2023-2024學(xué)年北京人民大學(xué)附中高三下第一次測試生物試題含解析

2023-2024學(xué)年北京人民大學(xué)附中高三下第一次測試生物試題注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．結(jié)合下圖分析，下列說法正確的是（）A．若判斷甲是否為需氧型生物，依據(jù)的是細胞中是否含有結(jié)構(gòu)①B．若判斷乙是否為植物細胞，并不能僅依據(jù)細胞中是否含有結(jié)構(gòu)②C．用電子顯微鏡觀察不能區(qū)分細胞甲和細胞乙是否為原核生物D．根據(jù)細胞中是否含有結(jié)構(gòu)③，可將甲、乙、丙三種生物分為真核生物和原核生物兩個類群2．將含有胚乳的玉米種子置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，在萌發(fā)長出真葉前的過程中會發(fā)生一系列的生理變化，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．吸收水的方式會由吸脹吸水逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闈B透吸水B．呼吸強度的變化會表現(xiàn)為先增加后穩(wěn)定再急劇增加C．赤霉素合成量下降，脫落酸合成量增加D．胚乳儲存的淀粉經(jīng)分解后可用于細胞呼吸和轉(zhuǎn)化為其它組成物質(zhì)3．下列關(guān)于真核細胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述，錯誤的是（）A．細胞質(zhì)中許多重要細胞器的形成以膜的分化為基礎(chǔ)B．細胞核通過mRNA和核糖體對細胞生命活動進行控制C．胰高血糖素和胰島素空間結(jié)構(gòu)的形成均需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與D．細胞骨架由纖維素構(gòu)成，在物質(zhì)運輸?shù)确矫嫫鹬匾饔?．下列關(guān)于元素和化合物的敘述，正確的是（）A．磷是核糖及核苷酸的組成元素B．葉綠體中有些色素含有鎂元素C．蛋白質(zhì)在鹽溶液中都會變性D．蛋白質(zhì)的多樣性與氨基酸縮合方式有關(guān)5．下圖表示動物（二倍體）體內(nèi)細胞在細胞分裂過程中細胞核膜面積相對值的變化曲線，據(jù)圖分析正確的是（）A．該變化只能發(fā)生在有絲分裂的過程中B．a(chǎn)點表示細胞已完成間期的物質(zhì)準備C．b~c段細胞中一定存在同源染色體D．d點后細胞中依然存在姐妹染色單體6．醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)退行性疾病與神經(jīng)元中形成的R-1oop結(jié)構(gòu)有關(guān)。R-loop結(jié)構(gòu)是一種三鏈RNA-DNA雜合片段，由新產(chǎn)生的mRNA與DNA模板鏈形成了穩(wěn)定的雜合鏈，導(dǎo)致該片段中DNA模板鏈的互補鏈只能以單鏈狀態(tài)存在。下列敘述中錯誤的是（）A．從理論上講R-loop結(jié)構(gòu)中含有5種堿基B．R-loop結(jié)構(gòu)中mRNA和DNA模板鏈的互補鏈堿基序列相同C．R-loop結(jié)構(gòu)中的DNA單鏈不穩(wěn)定，易發(fā)生遺傳信息改變D．R-loop結(jié)構(gòu)抑制基因的表達7．如圖是為理解某些生物學(xué)問題所建立的一個數(shù)學(xué)模型（此圖僅表示變化趨勢），以下對此數(shù)學(xué)模型應(yīng)用不科學(xué)的是（）A．若x表示外界溫度，y表示耗氧量，則a為變溫動物，b為恒溫動物B．若x表示外界O2濃度，y表示CO2釋放量，則a為有氧呼吸強度，b為無氧呼吸強度C．若x表示進食后血糖濃度，y表示激素含量，則a為胰島素，b為胰高血糖素D．若x表示生長素濃度，y表示生理作用，則a為對根的促進作用，b為對莖的促進作用8．（10分）某課題小組利用無菌培養(yǎng)液培養(yǎng)酵母菌，探究不同條件下酵母菌種群數(shù)量的變化規(guī)律。實驗人員抽取每種條件下的酵母菌培養(yǎng)液各1mL，分別稀釋11倍后，用血球計數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×1．1mm，計數(shù)室為25×16型）進行計數(shù)，測得不同條件下每毫升培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量，實驗結(jié)果見下圖（單位：×117個/mL）。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．依據(jù)21℃、24h條件下酵母菌種群數(shù)量值，可推算所用血球計數(shù)板中格中酵母菌的數(shù)量平均為31個B．溫度是該實驗的自變量，酵母菌菌種、酵母菌數(shù)量、培養(yǎng)液成分等為無關(guān)變量C．