靈芝孢子粉采收及加工技術(shù)規(guī)范

1靈芝抱子粉采收及加工技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了靈芝抱子粉的采收和加工技術(shù)要求。本文件適用于赤芝［Gc(Leyss.exFr.)Karst]和松杉靈芝（GMurr)抱子粉的采收、加工。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB50073—2013潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法（國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局〔2005〕75號令）3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1靈芝抱子由靈芝子實(shí)體發(fā)育產(chǎn)生并可在成熟時釋放的擔(dān)抱子。3.2破壁靈芝抱子-經(jīng)加工，抱子壁被破碎的靈芝抱子。3.3破壁率-破壁的抱子在總抱子中所占的百分比。4靈芝抱子粉的采收4.1.1采收前，靈芝種植大棚、出芝房應(yīng)進(jìn)行衛(wèi)生清理，去除雜4.1.2采收人員進(jìn)入大棚、出芝房應(yīng)頭戴工作帽，身穿工作服。4.1.3采收用紙張、薄膜、無紡布等材料及盛裝容器應(yīng)符合相應(yīng)的食品容器、包裝材料的國家標(biāo)準(zhǔn)，不應(yīng)對抱子粉的質(zhì)量產(chǎn)生影響。4.1.4采收用毛刷、剪刀等工具應(yīng)干凈并專用。4.1.5不應(yīng)過度采收靈芝抱子粉，以免影響抱子粉的質(zhì)量，靈芝抱子粉中的多糖（以無水葡萄糖計(jì)）應(yīng)不低于0.9%,靈芝抱子多糖按附錄A規(guī)定的方法測定。24.2.1當(dāng)靈芝菌蓋邊緣白色生長圈消失時，最后噴一次水將菌蓋清理干凈，生長1d~2d,待有少量抱子彈射，釋放在菌蓋表面時，開始采收。4.2.2環(huán)境溫度以25℃~29℃為宜。取白紙皮或無紡布，根據(jù)靈芝子實(shí)體菌蓋大小和靈芝柄長度來制作套筒的大小，把白紙皮或無紡布裁成長35cm~60cm、高20cm~26cm的矩形，然后卷成圓筒，直徑比靈芝子實(shí)體大5cm左右。待靈芝菌蓋邊緣黃白色生長圈消失，即將彈射抱子時，在地面鋪設(shè)塑料墊底薄膜，以隔離泥土。再鋪上方形的接粉薄膜或無紡布，其邊長應(yīng)比套筒直徑長3cm以上。鋪好接粉薄膜或無紡布后，將準(zhǔn)備好的紙筒或無紡布筒逐個套住靈芝子實(shí)體。筒壁距菌蓋邊緣應(yīng)至少2.5cm。筒口用紙封蓋或無紡布板蓋上，蓋板與靈芝菌蓋應(yīng)有不少于5cm的空隙距離。收粉時將蓋板和套筒取下后，將收集在套筒內(nèi)側(cè)的抱子粉刷入容器中。然后把靈芝子實(shí)體從基部剪切下來，將子實(shí)體上面的靈芝抱子粉掃入容器內(nèi)。最后提起接粉薄膜或無紡布，將抱子粉倒入容器內(nèi)。4.3.2風(fēng)機(jī)吸附采粉當(dāng)靈芝生長至有靈芝抱子粉彈射時，將靈芝栽培房或大棚適當(dāng)密封，大棚栽培的地面鋪上塑料薄膜，以隔離泥沙。當(dāng)靈芝抱子開始釋放時，將抱子收集器放置在出芝棚中間，應(yīng)距地面1m~1.5m高，開動風(fēng)機(jī)，形成負(fù)壓流，收集靈芝抱子粉，應(yīng)每日將收集的靈芝抱子粉取出。4.3.3地膜覆蓋采粉當(dāng)靈芝菌蓋邊緣白色生長圈消失，菌蓋表面有少量抱子彈射時，在平整過的地面上鋪設(shè)塑料墊底薄膜，隔離泥土，然后再鋪接粉薄膜或無紡布，最后利用能通風(fēng)透氣的食品級的茶濾紙或無紡布搭建成小拱棚，棚高50cm以上，不低于80cm。采收抱子粉時先用專用的軟毛刷把靈芝菌蓋表面抱子粉刷入專用的容器內(nèi)，再將靈芝子實(shí)體剪下，采收地膜上的抱子粉時只采收上層膜粉，避免采收貓附在地膜上的下層抱子粉。5靈芝抱子粉的加工5.1加工人員管理5.1.1加工人員應(yīng)每年進(jìn)行健康體檢，并符合相關(guān)法律、法規(guī)的規(guī)定。5.1.2進(jìn)入車間的人員應(yīng)按規(guī)定程序進(jìn)行更衣。35.2加工車間環(huán)境5.2.2滅菌后的出料應(yīng)置于凈化車間內(nèi)。5.2.4需凈化的車間，潔凈度應(yīng)至少達(dá)到GB50073—2013中3.0.1中的第8級。5.3抱子粉的加工步驟采收后的抱子粉應(yīng)及時進(jìn)行干燥，應(yīng)在防風(fēng)避雨的棚內(nèi)曬干或用烘箱烘干，干燥至水分不大于9.0g/100g。注：水分測定方法見GB5009.3。先用孔徑180μm篩網(wǎng)除去較大雜質(zhì)，再用孔徑50μm篩網(wǎng)篩去細(xì)小雜質(zhì)，灰分不應(yīng)大于3.0%。注：灰分測定方法見GB5009.4?？刹捎酶邏赫羝?、輻照等滅菌方式，采用輻照滅菌的，輻照劑量應(yīng)符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，滅菌后的微生物指標(biāo)應(yīng)符合相應(yīng)的規(guī)定。