又分正相色譜與反相色譜。正相：含水吸附劑（固定相），弱極性流動(dòng)相，極性小的移動(dòng)快。反相：鈍化吸附劑（固定相），強(qiáng)極性流動(dòng)相，極性強(qiáng)的移動(dòng)快。薄層吸附色吸附色譜固定相：硅膠、氧化鋁活化；加石膏為G型，不加為H型，加熒光劑為GF或HF正相分配色譜固定相：纖維素或用緩沖水溶液處理過的硅膠、或用極性有機(jī)溶劑處理過的硅膠。反相分配色譜固定相：用硅酮、石蠟等非極性溶劑處理過的硅膠或纖維素。薄層涂層：薄層自然晾干后進(jìn)行活化?；罨瘻囟扰c時(shí)間：硅膠板105-120℃，1h；氧化鋁板：70℃，40min。吸附劑選擇吸附劑用途吸附劑用途硅膠吸附，分配氧化鋁吸附，分配硅藻土分配纖維素分配氫氧化鈣吸附聚酰胺吸附離子交換樹脂離子交換氧化鎂吸附，分配吸附劑粒度的要求：5-50μm。粒度太大推進(jìn)快，影響分離；粒度太小則展開慢，出現(xiàn)拖尾或橫向擴(kuò)散過度。制備薄層板的參數(shù)薄層板規(guī)格：20×20cm，20×15cm，10×20cm，10×15cm，7.5×20cm，7.5×15cm，5×20cm，5×15cm。制板：皂液洗凈，烘干備用。漿液與活化硅膠G:水=1:2（W∶W），110-130℃，1h氧化鋁G:水=1:1—1:3（W∶W），80-100℃，30min硅藻土G:水=1:2（W∶W），110℃，30min纖維素粉:95%乙醇（丙酮）=1:5—1:6（W∶W），100℃，3-5min聚酰胺:甲醇=1:4—1:6（W∶W），60-70℃，1h。薄層板的制備制漿：按照比例將吸附劑和相應(yīng)的液體加入燒杯，攪拌均勻。鋪板：一般將均勻漿液適量倒在薄板上，兩手指夾薄板兩側(cè)，旋轉(zhuǎn)傾斜，讓漿液在薄板上流均勻，也可以適度敲擊震蕩，使?jié){液流平?；蛘邔砂遒N緊，插入漿液中，在提起，讓多余漿液流下，一次可以制備兩塊板。還有用涂布器鋪板的。薄板鋪好后置平臺(tái)自然晾干，活化備用。展開劑選擇展開劑選擇標(biāo)準(zhǔn)，與淋洗劑標(biāo)準(zhǔn)一致。官能團(tuán)極性如下：H—＜—Cl＜—C2H5＜—CH=CH2＜—OCH3＜—NO2＜—NMe2＜—COCH3＜—CO2R＜＞C=O＜—CHO＜—SH＜—NH2＜—NHCOR＜—OH＜—CONH2＜—CO2H一般單一展開劑沒有很好的適合的極性，多用相容的展開劑混合，以調(diào)節(jié)展開劑極性。被分離物質(zhì)、淋洗（展開劑）及固定相的極性選擇關(guān)系用右下圖指導(dǎo)選擇展開體系。圓弧內(nèi)三角形可以繞圓心轉(zhuǎn)動(dòng)，其三個(gè)角頂點(diǎn)分別指向三類物質(zhì)的極性區(qū)限。如果沒有適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相，可以采用混合溶劑調(diào)節(jié)極性?；【€A代表吸附劑的活性，順箭頭方向增大?；【€B代表展開劑的極性，順箭頭方向增大。弧線C代表被分離物質(zhì)極性，順箭頭方向增大。三角形的三個(gè)角所指位置就是三者的關(guān)系一般薄層色譜實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作環(huán)節(jié)：點(diǎn)樣—展開—顯色—計(jì)算Rf值點(diǎn)樣：在距薄板下沿1cm處的水平線上毛細(xì)管的液滴與薄層表面相切，切忌玻璃管戳破薄層，可以重復(fù)點(diǎn)樣。展開：薄層板下沿水平插入層析缸，展開劑一定不能淹沒樣點(diǎn)，層析缸內(nèi)要充滿展開劑蒸汽，層析缸要蓋蓋子，展開劑呈水平線上升，接近薄層上沿時(shí)為止。顯色：大多數(shù)被展開物質(zhì)沒有顏色，要進(jìn)行物理或者化學(xué)方法顯色。薄層從層析缸取出，在展開劑前沿作一記號(hào)，待展開劑揮發(fā)干后顯色。物理方法：紫外燈照射；碘蒸汽熏蒸等?；瘜W(xué)方法：可以產(chǎn)生有色物質(zhì)的反應(yīng)。幾種點(diǎn)樣方法直接點(diǎn)點(diǎn)樣：離下沿1.5-2.0cm處，毛細(xì)管分次點(diǎn)樣d≤0.3cm（凸出液滴與薄層表面相切）。間接點(diǎn)樣：打孔器打?yàn)V紙片2-3mm直徑。試液點(diǎn)滿濾紙片，晾干；打孔器打薄層2-3mm直徑的孔，濾紙片嵌入。制備薄層可以將試樣液用打孔器打下的吸附劑吸收，干后填入孔中；也可以在薄層上挖一條溝槽，試樣液用吸附劑吸收，干后填入溝槽（展開后是平行帶狀）薄板置于密閉的層析缸中展開分離。要確保薄板平行放置，樣點(diǎn)在展開劑液面之上。等溫吸附線與分離效果的關(guān)系在恒溫下以展開相濃度為橫坐標(biāo)，吸附相濃度為縱坐標(biāo)作圖，得到等溫吸附曲線。曲線中，A物質(zhì)斜率大，說明被吸附作用強(qiáng)，展開速度就慢，Rf值就小。Ⅰ是理想狀況，顯色后是標(biāo)準(zhǔn)圓斑；Ⅱ和Ⅲ出現(xiàn)“拖尾”現(xiàn)象，分離效果也不好。、ⅠⅡⅢ有機(jī)磷農(nóng)藥的極性農(nóng)藥分子的極性是影響分離效果的重要因素。硫酮型農(nóng)藥小于硫醇型農(nóng)藥的極性二硫代型小于磷酸酯、磷酰胺型共軛雙鍵增多則增強(qiáng)分子極性；甲基同系物大于乙基同系物極性影響Rf的因素薄層厚度吸附劑種類、活度、展開劑極性、展層的飽和度展開方法：一般不加黏合劑，薄板水平展開。單向上行一次展開，傾角70-80°Rf值接近的物質(zhì)要多次單向展開。每次可用同一展開劑，也可不同的展開劑。雙向展開法：用正方形薄板，展開劑一次走到上沿后取出風(fēng)干，旋轉(zhuǎn)90°后再展開邊緣效應(yīng)：溶劑前沿線一般朝下彎造成Rf不準(zhǔn)，且使色斑大小及形狀不規(guī)則顯色是配合薄層進(jìn)行鑒別。掃集共蒸餾法分離原理：將試樣用注射器注入事先填入的無吸附性的填充劑（玻璃棉、玻璃珠、海砂等）的凈化柱內(nèi)，在規(guī)定溫度下，農(nóng)藥和溶劑蒸汽隨氮?dú)饬鬟M(jìn)冷凝管，冷凝后進(jìn)入接收器。脂肪、色素不能汽化的雜質(zhì)沉積在柱內(nèi)填充劑上，使雜質(zhì)得以分離。本法可用于有機(jī)磷、有機(jī)氮農(nóng)藥的分離提純。構(gòu)成部件：柱溫箱、溫度控制器、載氣流量控制器、自動(dòng)淋洗裝置、凈化柱、冷凝管、冷阱、收集器。低溫冷凍分離法食品中農(nóng)藥殘留的分析，取樣后殘留農(nóng)藥與大量的脂肪、蠟質(zhì)混合在一起，給分離造成困難。由于動(dòng)植物組織中的脂肪、蠟質(zhì)可以在低溫下于丙酮溶液中生成沉淀，將樣品用丙酮反復(fù)萃取，萃取液經(jīng)過冷凍，過濾而分離掉脂肪、蠟質(zhì)沉淀，而農(nóng)藥留在丙酮中。冷凍溫度一般在-70℃液相萃取法萃取原理：一組互不相溶的溶劑中溶有某一成分溶質(zhì)。這種溶質(zhì)以一定比例（濃度比）在兩相中分配。兩相中分配比稱分配系數(shù)。利用同組溶劑中各物質(zhì)分配系數(shù)不同或同種物質(zhì)在不同溶劑組中分配系數(shù)不同而分開。（選擇合適溶劑，反復(fù)分配）等容一次分配：一組等容互不相溶的溶劑中加入某一溶質(zhì)，平衡后弱極性溶劑中農(nóng)藥比值是P；強(qiáng)極性溶劑中比值是Q;顯然P+Q=1，兩相濃度比為P/Q。等容多次分配與不等容分配取幾份等體積強(qiáng)極性溶劑在1份弱極性溶劑中萃取幾次后，弱極性溶劑中溶質(zhì)含量是Pn,強(qiáng)極性溶劑中溶劑含量是1-Pn

