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文檔簡(jiǎn)介

A-431(人表皮癌細(xì)胞)培養(yǎng)攻略細(xì)胞名稱(chēng)：A-431(人表皮癌細(xì)胞)細(xì)胞別稱(chēng)：A431;A431/P細(xì)胞貨號(hào)：SNL-066生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳(CO2)，5%；37℃細(xì)胞簡(jiǎn)介：A-431源自一位患有皮樣癌的85歲女性表皮，是由D·J·Giard等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。A-431細(xì)胞在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的NIH瑞士小鼠中形成類(lèi)似于惡性黑素瘤快速增長(zhǎng)的皮下腫瘤，在普通成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層和瓊脂上形成克隆。A-431細(xì)胞是一個(gè)超三倍體人細(xì)胞株。A-431可用于3D細(xì)胞培養(yǎng)、高通量篩選、癌癥研究、毒理學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。1、A-431細(xì)胞消化時(shí)間較長(zhǎng)，具體時(shí)間因胰酶濃度、效價(jià)、消化條件有所不同，第一次對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行消化時(shí)要摸索最佳時(shí)間（具體步驟見(jiàn)后文）。傳代時(shí)注意消化至細(xì)胞部分脫落后，先用胰酶將細(xì)胞都吹下來(lái)后再加入完培終止消化，避免細(xì)胞重新貼壁。2、培養(yǎng)時(shí)黑點(diǎn)可能會(huì)比較多，為細(xì)胞代謝產(chǎn)物和細(xì)胞碎片，不影響細(xì)胞生長(zhǎng)。若黑點(diǎn)較多可以通過(guò)PBS潤(rùn)洗或換液清除。如果黑點(diǎn)較多同時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞變形、大量死亡或不生長(zhǎng)的情況，應(yīng)該考慮操作不當(dāng)導(dǎo)致細(xì)胞受損或者存在支原體污染。3、培養(yǎng)時(shí)存在部分漂浮的細(xì)胞是正常現(xiàn)象，不影響貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)。漂浮細(xì)胞較多時(shí)可

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