實驗動物學(xué)課件

動物實驗基本技術(shù)和方法一、實驗前準備理論準備：了解動物實驗基礎(chǔ)知識制定研究計劃和方案查閱關(guān)于實驗方法的參考文獻條件準備：儀器、器械、藥品運輸實驗和飼養(yǎng)場所二、抓取和固定小鼠大鼠豚鼠家兔犬貓的抓取猴三、性別、發(fā)情、配種與懷孕鑒定四、編號和標記1、染色法：淺色動物3.5-5％苦味酸溶液（黃色）0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色）2％硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照10分鐘）煤焦油酒精溶液（黑色）龍膽紫溶液（紫色）2、打耳孔法：小型動物3、剪趾法：小型動物4、剪尾法：大、小鼠，僅限與兩組間區(qū)分5、烙印法：刺號鉗，中、大型動物6、針刺法：中、大型動物7、號牌法：耳標簽、項圈、腿圈，中、大型動物8、剪毛法：大動物9、籠子標號五、分組隨機化分組：避免人為影響例：將14只小鼠隨機分成兩組。①先將小鼠編為I～14號，②在隨機數(shù)字表上任點一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄12個隨機數(shù)字。編排如下；動物編號1234567891011121314隨機數(shù)日1622779439495443548217379323歸組BBABAABABBAAAA③奇數(shù)代表A織，偶數(shù)代表B組④A組：356811121314B組：1247910⑤調(diào)整分組：接剛才隨機數(shù)字23繼續(xù)抄表得隨機數(shù)字78，用78除以8（因為需要把C組的8個數(shù)字調(diào)整掉一個），得余數(shù)6，所以把A組的第6個動物，即12號動物調(diào)整到B組⑥最終分組A組：3568111314B組：124791012例：12只大鼠隨機分為3組①大鼠編號1~12②在隨機數(shù)字表上任點一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄12個隨機數(shù)字。③每個數(shù)分別用3除，記錄余數(shù)，④根據(jù)余數(shù)分組大鼠編號：1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12隨機數(shù)字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79，69，10余數(shù)：2，0，1，2，0，2，0，0，1，1，0，1組別：B，C，A，B，C，B，C，C，A，A，C，A⑤A：3，9，10，12B；1，4，6C：2，5，7，8，11⑥調(diào)整分組：接剛才隨機數(shù)字10繼續(xù)抄表得隨機數(shù)字61，用61除以5（因為需要把C組的5個數(shù)字調(diào)整掉一個），得余數(shù)1，所以把C組的第1個動物，即2號動物調(diào)整到B組。⑦最終分組A：3，9，10，12B；1，2，4，6C：5，7，8，11六、去毛1、剪毛：彎頭剪毛剪2、拔毛：大小鼠尾靜脈、家兔耳緣靜脈注射3、剃毛：將剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸溫肥皂水潤濕，用剃刀順著被毛方向剃毛，用電動剃毛推剪，則逆被毛向剃毛。4、化學(xué)脫毛：常用脫毛劑①8%硫化鈉水溶液②硫化鈉3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水調(diào)成糊狀③硫化鋇50克，氧化鋅25克，淀粉25克，加水100毫升調(diào)成糊狀④硫化鈉10克，生石灰15克，加水到100毫升，適合犬和其他大動物。七、給藥1、自動口服：加入飼料或飲水2、投喂藥片：掰開口，放到舌根部3、灌胃（i.g)：4、直腸給藥5、呼吸道給藥6、滴鼻7、點眼8、經(jīng)皮膚給藥：常用于檢測藥物、毒物、化妝品等的透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠選擇脊柱兩側(cè)皮膚，大小鼠常采取浸尾方式。9、皮內(nèi)注射(i.d)：一般用于接種或過敏實驗。將藥液注射在真皮和表皮之間。10、皮下注射(s.c)：頸背部、腋下、腿、側(cè)腹11、肌肉注射(i.m)：股部肌肉12、腹腔注射(i.p)：下腹部腹中線兩側(cè)13、靜脈注射(i.v)：小鼠：尾靜脈大鼠：尾靜脈、陰莖靜脈、舌下靜脈、淺背側(cè)跖靜脈尾靜脈注射：大小鼠有上、左、右3根尾靜脈陰莖靜脈注射舌下靜脈注射淺背側(cè)跖靜脈注射猴的后肢皮下靜脈注射豚鼠：淺背側(cè)跖靜脈、耳靜脈注射家兔：耳靜脈注射豬：耳緣靜脈猴：前肢橈靜脈、后肢隱靜脈注射貓、狗：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈注射狗前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈狗后肢外側(cè)小隱靜脈14、腦腔注射：（1）小鼠小指夾鼠尾，拇指和是指置小鼠頭兩側(cè)固定，中指和無名指壓住鼠身，在注射處消毒后，右手持注射器，以食指固定針芯，垂直刺入針頭深度約5～7mm（2）兔將兔用固定器固定好，剃去頭頂?shù)谋幻?，左手將頭皮繃緊，消毒后，右手持錐子，自頭頂正中稍偏一側(cè)部位，錐穿頭骨，即換以左手固定錐子，右手持注射器，使針頭沿錐尖刺入，慢慢拔出錐子，即刻將針頭刺入約10～20mm，即可推液15、關(guān)節(jié)腔注射：16、椎管內(nèi)注射：注射入蛛網(wǎng)膜下腔17、淋巴囊內(nèi)注射：蛙和蟾蜍18、小腦延髓池注射：八、采血1、大小鼠：眶靜脈叢（竇）：少量多次采大小鼠血。小鼠0.2～0.3ml，大鼠0.4～0.6ml摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到4～5％體重的血量尾靜脈：用于少量多次采大小鼠血剪頭：用于一次性大量采小鼠血，可得到0.5～1.0ml的血量大血管：包括頸動脈（靜脈），股動脈（靜脈），腋下動脈（靜脈），腹主動脈。此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。可得5ml左右血量。心臟采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。2、家兔：耳緣靜脈：可反復(fù)采血，每次5～10ml。耳中央靜脈：可反復(fù)采血，每次10～15ml。心臟采血：可用于一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。一次性開胸采血可得到80～100ml血量頸動靜脈采血：用于一次性采血，需要手術(shù)，可得血量80～10ml。3、豚鼠：心臟采血：可用于一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。一次性開胸采血可得到5～10ml血量。背跖靜脈采血：用于少量反復(fù)采血。4、犬貓：和靜脈注射部位相同，前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈。也可頸靜脈（動脈）或心臟采血5、豬：心臟采血或耳大靜脈采血6、羊：頸靜脈采血7、猴：前肢頭靜脈、后肢皮下靜脈或耳緣靜脈等。8、禽類：翼下靜脈常用抗凝劑：肝素：抑制凝血酶活力，阻止血小板凝集。純品肝素1mg＝125U，10U~20U抗1ml血凝集，但通常應(yīng)用2~3倍劑量。用法：可配成1%肝素溶液，用時取0.1ml于試管內(nèi)，100℃烘干，每管可抗凝5~10ml血。或用1%肝素溶液濕潤采血注射器。肝素可改變蛋白質(zhì)等電點，當用鹽析法分離蛋白作分類測定時，不可用肝素抗凝。枸櫞酸鈉：使凝血必需的鈣離子失活。常用3~5%水溶液，堿性較強。草酸鹽合劑：草酸銨1.2g，草酸鉀0.8g，福爾馬林1.0ml，加蒸餾水至100ml。使凝血必需的鈣離子失活。每毫升血加草酸鹽合劑0.1ml。氟化鈉：每毫升血加6mg。九、其他體液采集1、胸水、腹水采集：穿刺2、消化液采集：唾液，胃液，胰液，膽汁3、精液采集：中、大動物用假陰道，小動物穿刺附睪來采集精液。4、腦脊液采集：手術(shù)或小腦延髓池抽取5、骨髓采集：大動物活體穿刺，小動物處死后取股骨或胸骨骨髓6、尿液采集：代謝籠收集導(dǎo)尿管采集膀胱穿刺壓迫排尿十、麻醉1、麻醉方法：全麻吸入麻醉，靜脈注射、腹腔注射。局麻浸潤麻醉。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射到術(shù)野周圍。2、麻醉前準備：禁食8~12h，防止嘔吐，可飲水根據(jù)實驗部位和種類，給動物脫毛。犬、豬、猴等大動物可在麻醉前給予一些藥物以減少動物緊張，減少支氣管分泌阿托品：減少支氣管和唾液腺分泌，防止氣管阻塞。副作用：加快心率。用量：肌肉或皮下注射0.04mg/kg安定：產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用，加強麻醉效果，使骨骼肌松弛。用量：2.5~5mg/kg嗎啡：產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用。副作用：抑制呼吸中樞。用量：皮下注射1~2mg/kg，肌肉注射10~20mg/kg.3、麻醉藥物：全麻藥物乙醚：強揮發(fā)性、易燃。乙醚是最常用的吸入麻醉劑，各種動物適用。機制：抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。特點：安全范圍大，肌肉完全松弛，對肝腎毒性小，麻醉誘導(dǎo)期和蘇醒期較長。副作用：局部刺激大，引起上呼吸道黏膜分泌增加，導(dǎo)致呼吸道阻塞，可用阿托品對抗解救。巴比妥類：種類很多，有巴比妥鈉，戊巴比妥鈉，硫噴妥那，苯巴比妥鈉等。適用于各種動物。特點；安全范圍廣，毒性小，麻醉潛伏期短，麻醉維持時間長。可腹腔或靜脈給藥。機理：阻斷神經(jīng)沖動傳遞到大腦。副作用：過量使用可導(dǎo)致呼吸肌麻痹而死亡，同時抑制末梢循環(huán)，導(dǎo)致血壓降低，并影響基礎(chǔ)代謝，導(dǎo)致體溫降低氯胺酮：常用其鹽酸鹽。特點：麻醉潛伏期短，麻醉維持期僅10~20min，麻醉淺，安全性高，可重復(fù)給藥。機制：阻斷大腦聯(lián)絡(luò)途徑。副作用：興奮心血管系統(tǒng)，使血壓升高，心率加快，偶爾引起嘔吐。水合氯醛：作用特點和巴比妥類相似。但安全范圍小，麻醉劑量和中毒劑量接近，對皮膚和黏膜有較強刺激。局麻藥物普魯卡因：是無刺激性的局麻藥物。特點：麻醉速度快，注射后1~3分鐘就可產(chǎn)生麻醉?？梢跃S持30~45分鐘。對皮膚和黏膜穿透力很弱，需要注射給藥才能產(chǎn)生局麻效果。它可以使血管舒張，易被吸收入血液而失去效果。在其溶液中加入腎上腺素（每100ml加入0.1%腎上腺素0.2~0.5ml）可以使麻醉時間延長1~2小時。利多卡因：效力和穿透力比普魯卡因強的卡因：化學(xué)結(jié)構(gòu)和普魯卡因類似，效力和穿透力比普魯卡因強。

