DB2310-T 121-2024 食用菌種質(zhì)資源維護(hù)管理技術(shù)規(guī)程

65.020.20CCS

B

30/392310 DB

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—2024食用菌種質(zhì)資源維護(hù)管理技術(shù)規(guī)程牡丹江市市場(chǎng)監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB

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121—2024 本文件按照GB/T

—《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院牡丹江分院和黑龍江華騰生物科技有限公司提出。學(xué)、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件主要起草人：王延鋒、盛春鴿、張秀豐、時(shí)新瑞、王金賀、史磊、劉姿彤、張鵬、于海洋、趙靜、王菲、閆水華、王遠(yuǎn)杭、陳文東、張勇、時(shí)新瑞、傅迎軍。DB

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121—20241

范圍2

規(guī)范性引用文件文件。GB/T

12728

食用菌術(shù)語(yǔ)NY/T

食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T

1742

食用菌菌種通用技術(shù)要求3

術(shù)語(yǔ)和定義3.13.23.33.4

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。組織分離組織分離是一種用子實(shí)體的某一部分來(lái)分離菌種的方法。菌種活力菌種活力包括萌發(fā)能力、定植能力和吃料能力。待檢菌種指由委托方提供的需要檢測(cè)的菌種。標(biāo)準(zhǔn)菌種種（一級(jí)菌種）、標(biāo)準(zhǔn)原種（二級(jí)菌種）和標(biāo)準(zhǔn)栽培種（三級(jí)菌種）。3.5菌種退化DB

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121—2024菌種在生長(zhǎng)和栽培過(guò)程中，由于自發(fā)突變導(dǎo)致優(yōu)良性狀下降的現(xiàn)象。3.6菌種提純使菌種得到進(jìn)一步純化，并保持菌種優(yōu)良性狀的技術(shù)措施。3.7菌種復(fù)壯提高菌種活力的技術(shù)措施。3.8雜菌污染菌種受到細(xì)菌、放線菌或其他真菌污染的現(xiàn)象。3.9病毒侵染菌絲體因病毒感染而導(dǎo)致代謝生長(zhǎng)不正常的現(xiàn)象。3.10種質(zhì)資源

種、品系、特殊遺傳材料等。3.11育種中間材料育種過(guò)程中產(chǎn)生的單孢菌株、原生質(zhì)體單核化菌株、雜交菌株、誘變菌株等。4

菌種質(zhì)量評(píng)價(jià)4.1

培養(yǎng)基制備根據(jù)母種特性，按NY/T

的要求，配制相應(yīng)的母種培養(yǎng)基。4.2

接種及培養(yǎng)取適宜大小的待檢母種菌絲塊，接種到平板培養(yǎng)基中央部位，每個(gè)菌株3次以上重復(fù)。于恒溫培養(yǎng)箱中適溫培養(yǎng)7

d～

d。4.3

菌種定性評(píng)價(jià)觀察接種塊長(zhǎng)出的菌落形態(tài)及菌絲體長(zhǎng)勢(shì)，并按下列方法進(jìn)行菌種質(zhì)量評(píng)價(jià)：DB

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121—2024a) 優(yōu)質(zhì)母種：菌落呈規(guī)則圓形、菌絲粗壯、長(zhǎng)勢(shì)良好，符合本品種母種應(yīng)有的特征，可用于生產(chǎn)；b) 老化、退化母種：部分菌落菌絲生長(zhǎng)不規(guī)則或分泌色素較多，可用于提純復(fù)壯；c) 淘汰母種：具備下列特征之一的均應(yīng)淘汰：——接種塊菌絲體停止生長(zhǎng)或死亡；反應(yīng)；——菌絲生長(zhǎng)緩慢、散發(fā)出難聞的酸臭氣味。4.4

菌種活力評(píng)價(jià)4.4.1

菌絲萌發(fā)能力發(fā)出新菌絲的能力。4.4.2

菌絲生長(zhǎng)速度將活化好的菌種接種到適宜培養(yǎng)基上。3

次重復(fù)。最適溫度下培養(yǎng)至直徑為

cm～1.5

cm后，每隔24

h測(cè)量菌落大小，連測(cè)3

d～5

d，計(jì)算菌絲平均生長(zhǎng)速度。4.5

菌種純度評(píng)價(jià)4.5.1

肉眼觀察在適宜光線條件下，肉眼觀察裝有菌種的容器中是否混有細(xì)菌、霉菌、螨蟲(chóng)、線蟲(chóng)等其它生物。4.5.2

顯微檢測(cè)1040倍物鏡觀察50野，檢查是否有其它生物。4.6

生物學(xué)特性檢驗(yàn)4.6.1

溫度將待檢菌種與標(biāo)準(zhǔn)菌種接種到平板培養(yǎng)基上，在

℃～37

℃每隔3

1梯度進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)量生長(zhǎng)速度。4.6.2

pH將待檢菌種接種到不同酸堿度的平板培養(yǎng)基上，置于適宜的溫度下培養(yǎng)。在

4～11范圍內(nèi)每隔1個(gè)pH設(shè)1梯度進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度，獲得菌絲生長(zhǎng)范圍和最適pH。4.7

