細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置培訓(xùn)課件

細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置實(shí)驗(yàn)室組成基本設(shè)施配置常用器皿、器械培養(yǎng)基的成份、配制與選擇實(shí)驗(yàn)室操作注意事項(xiàng)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置2一.實(shí)驗(yàn)室組成衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置3一.實(shí)驗(yàn)室組成

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)是由工作的目的和規(guī)模決定的，其基本要求是：便于隔離、便于操作、便于滅菌、便于觀察。

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置必須滿足三個(gè)基本的需要，即：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備（培養(yǎng)基配制，洗滌與滅菌等）、無(wú)菌操作、控制培養(yǎng)。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置4一.實(shí)驗(yàn)室組成基本實(shí)驗(yàn)室

消毒準(zhǔn)備室制備室無(wú)菌操作室輔助實(shí)驗(yàn)室

細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室生化分析室攝影室及暗室衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置基本組成：5一.實(shí)驗(yàn)室組成消毒準(zhǔn)備室制備室無(wú)菌操作室衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置1.基本實(shí)驗(yàn)室：6一.實(shí)驗(yàn)室組成消毒準(zhǔn)備室

功能

一切與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的準(zhǔn)備工作要求

設(shè)備的安裝和排列要合理

房間要寬敞明亮，通風(fēng)條件好

地面要便于清潔、防滑配備

實(shí)驗(yàn)臺(tái)，高壓滅菌鍋、排風(fēng)滅火設(shè)備

干熱消毒柜、超聲波清洗器、洗瓶機(jī)等。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置7一.實(shí)驗(yàn)室組成制備室

功能

進(jìn)行培養(yǎng)液及相關(guān)試劑的配制要求

在無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)過(guò)濾、除菌。配備

冰箱、天平、真空泵、PH計(jì)等。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置8一.實(shí)驗(yàn)室組成無(wú)菌操作室地面、天花板及四壁盡可能光潔，無(wú)死角，易于清潔。大小適度，層高不高于2.5米。干爽、安靜、清潔、明亮。紫外燈1－2盞，保持室內(nèi)無(wú)菌狀態(tài)。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置9一.實(shí)驗(yàn)室組成無(wú)菌操作室設(shè)置空氣過(guò)濾和恒溫恒濕裝置，恒溫溫度26度左右。保持正壓，盡量減少與外界的空氣對(duì)流，減少塵埃與微生物侵入。通常由內(nèi)外間組成，外間為緩沖間，用于準(zhǔn)備工作。研究人員進(jìn)入操作間前要穿上消過(guò)毒的工作服和拖鞋。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置10一.實(shí)驗(yàn)室組成細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室

對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究，要求清潔、明亮、干燥，使各種光學(xué)儀器不受潮濕和灰塵污染。攝影室及暗室

其功能是進(jìn)行培養(yǎng)材料的攝影記錄和膠片沖印。生化分析室

在以培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室中，應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，以便于對(duì)培養(yǎng)物的有效成分隨時(shí)進(jìn)行取樣檢查。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置2.輔助實(shí)驗(yàn)室：11單元小結(jié)：

基本的細(xì)胞培養(yǎng)室應(yīng)包括消毒準(zhǔn)備室、制備室、無(wú)菌操作室。

無(wú)菌室的設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)。

衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置12二.基本設(shè)備配置衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置13二.基本設(shè)備配置衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置基本設(shè)備滅菌設(shè)備無(wú)菌操作設(shè)備光溫控制設(shè)備細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備細(xì)胞學(xué)鑒定設(shè)備14二.基本設(shè)備配置冰箱天平酸度計(jì)恒溫水浴鍋磁力攪拌器液氮罐純水設(shè)備衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置1.基本設(shè)備15衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置16衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置17PH7.0～7.4

去離子水

無(wú)菌

衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置18衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置19二.基本設(shè)備配置蒸汽壓力滅菌鍋干熱消毒柜過(guò)濾滅菌裝置噴霧消毒器紫外燈衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置2.滅菌設(shè)備20衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置21衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置消毒物理消毒射線、紫外線、干熱、濕熱、濾過(guò)化學(xué)消毒來(lái)蘇兒、新潔爾滅、過(guò)氧乙酸、70%酒精220.45μm

0.22μm衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置23二.基本設(shè)備配置凈化工作臺(tái)生物安全柜衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置3.無(wú)菌操作設(shè)備24超凈臺(tái)原理：內(nèi)設(shè)鼓風(fēng)機(jī)，驅(qū)動(dòng)空氣通過(guò)高效濾器過(guò)濾，凈化后的空氣以水平或垂直氣流的狀態(tài)送出，從而形成無(wú)菌潔凈工作環(huán)境。分類：垂直流超凈工作臺(tái)，水平流超凈工作臺(tái)；單邊操作臺(tái)，雙邊操作臺(tái)；普通操作臺(tái)，醫(yī)用（生物）操作臺(tái)。維護(hù)：檢查濾膜，定期清洗，更換。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置25生物安全柜根據(jù)主要幾項(xiàng)生物安全柜國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三大類以滿足不同生物研究和防疫的要求。安全柜的分類級(jí)別與生物安全登記無(wú)關(guān)。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置26一級(jí)生物安全柜