酵母菌種群數(shù)量變化過程中出現(xiàn)了“S”型增長，達到K值后穩(wěn)定時間的長短與培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)的含量有關(guān)D．酵母菌在15℃環(huán)境中存活的時間最長，15℃是酵母菌種群數(shù)量增長的最適溫度二、非選擇題9．（10分）孟加拉國有望在2021年成為全球第一個種植轉(zhuǎn)基因黃金大米的國家。黃金大米是在普通大米中轉(zhuǎn)入兩個合成β—胡蘿卜素（胡蘿卜素的一種）所需的外源基因，即玉米來源的八氫番茄紅素合酶基因和細菌來源的胡蘿卜素脫氫酶兩個基因，使原本不能合成β—胡蘿卜素的水稻胚乳可以合成β—胡蘿卜素。請據(jù)此回答問題：（1）結(jié)合所學(xué)的知識，解釋為何將上述轉(zhuǎn)基因大米稱為黃金大米?____________。胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為____________，從而提高了大米的營養(yǎng)價值。（2）八氫番茄紅素合酶基因和胡蘿卜素脫氫酶基因在基因工程中被稱為______________________。（3）啟動子通常具有物種及組織特異性，在構(gòu)建黃金大米基因表達載體時，需要選擇的是要能夠在____細胞內(nèi)特異性表達的啟動子。（4）若對八氫番茄紅霉素合酶基因利用PCR技術(shù)進行擴增，則需要根據(jù)____________設(shè)計引物，同時還需要在一定的緩沖溶液中提供八氫番茄紅素合酶基因、__________和___________，通過控制________使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行。（5）水稻是單子葉植物，若用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將以上兩種基因?qū)胨炯毎鹊冒阉麄儾迦朕r(nóng)桿菌的____________上，并需要使用____________物質(zhì)處理水稻的組織細胞。10．（14分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，其目的是_________________________。11．（14分）淀粉酶在食品加工及輕工業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛用途。研究人員從細菌中克隆了一種淀粉酶基因，為了獲得高產(chǎn)淀粉酶菌株，按下圖所示流程進行基因工程操作。（1）將淀粉酶基因與質(zhì)粒載體重組時需要使用的酶包括_________。（2）大腸桿菌經(jīng)過_________處理后，可作為重組載體的宿主（感受態(tài)）細胞使用。（3）為了初步篩選高產(chǎn)菌株，研究人員將得到的3個工程菌株接種到以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)后用稀碘液處理，可觀察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落為中心的透明圈。測量不同菌株形成的菌落及透明圈直徑，結(jié)果見下表。工程菌菌落直徑（C，mm）透明圈直徑（H，mm）H/C菌株Ⅰ8.113.01.6菌株Ⅱ5.111.22.2菌株Ⅲ9.517.11.8①表中菌落直徑（C）的大小反映了__________，透明圈直徑（H）的大小反映了_____________。②根據(jù)表中數(shù)據(jù)，可推斷其中淀粉酶產(chǎn)量最高的菌株是_______。（4）基因工程技術(shù)已成功應(yīng)用于人類生產(chǎn)生活中的諸多方面。請從植物育種或人類疾病預(yù)防與治療方面舉一實例，并說明制備該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的基本技術(shù)流程。（限100字以內(nèi)）___________________12．稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?；卮鹣铝袉栴}：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴增出cDNA。在PCR過程中，兩個引物是_____酶的結(jié)合位點；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴增基因時，設(shè)計兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制酶酶切位點，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測方法是_____。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