。不等容一次分配：設(shè)弱極性溶劑體積是強(qiáng)極性體積的α倍。依定義，一次分配后弱極性溶劑中含量是αP，強(qiáng)極性溶劑中含量為Q；弱極性溶劑中所含農(nóng)藥占農(nóng)藥總量比例為：αP/（Q+αP）。用此比例式可以計(jì)算兩相的農(nóng)藥含量。設(shè)P=0.7Q=0.3因兩相濃度比不變。設(shè)0.7的相用2倍體積，則有0.7的液相中含有2×0.7/（0.3+2×0.7）=1.4/1.7乙腈提取樣品中的殘留農(nóng)藥果蔬，特別是新鮮果蔬樣品，含有大量水分，極性小的有機(jī)溶劑不能萃取其中的微量殘留農(nóng)藥。首先用與水互溶的乙腈萃取，萃取液再用極性小的有機(jī)溶劑（不溶于水）萃取乙腈中的農(nóng)藥。萃取液中加入濃的Na2SO4溶液以降低農(nóng)藥在其中溶解度；用CH2Cl2加入正己烷增加農(nóng)藥在有機(jī)相溶解度，加入中等酸度緩沖液防農(nóng)藥水解。分離操作取100—125ml提取液，于500mL容量瓶中，加10mlCH2Cl2，20mLpH=6的磷酸鹽緩沖溶液，200mL正己烷，搖動(dòng)1min；再加入50mL蒸餾水，50mL飽和Na2SO4溶液再搖2min；分層去水后有機(jī)相用100ml水/次洗兩次；輕輕旋轉(zhuǎn)減少乳化租用，分水后Na2SO4干燥，濃縮后經(jīng)柱層析，作氣相色譜分析。注意：乙腈溶于水，農(nóng)藥不溶于水，加大水量使乙腈失去溶解農(nóng)藥的能力。適用農(nóng)藥種類用此法一次性回收率達(dá)60—100%的含氯農(nóng)藥有：2，4—滴甲酯劑，艾氏劑、甲體六六六、乙體六六六、丙體六六六、丁體六六六、硫丹、異狄氏劑、七氯、氯殺螨、丙菌清、P，P`—滴滴滴、P，P`—滴滴E、O，P`—滴滴銻、三氯殺螨醇、狄氏劑、環(huán)氧七氯、六氯苯、碳?xì)潇`、甲氧滴滴銻、滅蟻靈、螨卵酯、五氯硝基苯、乙滴銻、氯螨砜、三氯殺螨砜用上法回收的有機(jī)磷農(nóng)藥谷硫磷、三硫磷、地亞農(nóng)、氮線磷、乙拌磷、殺蟲螟松、亞胺硫磷、馬拉硫磷、甲基一六0五、一六0五、三九一一、磷胺、皮蠅硫磷用于液—液萃取的體系還有乙腈/CHCl3、丙酮/石油醚、丙酮、CH2Cl2注意萃取過程中會(huì)發(fā)生乳化現(xiàn)象，乳化會(huì)使結(jié)果偏低或達(dá)不到提純效果，因此需要采取抑制或消除乳化措施：1、飽和Na2SO4溶液破乳