保護(hù)工作人員和環(huán)境，而不保護(hù)樣品。排氣口安裝有HEPA過(guò)濾器。無(wú)自帶風(fēng)機(jī)，依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶

動(dòng)氣流。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置27二級(jí)生物安全柜可提供對(duì)樣品，環(huán)境，工作人員的保護(hù)。排氣口安裝有HEPA過(guò)濾器，獨(dú)有特征是具有垂直層狀薄片（無(wú)定向的）HEPA過(guò)濾器。內(nèi)置風(fēng)機(jī)，形成下沉氣流無(wú)自帶風(fēng)機(jī)，依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶

動(dòng)氣流。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置28三級(jí)生物安全柜為3－4級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)而設(shè)計(jì)，柜體完全氣閉。通過(guò)手套進(jìn)行操作，俗稱“手套箱”。實(shí)驗(yàn)品通過(guò)雙門(mén)的傳遞箱進(jìn)出。適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物實(shí)驗(yàn)。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置29確認(rèn)通風(fēng)櫥已經(jīng)打開(kāi)，并且空氣正在循環(huán)。把框格降低到刻度處不要阻礙空氣流通使用前用70％乙醇擦拭臺(tái)面不要使用酒精燈減少手臂再通風(fēng)櫥內(nèi)晃動(dòng)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置30二.基本設(shè)備配置時(shí)間程序控制器空調(diào)及溫度感應(yīng)器衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置4.光溫控制設(shè)備31二.基本設(shè)備配置CO2培養(yǎng)箱離心機(jī)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置5.細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備32溫度：37℃±0.5℃

CO2濃度：5%

相對(duì)濕度：100%

定期清洗、消毒

衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置33衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置罐內(nèi)壓力指示接培養(yǎng)箱的管子輸出壓力指示壓力調(diào)節(jié)旋鈕流量控制閥門(mén)34衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置固定角式轉(zhuǎn)子水平轉(zhuǎn)子垂直轉(zhuǎn)子1000RPM10MIN配平35二.基本設(shè)備配置倒置顯微鏡熒光顯微鏡酶標(biāo)檢測(cè)儀流式細(xì)胞儀衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置6.細(xì)胞學(xué)鑒定設(shè)備36衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置37衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置單元小結(jié)：

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)備：離心機(jī)、倒置顯微鏡、冰箱、無(wú)菌操作臺(tái)、液氮罐。

II型生物安全柜的使用規(guī)范。

CO2培養(yǎng)箱、離心機(jī)的使用規(guī)范。

38三.常用器皿、器械衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置39三.常用器皿、器械解剖器具培養(yǎng)器皿移液器特殊用具衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置40三.常用器皿、器械解剖器具

主要用于解剖動(dòng)物、取材和原代培養(yǎng)中切割組織。常用的手術(shù)器械有手術(shù)刀柄及刀片（圓形或尖型）、組織剪、眼科剪（直頭和彎頭）、鑷子（平齒、鼠齒）、尖鑷、止血鉗、持針器等。

各種器械至少要準(zhǔn)備兩套，以備輪換消毒用。各種金屬器械使用后，要及時(shí)刷洗干凈，用干凈紗布拭干，上一薄層液體石蠟，以防生銹。消毒法采用高壓蒸汽滅菌或采用70％乙醇浸泡消毒。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置41三.常用器皿、器械培養(yǎng)器皿

如溶液瓶、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板等。多孔培養(yǎng)板材料僅有塑料的一種，適宜少量細(xì)胞和單克隆生長(zhǎng)，也適宜進(jìn)行分組比較的生化、藥理、毒理等方面的實(shí)驗(yàn)，其規(guī)格主要有6孔，12孔、24孔、96孔培養(yǎng)板。

移液管和吸管移液管有刻度，可定量移液，有玻璃和塑料2種，常用規(guī)格為10ML、5ML、1ML。

其它器皿燒杯、量筒、漏斗，細(xì)胞凍存管等。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置42細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置43三.常用器皿、器械移液器電動(dòng)移液器微量移液器多通道微量移液器衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置44三.常用器皿、器械特殊用具

細(xì)胞篩網(wǎng)、細(xì)胞刮刀、細(xì)胞計(jì)數(shù)板衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置45三.常用器皿、器械單元小結(jié)：

了解常用器械種類，用途。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置46四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置47四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求細(xì)胞培養(yǎng)基分類常用細(xì)胞培養(yǎng)基干粉培養(yǎng)基的配制細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇48四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求營(yíng)養(yǎng)成分:12種必須氨基酸、葡萄糖、維生素、無(wú)機(jī)離子與微量元素促生長(zhǎng)因子及激素：胰島素、氫化可的松、泌乳素滲透壓：260－320mOsm/kgpH、氣體：

pH值約7．2～7．4。CO2濃度（5％）

無(wú)毒、無(wú)污染衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置49四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇細(xì)胞培養(yǎng)基分類