分析題圖：甲細胞沒有被核膜包被的成形的細胞核，屬于原核細胞；乙細胞含有液泡、葉綠體和細胞壁，屬于植物細胞；丙為病毒；①為線粒體，是有氧呼吸的主要場所；②是葉綠體，是光合作用的場所。③是細胞核?！驹斀狻緼、結(jié)構(gòu)①為線粒體，甲是原核生物，細胞沒有線粒體，因此判斷甲是否為需氧型生物，不能依據(jù)細胞中是否含有結(jié)構(gòu)①，A錯誤；

B、若判斷乙是否為植物細胞，并不能僅依據(jù)細胞中是否含有結(jié)構(gòu)②葉綠體，因有些植物細胞如根部細胞無葉綠體，B正確；

C、電子顯微鏡可以觀察到細胞器和細胞核，能區(qū)分真核細胞和原核細胞，C錯誤；

D、結(jié)構(gòu)③是細胞核，原核細胞和真核細胞最主要的區(qū)別是有無核膜包被的細胞核，丙沒有細胞結(jié)構(gòu)，既不屬于原核細胞，也不屬于真核細胞，D錯誤。故選B?！军c睛】本題結(jié)合幾種細胞和細胞器的結(jié)構(gòu)模式圖，考查原核細胞和真核細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同、細胞結(jié)構(gòu)和功能，要求考生識記原核細胞和真核細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，識記動植物細胞結(jié)構(gòu)的異同，能準確判斷圖中各細胞和細胞器的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識答題。2、C【解析】

1、吸脹作用的大小與細胞內(nèi)原生質(zhì)凝膠物質(zhì)對水的親和性有關(guān)，蛋白質(zhì)、淀粉和纖維素對水的親和性依次遞減。

2、種子能否正常萌發(fā)，與溫度、水等外界因素有關(guān)，還受到種子是否具有生活力等內(nèi)部因素制約?！驹斀狻緼、干種子細胞中沒有大液泡，種子在萌發(fā)初期，吸水方式主要是吸脹吸水，萌發(fā)過程中長出胚根后，主要是滲透吸水，A正確；B、種子萌發(fā)過程中，由于吸水，細胞代謝加強，呼吸強度增加；由于有種皮的包裹，氧氣含量有限，當水分吸收達到飽和后，呼吸強度相對穩(wěn)定；當胚根突破種皮后，細胞獲得的氧增加，呼吸強度急劇增加，B正確；C、赤霉素能解除種子休眠，脫落酸可抑制細胞分裂，所以種子萌發(fā)過程中，赤霉素合成量增加，脫落酸合成量減少，C錯誤；D、種子萌發(fā)過程中不能進行光合作用，胚乳儲存的淀粉經(jīng)分解后可用于細胞呼吸（為種子萌發(fā)提供能量）和轉(zhuǎn)化為其它組成物質(zhì)，D正確。故選C。3、D【解析】