4、實驗動物的急救呼吸停止：人工呼吸尼可剎米：適用于各種原因的中樞性呼吸衰竭，每次0.25g~0.5g，靜脈注射。戊四氮：對抗巴比妥類和氯丙嗪過量導(dǎo)致的呼吸衰竭，每次0.1g，靜脈注射或心內(nèi)注射美解眠：對抗巴比妥類和水合氯醛中毒，每次50mg，靜脈緩慢注射心跳停止：心臟按摩針刺或脈沖電刺激腎上腺素：用于心臟驟停的急救。每次0.5~1.0ml靜脈注射碳酸氫鈉：糾正急性酸中毒?？勺⑸淠I上腺素后立即靜脈注射5%碳酸氫鈉1~2ml/kg十一、處死1、頸椎脫臼法：小鼠、大鼠2、空氣栓塞法：兔、貓、犬等大動物3、放血法：心臟放血或大血管放血4、斷頭法：小鼠、大鼠5、吸入二氧化碳6、注射巴比妥類藥物十二、動物的大體解剖和臟器識別（1）切面術(shù)語①矢狀面：是與動物體長軸平行面與地面垂直的切面。其中把動物體等分成左、右對稱兩半的叫正中矢面；與正中矢面相平行的所有切面均稱為矢狀面。②橫斷面：是與動物體長軸相垂直的切面，把動物體分成前、后兩部分。與器官長軸相垂直的切面也叫橫斷面。③額切面（水平面）：與地面平行面與矢狀面和橫斷面相垂直的切面，可把動物體分成背、腹兩部分。橫切面2、矢狀面3、額切面4、顱側(cè)(前側(cè))5、尾側(cè)(后側(cè))6、背側(cè)7、腹側(cè)8、內(nèi)側(cè)9、外側(cè)10、口側(cè)11、遠口側(cè)12、背側(cè)13、掌側(cè)、14、跖側(cè)15、近端16、遠端17、軸側(cè)18、遠軸側(cè)狗軀體各部名稱

小鼠的淋巴系統(tǒng)小鼠乳腺區(qū)域外科手術(shù)大鼠無創(chuàng)血壓測量，尸體剖檢等

略尸體需要做無害化處理：高壓、焚燒、深埋等實驗動物的選擇和利用第一節(jié)實驗動物選擇基本原則一、根據(jù)課題研究的目的、內(nèi)容、水平，選用相匹配的標準化動物一切動物實驗都是為科學(xué)研究服務(wù)的，選擇實驗動物，首要的就是要根據(jù)研究的內(nèi)容來選擇實驗動物。蛙的大腦不發(fā)達，不可作為高級神經(jīng)活動的實驗，但蛙的脊髓具有最簡單的發(fā)射中樞，做神經(jīng)反射弧實驗，簡單、直觀、明確、容易分析。二、必要的預(yù)試驗有助于選擇與本課題相適應(yīng)的實驗動物動物預(yù)試驗的作用在于1.初步觀察動物是否適宜于本項目的研究2.熟悉動物的生物學(xué)特性及飼養(yǎng)管理3.檢查與動物實驗配套的實驗條件、方法是否初步到位三、充分利用與人具有某種相似性的實驗動物絕大多數(shù)生物學(xué)與醫(yī)學(xué)研究的最終目的是要為人類服務(wù)的。因此在實際可能的情況下，盡量選擇那些生物學(xué)特征及解剖生理特點等與人類類似的實驗動物。一般來說，實驗動物愈高等，進化程度愈高、其機能、代謝、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜．反應(yīng)就愈接近人類，猴、拂拂、猩猩、長臂猿等靈長目動物是最近似于人類的理想動物。但實驗動物中，并非僅靈長類動物在生物學(xué)特性、解剖生理特點等方面與人具有相似性。1.結(jié)構(gòu)功能的相似性2.時象或年齡狀態(tài)的相似性3.群體分布的相似性在以群體為對象的研究課題,有時要考慮到選擇與人群基因型及表現(xiàn)型分布類型相似的動物類別。主要是一些封閉群動物,如:KM小鼠,Wistar大鼠,畢格犬等。人類封閉群動物群體分布相似4.生態(tài)或健康狀況的相似性在正常生命過程的研究中，找到與人類生態(tài)情況相似的替代模型非常重要。現(xiàn)有的不同微生物學(xué)質(zhì)量級別的普通動物、清潔動物、SPF動物、無菌及悉生動物分別代表著不同的微生態(tài)模式并具有不同特點,適用于不同研究目的。5.疾病特點的相似性實驗動物有許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病能局部或全部地反映與人類類似的疾病過程及特點，可用于研究相關(guān)的人類疾病。6.操作實感的相似性外科手術(shù)性的操作模型中或教學(xué)示教中,常選擇體型較大的動物。1.差異性原則

由于物種之差異，各種動物之間存在基因型、組織型、代謝型、易感性等方面的差別，這種差異有時可作為研究課題所需的一種指標或特殊條件。四、除利用與人具有的相似性以外的實驗動物選擇原則

如：對毒性或抑制機制的敏感性的差異常被利用于藥物尤其是抗菌、抗腫瘤藥物的研究，這類差異越大則藥物特異性越強。利用這一特點，人們可能找對人類毒性小而對病原微生物或腫瘤細胞殺傷力強的藥物。又如，免疫缺陷模型在組織排斥反應(yīng)上的差異，使得同種異體移植或異種異體移植得以實現(xiàn)。2.易化原則進化程度高或結(jié)構(gòu)機能復(fù)雜的動物有時會給實驗條件的控制和實驗結(jié)果的獲得帶來難以預(yù)料的困難。應(yīng)依據(jù)易化原則選擇那些結(jié)構(gòu)功能簡單而又反映研究指標特質(zhì)的動物。