按其物質(zhì)狀態(tài)：

半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類

按其來(lái)源：

合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置50四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇天然培養(yǎng)基

最普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清，基本以小牛血清最為普遍。血清由于含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其多活性物質(zhì)。常見(jiàn)使用最為5-20%。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置51四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題血清的準(zhǔn)確成份、含量仍不清楚。批量生產(chǎn)的血清各批量之間差異很大，且保存期至多一年，因此實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)（成纖維細(xì)胞）同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)（表皮細(xì)胞）。

衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置52四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，甚至造成細(xì)胞死亡。取材中可能帶入支原體、病毒，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響，可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。價(jià)格昂貴衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置53四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇合成培養(yǎng)基：

根據(jù)細(xì)胞所需物質(zhì)的種類和數(shù)量,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基。從最初的基本培養(yǎng)基發(fā)展到無(wú)血清培養(yǎng)基、無(wú)蛋白培養(yǎng)基，并且還在不斷發(fā)展。酚紅谷氨酰胺衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置55四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇無(wú)血清培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)

不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。優(yōu)點(diǎn)：可避免血清批次間的質(zhì)量變動(dòng)，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。避免血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。避免血清組分對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的影響。有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。可提高產(chǎn)品的表達(dá)水平并使細(xì)胞產(chǎn)品易于純化。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置56四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇無(wú)血清培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)缺點(diǎn)：易受某些機(jī)械因素和化學(xué)因素的影響，培養(yǎng)基的保存和應(yīng)用不如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。成本較高針對(duì)性很強(qiáng)，僅適合某一類細(xì)胞的培養(yǎng)。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置57四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇無(wú)蛋白培養(yǎng)基（proteinfreemidium,PFM）

不含有動(dòng)物蛋白的培養(yǎng)基。從生物技術(shù)發(fā)展的趨勢(shì)來(lái)看，不含動(dòng)物蛋白的培養(yǎng)基有廣泛的應(yīng)用前景，許多利用基因工程技術(shù)重組的蛋白質(zhì)最終要應(yīng)用于人體，如果在生長(zhǎng)過(guò)程中使用了含有動(dòng)物蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基，純化過(guò)程就比較復(fù)雜，最終要達(dá)到一定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也有一定的難度。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置58四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇限定化學(xué)成分培養(yǎng)基(chemicaldefinedmedium,CDM)

指培養(yǎng)基中的素有成分都是明確的，它同樣不含有動(dòng)物蛋白，同樣也不是添加了植物水解物，而是使用了一些已知結(jié)構(gòu)與功能的小分子化合物，如短肽、植物激素等。這種培養(yǎng)基更有利于分析細(xì)胞的分泌產(chǎn)物。目前已經(jīng)有適合于293細(xì)胞、CHO細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的CDM問(wèn)世。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置59四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇MEM細(xì)胞培養(yǎng)基系列DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基系列RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基系列199細(xì)胞培養(yǎng)基系列水解乳蛋白細(xì)胞培養(yǎng)基歐氏平衡鹽F-10,F-12細(xì)胞培養(yǎng)基系列其它類型細(xì)胞培養(yǎng)基衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置常用細(xì)胞培養(yǎng)基60四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇認(rèn)真閱讀說(shuō)明書(shū)。說(shuō)明書(shū)都注明干粉不包含的成分，常見(jiàn)的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等。這些成分有些是必須添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要決定。

配制是要保證充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物質(zhì)都要等培養(yǎng)基完全溶解之后才能添加。

配制所用的水應(yīng)是三蒸水，離子濃度很低。

所用器皿應(yīng)嚴(yán)格消毒。

配制好的培養(yǎng)基應(yīng)馬上過(guò)濾，無(wú)菌保存于4度。衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置干粉培養(yǎng)基的配制61四.培養(yǎng)基的成份、配置與選擇細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)室設(shè)置細(xì)胞系細(xì)胞類型種組織培養(yǎng)基293成纖維細(xì)胞人胚胎腎MEM,10%熱滅活馬血清IMR-90成纖維細(xì)胞人肺MEM,10%胎牛血清和NEAAW1-38成纖維細(xì)胞人胚胎肺,3月妊娠MEM,10%胎牛血清A549上皮細(xì)胞人肺癌F-12K,10%胎牛血清A431上皮型人表皮細(xì)胞癌DMEM,10%胎牛血清BHL-100上皮細(xì)胞人乳房McCoy'5A,10%胎牛血清BeWo上皮滋養(yǎng)層人絨毛癌F-12K,15%胎牛血清Caco-2上皮細(xì)胞人結(jié)腸腺癌MEM,10%