1、細胞核包括核膜（將細胞核內(nèi)物質(zhì)與細胞質(zhì)分開）、染色質(zhì)（DNA和蛋白質(zhì)）、核仁（與某種RNA（rRNA）的合成以及核糖體的形成有關(guān)）、核孔（核膜上的核孔的功能是實現(xiàn)核質(zhì)之間頻繁的物質(zhì)交換和信息交流），是遺傳物質(zhì)貯存和復(fù)制的場所，是細胞遺傳和代謝的控制中心。2、生物膜系統(tǒng)：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體、葉綠體、溶酶體等細胞器膜和核膜、細胞膜等結(jié)構(gòu)共同構(gòu)成細胞的生物膜系統(tǒng)。功能：（1）保證內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定，對物質(zhì)運輸、能量轉(zhuǎn)換和信息傳遞等過程起決定作用。（2）為多種酶提供附著位點，是許多生物化學(xué)反應(yīng)的場所。（3）分隔細胞器，保證細胞生命活動高效、有序地進行。3、、真核細胞中分泌蛋白的合成與分泌過程：附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成蛋白質(zhì)→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡→高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)→高爾基體“出芽”形成囊泡→細胞膜，整個過程還需要線粒體提供能量?！驹斀狻緼、在真核細胞的細胞質(zhì)中大多數(shù)細胞器都具有膜結(jié)構(gòu)，故許多細胞器都是以膜的分化為基礎(chǔ)形成的，A正確；B、大多數(shù)mRNA在細胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生，經(jīng)核孔進入細胞質(zhì)，與核糖體結(jié)合翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，從而對細胞進行穩(wěn)定性調(diào)控，B正確；C、胰高血糖素和胰島素都是蛋白質(zhì)類的激素，在核糖體上合成后進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形成一定的空間結(jié)構(gòu)，經(jīng)過高爾基體的進一步加工成熟后分泌出細胞，C正確；D、細胞骨架是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，在物質(zhì)運輸能量轉(zhuǎn)換等方面起重要作用，D錯誤。故選D?！军c睛】本題是對細胞結(jié)構(gòu)和功能的綜合考查，需要考生識記生物膜的組成和功能，分泌蛋白的合成途徑和細胞骨架等知識。4、B【解析】

蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸，氨基酸脫水縮合形成肽鏈，一條或幾條肽鏈盤區(qū)折疊形成具有一定的空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性與組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序及蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)有關(guān)。【詳解】A、核糖的組成元素只有C、H、O，磷是核苷酸的組成元素，A錯誤；B、葉綠體中葉綠素含有鎂元素，B正確；C、蛋白質(zhì)在高濃度的鹽溶液中會因溶解度降低而析出，稱為鹽析，空間結(jié)構(gòu)未改變，不會變性，C錯誤；D、蛋白質(zhì)的多樣性與氨基酸的種類、數(shù)量、排列順序有關(guān)，與脫水縮合方式無關(guān)，D錯誤。故選B。5、B【解析】

分析圖示可知，oa段表示間期，ab段表示前期，bc段表示中期和后期，cd段表示末期。【詳解】A、減數(shù)分裂過程中也會出現(xiàn)核膜核仁的消失和重建，A錯誤；B、oa段表示間期，a點表示細胞已完成間期的物質(zhì)準備，B正確；C、b~c段細胞中可能處于減數(shù)第二次分裂，故不一定存在同源染色體，C錯誤；D、cd段表示末期，d點后細胞中不存在姐妹染色單體，D錯誤。故選B。6、B【解析】

本題屬于信息題，注意題干信息“R-Ioop結(jié)構(gòu)是一種三鏈RNA-DNA雜合片段，由于新產(chǎn)生的mRNA與DNA模板鏈形成了穩(wěn)定的雜合鏈。導(dǎo)致該片段中DhIA模板鏈的互補鏈只能以單鏈狀態(tài)存在”的應(yīng)用?！驹斀狻緼、R-loop結(jié)構(gòu)是一種三鏈RNA-DNA雜合片段，DNA中有四種脫氧核糖核苷酸，RNA中有四種核糖核苷酸，所以R-loop結(jié)構(gòu)中有8種核苷酸，5種含氮堿基，A正確；B、R-loop結(jié)構(gòu)中mRNA與DNA模板鏈堿基互補配對，和DNA模板鏈的互補鏈堿基序列相似，只是U替代了T，B錯誤；C、R-loop結(jié)構(gòu)中的DNA單鏈不穩(wěn)定，易發(fā)生基因突變，C正確；D、根據(jù)題干信息“R-loop結(jié)構(gòu)是一種三鏈RNA-DNA雜合片段，由于新產(chǎn)生的mRNA與DNA模板鏈形成了穩(wěn)定的雜合鏈。導(dǎo)致該片段中DNA模板鏈的互補鏈只能以單鏈狀態(tài)存在”可推測R-loop結(jié)構(gòu)既影響DNA復(fù)制又影響基因的表達，D正確。故選B。7、D【解析】

