免疫發(fā)光技術(shù)課件

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全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀CL-2000i

免疫知識免疫學(xué)檢驗方法34免疫的概念

免疫：是機(jī)體識別和排除異物的功能，識別自我和非我，自我防護(hù)的功能（人體對外的部隊和對內(nèi)的警察）但在某些條件下可對機(jī)體有害

組成：免疫器官（胸腺、淋巴結(jié)）、免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞)、免疫分子（抗體）凡自己的耐受；凡非己的排斥。。。。5什么是抗原？抗原（Ag）：是一類能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。分類：異種抗原、同種異型抗原、自身抗原、異嗜性抗原一種抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗不同部位的多種抗體抗體相對于不同個體也是抗原免疫的要素6抗原（Ag）7病毒異物性和復(fù)雜結(jié)構(gòu)細(xì)菌 藥物微生物及其成分、蛋白質(zhì)、多肽、多糖。。。免疫的要素抗體（Ab）：是B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的能與抗原分子上相應(yīng)表位發(fā)生特異性結(jié)合的、具有免疫功能的球蛋白? 抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的蛋白質(zhì)? 能和相應(yīng)刺激物(抗原)結(jié)合? 結(jié)合產(chǎn)生一定效果抗體是相對的8抗體（Ab）

特異性：相對的一一對應(yīng)，一種抗原可以有多種抗體與之結(jié)合可逆性：非共價結(jié)合階段性：反應(yīng)階段和結(jié)果階段9免疫學(xué)檢驗方法10免疫分析技術(shù)：利用抗原、抗體之間的特異性結(jié)合來測定、分析特定物質(zhì)的方法——上帝的饋贈。Ag+Ab

Ag

Ab?無錫市第八人民醫(yī)院檢驗科11免疫分析和生化分析特點生 化免疫分析基本原理朗伯比爾定律免疫測試基于抗原抗體的非特異性結(jié)合；測試模式簡單流程復(fù)雜，所需試劑種類多，孵育時間更長；分離方式不需要非均相測試，需要磁分離；均相測試，不需要分離。信號檢測方式不同比色法，朗伯-比爾定律，需要光源；化學(xué)反應(yīng)發(fā)光，光子計數(shù)法真正的化學(xué)發(fā)光不需要光源測試項目微量，超微量，激素，微生物等12免疫標(biāo)記檢測實現(xiàn)方式

第一種，雙抗體夾心法：多用來檢測抗原。Eg:乙肝表面抗原?無錫市第八人民醫(yī)院檢驗科13免疫標(biāo)記檢測實現(xiàn)方式

第二種，競爭法：抗原、抗體的檢測均有利用，eg:乙肝e抗體?無錫市第八人民醫(yī)院檢驗科14免疫標(biāo)記檢測實現(xiàn)方式

第三種，間接法：多用于檢測抗體，例如：乙肝表面抗體的檢測?無錫市第八人民醫(yī)院檢驗科15化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)發(fā)光原理:是指分子或原子中的電子吸收能量后，由基態(tài)（較低能級）躍遷到激發(fā)態(tài)（較高能級），然后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過程。根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同可分為:光照發(fā)光、生物發(fā)光、化學(xué)發(fā)光等。16化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)常用發(fā)光劑（底物or標(biāo)記物）

異魯米諾

（Diasorin、新產(chǎn)業(yè)）

堿性環(huán)境中，閃光型（3s）；吖啶脂 （BAYER、ABBOTT

I系列)

吖啶脂標(biāo)記，堿性環(huán)境中直接發(fā)閃光（10s）；

魯米諾+HRP（強(qiáng)生OCD）

HRP標(biāo)記，魯米諾在增強(qiáng)劑作用下發(fā)光，輝光型（2h）；AMPPD+ALP

（BECKMAN、DPC、OLYMPUS）

ALP標(biāo)記，AMPPD做底物，輝光型（N小時）；三聯(lián)吡啶釕+TPA（ROCHE）

三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記，電化學(xué)發(fā)光，應(yīng)用于Roche儀器?無錫市第八人民醫(yī)院檢驗科17間接化學(xué)發(fā)光（酶促發(fā)光、輝光）-

邁瑞、貝克曼、西門子DPC堿性磷酸酶(ALP)：ALP標(biāo)記抗體(或抗原)，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時加入AMPPD(螺旋金剛烷)發(fā)光劑，ALP使AMPPD脫去磷酸根基團(tuán)而發(fā)光。18檢測流程輝光發(fā)光時間長（