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elisa雙抗體夾心法實(shí)驗(yàn)報(bào)告摘要:本實(shí)驗(yàn)旨在探究Elisa雙抗體夾心法的原理及應(yīng)用,在酶標(biāo)儀上測定目標(biāo)物的濃度。通過反應(yīng)曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制,可得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本實(shí)驗(yàn)操作方法準(zhǔn)確可靠,能夠測定目標(biāo)物的濃度。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^Elisa雙抗體夾心法,測定目標(biāo)物的濃度。二、實(shí)驗(yàn)原理:Elisa雙抗體夾心法是一種分析化學(xué)方法,通過特異性抗體-抗原的相互作用,利用酶作為信號發(fā)生器來檢測特定物質(zhì)。其基本原理是,在抗體與抗原的特異性結(jié)合后,再加入另一種抗體嵌合的酶標(biāo)記,形成二次反應(yīng),使其測定量呈現(xiàn)出較高的靈敏度,測定出被檢物質(zhì)的濃度。三、實(shí)驗(yàn)步驟:1.預(yù)處理:將試管裝滿稀釋液,用超聲波浴清洗10分鐘后再用去離子水清洗干凈。2.打標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品與樣品吸附于多孔板內(nèi)壁,加入雙抗體(McAb和PcAb)的混合物使其與標(biāo)樣可以特異性結(jié)合,洗液清洗干凈試管,最后加入底物染色。3.試題評估:在樣品加入雙抗體(McAb和PcAb)的混合物中,加入研磨細(xì)胞,等待1小時(shí)后,離心去沉淀后取上清液。4.打樣品:將標(biāo)記物加入到樣品中,并加入雙抗(McAb和PcAb)混合物,等待1-2小時(shí)后,洗滌清洗干凈,加入底物染色再測定。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析:采用反應(yīng)曲線的方法,得到的目標(biāo)物濃度與OD值圖示:(圖片)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線對目標(biāo)物濃度進(jìn)行計(jì)算,數(shù)據(jù)如下表所示:(表格)五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)采用Elisa雙抗體夾心法測定目標(biāo)物濃度,通過反應(yīng)曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制,得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)確可靠,能夠測定目標(biāo)物的濃度。六、參考文獻(xiàn):1.張清山等.臨床檢驗(yàn)技術(shù)與質(zhì)量控制.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008.2.陳小平等.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù).北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.
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