2、1：1H2SO4破乳（限酸穩(wěn)定的農(nóng)藥）

3、高速離心破乳

4、加草酸鉀、甲酸、丙酮等試劑破乳化學(xué)凈化法殘留農(nóng)藥提取液干擾分析成分很大程度是脂肪與色素?；瘜W(xué)凈化法是使雜質(zhì)與某種試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)除掉或者消除干擾。最常用的化學(xué)凈化法是用酸處理對酸穩(wěn)定的農(nóng)藥或用堿處理對堿穩(wěn)定的農(nóng)藥來除雜。酸凈化：用濃H2SO4或濃H2SO4與發(fā)煙硫酸（1：1）混合液在分液漏斗中處理萃取液，可以除脂肪、色素。除雜原理：不飽和脂肪，色素中含有C=C，可以和濃H2SO4加成生，成可溶于濃H2SO4的化合物而除去。硫酸除雜注意事項(xiàng)注意：對酸不穩(wěn)定的農(nóng)藥如有機(jī)磷、氨基甲酸酯不可用。酸體積與提取液體積之比為1：10；一般凈化兩次。石油醚中脂肪含量超過4%時(shí)，乙、丁體六六六結(jié)果偏低；提取液脫水不完全或潮天加發(fā)煙H2SO4效果較好；防乳化：第一次凈化輕搖，第二次凈化猛搖，已乳化可以加水消乳堿凈化法除雜對艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑用堿凈化方法：KOH—助濾劑柱凈化。一層KOH一層含水14-17%的助濾劑，一層氧化鎂一層助濾劑裝柱。用石油醚淋洗，而耐堿農(nóng)藥有很好的回收率。在分析魚肉蛋、奶粉中的七氯、環(huán)氧七氯、艾氏劑、P.P一滴滴伊?xí)r可以用10%的乙醇鉀分解凈化，但處理時(shí)間不超過30min，溫度不超過65℃艾氏劑、狄氏劑、七氯第三章商品農(nóng)藥的一般分析方法

商品農(nóng)藥由于主要只分析有效成分，被分析的對象化學(xué)結(jié)構(gòu)清楚，而且在出廠前已經(jīng)有了標(biāo)準(zhǔn)的分析方法，并且多為定量分析。相對而言簡單易行。一般分析方法如下：電位滴定法，極譜分析法分光光度法（紅外、紫外和可見光分析）氣相色譜法液相色譜法等電位滴定法電位滴定法原理：通過對被測溶液電極電位滴定，確定滴定終點(diǎn)，從而達(dá)到容量分析的目的參比電極：電位不隨濃度變化。指示電極：電位隨濃度變化。滴定終點(diǎn)前后被測物濃度的微小變化引起電極電位急劇變化，突躍點(diǎn)為終點(diǎn)

儀器與試劑儀器：酸度劑（pH劑）或自動(dòng)電位滴定儀。2mV或0.02pH精確玻璃電極，甘汞電極及雙鹽橋甘汞、銀、鉑、鋅、鎢離子選擇電極。電磁攪拌器、滴定管被測樣品反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液分析步驟方法：稱取待測樣品（準(zhǔn)確到0.2mg），溶于適當(dāng)溶劑，插入電極，開動(dòng)攪拌器，進(jìn)行滴定。過程：先加入90%的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測電位或pH次，然后每加1mL測一次電位或pH，接近終點(diǎn)前后每加0.1mL測一次電位或pH。一直滴到電位或pH改變不大為止。然后按作圖法確定終點(diǎn)，進(jìn)行計(jì)算。終點(diǎn)確定與繪圖計(jì)算終點(diǎn)確定：以滴定液的體積為橫坐標(biāo)，pH（或者電位）為縱坐標(biāo)，作滴定曲線。作與縱坐標(biāo)成45°角的兩平行切線切滴定曲線。二切線的平行等分線與曲線交點(diǎn)，為滴定終點(diǎn)。二級(jí)微商法計(jì)算滴定終點(diǎn)依滴定體積與電位（pH）變化計(jì)算△V和△E（△pH）兩相鄰體積之差為△V，兩相鄰電位之差為△E（△pH）?！鱁△pH和△V的比值△E/△V為一級(jí)微商。兩相鄰一級(jí)微商之差為二級(jí)微商，即△2E/△V2=（△E/△V）2—（△E/△V）1一級(jí)微商最大，二級(jí)微商為0處為滴定終點(diǎn)。E/vΔEV/mLΔV（ΔE/ΔV）（Δ2E/ΔV2