例如：在遺傳研究中，用壽命短、繁殖快的果蠅取得了豐碩的成果，而同樣方法若改用靈長目動物其難度是很難設(shè)想的。有時為了刪除系統(tǒng)作用背景對某器官或某功能進行研究，可用離體方法進行。3.相容或匹配原則所謂“相容”或“匹配”是指所用動物的標準化品質(zhì)應(yīng)與實驗設(shè)計、技術(shù)條件、實驗方法等條件相適應(yīng)。在設(shè)計實驗時不但要了解實驗儀器精度和靈敏性能．了解試劑的品質(zhì)、性能以及試劑和儀器之間的匹配性能，也要了解動物或動物模型對實驗手段的反應(yīng)能力。避免應(yīng)用高精儀器、試劑和低品位動物或低反應(yīng)性能匹配，或用低性能測試手段與高反應(yīng)性動物相匹配的不相協(xié)調(diào)的配合。4.易獲性原則易獲性是理想的實驗動物條件之一。雖然貓、狗、豬及靈長動物居于較高進化水平．各有其研究價值，尤其是靈長類動物在許多方面有不可替代的優(yōu)越性。然而這些大動物則往往由于其較長生殖周期，低繁殖率或產(chǎn)仔率等弱點而影響其易獲性，因而亦影響其被選用，故通常不作首選。從Little1901年育成第一株近交小鼠至今，已有常用近交系小鼠260多系，近交大鼠100多系，30多系近交地鼠，還有近交系鼠和近交免。此外，還有許多嚙齒目封閉群、突變系、雜交系動物可供選擇。這些動物因其繁殖周期短，多胎性等特點，使其非常易獲，且又是小型哺乳動物，在進化上比其他綱的脊椎動物要優(yōu)越，而且有豐富而清楚的背景資料、文獻索引、價低、分布又廣，故為實驗的良好選擇。??????5.重現(xiàn)性、均一性原則重現(xiàn)性和均一性為實驗結(jié)果質(zhì)量品質(zhì)所在。若實驗結(jié)果不能再現(xiàn)或不穩(wěn)定，則該結(jié)果的可靠性便成了問題。理論上說一定的基因型產(chǎn)生一定的表現(xiàn)型和演出型。因此，選擇基因型一致或相似是保障重現(xiàn)性和穩(wěn)定性的重要措施。一般情況下近交系動物的生物反應(yīng)穩(wěn)定性、實驗重復(fù)性都較封閉群好。F1代雜交群在一定程度上兼有近交系和遠交群的特點。封閉群動物雖然能較好地代表自然群體．但群與群之間有時存在有差異。因而在重現(xiàn)性上都有一定問題。周圍環(huán)境與發(fā)育環(huán)境是影響實驗動物表現(xiàn)型、演出型的重要因素。營養(yǎng)因素對胚胎影響、不同微生態(tài)環(huán)境、動物的疾病狀況等等，都會影響實驗反應(yīng)穩(wěn)定性，故也是選擇實驗動物的重要指標。

genotype基因型發(fā)育環(huán)境

developmentalphenotype表現(xiàn)型周圍環(huán)境

proximatedramatype演出型五、動物實驗結(jié)果的外推大多數(shù)生物學(xué)與醫(yī)學(xué)研究的最終目的是要為人類服務(wù)的。因此動物模型和動物實驗結(jié)果都要外推到人身上去，這就是動物實驗結(jié)果的外推（extrapolation）。因為動物與人不是同一種生物，加之不同的動物有不同的功能和代謝特點，所以肯定一個實驗結(jié)果最好采用兩種以上的動物進行觀察比較。所選的實驗動物中一種為嚙齒類動物，另一種為非嚙齒類動物。常用的實驗序列是小鼠、大鼠、狗、猴或小型豬。六、選用與實驗要求相適應(yīng)的實驗動物規(guī)格1.年齡實驗動物的年齡不同，其生物學(xué)特性也不同。2.體重實驗動物的體重與年齡有一定的相關(guān)性，在正常營養(yǎng)狀態(tài)及飼養(yǎng)條件下，也可根據(jù)體重加以選擇，發(fā)育正常、體重符合要求的實驗動物。3.性別許多實驗證明，同一品種（系）動物不同性別對許多外界刺激的反應(yīng)不一致，對實驗結(jié)果的影響不同。一般來說，無特殊要求宜選用雌雄各半。

♂≠♀七、實驗動物的選擇和應(yīng)用要注意有關(guān)國際規(guī)范和動物福利國際上普遍要求動物實驗達到實驗室操作規(guī)范（Goodlaboratorypracitice，GLP）和標準操作程序（Standardoperatingprocedure，SOP）。同時國際上廣泛宣傳3R原則。第二節(jié)論文中動物實驗的描述品種、品系的名稱微生物質(zhì)量來源合格證號性別年齡體重數(shù)量實驗和飼養(yǎng)環(huán)境動物實驗處理方式第三節(jié)醫(yī)藥研究中實驗動物的選擇和應(yīng)用

藥理學(xué)研究中的選擇

主要藥效學(xué)一般藥理學(xué)藥物代謝動力學(xué)

一、主要藥效學(xué)

《新藥藥效學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（一）總的要求：1.方法體內(nèi)體外兩種以上試驗方法證明主要藥效，其中一種必須是整體的正常動物或模型動物。實驗?zāi)Ｐ捅仨毮芊从乘幚碜饔玫谋举|(zhì)。確無法滿足上述動物和模型要求時，應(yīng)予以充分說明理由，改用其它模型。

2.指標應(yīng)能反映主要藥效作用的藥理本質(zhì)客觀，能定量或半定量。3.劑量應(yīng)做出量效關(guān)系，盡量求出ED50，或有效劑量范圍。量效關(guān)系不明確的藥物應(yīng)說明原因。4.給藥方法應(yīng)采用擬推薦臨床應(yīng)用的給藥方法。如該法在動物上無法實施時，應(yīng)予說明，改用他法。5.對照應(yīng)有空白對照和巳知標準陽性藥物或治療措施對照。（二）有關(guān)說明：1.動物選擇一般選擇的動物應(yīng)是品系清楚、成年、健康、雌雄各半、符合實驗動物管理要求、且對藥效學(xué)反映敏感的動物。但同時要注意對動物年齡、性別、種屬的選擇。2.模型的建立3.分組：單組比較設(shè)計：同一個體的前后觀測指標比較，消除了個體差異配對比較設(shè)計：將性質(zhì)相同的動物為一對，配成若干對，再將一對動物隨機分配在兩組，取得均衡實驗。減少誤差和個體差異完全隨機設(shè)計拉丁方設(shè)計：適用于多因素實驗正交設(shè)計：多因素、多水平的實驗。4.劑量(一)最小有效量藥物達到開始出現(xiàn)藥效的劑量。

(二)極量是指安全用藥的極限劑量。

(三)治療量(常用量:)治療量是指臨床常用有效劑量范圍。它比最小有效量要高，又比藥物極限量要低。

(四)最小中毒量最小中毒量是指藥物已超過極量，使機體開始出現(xiàn)中毒的劑量。

(五)中毒量中毒量是指大于最小中毒量，使機體中毒的劑量。

(六)致死量致死量是引起機體死亡的劑量。

(七)藥物的安全范圍是指最小有效量與極量之間的范圍。安全范圍廣的藥物，其安全性大；安全范圍窄的藥物，其安全性小。以上是臨床應(yīng)用的各種劑量。此外，在實驗研究中，還要引用統(tǒng)計學(xué)計算的兩種劑量：半數(shù)致死量(LD50)及半數(shù)有效量(ED50)。（1）給藥量的確定參考結(jié)構(gòu)和作用相似的藥物劑量作為應(yīng)用劑量或者以小鼠中毒劑量或致死劑量的1/5或1/10作為應(yīng)用劑量按等比關(guān)系設(shè)立至少3個劑量組進行動物實驗考慮動物種屬，年齡，給藥途徑調(diào)整給藥劑量。（2）人與動物及各類動物間藥物劑量的換算按體表面積計算A=K×(W2/3/10000)A：體表面積（m2）；W：體重(g);K：體表面積系數(shù)小鼠大鼠豚鼠家兔貓犬猴人K9.19.19.810.111.211.810.5例如：某藥大鼠劑量為250mg/kg，問犬的給藥劑量？（假設(shè)一般實驗大鼠0.2kg，實驗犬10kg）①算大鼠體表面積：A=0.031m2②將mg/kg劑量換算為mg/m2劑量：（250mg/kg×0.2kg）/0.031m2=1608mg/m2③算犬體表面積：A=0.5198m2④算犬給藥劑量：1608mg/m2×0.5198m2/10kg=84mg/kg按體型系數(shù)換算

dA=dB×RA/RB×（wA/wB）1/3dA和dB分別是A、B兩種動物的每kg體重劑量（mg/kg)RA和RB分別是A、B兩種動物的體型系數(shù)

wA和wB分別是A、B兩種動物的體重小鼠大鼠豚鼠兔貓猴犬人R5990999382111104100二、藥物代謝動力學(xué)目的：了解新藥在動物體內(nèi)動態(tài)變化的規(guī)律及特點，為臨床合理用藥提供參考。內(nèi)容：藥時曲線、吸收速率、清除速率、分布情況等等。健康成年動物首選動物種類及性別盡量和藥效學(xué)或毒理學(xué)一致。藥物動力參數(shù)測定以大動物為好。藥物分布實驗以大鼠或小鼠為好。三、一般藥理學(xué)研究目的：了解新藥的全面藥理作用，補充毒性觀察之不足，為長期毒性的試驗設(shè)計提供參考。內(nèi)容：至少觀察3個系統(tǒng)，神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)。盡量選擇和主要藥效學(xué)一致的動物對心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)，一般用犬，而不用小鼠和兔對性別要求不嚴。對神經(jīng)系統(tǒng)，多用小鼠、大鼠（一）抗腫瘤藥物研究抗腫瘤藥物的研究中常選擇以下3種類型的動物模型。

