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文檔簡介
二次諧波成像操作說明開啟硬件,包括計(jì)算機(jī)、顯微鏡、掃描裝置、雙光子激光器(圖1、圖2)、光電調(diào)節(jié)器EOM(圖3)。圖2圖2圖1圖圖3開啟LASAF軟件,Configuration選擇machine_MP-Laser-on選項(xiàng),點(diǎn)擊OK進(jìn)入軟件界面(圖4)。圖圖4進(jìn)入Acquire面板,進(jìn)行參數(shù)設(shè)置。scan1(二次諧波通道)參數(shù)設(shè)置如下(圖5、圖6)。圖5AcquisitionMode:xyz;圖5Format:1024x1024;Speed:400Hz;LineAverage:4;FrameAverage:1;Objective:63x1.40oil;Pinhole:600μm圖圖6點(diǎn)擊MP,紅色指示燈亮起(圖7)。圖圖7點(diǎn)擊MPlaser,進(jìn)入MPLaserConfiguration,設(shè)置Laser為880nm,長按MP-Shutter,紅色指示燈亮起,雙光子激光即刻輸出,待OutputPower上升到2390mw(圖8)。MFP選擇SP715(圖9),發(fā)射波長為570-700nm(圖10)。圖8圖8圖10圖10圖9scan2(綠色熒光通道)參數(shù)設(shè)置如下(圖11、圖12)。AcquisitionMode:xyzFormat:1024x1024Speed:400HzLineAverage:4FrameAverage:1Objective:63x1.40oilPinhole:95.54μm圖12圖12圖11在LeicaSettings中選擇FITC通道(圖13),Laser為488nm(圖14),發(fā)射波長設(shè)為500
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