）

E1E2E3E4E5E6V1V2V3V4V5V6A1A2A3A4A5B1B2B3B4B5A1/B1A2/B2A3/B3A4/B4A5/B5C1C2C3C4

二級(jí)微商的計(jì)算公式V0=V+[a/（a-b）]△V

其中V0為終點(diǎn)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積

a是二級(jí)微商為0之前的二級(jí)微商B是二級(jí)微商為0之后的二級(jí)微商△V是a與b之間的△V（mL）V是在a時(shí)所用標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積其中ΔEn=An＋1-An

，單位為mVΔVn=Bn＋1-Bn

，單位為mL（Δ2E/ΔV2

）=[（ΔEn＋1/ΔVn＋1

）-（ΔEn/ΔVn

）]平均體積作圖法也可以用△E/△V對平均體積V*作圖其中第n次測量的平均體積V*=總體積/n所得圖形有一極大值為終點(diǎn)或△2E/△V2對體積作圖，與橫坐標(biāo)交點(diǎn)為終點(diǎn)。電位滴定法分析敵百蟲含量實(shí)例分析原理：敵百蟲在堿性條件下會(huì)分解出氯化鈉。用硝酸銀溶液滴定生成的氯化鈉，一分子硝酸銀相當(dāng)于一分子敵百蟲。極譜分析法極譜分析法創(chuàng)建于1922年，現(xiàn)在已經(jīng)形成了一系列的近代極譜方法與技術(shù)。極譜分析是以小面積工作電極與參比電極組成電解池，電解被分析物質(zhì)的稀溶液，根據(jù)所得的電流/電壓曲線來進(jìn)行分析。被分析物質(zhì)滿足的條件:凡在滴汞電極上可以氧化或還原的物質(zhì)均可進(jìn)行分析，分析濃度范圍10-2-10-5mol/L。極譜的分類常見極譜技術(shù)有如下類別：交流極譜、示波極譜、方波極譜、脈沖極譜、陽極溶出極譜、催化極譜、薄層極譜等。催化極譜的靈敏度可以提高到10-9-10-11mol/L薄層極譜適合于多雜質(zhì)農(nóng)藥分析。極譜分析的工作原理基本原理：滴汞電極中的汞以每秒0.2-0.3滴速度從毛細(xì)管滴入電解池（燒杯），甘汞為陽極，滴汞為陰極，通過靈敏檢流計(jì)從0電壓向負(fù)電壓遞增，記下電壓與電流數(shù)值，以電壓為橫坐標(biāo)，以電流為縱坐標(biāo)作圖。當(dāng)負(fù)電壓較小時(shí)被測物沒有電解，此時(shí)電流稱殘余電流；當(dāng)負(fù)電壓繼續(xù)增加到某一值時(shí)，電流值會(huì)發(fā)生突躍，此時(shí)被分析物質(zhì)開始分解，當(dāng)電流增加至一極限電流時(shí)：極限電流-殘余留電流=極限擴(kuò)散電流，極限擴(kuò)散電流與被分析物濃度成正比，是定量分析的基礎(chǔ)。左圖：圓圈表示電流計(jì)；不規(guī)則圈表示電壓計(jì)；

右圖；I表示電流，V表示電壓，A表示極限電流，B(A-C)表極限擴(kuò)散電流，C表示殘余電流，D表示半波電位。極譜分析裝置與電流電壓圖參比電極SCE滴汞電極DME擴(kuò)散電流與半波電位擴(kuò)散電流=1/2極限電流時(shí)的電位稱半波電位，半波電位是被分析物質(zhì)的特性，不隨濃度變化，是定性分析基礎(chǔ)。擴(kuò)散電流：在電解池中支持電解的作用下，滴汞電極加上的電壓等于被測物質(zhì)的還原電勢時(shí)，處在滴汞表面可還原或氧化的物質(zhì)就開始氧化或還原反應(yīng)。滴汞表面小，電流密度大,電解物質(zhì)很快在表面降低濃度,溶液靜止,電解靠擴(kuò)散維持。擴(kuò)散與液體本體濃度維持平衡時(shí)電流維持不變。擴(kuò)散速度與離子濃度的關(guān)系ilkovic公式id=706nD1/2m2/3t1/6Cid:擴(kuò)散電流；n被還原離子的價(jià)數(shù)；D：被還原離子的擴(kuò)散系數(shù);