分析曲線圖：曲線a表示在一定范圍內(nèi)，隨著x的增大，y逐漸增大，后趨于平衡；曲線b表示在一定范圍內(nèi)，隨著x的增大，y逐漸減小，后趨于平衡；兩者呈負相關(guān)?！驹斀狻緼、對于恒溫動物來說，在低溫時，為了維持體溫的穩(wěn)定，耗氧量逐漸增加，而溫度增加后，耗氧量就會下降，與曲線b符合，而對于變溫動物來說，體內(nèi)溫度與外界溫度一致，所以體內(nèi)酶的活性也是隨外界溫度的變化而變化的，外界溫度升高，變溫動物體內(nèi)溫度也會升高，新陳代謝加強，耗氧量增加，與曲線a相符，A正確；B、若表示O2濃度與呼吸作用CO2釋放量的關(guān)系，則在O2濃度較低時，生物體主要進行無氧呼吸產(chǎn)生CO2，隨著O2濃度的增加，無氧呼吸受抑制，產(chǎn)生的CO2量逐漸減少，而有氧呼吸逐漸增強，產(chǎn)生的CO2也逐漸增加，有氧呼吸強度還要受到其它因素的影響，所以有氧呼吸產(chǎn)生的CO2量最終趨于平穩(wěn)，因此a表示有氧呼吸強度，b表示無氧呼吸強度，B正確；C、機體進食后，體內(nèi)血糖濃度較高，需要胰島B細胞分泌胰島素降低血糖濃度，當血糖恢復(fù)正常后，胰島素的分泌量就不再增加，胰高血糖素和胰島素是拮抗作用，所以兩者曲線變化相反，C正確；D、植物不同的器官對生長素的敏感性不同，根對生長素比較敏感，所以隨著生長素濃度的增加，根的生長將會受到抑制，與曲線b相符，而莖則表現(xiàn)出促進生長，與曲線a相符，D錯誤。故選D。8、C【解析】