農(nóng)藝性狀檢測(cè)4.7.1

菌種萌發(fā)定植能力檢測(cè)將待檢菌種轉(zhuǎn)接到母種、原種和栽培種培養(yǎng)基

(料)中，適宜溫度培養(yǎng)，肉眼觀察菌絲的萌發(fā)定植情況。4.7.2

產(chǎn)量和生物學(xué)效率DB

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121—2024檢菌種和標(biāo)準(zhǔn)菌種的差異。4.7.3

子實(shí)體形態(tài)觀察栽培過(guò)程中，觀察記錄子實(shí)體形態(tài)。4.7.4

結(jié)菇轉(zhuǎn)潮能力栽培過(guò)程中，記錄出菇時(shí)間、采收時(shí)間和轉(zhuǎn)潮時(shí)間。5

菌種提純復(fù)壯方法5.1

子實(shí)體組織分離法備一級(jí)菌種用。5.2

菌絲尖端分離法

5

中培養(yǎng)，供制備一級(jí)菌種。6

菌種保藏6.1

保藏形式以純培養(yǎng)的菌絲體為保藏形式，即以母種形式保藏，母種制備應(yīng)符合NY/T

和NY/T

1742規(guī)定的要求。6.2

保藏方法6.2.1

短期保藏2

4

13

℃～16

2～66.2.2

中期保藏6.2.2.1

天然培養(yǎng)基保藏法為2

4

℃，一般可保藏1～2年。6.2.2.2

礦物油保藏法礦物油保藏法是用礦物油覆蓋斜面培養(yǎng)物，降低細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝活動(dòng)的保藏方法。保藏溫度為15

25

℃，一般可保藏3～5年。DB

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121—20246.2.2.3

無(wú)菌水保藏法為2

4

℃，一般可保藏1～2年。6.2.3

長(zhǎng)期保藏液氮保藏法是將菌種在液氮罐中長(zhǎng)期保存的保藏方法。保藏溫度為-196

℃，一般可保藏5～年。7

菌種管理7.1

管理制度7.1.1

專人負(fù)責(zé)制由專人負(fù)責(zé)種質(zhì)資源管理工作，包括種質(zhì)保存、信息記錄、資料整理歸檔、檔案審查等。7.1.2

信息管理檔案。7.1.3

檔案資料所有檔案資料應(yīng)同時(shí)保存紙質(zhì)文檔和電子文檔，紙質(zhì)文檔內(nèi)容應(yīng)清晰明確，電子文檔應(yīng)有備份。7.2

建立保種目錄在電腦中創(chuàng)建命名為“食用菌種質(zhì)資源保種目錄”的Excel文件，用表格記錄保藏菌株的各項(xiàng)背景信息，并定期備份。具體信息包括：a) 4位阿拉伯?dāng)?shù)字表示保藏菌株序號(hào)；b) 原編號(hào)：在保種目錄中記錄菌株提供方提供的原始菌名菌號(hào)；c) 來(lái)源：記錄菌株提供方的單位名稱或個(gè)人姓名及其所在地。若提供方能提供該菌株的來(lái)源地或獲得方式，在本目錄中作為二級(jí)來(lái)源記錄在括號(hào)內(nèi)；d) 短期庫(kù)編碼：各菌株在短期庫(kù)中都有一個(gè)編碼，由51、2個(gè)數(shù)字表明冷藏柜的編號(hào)；第3個(gè)數(shù)字表示柜內(nèi)有機(jī)玻璃保種架編號(hào)；第4個(gè)數(shù)字表示架上從左到右第幾列；第5個(gè)數(shù)字表示列中從前到后第幾行；e) 中期庫(kù)編碼：與短期庫(kù)編碼意義相同；f) 長(zhǎng)期庫(kù)編碼：個(gè)數(shù)字組成，標(biāo)明凍藏的時(shí)間和保藏位置。第（1～4）個(gè)數(shù)字表明凍藏的年5～67～89～字表示液氮罐編號(hào)；第個(gè)數(shù)字表示罐內(nèi)保種組號(hào)，每個(gè)液氮罐有6個(gè)缺口，可保藏6組保藏杯；第12個(gè)數(shù)字表示組內(nèi)保藏杯編號(hào)，每組保藏10個(gè)保藏杯；第13個(gè)數(shù)字表示保藏杯中凍藏管編號(hào)。7.3

庫(kù)藏更新短期、中期與長(zhǎng)期保藏庫(kù)保藏的菌株，應(yīng)在期限內(nèi)及時(shí)更新。7.3.1

短期庫(kù)更新DB

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