C：被還原離子濃度；m：汞流濃度mg/s;t:滴汞周期。對給定物質(zhì)，相同毛細(xì)管汞電極，同一電解質(zhì)溶液則n、D、m、t合并為一常數(shù)：id=kc干擾電流除擴(kuò)散電流外其他原因引起的電流稱干擾電流，干擾電流干擾測定。干擾電流主要有：遷移電流殘余電流極大現(xiàn)象氧波遷移電流及其消除方法遷移電流：在電極靜電作用下，離子遷移至電極表面而產(chǎn)生，不與離子濃度成正比。消除方法：加入大量電解質(zhì)，使陰陽離子互相作用，將電極對離子作用降為0，從而達(dá)到清除目的。加入電解質(zhì)稱支持電解質(zhì)。其濃度為被測物80-100倍，分解電壓應(yīng)比被測物高0.2V以上。常用支持電解質(zhì)為NaCl、KNO3、KCl、NH4Cl、LiCl、Me4NBr等。極大現(xiàn)象及其消除方法極大現(xiàn)象：正常極譜波出現(xiàn)的峰形電流（極譜極大）,影響半波電位與擴(kuò)散電流測量。消除方法：加入0.03%以下的抑制劑。抑制劑種類：動(dòng)物膠、聚乙烯醇，非離子型表面活性劑。（有機(jī)極大比無機(jī)少）注意：農(nóng)藥本身多含表面活性劑，多加會(huì)降低id。殘余電流：微量雜質(zhì)引起，對高靈敏極譜測定干擾大。儀器清除殘留不理想，可以用作圖法扣除。氧波干擾及其消除方法氧波干擾：溶劑中溶解氧而產(chǎn)生。氧在滴汞電極上還原產(chǎn)生兩個(gè)波。第一波：O2+2H++2e=H2O2半波電位E1/2=-0.2V第二波:H2O2+2H++2e=2H2O半波電位E1/2=-0.8V消除方法：溶劑中通過N2

或H210—15min可消除。堿性溶液中可加適量NaHSO3

除O2。電解池溶劑選擇與影響因素?zé)o機(jī)物用水做溶劑，有機(jī)物用水或有機(jī)溶劑或混合物。有機(jī)物不利于被測物擴(kuò)散，在保證樣品可溶前提下盡量少用。有機(jī)溶劑的要求：極性強(qiáng)，與水互溶，如:DMSO,DMF,EtOH,Me2COpH值的影響：pH值影響大，不同被測物質(zhì)需不同pH值。例：五氯硝基苯在pH=6有兩個(gè)不規(guī)則極譜波；pH=2.2一個(gè)極譜波；甲基對硫磷與雜質(zhì)硝機(jī)酚pH〈7時(shí)互相干擾，pH=8.1可分別測定。溫度對擴(kuò)散有影響，每增加1℃，id增加1.3%。故應(yīng)與標(biāo)樣在相同溫度下做測定。

定量分析方法一般測量極譜波圖中擴(kuò)散電流，對照標(biāo)準(zhǔn)樣品求濃度。波高測量方法：有延長線法，三切線法，中點(diǎn)法，平行線法導(dǎo)數(shù)極譜曲線法等。被測物含量計(jì)算含量計(jì)算可以用直接比較法。用標(biāo)準(zhǔn)樣測波高h(yuǎn)標(biāo)，試樣測波高h(yuǎn)試試樣含量=h試m標(biāo)/m試h標(biāo)極譜方法分析實(shí)例:甲基對硫磷含量分析標(biāo)準(zhǔn)樣品測定：稱取標(biāo)準(zhǔn)樣品0.1-0.15g于50mL容量瓶中，用無水乙醇定容。移取2mL此溶液于50mL容量瓶中依次準(zhǔn)確加入無水乙醇20mL緩沖溶液（PH=8.3）15mL；0.1%聚乙烯醇5mL，水定容。傾注適當(dāng)該溶液于電解槽中，通N2（H2）10min然后從-0.4V至-1.0繪制極譜曲線，用切線法求標(biāo)樣波高試樣含量測定