1、通過柱形圖可知，實驗的自變量是不同時間和溫度，因變量為酵母菌的數(shù)量。2、據(jù)圖可知，血球計數(shù)板有25個中方格，每1個中方格中有16個小方格，即總共有16×25=411個小方格，計數(shù)室的容積為1.1mm3（1mL=1111mm3）。【詳解】A、據(jù)圖表可知，21℃、24h條件下酵母菌總數(shù)量為5×117個/mL，因計數(shù)板共有25個中格，又因1mL=1cm3=113mm3，可設(shè)每個中格中的酵母菌數(shù)量為x，則有25×x×114×11（稀釋11倍）=5×117個/mL，推知x=21個，A錯誤；B、溫度和培養(yǎng)時間是該實驗的自變量，酵母菌菌種、酵母菌數(shù)量、培養(yǎng)液成分等為無關(guān)變量，B錯誤；C、酵母菌種群數(shù)量變化過程中出現(xiàn)了“S”型增長，達到K值后穩(wěn)定時間的長短與培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)的含量有關(guān)，C正確；D、通過柱形圖可知，酵母菌在15℃環(huán)境中存活的時間最長，25℃是酵母菌種群數(shù)量增長的最適溫度，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、β-胡蘿卜素的顏色為橘（橙）黃色，在水稻胚乳中合成后，使大米呈現(xiàn)黃色維生素A目的基因水稻胚乳八氫番茄紅素合酶基因的脫氧核苷酸序列四種脫氧核苷酸耐熱的DNA聚合酶溫度Ti質(zhì)粒的T-DNA酚類【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）上述轉(zhuǎn)基因大米的胚乳可以合成β-胡蘿卜素，β-胡蘿卜素的顏色為橘（橙）黃色，在水稻胚乳中合成后，使大米呈現(xiàn)黃色，故被稱為黃金大米。胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為維生素A，可以治療缺乏維生素A導(dǎo)致的夜盲癥，從而提高了大米的營養(yǎng)價值。（2）八氫番茄紅素合酶基因和胡蘿卜素脫氫酶基因?qū)儆谀康幕?。?）因為要在水稻的胚乳細胞中合成β-胡蘿卜素，故在構(gòu)建黃金大米基因表達載體時，需要選擇的能夠在水稻胚乳細胞內(nèi)特異性表達的啟動子。（4）利用PCR技術(shù)對八氫番茄紅霉素合酶基因進行擴增時，需要根據(jù)八氫番茄紅素合酶基因的脫氧核苷酸序列設(shè)計引物，同時還需要在一定的緩沖溶液中提供八氫番茄紅素合酶基因、四種脫氧核苷酸和耐熱的DNA聚合酶，通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行。（5）用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將以上兩種基因?qū)胨炯毎麜r，先把目的基因插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA上，并需要使用酚類物質(zhì)處理水稻的組織細胞，以吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞?！军c睛】本題以黃金大米為情境，考查學(xué)生對基因工程的基本操作程序等相關(guān)知識的識記和理解能力，掌握相關(guān)知識點結(jié)合題意答題。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達載體?；虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設(shè)置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?！军c睛】題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識在新的情景材料下分析運用。11、限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）、DNA連接酶Ca2+/氯化鈣細菌的增殖速度細菌分解淀粉的能力菌株Ⅱ示例一：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花。從細菌中克隆Bt蛋白基因，構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入棉花細胞后進行組織培養(yǎng)。經(jīng)對再生植株中目的基因的檢測，獲得轉(zhuǎn)基因棉花。示例二：基因工程胰島素?？寺∪说囊葝u素基因，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌后，檢測目的基因，篩選高產(chǎn)菌株并進行培養(yǎng)，生產(chǎn)胰島素?！窘馕觥?/p>

基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取→基因表達載體的構(gòu)建（核心）→將目的基因?qū)胧荏w細胞→目的基因的檢測與鑒定【詳解】（1）將目的基因與質(zhì)粒載體重組時，需要使用同一種限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）將目的基因與質(zhì)粒切出相同的黏性末端，再用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒載體連接形成重組載體。（2）大腸桿菌經(jīng)過Ca2+溶液（氯化鈣）處理后能成為感受態(tài)細胞。（3）①菌落直徑越大，表明細菌數(shù)量越多，細菌增殖越快，因此菌落直徑的大小反映了細菌的增殖速度；淀粉被淀粉酶水解，在平板上形成以菌落為中心的透明圈，因此透明圈直徑的大小反映了細菌分解淀粉的能力。②H/C值越大，淀粉酶產(chǎn)量越高，因此菌株I淀粉酶產(chǎn)量最高。（4）題干要求從植物育種或人類疾病預(yù)防與治療方面舉一實例，并說明制備該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的基本技術(shù)流程，可以舉例轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花和基因工程生產(chǎn)人的胰島素兩個方面闡述，舉例如下：示例一：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花。從細菌中克隆Bt蛋白基因，構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入棉花細胞后進行組織培養(yǎng)。經(jīng)對再生植株中目的基因的檢測，獲得轉(zhuǎn)基因棉花。示例二：基因工程胰島素?？寺∪说囊葝u素基因，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌后，檢測目的基因，篩選高產(chǎn)菌株并進行培養(yǎng)，生產(chǎn)胰島素?！军c睛】本題的難點在于最后一個小題，需要考生用精煉的語言闡述基因工程的實際應(yīng)用以及書寫流程，這就要求考生在平時學(xué)習(xí)過程中注重對所學(xué)知識歸納、總結(jié)，對操作流程熟記于心，并能夠用準確、精煉的語言加以描