1.自發(fā)性腫瘤模型

2.誘發(fā)性腫瘤模型

3.移植性腫瘤模型四、一些常用藥物研究中的動物選擇自發(fā)性腫瘤模型如：AKR的自發(fā)性白血病，C3H的自發(fā)性乳腺癌誘發(fā)性腫瘤模型用γ射線、二甲基苯蒽（DMBA）、黃曲霉素等誘發(fā)大小鼠、兔等發(fā)生癌癥。移植性腫瘤模型通常是接種一定數(shù)量的腫瘤細胞，或者是一些可致癌的病毒濾液，成功率接近100％，是最常用的抗腫瘤藥篩選模型。早期的抗癌藥物研究均已動物腫瘤為篩選模型，隨著T細胞免疫缺陷的裸鼠以及T、B細胞均缺陷的Scid鼠的發(fā)現(xiàn)，人體腫瘤異種移植動物模型得到了極大的發(fā)展，為抗癌藥物的尋找提供了更好的動物模型。（二）心血管系統(tǒng)疾病研究1、動脈粥樣硬化癥研究：早期選用鳥類（雞和鴿）和兔。但兔病變的局部解剖學(xué)與人類不同。兔是草食動物，膽固醇代謝與人不完全一致。目前常用大鼠、小型豬、狗、鴿、非人靈長類。恒河猴可以廣泛的主動脈和各個動脈的粥樣硬化。豬在高脂飼料誘導(dǎo)下形成的動脈粥樣硬化病變和分布與人很相似，又較猴便宜。2、高血壓研究：常用狗和大鼠試驗性高血壓模型常對動物給予加壓物質(zhì)或進行手術(shù)結(jié)扎腎動脈制備自發(fā)性高血壓動物模型有ＳＨＲＨ，ＤＳ，ＳＴＲ，ＬＨ等大鼠品系．

SHR(spontaneouslyhypertension

rat)是日本人okamoto用Wistar交配逐代選育而成。其發(fā)病表現(xiàn)與人原發(fā)性高血壓極為相似，是高血壓研究的最佳模型。1.5~2月齡就開始出現(xiàn)病變。血壓高、心臟肥大、出現(xiàn)腦梗死、心肌梗死、動脈肥厚等。繁殖正常。它和人類自發(fā)性高血壓有很多相近之。如：都是遺傳因素占主要地位；病程相似，血壓隨年齡增加而增加；高血壓早期有高血流特征；刺激和大量攝入食鹽加重病情；發(fā)生繼發(fā)性心血管損害．3、心肌缺血試驗研究：狗、豬、兔、大鼠、貓。狗心臟解剖和人類似，冠狀血管容易操作，心臟抗紊亂能力強，狗容易馴服。豬的冠狀循環(huán)和血液動力學(xué)和人類似，側(cè)枝循環(huán)比狗少，容易造成心肌缺血兔開胸手術(shù)不需要人工呼吸4、心率失常試驗研究：豚鼠、狗、豬、猴、兔、大鼠、貓。需要注意：小型動物因心臟小，沖動傳遞通路比較短，心室失常的震顫自發(fā)恢復(fù)較快。大鼠對強心甙不敏感。大小鼠心電圖無S~T段。若做開胸和心臟實驗，兔是首選動物。（三）消化系統(tǒng)疾病研究:1、狗有發(fā)達的消化系統(tǒng)，而且有與人相似的消化過程，適宜作消化系統(tǒng)的慢性實驗。

2、獼猴適合做人痢疾桿菌病，

3、大鼠肝再生能力強，適合肝切除術(shù)，4、維生素C缺乏癥選擇豚鼠。5、胃潰瘍多選擇大小鼠給以寒冷刺激、醋酸燒灼、幽門螺旋桿菌感染等方法5、乙肝病毒的研究黑猩猩最適合，但不易獲得。雛鴨DHBV感染，土撥鼠WHBV感染和人HBV感染有一定差別。樹鼩HBV感染表現(xiàn)為一過性，復(fù)制和表達水平不高。近年來HBV轉(zhuǎn)基因小鼠受到重視。（四）呼吸系統(tǒng)疾病研究:１.鎮(zhèn)咳藥首選動物是豚鼠．豚鼠對化學(xué)刺激或機械刺激都很敏感。狗也是咳嗽的良好動物模型．狗的咳嗽在反復(fù)刺激時變異小，故特別適合觀察鎮(zhèn)咳作用持續(xù)時間．一般不用大小鼠，因為它們噴嚏和咳嗽動作很難區(qū)別。也不用兔。2、支氣管哮喘最常用的是大鼠、豚鼠、狗。豚鼠的支氣管平滑肌對致痙劑和藥物反應(yīng)敏感3、祛痰藥研究選用雄性小鼠、兔或貓。4、大鼠可以用做實驗性肺纖維化、矽肺、肺水腫研究5、豚鼠可用做結(jié)核桿菌、白喉桿菌研究

（五）神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究：1、鎮(zhèn)痛藥一般用大鼠或小鼠，但熱板法一般不用于雄性動物，因為雄性動物陰囊對熱敏感2、研究神經(jīng)傳導(dǎo)首選貓3、沙鼠因為Willis動脈環(huán)不完整，結(jié)扎一側(cè)總動脈，沙鼠出現(xiàn)腦梗塞。沙鼠還可以作為自發(fā)性癲癇模型。4、家兔頸部減壓神經(jīng)、、迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)獨立行走，可以用來研究減壓神經(jīng)對心臟的作用5、DBA/2N小鼠（35日齡）聽源性癲癇發(fā)生率為100%。C3H/eN小鼠對脊髓灰質(zhì)炎病毒Lan-sing株敏感。C57BL/KalWN小鼠有先天性腦積水。6、研究嗎啡的時候注意，嗎啡對小鼠和貓表現(xiàn)為中樞興奮作用，而對犬、兔、猴、大鼠、人表現(xiàn)為中樞抑制。7、靈長目用于行為學(xué)研究8、樹鼩的神經(jīng)系統(tǒng)有特色，對它進行腦外科手術(shù)，無須麻醉樹鼩也可以忍受切割皮膚、肌肉、硬腦膜等引起的疼痛。表現(xiàn)僅為流口水，而不掙扎。9、抗焦慮藥研究一般選用成年健康小鼠、大鼠、兔等。長期實驗應(yīng)選用雄性動物為好，因為雄性動物耐受性強?？挂钟羲幙蛇x用小鼠、大鼠，其次為狗、豬。

（六）內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病研究：有多種基因突變動物1、db：糖尿病基因（diabetes),為4號染色體隱性突變基因。發(fā)現(xiàn)于C57BL/KsJ小鼠。純合子糖尿病伴有肥胖癥。多食、多飲、多尿，高血糖，尿糖，胰島素分泌過多。短壽，純合子一般不孕。2、ob：肥胖基因（obese),為6號染色體隱性突變基因。純合子單純肥胖，或伴有輕度糖尿病。4周齡就表現(xiàn)肥胖。8~9月齡可達峰值70g。一度有中高血糖，但隨后自行消失。免疫反應(yīng)水平降低。3、NOD/LtJ小鼠NOD小鼠由日本Aburahi的Shionogi研究實驗室培育而成。NOD小鼠在糖尿病形成中所產(chǎn)生的胰島炎(insulitis)癥狀，是指胰臟小島中產(chǎn)生白血球的浸潤物。約１２周齡的母鼠有明顯的胰島素含量降低的現(xiàn)象；而雄鼠則于稍后幾周也發(fā)生此現(xiàn)象。糖尿病開始時有明顯的中度糖尿病癥，非禁食期的葡萄糖含量高于250mg/dl。主要用于糖尿病和免疫學(xué)方面的研究。4、dw：矮小基因(dwarf)1929年Snell發(fā)現(xiàn)。純合子腦下垂體前葉缺損，幾乎不分泌生長激素，腎上腺素分泌水平很低，睪丸和卵巢發(fā)育不正常，雌雄都無繁殖能力。發(fā)育到10日齡就明顯小于正常小鼠，到20日齡體重不再增加，體重僅為正常小鼠1/3。與之類似還有af(amesdwarf)基因。5、di：尿崩癥基因(diubetesinsipidus)3號染色體隱性基因。純合子下丘腦病變使加壓素和抗利尿激素分泌減少。癥狀為煩渴、多尿、尿滲透壓低。是遺傳性下丘腦尿崩癥良好模型6、fa：肥胖基因(fatty)5號染色體隱性基因。純合子食欲亢進、胰島素分泌過多、血漿中脂肪含量是正常的10倍、膽固醇也偏高。3周齡就表現(xiàn)肥胖，40周齡是正常大鼠的2倍。雌雄不育。做有關(guān)代謝試驗是，宜選擇雄性動物，因便于收集尿液。腎上腺皮質(zhì)激素類藥物研究可選用大鼠、小鼠。H1受體激動藥物或阻斷藥物研究首選是豚鼠，其次為大鼠，雌雄各半。