注：如用于保健食品時，微生物指標(biāo)見保健食品相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)，用于藥品時，微生物指標(biāo)見《中華人民共和國藥典》。將高壓蒸汽滅菌后需要烘干的抱子粉用烘干設(shè)備進(jìn)行烘干，烘干至水分不大于9.0g/100g。注：水分測定方法見GB5009.3。應(yīng)采用低溫物理方法破壁，如用機(jī)械碾壓、氣流粉碎等方式對滅菌后的靈芝抱子粉進(jìn)行破壁，不應(yīng)采用金屬撞擊的方法破壁，破壁率應(yīng)不低于95.0%,破壁抱子粉的含油率應(yīng)不低于25.0%,破壁率按附錄B規(guī)定的方法測定，含油率按附錄C規(guī)定的方法測定。當(dāng)破壁后的抱子粉結(jié)成片狀或粒狀時，應(yīng)進(jìn)行粉碎處理，并過孔徑180μm篩網(wǎng)。封裝應(yīng)平整嚴(yán)密，破壁靈芝抱子粉應(yīng)避光，包裝材料應(yīng)符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)要求，凈含量應(yīng)符合《定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法》的規(guī)定。6貯存產(chǎn)品應(yīng)存放于通風(fēng)、干燥、陰涼的倉庫內(nèi)，不應(yīng)與有害、有異味、有腐蝕性的物品混貯，堆放應(yīng)隔墻離地。47質(zhì)量管理采收、加工過程、貯存均應(yīng)有相應(yīng)的記錄，記錄保存期限不得少于兩年。5附錄A（規(guī)范性）靈芝抱子多糖的測定方法A.1試劑和材料A.1.3無水葡萄糖對照品。A.1.4硫酸蔥麗溶液：精密稱取蔥麗0.1g,加硫酸溶液100mL使溶解，搖勻，置于棕色瓶中。A.1.5實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的三級水規(guī)格。A.2儀器和設(shè)備A.2.2分光光度計(jì)(±2nm)。A.2.3玻璃回流裝置。A.2.4電熱恒溫水浴鍋。A.2.5容量瓶25mL,容量瓶50mL。A.2.6各規(guī)格移液管（最小刻度應(yīng)不大于0.02mL)。A.2.7具塞試管10mL。A.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備A.3.1對照品溶液的制備取無水葡萄糖對照品12mg,準(zhǔn)確稱取，加水制成每1mL含0.12mg的溶液。A.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制吸取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL,分別置于10mL的具塞試管中，各加水補(bǔ)充至2.0mL,緩慢勻速加入硫酸蔥麗溶液6mL,立即搖勻，靜置15min后置于冰水浴中冷卻15min,取出，以相應(yīng)的試劑為空白，在625nm處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。A.4供試品溶液的制備取本品約1g（精確至0.001g),置圓底燒瓶中，加水60mL,靜置1h,加熱回流4h,趁熱過濾，用少量熱水洗滌濾器和濾渣，將濾紙和濾渣置圓底燒瓶中，加水60mL,加熱回流3h,趁熱過濾，合并濾液，置水浴鍋上蒸干，殘?jiān)盟?mL溶解，邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇75mL,搖勻，在4℃放置12h,離心，棄去上清液，沉淀物用熱水溶解并轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶，放冷，加水至刻度，搖勻后取適量溶液于具塞離心管中，離心，精密量取上清液3mL,置25mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。A.5測定吸取供試品溶液2.0mL,置10mL具塞試管中，按照A.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的方法，自“緩慢勻速加6入硫酸蔥麗溶液6mL”起，同法操作，測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中無水葡萄糖的質(zhì)量濃度，計(jì)算即得。A.6結(jié)果計(jì)算A—X100%式中：mA—多糖的含量，%；ρA—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的多糖的質(zhì)量濃度，單位為毫克每毫升（mg／mLA—樣品質(zhì)量，單位為毫克（mg、—表示稀釋倍數(shù)；50—水提醇沉后獲得的沉淀物經(jīng)熱水溶解定容的體積，單位為毫升（mL）。A.7精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。