幾種外用抗生素對痤瘡丙酸桿菌抑菌作用的比較研究

痤瘡丙酸桿菌（C.acnes）作為誘發(fā)痤瘡的重要因素之一，除了其本身會引發(fā)炎癥外，也可能將葡萄球菌等其他細菌帶入皮膚，造成更復(fù)雜的感染。進入青春期，很多同學(xué)因為痤瘡而苦惱，但并不清楚選擇何種藥物進行治療。外用抗生素是治療痤瘡的藥物之一，哪種外用抗生素的抑菌效果最優(yōu)？我對此進行了探究，以期為同學(xué)們治療輕中度痤瘡提供參考。一、實驗準備（一）菌種選取北京保藏生物科技有限公司保存的痤瘡丙酸桿菌ATCC11827。（二）培養(yǎng)基選取采用FT液體培養(yǎng)基和CBA固體培養(yǎng)基進行C.acnes的活化及擴培，取代強化梭菌培養(yǎng)基。（三）藥物選取選擇夫西地酸鈉、克林霉素、鹽酸金霉素進行抑菌實驗。圖1作者與指導(dǎo)老師汪海（左）討論二、實驗過程我選擇通過高溫滅菌這一方式進行氧氣的去除和儀器的滅菌。在溶液配置方面，由于儀器不夠精確，采用“做減法”的方式進行實驗。創(chuàng)造性地使用厭氧袋加恒溫搖床的方式進行培養(yǎng)，并關(guān)閉恒溫搖床的振蕩功能。（一）菌種活化及傳代培養(yǎng)1.將凍干粉離心至底部圓球位置，然后用70%的酒精脫脂棉球?qū)龈晒懿粮蓛?，并將凍干管的尖端放在火焰上加熱?.迅速滴幾滴蒸餾水至已加熱的凍干管的尖端處，尖端破裂后用鑷子輕輕敲掉凍干管尖端。3.逐漸敲開凍干管，直至適當位置注入2mL無菌水溶解（剩余菌液冷凍備用)。4.用移液槍吸取0.5mL菌液，快速地注射到3個裝7mLFT培養(yǎng)基的試管底層，塞上試管塞，并用牛皮紙包裹，在37℃環(huán)境下密封培養(yǎng)48h。5.用移液槍吸取剩余的0.5mL菌液，在平板上涂布均勻，放入?yún)捬醮?、產(chǎn)氣包和指示劑，在37℃環(huán)境下密封培養(yǎng)48h備用。6.48h后，用移液槍吸取試管底層菌液1mL（取長勢最好的），注射到2個裝25mLFT培養(yǎng)基的錐形瓶底層、2個7mLFT培養(yǎng)基的試管，用橡膠塞塞緊，在37℃環(huán)境下密封傳代培養(yǎng)48h。（二）抑菌作用比較1.配置藥物溶液用電子天平分別稱量夫西地酸鈉、克林霉素、鹽酸金霉素，用滅菌水配置質(zhì)量分數(shù)為20mg/L、200mg/L的藥物溶液備用，如表1。表1藥物溶液及其對應(yīng)的涂布平板編號2.抑菌實驗比較（1）傳代培養(yǎng)完成后，用移液槍吸取1mL長勢較好的菌液加入平板中，用涂布器均勻涂布到1號至13號平板中。14號平板不加菌液，作為陰性空白對照。（2）用移液槍吸取配置好的藥物100uL后，在已涂布好的培養(yǎng)基上打孔，之后用無菌針頭將槍頭從培養(yǎng)基中挑出。各孔中心相距25mm以上，與培養(yǎng)基邊緣相距15mm以上，在每個平板上打3個孔。每種藥物濃度做2次平行重復(fù)。（3）接種完成后將所有平板分裝至厭氧培養(yǎng)袋中，迅速加入打開包裝的產(chǎn)氣袋和開口的氧氣指示劑密封，放入37℃環(huán)境下正置培養(yǎng)。（4）48h后取出平板，測定各個平板中的抑菌圈的直徑。3.實驗結(jié)果（1）1—12號涂布平板的抑菌圈直徑見表2、表3、表4（其中“＜7”表示無明顯抑菌作用，“無”表示沒有抑菌圈）。表2不同質(zhì)量分數(shù)的鹽酸金霉素的抑菌圈直徑表3不同質(zhì)量分數(shù)的夫西地酸鈉的抑菌圈直徑表4不同質(zhì)量分數(shù)的克林霉素的抑菌圈直徑（2）13號平板為陽性空白對照，14號為陰性空白對照，如圖2。1—12號平板的抑菌圈如圖3。圖213號陽性空白對照與14號陰性空白對照圖31—12號平板的抑菌圈三、實驗分析（一）結(jié)果分析克林霉素在高濃度環(huán)境中表現(xiàn)出較強的抗菌效果，達到了高敏，抑菌圈平均直徑約為31.14mm，是同等條件下夫西地酸鈉抑菌圈直徑的兩倍以上。在低濃度環(huán)境中，兩者的抑菌圈直徑差別不明顯。在低濃度環(huán)境中，鹽酸金霉素的抑菌圈直徑不明顯，而在高濃度環(huán)境中的抑菌圈直徑大于夫西地酸鈉的，但數(shù)值不穩(wěn)定，出現(xiàn)了較多未產(chǎn)生抑菌圈的情況。綜上所得，在低濃度環(huán)境中，抑菌作用從大到小依次為克林霉素（中敏）、夫西地酸鈉（中敏）、鹽酸金霉素（鈍敏）；在高濃度環(huán)境中，抑菌作用從大到小依次為克林霉素（高敏）、鹽酸金霉素（中敏）、夫西地酸鈉（中敏）。（二）誤差分析鹽酸金霉素和夫西地酸鈉的抑菌圈在48h后繼續(xù)放置了一段時間，可能導(dǎo)致抑菌圈內(nèi)出現(xiàn)些許菌落生長。取放平板過程中的搖晃導(dǎo)致藥液流動，因此在培養(yǎng)基上出現(xiàn)了少許未生長菌落的不規(guī)則抑菌斑紋。四、實驗結(jié)論由C.acnes侵入皮脂腺引起的痤瘡，通常以局部外用抗生素的方案進行治療。我通過比較鹽酸金霉素、克林霉素、夫西地酸鈉對痤瘡丙酸桿菌ATCC11827的抑菌作用效果，發(fā)現(xiàn)對于由C.acnes感染引起的輕中度痤瘡，藥物選擇優(yōu)先級依次為克林霉素、夫西地酸鈉、鹽酸金霉素。建議局部外用克林霉素類和夫西地酸類藥物對尋常性痤瘡進行治療。專家點評文章比較了不同抗生素在低濃度和高濃度下的抑菌效果，提供了科學(xué)依據(jù)和實驗證據(jù)。這種實驗設(shè)計有助于評估抗生素的敏感性和抑菌效果，對研究抗菌治療的有效性具有科學(xué)性。文章還提供了對C.acnes感染引起的痤瘡的治療方案建議，通過比較不同抗生素的抑菌效果，得