（七）計劃生育藥物研究注意動物生殖生理特點繁殖周期：狗春秋二季季節(jié)性單發(fā)情；貓春秋二季季節(jié)性多次發(fā)情；大小鼠、豚鼠、家兔常年多次發(fā)情；獼猴有月經(jīng)周期排卵方式：兔、貓、駱駝?wù)T導(dǎo)排卵；其他自發(fā)排卵發(fā)情周期：發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期、發(fā)情間期終止中期妊娠藥物或子宮收縮藥物的研究常選用雌性大鼠、豚鼠、家免、貓。女用避孕藥常選用雌性大鼠、倉鼠、家兔及獼猴，且盡可能選用近交系動物。男用避孕藥常選用雄性近交系大鼠或獼猴。五、藥物毒理學(xué)及安全性評價試驗中實驗動物的選擇和應(yīng)用20世紀60年代的“反應(yīng)?！笔录磻?yīng)停（Thalidomide）是西德一家制藥公司50年代末期生產(chǎn)的一種鎮(zhèn)靜催眠藥，具有止吐作用。孕婦在懷孕一二個月時，往往會產(chǎn)生強烈的妊娠反應(yīng)，服用這種藥后，能暫時減輕妊娠反應(yīng)。1959-1962年，歐洲19國和日本相繼出生了12000多名手腳異常的畸形嬰兒。這種嬰兒手腳比正常人短，形狀如海豹甚至根本沒有手腳。倫茲博士對這種怪胎進行了調(diào)查，于1961年發(fā)表了“畸形的原因是催眠劑反應(yīng)停”的結(jié)論，使人們大為震驚，并引起各國政府相關(guān)部門的高度重視。反應(yīng)停引起的肢體畸形（一）急性毒性實驗指動物一次或24小時內(nèi)多次給予大劑量藥物后，觀察：LD50、毒性靶器官、中毒表現(xiàn)等。一般選擇小鼠、有時也選擇大鼠。一類新藥，還要求增加犬或猴實驗。小鼠體重18-22g，同次試驗體重相差不超過4g，大鼠體重120-150g，次試驗體重不超過20g；狗用成年狗。雌雄各半。小動物要求4-6組，每組至少10只；狗6條。（二）長期毒性實驗指是反復(fù)多次給藥于動物，觀察藥物對動物的毒性反應(yīng)，一般是指連續(xù)給藥14天以上，一般在3個月以內(nèi)，特殊情況可在3個月以上。過去將長期毒性試驗分別叫過亞急性毒性試驗、亞慢性毒性試驗、慢性毒性試驗和終生毒性試驗。要求兩種動物。一種為嚙齒類，首選大鼠。另一種為犬，首選Beagle犬。雌雄各半3個劑量組，大鼠每組至少10只，犬每組4只。實驗時間越長，需要動物越多。（三）特殊毒性實驗包括：致突變實驗；致癌實驗；生殖毒性實驗生殖毒性實驗包括一般生殖毒性實驗、致畸敏感期實驗、圍產(chǎn)期毒性實驗。不同種屬動物要求至少兩種動物。嚙齒類可用小鼠、大鼠、倉鼠等，非嚙齒類兔、犬、雪豹及靈長類。常用大鼠和兔。致突變實驗一般用NIH小鼠?，F(xiàn)在各國致力于替代實驗。致癌實驗一般選擇小鼠或大鼠，如A系小鼠，F(xiàn)344大鼠。長期致癌試驗對實驗動物要求很高，必須提供動物飼養(yǎng)場5年內(nèi)該品系大、小鼠的癌癥自發(fā)率數(shù)據(jù)。對環(huán)境要求也很高，動物應(yīng)飼養(yǎng)在SPF環(huán)境中，要排除一切其它致癌因素?；蚯贸∈?，如抑癌基因P53和lats的基因敲除小鼠，對致癌物質(zhì)更為敏感，作為長期致癌試驗的實驗動物將有更大的應(yīng)用前景。（四）其他安全性評價1、過敏反應(yīng)實驗全身過敏反應(yīng)：豚鼠皮膚局部過敏反應(yīng)：白色豚鼠2、熱原質(zhì)檢查：家兔3、異常毒性實驗：小鼠4、降壓物質(zhì)檢查：貓5、藥物依賴性試驗：大、小鼠及猴第四節(jié)其它研究中的動物選擇一、創(chuàng)傷學(xué)研究（一）燒傷豬、犬、家兔、大鼠、小鼠、豚鼠等。其中豬由于與人的皮膚相似，是最為理想的動物。需要建立一系列的動物模型來進行實驗。（二）沖擊傷犬、兔、豚鼠或大小鼠，大動物為宜。（三）高速投射物致傷犬和豬（四）撞擊傷兔、犬和豬二、放射學(xué)實驗研究常選用大小鼠、沙鼠、犬、豬、猴等，不使用兔。因為兔對放射線非常敏感，照射后常發(fā)生休克樣死亡。小鼠常用品系有C57BL/6、LACA、C3H、RF、SJL三、休克試驗研究1.失血性休克：大多用狗或山羊做為模型動物，也有用貓和猴的。兔、嚙齒類效果較差。2.感染性休克：狗作感染性休克模型，優(yōu)點很多，貓和嚙齒類常有較大的耐受性。兔極不穩(wěn)定。3.創(chuàng)傷性休克：需要使用較多數(shù)量的動物，以滿足統(tǒng)計需要。所以選擇嚙齒類等中小型動物比較適宜。一般常用大鼠、兔，狗等大動物只偶爾使用。四、微生物實驗研究

1.病毒學(xué)研究2.細菌學(xué)研究3.微生物實驗研究中動物選擇的考慮因素（1）與宿主有關(guān)的因素a.基因型b.年齡c.性別d.微生物狀態(tài)（2）與微生物和物質(zhì)有關(guān)的因素a.毒力b.劑量c.接種途徑d.營養(yǎng)e.環(huán)境五、遺傳學(xué)研究六、營養(yǎng)學(xué)研究1.食譜需要中種的變化2.營養(yǎng)的增效與拮抗作用3.饑餓和營養(yǎng)不良的動物模型4.動物在碳水化合物，蛋白質(zhì)，脂肪及其相關(guān)代謝中的應(yīng)用5.維生素及礦物質(zhì)與之相關(guān)疾病的研究6.無菌動物在營養(yǎng)代謝研究中的應(yīng)用七、行為學(xué)研究中的應(yīng)用1.嚙齒類、貓、狗，靈長類在行為學(xué)研究中的應(yīng)用。2.神經(jīng)機能病，精神病，躁狂-抑郁癥的動物模型，精神分裂癥，精神遲鈍，酒精中毒的動物模型。老年醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用小鼠，大鼠，狗，豬營養(yǎng)控制實驗動物質(zhì)量控制：遺傳質(zhì)量控制微生物質(zhì)量控制環(huán)境控制營養(yǎng)控制第一節(jié)、實驗動物的營養(yǎng)需要

水碳水化合物蛋白質(zhì)脂肪礦物質(zhì)維生素

水是生命之源水是動物體內(nèi)各種器官、組織的重要組成部分，是飼料消化、營養(yǎng)物質(zhì)吸收的溶劑。其含量一般可達動物體重的50%，血液的80%。水對動物體的正常物質(zhì)代謝有特殊的作用，是動物最重要的營養(yǎng)物質(zhì)之一。水水的功能1)水直接參與構(gòu)成活的細胞與組織2)參與體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)3)水是一種重要的溶劑4)水對調(diào)節(jié)體溫起重要作用5)潤滑功能水的來源動物體內(nèi)水的來源有代謝所產(chǎn)生的水、飼料中的水分、直接飲用的水三個途徑。所謂代謝所產(chǎn)生的水分是蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物氧化后產(chǎn)生的水分。實驗動物的飲水實驗動物的飲用水應(yīng)符合衛(wèi)生部門頒發(fā)的人飲用水的質(zhì)量和衛(wèi)生指標。實驗動物飲用水應(yīng)由新鮮、純凈的水源直接提供。微生物質(zhì)量等級不同的動物應(yīng)供應(yīng)與其級別相適應(yīng)的飲用水，這些飲用水通常都采用高壓、過濾、酸化等滅菌處理措施。對于清潔級及其以上級別的實驗動物來說，其飲用水必須經(jīng)過高溫高壓滅菌處理。亦可應(yīng)用酸化水（pH2.5-3.0）。

表7-1各種動物每日的飲水需要量動物品種飲水需要量小鼠（成熟齡）4～7ml大鼠（50g）20～45ml豚鼠（成熟齡）85～150ml兔（1.4-2.3kg）60～140ml/kg(體重)金黃地鼠（成熟齡）8～12ml小型豬（成熟齡）1～1.9l狗（成熟齡）25～35ml/kg(體重)貓（2-4kg）100～200ml紅毛猴（成熟齡）200～950ml各種飲水瓶（大、小鼠用）蛋白質(zhì)及氨基酸