稱取樣品0.12-0.17g（如樣品中有晶體，55℃水浴溶解，搖均勻后再取樣稱量）

，操作同標(biāo)準(zhǔn)樣品的操作。測得波高后按上式計(jì)算含量工作曲線法：對于大量樣品的分析，可以用一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，繪制濃度—波高工作曲線。對于任一樣品，在相同條件下測得波高后可以在工作曲線上求得樣品的濃度?？梢姟贤夤夥止夤舛确ǚ止夤舛确垂怆姳壬治龇?，對于部分樣品的分析具有儀器設(shè)備簡單、方便可靠的特點(diǎn)。紫外光（uv）波長為10-380nm一般分析用200-380nm，低于200nm屬于真空紫外?？梢姽獠ㄩL為380-760nm。原理：物質(zhì)受電磁輻射，吸收能量，發(fā)生躍遷。能量吸收分為三類：旋轉(zhuǎn)、振動(dòng)、電子躍遷。在可見—紫外照射下，只有N、O、S、X外層孤電子對（n電子）和π電子發(fā)生躍遷物質(zhì)結(jié)構(gòu)與吸收波長的關(guān)系生色基：含π電子的基團(tuán)：烯烴、芳香環(huán)等助色基：飽和的含孤電子對（稱n電子）的基團(tuán)。兩者相連，發(fā)生p-π(n-π)共軛，改變吸收波長（向長波方向移動(dòng)稱紅移）產(chǎn)生顏色。如果助色基與生色基不共軛，吸收重復(fù)加和（即不改變吸收波長，只改變吸收強(qiáng)度）苯環(huán)上有取代基產(chǎn)生強(qiáng)度和紅移的雙重作用。對位取代苯環(huán)發(fā)生紅移，間位取代只增加吸收強(qiáng)度，紅移不明顯；金屬螯合物可能增加紅移。離子與配體之間氧化—還原反應(yīng)決定其顏色深淺。經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)，可以使被測物吸收波長落有顯色范圍。溶劑影響與朗伯—比耳定律溶劑的作用：應(yīng)該在設(shè)定波長下無明顯吸收。許多有機(jī)溶劑對紫外有吸收，而水對紫外吸收最小，用紫外測定時(shí)應(yīng)考慮溶劑的吸收公式：吸光度A=lgI0/I=acL=lg（1/T）T為透光率，L為吸收池厚度，C為濃度I0為入射光強(qiáng)度，I透射光強(qiáng)度，a為吸光系數(shù)上述公式只適用于稀溶液。光譜波長檢測KMnO4溶液檢測法（傳統(tǒng)方法）:取2mL0.1mol/LKMnO4溶液稀釋到100mL(2×10-3mol/L),于1cm比色皿中,以水為空白.在460，480，500，515，520……，550，570nm測吸光度，并繪制A—λ吸收曲線，其Amax=525nm.如Amax=525±10nm屬正常，否則應(yīng)調(diào)整刻度盤?，F(xiàn)在有自動(dòng)掃描裝置進(jìn)行掃描，自動(dòng)繪制出吸收曲線，由此確定最大吸收峰。波長的選擇選擇合適波長，取最大吸收波長可以減少雜質(zhì)，溶劑的干擾及儀器夾縫寬度，波長變化對測定的影響。方法：繪制A—λ吸光度曲線，取最大值?；蛴胠gA對波長作圖。溶劑往往改變圖形；還與儀器性能，單色分辨率，放大增益，記錄器慣量有關(guān)現(xiàn)在的一起一般可以自動(dòng)繪制A—λ或T—λ曲線。注意：物質(zhì)經(jīng)純化或不純化直接測。物質(zhì)本身有適合波長，雜質(zhì)不干擾—直接測；物質(zhì)本身有適合波長，雜質(zhì)干擾—純化后測。物質(zhì)本身無適合波長或不易純化—用化學(xué)反應(yīng)，使其轉(zhuǎn)化成符合條件的樣品進(jìn)行測量：如水解，氧化—還原，加顯色劑等。溶劑選擇與濃度確定農(nóng)藥分析多用有機(jī)溶劑。要求農(nóng)藥在溶劑中可溶，在測定波長范圍內(nèi)無明顯吸收；確定濃度范圍吸光度范圍，吸光度A在0.190—0.700之間測定誤差較小。另外濃度變化可能會(huì)使被測組分存在形式發(fā)生變化等致偏離郎伯—比爾定律。用標(biāo)準(zhǔn)溶液確定有效濃度范圍。用控制濃度或改變比色皿厚度方法來調(diào)節(jié)范圍。紫外分光光度法測殺蟲螟松含量

95%乙醇作溶劑，殺螟松在268nm有最大吸收；而在CHCl3中，殺螟松在270nm有最大吸收。用紫外分光光度法在10—20mg/mL范圍內(nèi)可以測定。稱取1g樣品，于50mL容量瓶中，用正己烷—CHCl3定溶。400×8mm色譜柱，8g純化硅膠填充；5mL樣品溶液加入柱內(nèi)，用70mL正己烷—CHCl3洗脫。洗脫速度為0.5mL/min；再用50mLCHCl3洗；棄出開始流出的70mL洗脫液，收集后流出的50mL洗脫液，取洗脫液2mL，于100mL容量瓶中CHCl3定溶。在271nm測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后一標(biāo)準(zhǔn)曲線測定樣品濃度?？梢姽夥止夤舛确ㄞr(nóng)藥一般無色，需要顯色。如殺滅威和速滅威同時(shí)存在下測定速滅威，其堿性水解物分別在295nm和292nm有極大吸收，故二者互相干擾。如把速滅威在水解后制成偶氮化合物，在495nm最大吸收。而殺滅威無此反應(yīng)。

不形成偶氮化合物速滅威殺滅威主要的顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)主要有三類：偶氮反應(yīng)，對位無取代的活化苯環(huán)，如酚.苯胺?？梢运獬龇?苯胺的農(nóng)藥大多可以用此法，如：西維因、百克威、葉蟬散、萎銹靈。不直接發(fā)生偶連反應(yīng)的化合物苯環(huán)上硝基的化合不偶連，如：對硫磷、樂散松、甲基對硫磷（但是可以水解后用Zn+HCl還原成胺再偶連）。對硫磷樂散松甲基對硫磷苯硫磷殺螟松氯硫磷形成π絡(luò)合物—使用于有機(jī)磷農(nóng)藥經(jīng)一系列化學(xué)反應(yīng)，生成π絡(luò)合物顯色的化合物有：有機(jī)磷轉(zhuǎn)化成H3PO4，再轉(zhuǎn)化成磷鉬雜多酸或磷鉬藍(lán)特點(diǎn)：不需標(biāo)準(zhǔn)品，但需提純凈化，一切有機(jī)磷均干擾測定。例如40%稻瘟凈乳油用薄層分離。硝酸氧化，高氮酸分解成H3PO4