7附錄B（規(guī)范性）破壁靈芝抱子粉破壁率的測定方法利用血球計(jì)數(shù)板對未破壁的抱子進(jìn)行計(jì)數(shù)，分別計(jì)算出單位質(zhì)量抱子粉中靈芝抱子的數(shù)量和單位質(zhì)量破壁抱子粉中未破壁靈芝抱子的數(shù)量，從而獲得破壁抱子粉的破壁率。B.2儀器與設(shè)備B.2.1血球計(jì)數(shù)板：25中格×16個小格或16個中格×25個小格。B.2.3超聲波清洗器：功率≥45W。B.2.4光學(xué)顯微鏡：放大倍數(shù)≥200。B.3試劑和溶液B.3.1實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的三級水規(guī)格。B.4樣品制備分別取有代表性的靈芝抱子粉和破壁靈芝抱子粉的樣品各至少50g,分別充分混勻，置于密閉的容器內(nèi)。B.5分析步驟B.5.1取適量的靈芝抱子粉A和破壁靈芝抱子粉B,于烘箱60℃下烘干5h。B.5.2準(zhǔn)確稱取經(jīng)烘干的靈芝抱子粉A和破壁靈芝抱子粉B,其中ωA=0.1000g,ωB=0.1500g。B.5.3分別稱取5.0g經(jīng)過研磨后過孔徑為0.15mm(100目）篩的蔗糖粉末，分別與靈芝抱子粉A、破壁靈芝抱子粉B充分混合至色澤均一。用蒸餾水分別溶解上述樣品，在樣品溶液中加0.1mL吐溫80,用蒸餾水定容到100mL的容量瓶中，并在室溫超聲振蕩30min,使抱子充分分散。B.5.4將待測抱子懸液，用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，使液體緩緩滲入，多余的液體用吸水紙吸取，進(jìn)樣完成后靜置約30s,然后將血球計(jì)數(shù)板置于200倍及以上放大倍數(shù)的光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。B.5.5使用25中格×16個小格的計(jì)數(shù)板時，應(yīng)計(jì)算出血球計(jì)數(shù)板4個角上與中央共5個中格中含完整靈芝抱子的數(shù)目（即以80個小格為一個計(jì)數(shù)單位當(dāng)使用16個中格×25個小格的計(jì)數(shù)板時，應(yīng)計(jì)算出血球計(jì)數(shù)板4個角上的4個中格中含完整靈芝抱子的數(shù)目（即以100個小格為一個計(jì)數(shù)單位）。如有部分抱子處于中格邊線上，計(jì)數(shù)時應(yīng)僅統(tǒng)計(jì)位于中格四個邊線的其中兩個邊線的抱子數(shù)，每個樣品觀察計(jì)數(shù)時應(yīng)去掉離群較大的值，每個樣品有效觀察計(jì)數(shù)不少于3次，然后計(jì)算它們的平均數(shù)n。B.6結(jié)果計(jì)算B.6.1使用25個中格×16個小格的計(jì)數(shù)板時，每克抱子粉中含完整靈芝抱子數(shù)按式(B.1)計(jì)算。8N—X400X10000X式中：N—每克抱子粉中含完整靈芝抱子數(shù)，單位為個每克（個／gnB1—80個小方格內(nèi)含完整靈芝抱子的總數(shù)，單位為個；100—抱子稀釋液的體積數(shù)值；mB—樣品的質(zhì)量，單位為克（g400—指血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)共有400個小方格；10000—血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積為0.1mm3，1mL相當(dāng)于10000個血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積。B.6.2使用16個中格×25個小格的計(jì)數(shù)板時，每克抱子粉中含完整靈芝抱子數(shù)按式（B.2）計(jì)算。 N—X00X0000X 式中：N—每克抱子粉中含完整靈芝抱子數(shù)，單位為個每克（個／gB2—100個小方格內(nèi)含完整靈芝抱子的總數(shù)，單位為個；100—抱子稀釋液的體積數(shù)值；mB—樣品的質(zhì)量，單位為克（g400—指血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)共有400個小方格；10000—血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積為0.1mm3，1mL相當(dāng)于容積。B.6.3破壁率的計(jì)算10000個血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的X—1-X100%（B式中：X—破壁靈芝抱子粉的破壁率；NB—每克破壁靈芝抱子粉中含完整靈芝抱子數(shù)，單位為個每克（個／gNA—每克靈芝抱子粉中含完整靈芝抱子數(shù)，單位為個每克（個／g）。9附錄C（規(guī)范性）含油率的測定方法C.1試劑和材料C.1.1石油獸（30℃~60℃分析純）。C.2儀器和設(shè)備索氏提取裝置。電熱恒溫水浴鍋。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。濾紙（中速定性濾紙）。C.3含油率的測定方法在500m