蛋白質(zhì)是生命的起源，一切生命過程都與蛋白質(zhì)代謝有關(guān)。是動物維持生命、生長發(fā)育、繁殖不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)。蛋白質(zhì)由氨基酸組成，飼料中的蛋白質(zhì)必須分解成氨基酸，才能被吸收。氨基酸又分為必需氨基酸和非必需氨基酸兩大類。前者是動物體內(nèi)不能合成或合成速度及數(shù)量不能滿足正常生長需要，必須由飼料中供給的氨基酸；后者是體內(nèi)能合成，不需要由飼料中供給的氨基酸。不同動物對必需氨基酸需求的種類存在差異。實驗動物飼料中的氨基酸必需氨基酸非必需氨基酸異亮氨酸亮氨酸丙氨酸甘氨酸色氨酸蘇氨酸絲氨酸門冬氨酸苯丙氨酸賴氨酸谷氨酸羥脯氨酸蛋氨酸纈氨酸酪氨酸脯氨酸組氨酸精氨酸胱氨酸瓜氨酸蛋白質(zhì)（氨基酸）的互補作用不同飼料含的必需氨基酸比例不同。將不同飼料混合應(yīng)用，取長補短，可以提高其營養(yǎng)價值，使其必需氨基酸的比例符合機體的需要。這種作用稱為蛋白質(zhì)（氨基酸）的互補作用。碳水化合物與脂肪1.碳水化合物包括無氮浸出物和粗纖維

無氮浸出物：包括淀粉和糖類供應(yīng)能量，小部分構(gòu)成組織成分

粗纖維：包括纖維素、半纖維素和木質(zhì)素纖維素經(jīng)酵解，部分轉(zhuǎn)變成揮發(fā)性脂肪酸吸收，部分轉(zhuǎn)變成二氧化碳和甲烷排出碳水化合物營養(yǎng)上的功能是供給熱能。如有多余，可變?yōu)橹举A存體內(nèi)。碳水化合物是構(gòu)成機體組織及生命物質(zhì)的重要成分，如細胞核中的核糖，腦及神經(jīng)組織中的糖脂等，核酸由核糖和脫氧核糖參與構(gòu)成，是傳遞遺傳信息的載體。2.脂肪分成真脂肪和類脂肪真脂肪是指甘油和脂肪酸組成的甘油三酯。類脂除了C、H、O元素以外還有N、S、P脂肪是構(gòu)成實驗動物組織的重要成分，如神經(jīng)、肌肉、骨骼、血液中均含有脂肪。在維持細胞結(jié)構(gòu)、功能中起重要作用。脂肪是能量的重要來源，也是儲存能量的最好形式。某些脂肪酸動物不能合成，但又是生長必需的稱為必需脂肪酸，如：亞麻酸、亞油酸和花生四烯酸。必需脂肪酸缺乏引起生長發(fā)育緩慢停止，生殖能力下降，泌乳量減少，脫毛等礦物質(zhì)

飼料在550－600℃高溫下灼燒后，剩下的灰分即為礦物質(zhì)。到目前為止，已知其中有二十種左右的元素對動物機體有重要作用，是構(gòu)成機體組織，維持生理功能和生化代謝所必不可少的物質(zhì)。礦物質(zhì)元素按其在動物機體內(nèi)的含量可分為常量元素和微量元素。機體中含量大于0.01%者為常量元素，如鈣、磷、鈉、鉀、氯、鎂與硫等。機體中含量小于0.01%者為微量元素，已確認維持正常生命活動不可缺少的必需微量元素有銅、鈷、氟、鐵、碘、錳、鉬、鎳、硒、硅、錫、釩和鋅等。礦物質(zhì)在動物維持生理功能和生化代謝過程中起著必不可少的作用。如：缺鈣會造成幼畜的佝僂病缺鐵易患貧血缺硒引起雞的滲出性素質(zhì)，白肌病維生素

維生素是一大類化學(xué)結(jié)構(gòu)與生理功能各不相同的物質(zhì)。它們既不參與機體組成也不提供熱能、主要起控制、調(diào)節(jié)代謝作用的有機物。實驗動物對它們的需要量甚微，但卻是比必不可少的物質(zhì)維生素種類很多，各種維生素也各具獨特作用，營養(yǎng)學(xué)常按其溶解性分為脂溶性與水溶性維生素二大類。脂溶性的有維生素A、D、E、K，水溶性的有維生素B族，包括B1、B2、B6、B12、煙酸、葉酸、泛酸、膽堿，另有維生素C等。表5-2維生素的生理功能、缺乏癥和來源

維生素生理功能缺乏癥來源脂溶性維生素A維持正常視覺，參與上皮細胞正常視覺損害、夜盲癥、上皮粗糙、肝臟、魚肝油、形成，促進生長發(fā)育角化、骨發(fā)育不良，生長遲緩蛋黃、牛奶

維生素D促進鈣吸收，與骨骼的形成有關(guān)軟骨病魚肝油、蛋、苜蓿干草維生素E與胚胎發(fā)育及繁殖有關(guān)，保持心血生殖系統(tǒng)損害，睪丸萎縮、肌油脂，如花生油、管系統(tǒng)結(jié)構(gòu)功能的完整性肉麻痹、癱瘓、紅細胞溶血玉米油；綠色植物、蛋、魚肝油

水溶性維生素B1

參與糖代謝多發(fā)性神經(jīng)炎谷類、豆類、酵母

維生素B2

參與生物氧化、晶狀體及角膜的呼生長停止、脫毛、白內(nèi)障、角麥麩、豆粉、吸過程，維護皮膚粘膜完整性膜血管新生動物內(nèi)臟

維生素C參與糖、蛋白質(zhì)代謝，參與膠原、壞血病新鮮蔬菜齒質(zhì)及骨細胞間質(zhì)生成1.小鼠小鼠近交系極多，飼料中必需給小鼠充足的營養(yǎng)以維持其生物學(xué)特性和保證實驗正常進行。飼料中18%粗蛋白，4-8%粗脂肪，KM、ICR、BALB/c、DBA/2等品系小鼠均獲得滿意的繁殖效果。若添加0.47%含硫氨基酸可提高小鼠的生長發(fā)育和繁殖性能。小鼠特別需要含亞油酸豐富的日糧。第二節(jié)各種實驗動物的營養(yǎng)需要小鼠對鈣及維生素A、D需要量較高，但同時又對過量維生素A敏感。維生素A過量可導(dǎo)致小鼠繁殖紊亂和胚胎畸形。每公斤飼料中添加維生素E50mg，可顯著提高小鼠受孕率、產(chǎn)仔率。無菌小鼠還應(yīng)注意補充維生素K。2.大鼠應(yīng)滿足各種營養(yǎng)物質(zhì)需要，在飼料中添加0.4%的蛋氨酸和0.48%的賴氨酸，可提高大鼠的生長速度，18-20%的粗蛋白質(zhì)可滿足大鼠的生長、妊娠和泌乳的需要，大鼠對各種營養(yǎng)素的缺乏敏感，應(yīng)特別注意脂肪酸的供給，必需脂肪酸含量占總能量的1.3%，其中亞油酸在飼料中含量不能低于0.3%大鼠對鈣、磷的缺乏耐受力較強，對鎂需要量較多，尤其是妊娠、哺乳時需要量明顯增加。每公斤飼料中添加60mg的維生素E能提高大鼠繁殖率。無菌大鼠還應(yīng)注意補充維生素B12

3.地鼠地鼠飼料中，粗蛋白的含量要求達到21-24%，特別是飼料中的動物性蛋白應(yīng)有一定比例。地鼠像反芻動物一樣能有效地利用非蛋白氮。如蛋白質(zhì)不足，成年地鼠將出現(xiàn)性功能減退，幼鼠則生長發(fā)育遲緩。4.豚鼠豚鼠對某些必需氨基酸特別是精氨酸的需要量較高。對粗纖維的消化能力強，日糧中要含12%--14%的粗纖維。如果粗纖維量不足，豚鼠會出現(xiàn)排糞障礙和脫毛現(xiàn)象。豚鼠對維生素C缺乏特別敏感，缺乏時可致壞血病，生殖力下降，甚至造成死亡。每只豚鼠每日需補10mg維生素C，繁殖階段需補充30mg。5.兔兔日糧應(yīng)補充精氨酸和賴氨酸。兔對缺鈣有較強的耐受能力。雖然其腸道微生物可以合成維生素K和大部分B族維生素，但繁殖時仍需額外補充維生素K。飼料中需要有一定量的粗纖維以維持其正常的消化生理功能，其日糧中粗纖維含量應(yīng)大于11%6.犬犬是肉食動物，犬必須供給足夠的脂肪和蛋白質(zhì)，飼料中動物性蛋白應(yīng)占全部蛋白質(zhì)食物的1/3。犬能耐受高脂肪日糧，要求日糧含有一定量的不飽和脂肪酸。維生素A的需要量較大，亦需補充維生素B12。7.貓貓也是肉食動物，對蛋白質(zhì)需求較高。小貓要求高脂肪酸日糧，生長期貓的日糧要求亞油酸含量不能低于1%。貓屬于不能利用β-胡蘿卜素作為維生素A源動物，因此應(yīng)在飼料中補充維生素A，對維生素E的需求量也較高。8.非人靈長類非人靈長類動物日糧能量的50%以上來自糖代謝。體內(nèi)不能合成維生素C，必須由日糧提供，同時要注意日糧的適口性。除主食外，每天應(yīng)供給一定量的新鮮水果和蔬菜。1.遺傳因素不同品種品系的動物因遺傳基因的表達程度不同而影響遺傳的需求，例如近交系小鼠與封閉群小鼠