，在強(qiáng)酸性條件下與偏釩酸銨和鉬酸銨生成雜多酸H3(PMo3O10)4

在420nm測定。該反應(yīng)也可用濃H2SO4代替HClO4，可HClO4比H2SO4反應(yīng)快。有機(jī)磷農(nóng)藥分析實(shí)例0.37g～0.45g樣品于250mL錐型瓶中，緩緩加入10mL濃HNO3及5mL70%HClO4。緩熱至NO2氣體消失。要使有機(jī)物全部分解后加入HClO4,否則爆炸。說法不一，小心為上！（四川農(nóng)科院報(bào)道）磷鉬酸亦可用SnCl2還原成磷鉬藍(lán)。在735nm比色。形成銅鹽絡(luò)合物比色分析形成銅鹽絡(luò)合物亞胺硫磷馬拉硫鱗．形成根或離子進(jìn)行比色分析聯(lián)吡啶農(nóng)藥如百草枯、殺草快，在堿性介質(zhì)中被Na2S2O4還原形成穩(wěn)定蘭色游離基分別在600nm和377nm有最大吸收。能水解出硝基酚的形成離子在400nm處可測定。硝基酚分光光度法示例對硫磷水解比色法原理：試劑，儀器（略）實(shí)驗(yàn)過程：對硝基酚標(biāo)準(zhǔn)吸收光度工作曲線繪制。稱取0.1g對硝基酚純品于1000mL容量瓶中，用甲醇稀釋定容。取此溶液1，2，3，4，5，6mL分別置于6個(gè)100mL的容量瓶中。用1mol/LKOH的50%的甲醇溶液2mL。蒸餾水定容。以蒸餾水為空白，在420nm比色。A為縱坐標(biāo)，C為橫坐標(biāo)作吸光度曲線。（6ppm以下符合比爾定律）樣品的測定取1g待測樣甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至于50mL容量瓶中，甲醇定容。干燥濾紙濾入100mL錐形瓶。取濾液1mL于直徑3cm試管中，加1mol/L的NaOH溶液2mL，沸水浴水解20min。水解液轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，蒸餾水定容后測吸光度A總另取濾液5mL于50mL容量瓶中，加入10mL甲醇，10mLPH=10的緩沖溶液。蒸餾水定容后測A游

計(jì)算：由A總、A游在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出C總、C游

偶氮比色法分析實(shí)例測定內(nèi)容：巴沙含量的測定樣品劑型：乳油測定原理：巴沙有效成分為氨基甲酸酯，堿性水解出2-叔丁基苯酚。2-叔丁基苯酚與對硝基苯重氮二氟硼酸鹽反應(yīng)生成偶氮化合物，用分光光度法比色分析。分析步驟標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備與測定準(zhǔn)確稱取0.1g巴沙，20mL甲醇在燒杯中溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中甲醇定容。移取1mL此液于50mL容量瓶中，甲醇定容（C=2ug/mL）為標(biāo)準(zhǔn)溶液。移取2mL標(biāo)準(zhǔn)溶液入25mL三角瓶中，加入3mL甲醇、0.8mLKOH(0.1mol/l),50℃恒溫水浴60min水解，冷至室溫。加0.03%對硝基苯重氮二氟硼酸鹽的甲醇溶液，30min后轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶甲醇定容，搖均勻，試劑空白對照，510nm測吸光度。樣品的制備與測定稱取巴沙樣品（約含純品0.1g）,于100mL容量瓶中甲醇定容，取1.0mL點(diǎn)板（距底沿3cm，兩邊緣2cm），冷氣流吹干。用少量甲醇外洗移液管尖的巴沙，洗液點(diǎn)于板上，空氣中15min晾干。用乙酸乙酯-正己烷展開，晾干。乙酸乙酯-正己烷二次展開，溶劑移動(dòng)14cm以上，晾干30min，紫外燈下觀察譜帶，作計(jì)號(hào)。用吸收管吸收巴沙譜帶硅膠，置于玻璃垂熔漏斗中用10mL甲醇×4洗脫巴沙，洗脫液于50mL容量瓶定容。以下按標(biāo)準(zhǔn)溶液分析操作操作步驟進(jìn)行巴沙含量計(jì)算巴沙含量X=m1A2P×100%/m2A1m1、m2分別是標(biāo)樣、式樣重量A1A2分別是標(biāo)樣、式樣吸光度。P是標(biāo)樣純度。硅膠板制備：50gHF254+140mLH2O,均勻涂6塊20×

20cm的板。厚度0.5mm，干燥過夜，110℃烘1hr，正己烷：乙酸乙酯=8：2展開。分解定磷法分析實(shí)例分析內(nèi)容：稻瘟盡含量測定分析原理：稻瘟盡屬于硫代磷酸酯，用高氯酸氧化成磷酸。磷酸與喹鉬檸酮試劑反應(yīng)，定量生成穩(wěn)定的、分子量大的喹鉬檸酮沉淀，用重量法分析。分析步驟消化：準(zhǔn)確稱取0.37-0.45g樣品放入250mL錐形瓶，緩緩加入10mL濃HNO3，5mL70%HClO4,緩緩加熱至無NO2氣體放出。然后轉(zhuǎn)入250mL容量瓶用水定容。中和：取50mL上層清液，在300mL燒杯中用20%NaOH中和，酚酞作指示劑，中和至微紅。沉淀：加10mL1：1的HNO3