，對飼料的需求，近交系小鼠要更高些。一些突變系動物，如ODS大鼠因為基因突變造成L—谷氨酸氧化酶的缺乏，使ODS大鼠無法合成維生素C，這個品系的大鼠也就與其它品系的大鼠不同，需補充維生素C第三節(jié)影響營養(yǎng)需求的因素2.生理狀況動物在不同的生理狀況中，如生長、懷孕、創(chuàng)傷或泌乳時，對營養(yǎng)需求會有所不同，個體需從飼料中獲取額外的營養(yǎng)，以滿足胎兒的生長、發(fā)育，組織的合成或修補，吸取制作乳、蛋、毛的原料。如在實驗動物中如產(chǎn)后發(fā)情配種的小鼠，如帶仔多，營養(yǎng)供應(yīng)不上，母鼠會發(fā)出信號，使受精卵停留于輸卵管而不在子宮著床，這樣就使小鼠的懷孕期大大延長，而營養(yǎng)好帶仔少的母鼠，則會在19—21天內(nèi)，按正常的懷孕期產(chǎn)仔。3.環(huán)境因素環(huán)境因素會改變動物的營養(yǎng)需求。就恒溫動物而言，若暴露在較低的溫度下，動物必須產(chǎn)生較多的熱能以維持體溫的恒定。反之，在高溫環(huán)境中，動物采食欲望會下降，此時應(yīng)提供高營養(yǎng)水平的飼料，使動物獲得足夠的養(yǎng)分。又如動物可由鍍鋅的籠盒表面接觸到鋅元素，而飼養(yǎng)在平板底網(wǎng)上的動物，就有更多的機會攝取到糞便中的額外養(yǎng)分。4.微生物狀態(tài)在正常飼養(yǎng)條件下，動物腸道中存在大量的微生物，這些微生物在腸道中棲生、繁殖、代謝，產(chǎn)生許多營養(yǎng)物質(zhì)，如水溶性的維生素B1，維生素K及氨基酸等，這些物質(zhì)通常通過食糞行為被動物再吸收和利用。這些物質(zhì)被利用的情形，會因動物種類、飼料成分、飼養(yǎng)條件不同而有所差異。無菌動物因腸道內(nèi)微生物狀態(tài)與一般動物不同因此在配制飼料時，必須調(diào)整飼料成分及配制方法，以滿足動物的需求。5.研究條件實驗操作如外科手術(shù)或于飼料中添加測試藥物時，會造成動物緊張或改變飼料的適口性，使動物食欲減退，進而影響飼料的采食。此時就必須給予適口性較好的飼料或提供高營養(yǎng)成分的飼料。6.營養(yǎng)成分的相互作用在調(diào)制飼料時要留意營養(yǎng)成分間的相互作用，因為某種養(yǎng)分攝取量增加時往往會影響到另外營養(yǎng)成分的吸收和利用。另外不同的礦物質(zhì)飼料會競爭同一吸收門戶或同一運送系統(tǒng)，而影響到彼此被吸收的效率，例如鈣、磷、鎂及維生素D間的關(guān)系。因此在調(diào)配飼料時，若存在不尋常的養(yǎng)分濃度時，則應(yīng)考慮它對其它養(yǎng)分的影響，并相應(yīng)調(diào)整其它營養(yǎng)成分的含量。第四節(jié)實驗動物飼料飼料原料的來源天然飼料原料：如谷物、脫水蔬菜、草粉、魚粉、骨粉、礦物質(zhì)、酵母等加工飼料原料：如玉米淀粉作為飼料糖類來源，牛奶中提取酪蛋白作為蛋白質(zhì)來源等純化學(xué)物質(zhì)：如氨基酸、必需脂肪酸等飼料的配合任何單一的飼料都不能滿足不同動物的不同生長時期對營養(yǎng)的需要，因此需要進行配制，使其含有全面而均衡的各種營養(yǎng)素，以滿足動物生長繁殖或特殊實驗的需要。這種飼料叫“全價營養(yǎng)飼料”。設(shè)計配合飼料適應(yīng)考慮：必需參考各類動物的營養(yǎng)需要量，并根據(jù)飼養(yǎng)實踐經(jīng)驗加以應(yīng)用；盡可能選用營養(yǎng)豐富，價格低廉，本地區(qū)來源較充足的原料；要注意飼料的適口性；要考慮動物的生理特點選用適宜的飼料。表5-3常用實驗動物的飼料參考配方原料大鼠小鼠地鼠豚鼠家兔大麥粉(黃豆粉)--(12)-12小麥粉202021--玉米粉3830152010高粱粉-7---豆餅粉2025132512麩皮10581214苜蓿草粉---3530脫水蔬菜----16魚粉(進口)56824.5酵母粉1352-骨粉1252.51食鹽1110.50.5魚肝油1-1--植物油（雞蛋）2-(11)--礦物質(zhì)添加劑10.8-0.8-維生素添加劑0.10.2-0.2-

飼料的分類飼料按物理性狀的分類顆粒料粉料膨化料凝膠料液體飼料大、小鼠配合顆粒飼料顆粒飼料的優(yōu)點加工過程中高溫作用使蛋白質(zhì)變性和淀粉α化，容易消化吸收。加工過程中高溫具有殺菌作用，使細菌數(shù)大量減少，飼料不易變質(zhì)。加工過程中高溫能滅活原料中有害物質(zhì)。顆粒飼料便于運輸、儲存、飼喂。顆粒飼料適合于嚙齒類動物啃咬習性。易掌握每日攝食量，不易造成浪費飼料消毒首選γ射線照射消毒（25kGy）干熱、濕熱消毒對營養(yǎng)成分破壞較多藥物熏蒸法會有化學(xué)殘留營養(yǎng)因素對動物實驗結(jié)果的影響1、影響動物健康生長發(fā)育、生理生化指標、免疫功能等等。2、有些藥物摻入飼料給予動物，飼料的營養(yǎng)情況對藥物的實驗結(jié)果有影響。3、對專門進行營養(yǎng)學(xué)研究的影響。第五節(jié)營養(yǎng)監(jiān)測

常用實驗動物第四節(jié)家兔家兔Rabbit；Oryctolaguscuniculus哺乳綱兔形目兔科歐洲穴兔屬穴兔種家兔變種一、生物學(xué)特性（一）一般特性：1、夜行性和嗜眠性。2、草食性動物，對粗纖維的消化能力強，飼料中粗纖維的含量需達到12--15%。3、有食糞性，被稱為半反芻動物。4、聽覺和嗅覺都十分靈敏，喜愛幽靜和空氣新鮮的環(huán)境，膽小怕驚。5、對環(huán)境影響很敏感，耐寒不耐熱，耐干燥不耐潮濕。喜清潔厭污穢6、喜穴居。7、性情溫順但群居性差，同性好斗。8、有嚙齒類行為，喜歡磨牙、啃木。9、壽命：7~15年（二）解剖生理特點：1、骨骼系統(tǒng)：與嚙齒類動物不同的是有6顆切齒，多了一對小切齒，緊貼在一對大門齒后。齒式2（）=28成年兔骨骼只占體重8%，易骨折。2、消化系統(tǒng)：腸非常長，約為體長的8倍，尤其盲腸發(fā)達。家兔的回腸與盲腸相連處膨大形成一后壁的圓囊，稱為圓小囊，這是家兔所特有的。圓小囊的作用：一，消化功能，分泌堿性液體，中和盲腸中微生物分解纖維素所產(chǎn)生的各種有機酸。二，免疫功能，是淋巴組織。三，神經(jīng)內(nèi)分泌功能，分泌腦腸肽及溶菌酶等。盲腸的作用：一，其中的微生物將纖維素轉(zhuǎn)化為淀粉和其他糖。二，產(chǎn)生軟糞，軟糞內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素B。3、不會嘔吐（兔，大鼠，馬屬動物）4、家兔的胸腔內(nèi)構(gòu)造與其它動物不同。胸腔由縱膈分為互不相通的左右兩部分。肺被肋胸膜和肺胸膜隔開，心臟又被心包胸膜隔開。因此，開胸后打開心包胸膜暴露心臟進行實驗操作時，動物不需作人工呼吸。其它動物如犬、貓等開胸后一定要作人工呼吸才能進行心臟操作。5、家兔頸部有減壓神經(jīng)獨立分支，和迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)干完全分開。6、正常體溫39.5℃，體溫變化靈敏。7、其嗜中性粒細胞內(nèi)有大的嗜酸性顆粒，易誤認為是嗜酸性粒細胞。8、繁殖：誘導(dǎo)排卵動物（家兔，貓，駱駝）。母兔在發(fā)情期間，必須通過公兔的交配刺激才能排卵而懷孕家兔卵子是哺乳動物中最大的，是在卵裂階段最容易在體內(nèi)培養(yǎng)的卵子，適合胚胎移植繁殖期6月齡~3歲，妊娠期30~33天，哺乳期：25~45天Female

Male

雌雄辨別（三）繁殖與飼養(yǎng)管理：母兔每月發(fā)情2~3次,發(fā)情周期8~15天,持續(xù)3~5天,在雌期間配種較為順利.配種方法:1.自然交配法2.人工輔助交配法3.人工授精環(huán)境溫度:20~26℃,濕度:40~70%單籠飼養(yǎng),兔籠為度鋅鐵絲或不銹鋼絲做成采用全價配合飼料,飼料中粗纖維含量不得少于15%二、在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用（一）免疫學(xué)研究生產(chǎn)抗體，制備高效價和特異性強的免疫血清。如：病原體免疫血清，間接免疫血清，抗補體抗體血清、抗組織免疫血清等。（二）發(fā)熱、解熱和檢查致熱原等實驗研究1、給家兔注射細菌培養(yǎng)液和內(nèi)毒素可引起感染性發(fā)熱。2、給家兔注射化學(xué)藥品或異性蛋白等可引起非感染性發(fā)熱。3、藥品生物檢定中熱源的檢查常用兔。（三）生殖生理和避孕藥的研究利用家兔誘發(fā)排卵的特點進行各種研究。（四）眼科的研究眼球大，便于操作，兩眼對照實驗。（五）膽固醇代謝和動脈粥樣硬化的研究對膽固醇吸收率高，清除率低。與人病變相似。（六）心血管和肺心病的研究頸部神經(jīng)血管和胸腔的特殊構(gòu)造，適合做心血管實驗和復(fù)制心血管及肺心病模型。（七）皮膚反應(yīng)試驗三、常用品種品系1、日本大耳白兔封閉群。生長快，繁殖強。兩耳大且直立，耳兩端細而中部寬，呈柳葉狀，全身被毛濃密、純白，紅眼睛，母兔頸下有肉髯。耳部血管清晰，適合注射或采血。2、新西蘭白兔封閉群。毛色純白，體長中等，早期生長快，性情溫和，繁殖力強。已培育出近交系。3、中國本兔封閉群。純白居多。體型小，耳短嘴尖?？共×姡m應(yīng)性好，繁殖力強。4、青紫蘭兔封閉群。毛色特征是每根毛由三種顏色組成，即毛尖黑色，中段灰白色，基部深灰色，全身看為灰藍色、耳尖尾、背皆為黑色，眼周圍、尾腹面、腹下和后頸的三角區(qū)的毛色較淡，呈灰白色。有標準型，中型，巨型三種。第五節(jié)犬犬

DogCanisfamiliaris哺乳綱食肉目犬科犬屬犬種一、生物學(xué)特性（一）一般特性1、喜近人，易馴養(yǎng)。2、環(huán)境適應(yīng)能力強，可承受比較冷和熱的氣候。3、犬習慣不停地運動，故需要一定的活動場地。4、喜食肉類和脂肪性飼料，飼料中需有一定的動物蛋白質(zhì)和脂肪。5、正常犬鼻呈油狀滋潤，人以手背觸之有涼感，它能靈敏地反映全身的健康情況。6、智力發(fā)達、記憶力強、感情豐富。7、壽命10--20年。（二）解剖生理特點1、骨骼：犬的牙齒具備食肉動物的特點，犬齒大而銳利。出生后十幾天開始生乳齒，2個月后開始換齒，8--10個月?lián)Q齊，但犬要到1歲半后犬齒才能長堅實。乳齡齒式2（）=28個,成年齒式2（）=42個犬無鎖骨，肩胛骨由骨骼肌連接軀體。有陰莖骨。2、犬的汗腺很不發(fā)達，散熱主要靠加速呼吸頻率，舌伸出口外喘式呼吸。3、感覺器官：視覺不靈敏。每只眼睛只有單獨視野，視野25度以下，且無立體感。遠處的東西看的較清楚，1--2米近處的東西看不清楚，對移動著的物體感覺卻比較靈敏。視網(wǎng)膜上無黃斑，即無最清楚的視覺點，因此視覺較差。犬還是紅綠色盲，不能以紅綠色為條件刺激物進行條件反射實驗。嗅覺和聽覺靈敏。其嗅覺能力超過人的1200倍，聽覺比人靈敏16倍。味覺遲鈍觸覺靈敏4、犬有5種血型，即A、B、C、D、E型，只有A型血（有A凝集原）能引起輸血反應(yīng)5、犬有4種神經(jīng)類型：對動物選擇很重要多血質(zhì)（活潑型）—均衡的靈活型粘液質(zhì)（安靜型）—均衡的遲鈍型膽汁質(zhì)（不可抑制型）—不均衡，興奮占優(yōu)勢的興奮型憂郁質(zhì)（衰弱型）—興奮和抑制不發(fā)達的弱型6、生殖：性成熟8--10月齡春秋季兩次發(fā)情妊娠期58--63天哺乳期60天每胎產(chǎn)仔2--8只（三）繁殖與飼養(yǎng)管理在春季3~5月和秋季9~11月母犬發(fā)情季節(jié)配種,發(fā)情期母犬外陰排出血性分泌物.當血性分泌物出現(xiàn)9~12天,即可進行配種。犬是肉食性動物,飼料中應(yīng)有一定的動物性蛋白。二、在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用（一）實驗外科學(xué)廣泛用于實驗外科各個方面的研究，如心血管外科、腦外科、斷肢再植、器官或組織移植等。臨床外科醫(yī)生在研究新的手術(shù)或麻醉方法時往往是選用犬來作動物試驗，先取得熟練而精確的技巧，然后才妥善用于臨床。（二）基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗研究犬是目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究和教學(xué)活動中最常用的實驗動物之一。犬的神經(jīng)系統(tǒng)和血液循環(huán)系統(tǒng)發(fā)達特別適合在生理和病理生理等實驗研究。（三）慢性實驗研究由于犬可以通過短期訓(xùn)練能夠配合實驗，所以適合于進行慢性實驗，如條件反射實驗、各種實驗治療效果實驗、毒理學(xué)實驗、內(nèi)分泌腺摘除實驗等。又如犬的消化系統(tǒng)發(fā)達，與人有相同的消化過程，所以特別適合作消化系統(tǒng)的慢性實驗，如以無菌手術(shù)方法做成食管瘺、腸瘺、胰液管瘺、胃瘺、膽管瘺來觀察胃腸運動和消化吸收、分泌等變化。（四）藥理學(xué)和毒理學(xué)研究常用于新藥臨床使用前的毒性試驗、代謝實驗、藥理實驗。如磺胺類藥物的代謝研究，苯胺及其衍生物的毒理學(xué)研究。（五）其他如：進行先天性白內(nèi)障、胱胺酸尿、遺傳性耳聾、血友病A、先天性心臟病、先天性淋巴水腫、蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良、家庭性骨質(zhì)疏松、視網(wǎng)膜發(fā)育不全、高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化、糖原缺乏綜合癥等的研究。三、常用品種犬品種繁多，世界上犬的品種已近300種，根據(jù)不同的飼養(yǎng)目的，可分為役用犬、作業(yè)犬、獵犬、玩賞犬、牧羊犬、食用犬、實驗犬等。專用于實驗的品種不多，目前還常買民養(yǎng)犬進行實驗。1、畢格犬（Beagle)

原產(chǎn)英國，是獵犬中較小的一種。1880年引入美國，開始大量繁殖。我國在20世紀80年代初引進。目前世界上該犬的年用量約為10萬頭。尤其適合藥理、循環(huán)生理、眼科、毒理、外科學(xué)等的研究，被國際醫(yī)學(xué)、生物學(xué)界公認為最標準的實驗用犬。畢格犬體型小，有利實驗操作，成年體重為7--10kg，體長30--40cm，短毛，花斑色。稟性溫和，易于馴服和抓捕，親近人。遺傳性能穩(wěn)定，遺傳性疾病少。形態(tài)體質(zhì)均一，實驗反應(yīng)性一致。性成熟早，約8--12個月，產(chǎn)仔數(shù)多。2、華北犬和西北犬：是我國本地犬，常用于燒傷、放射性損傷、復(fù)合傷、胸外科和器官移植等實驗研究。

3.四系雜交犬：這是為科研工作者需要而培養(yǎng)出的一種外科手術(shù)用犬，它由兩種以上品系犬進行雜交而成。如Gveyhound、Labrador、Samoyed及Basenji四品系動物交配，取Labrador較大體軀、極大胸腔和心臟等優(yōu)點，取Samoyed耐勞和不愛吠叫的優(yōu)點。4.Labrador（紐芬蘭犬）專用于實驗外科。性情溫馴、體型大。吉娃娃西施犬貴賓犬北京犬狐貍?cè)锾锶聡裂蛉~芬蘭犬第六節(jié)獼猴獼猴Rheusmonkey；MacacamulattaZimmermann哺乳綱靈長目猴科獼猴屬一、生物學(xué)特點（一）一般特性1、熱帶和亞熱帶動物，群居，有