，加水至100mL，加入50mL喹鉬檸酮試劑，蓋上表面皿，沸水浴1min，冷至室溫，傾析清液，水洗沉淀1-2次，過濾，180℃烘45min，干燥器中放冷，然后稱重。稻瘟凈含量計(jì)算稻瘟凈含量X=（G1/G2）0.11749×100%G2為沉淀重，G1為樣品重；0.11749為換算因子。此反應(yīng)非特性反應(yīng)，干擾大。喹鉬檸酮試劑E的制備：試劑A：20g鉬酸鈉+150mL水試劑B：60g檸檬酸+80mLHNO3+150mLH2O試劑C：A+B攪拌制成

試劑D：5mL喹啉+35mLHNO3+100mLH2O

試劑E：D+C混合24hr后過濾，濾液+280mL丙酮喹鉬檸酮沉淀組成：銅鹽含量比色法實(shí)例分析內(nèi)容：馬拉硫磷含量測定.分析原理：銅離子有空軌道，硫原子有易于變形的價(jià)層電子，硫原子向銅離子配位，生成螯合物顯色。分析步驟薄板分離純化：稱取0.28—0.30g樣品于25mL容量瓶中，CHCl3定容，0.5mL樣品液點(diǎn)于GF254板（底、側(cè)各2.5cm寬）呈直線狀，風(fēng)干，石油醚+乙酸乙酯（8：2）展開，上行14-16cm，揮發(fā)至干。紫外燈下，用大頭針圈譜帶，吸濾器吸收譜帶，用棉球醮乙醇擦空處2次，合并至吸濾器中，加10mL乙醇攪動(dòng)，蓋緊塞子,雙鏈球壓液體于容量瓶,重復(fù)3次，乙醇定容.取5mL洗脫液加入干燥的分液漏斗中，加入5mL乙醇和2mLmol/L的KOH-乙醇溶液，搖10分鐘，靜2min,0.1mol/L,激烈搖1min，分層后取CCl4層用2cm比色皿比色，CCl4空白對照，10min內(nèi)測出A樣

用同樣方法測標(biāo)準(zhǔn)溶液的A標(biāo)馬拉硫磷含量計(jì)算X=(m1p

×0.05

×0.05

×A2

×1000)

×1.041

×100%(m2

×0.02

×0.1

×A1

×1000）其中m1m2分別為標(biāo)樣和試樣重A2A1分別為標(biāo)樣和試樣吸光度.1.041為換算因子薄板的制備:12g硅膠+25mL水,制備20

×20cm板,r.T.固化,60℃hr,120130℃1hr標(biāo)準(zhǔn)溶液:亞胺硫磷0.1g+100mL無水乙醇定容.取5mL,用100mL無水乙醇定容.游離基比色方法實(shí)例分析內(nèi)容：百草枯含量測定分析原理：百草枯為聯(lián)吡啶鹽，可以還原成雙游離基顯色。標(biāo)準(zhǔn)樣品測試準(zhǔn)確稱取0.1728g經(jīng)100-120℃恒溫烘干的樣品，500mL水定容，濃度0.25mg/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。分別移取9.0、10.0、11.0、12.0、13.0mL標(biāo)準(zhǔn)液加入5個(gè)100mL容量瓶，再加70mL蒸餾水。取一瓶，加入10mL1%連二亞硫酸鈉溶液后定容，倒順反復(fù)三次（不激烈搖，防氧化）立刻倒入1cm比色皿，永久藍(lán)玻璃參考，600nm光測A，測定再做第二瓶。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線百草枯樣品測定稱取含1.6-1.8g百草枯的樣品于250mL容量瓶水定容（A），取該液10mL，于250mL容量瓶水定容（B）。取B液10mL，仿標(biāo)準(zhǔn)品操作.含量計(jì)算X=m1×250×250×100%/m2×10×10×1000m1:依吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處的重量M2:樣品重量連二亞硫酸鈉溶液保留不超過3小時(shí);有水亦分解,固體存于真空干燥器中.其他有色物質(zhì)的測定可以水解生成有色物質(zhì)的農(nóng)藥可以水解后直接比色，如對硫磷、殺螟松水解生成硝基酚自身有色的物質(zhì)的分析自身有色的物質(zhì)也可以直接比色敵克松

黃棕色溶于水?dāng)呈簏S色，溶于丙酮水解后生成二硫代磷酸的，可以與Cu2+

顯色后比色如馬拉硫磷亞胺硫磷其它分析方法硫逐磷酸類農(nóng)藥可以和二苯酮反應(yīng)顯藍(lán)色

二苯硫酮，蘭色用薄層分離提純的樣品還可以作極譜分析。亦可以用化學(xué)方法進(jìn)行定量分析。如脂肪鹵可以用堿—乙醇回流脫鹵后分析X含量。芳鹵型分離后可以用Na+戊醇脫鹵后分析X含量。硅膠板中硅膠含Cl0.02%測定時(shí)空白中加入同量硅膠。溴化（氧化法）分析法溴化（氧化法）法：含硫農(nóng)藥組分如硫代磷酸酯，取代硫豚，沙蠶毒在一定條件下定量被溴氧化；水解成酚或苯胺的農(nóng)藥能定量被溴取代。從薄板上洗脫后可以用溴化法進(jìn)行定量分析，如果分子中還有可以被溴不定量氧化的基團(tuán)如醇、酮?jiǎng)t不能用此法。故用溴化法分析的展開劑應(yīng)用烴類（烷烴）溴化（氧化法）分析實(shí)例如殺蟲雙、殺蟲單和沙蠶毒殺蟲雙沙蠶毒殺蟲單用KBrO3-KBr/H