歷年高考生物知識(shí)清單-專題17 生物技術(shù)實(shí)踐（講）（原卷+解析版）

1專題17生物技術(shù)實(shí)踐考情解讀1.近五年的考題中，對微生物的分離和培養(yǎng)的考查尤為突出，側(cè)重考查微生物的分離純化技術(shù)，對傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的發(fā)酵原理、制作流程等的考查頻度也在不斷提高。對植物組織培養(yǎng)、胡蘿卜素的提取僅進(jìn)行了兩次考查，前者側(cè)重考查營養(yǎng)條件及有關(guān)植物激素的作用等；后者側(cè)重考查胡蘿卜素的萃取劑的選擇等。2．常借助某一特定的微生物的分離和培養(yǎng)考查微生物的營養(yǎng)、接種方法等；對于生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用，常借助發(fā)酵實(shí)例考查，填充內(nèi)容多為教材中一些結(jié)論性語句等。植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物有效成分的提取的考查也多以教材基礎(chǔ)知識(shí)為主。3．備考時(shí)，從以下5個(gè)方面來把握：(1)掌握大腸桿菌的純化原理、主要方法及菌種的保存方法。(2)認(rèn)真分析教材中兩個(gè)微生物分離與計(jì)數(shù)的實(shí)例，并掌握微生物的篩選及技術(shù)方法。(3)利用比較法歸納總結(jié)并掌握常見傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的原理、流程及影響因素等。(4)列表比較玫瑰精油、橘皮精油及胡蘿卜素的提取方法、原理、實(shí)驗(yàn)步驟等異同。重點(diǎn)知識(shí)梳理【知識(shí)網(wǎng)絡(luò)】知識(shí)點(diǎn)一、微生物的營養(yǎng)1．微生物的營養(yǎng)2營養(yǎng)要素來源功能碳源無機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞和合成一些代謝產(chǎn)物②有些既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能源有機(jī)碳源糖、脂肪、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等營養(yǎng)要素來源功能氮源無機(jī)氮源NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸營養(yǎng)要素來源功能生長因子(特殊營養(yǎng)物質(zhì))基①酶和核酸的組成成分②參與代謝過程中的酶促反應(yīng)水和無機(jī)機(jī)鹽外界攝入水不僅是優(yōu)良溶劑而且可維持生物大分子的穩(wěn)定；無機(jī)鹽是細(xì)胞內(nèi)的成分和調(diào)節(jié)物質(zhì)等2．培養(yǎng)基種類及用途劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定3劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽)用途鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)3．微生物的分離與計(jì)數(shù)(1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離：①篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選。②過程：土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。(2)分解纖維素的微生物的分離：①原理：即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。②流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。(3)鑒定方法：鑒定分解尿素的細(xì)菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基→細(xì)菌→指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素分解菌(4)計(jì)數(shù)方法：①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積樣品中的細(xì)菌數(shù)量。該方法不能區(qū)分細(xì)4菌的死活。②間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)：常用稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落即代表一個(gè)活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布3個(gè)平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值?！咎貏e提醒】消毒和滅菌的區(qū)別條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部部分微生物煮沸消毒法一般物品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌接種工具干熱滅菌玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基及容器的滅菌知識(shí)點(diǎn)二、酶的應(yīng)用1．酶的存在與簡單制作方法(1)酶在生物體內(nèi)的存在(或分布)部位：酶是在生物體活細(xì)胞中合成的。多數(shù)酶在細(xì)胞內(nèi)直接參與生物化學(xué)反應(yīng)，少數(shù)的酶要分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用。(2)酶的制備：①胞內(nèi)酶的制?。盒枰扑樯锝M織細(xì)胞，可用破碎儀、研磨器或勻漿器等機(jī)械將組織細(xì)胞破碎，使酶從活細(xì)胞中釋放出來，進(jìn)入細(xì)胞外的溶液中，經(jīng)過濾、離心制備成粗酶液。②胞外酶的制備：對于唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到細(xì)胞外的酶，可以直接從動(dòng)物分泌物或細(xì)胞外的組織間隙中提取。2．酶活性(力)測定的一般原理和方法(1)酶活性(力)的含義：酶的活性(力)是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。(2)酶活性(力)測定的一般原理和方法：酶的活性(力)通常以單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量或者在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量來表示。3．酶的活性及影響酶活性因素的實(shí)驗(yàn)探究(以果膠酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用為例探究溫度或pH對果膠酶活性的影響)(1)探究不同溫度(或pH)對酶活性的影響時(shí)，溫度(或pH)作為自變量，通常通過設(shè)置合理的梯度來確定最適值，最適值是通過比較相同時(shí)間內(nèi)獲得的產(chǎn)量或效果來確定的。(2)在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將蘋果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫(或同pH)處理，目的是保證底物和酶在混合時(shí)的溫度(或pH)相同，避免蘋果泥與果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度(或pH)，從而影響實(shí)驗(yàn)效果。(3)果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積大小反映了果膠酶催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋果汁的體積就越大。4．探究不同種類加酶洗衣粉的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)原理：加酶洗衣粉的酶制劑有多種，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶等。加入不同的酶制劑，會(huì)制成用于不同污漬洗滌的加酶洗衣粉。復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多，對各種污漬都有較好的洗滌效果。(2)實(shí)驗(yàn)操作程序：步驟燒杯編號(hào)ⅠⅡⅢ注入自來水500mL500mL500mL加入物質(zhì)(等量)奶漬布奶漬布奶漬布控制水溫37℃37℃37℃加入洗衣粉(等量)蛋白酶洗衣粉復(fù)合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉玻璃棒攪拌(等速)5分鐘5分鐘5分鐘觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象5．固定化酶和固定化細(xì)胞的比較項(xiàng)目固定化酶固定化細(xì)胞常用方法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法優(yōu)點(diǎn)①可反復(fù)使用；②有利于工藝的連續(xù)化、管道化，同時(shí)降低了生產(chǎn)成本 1可以連續(xù)發(fā)酵，節(jié)約成本；②保持酶在細(xì)胞內(nèi)的原始狀況，增加了酶的穩(wěn)定性；③操作容易6不足①酶在固定化時(shí)活力有所損失；②不適用于多酶反應(yīng)細(xì)胞膜、細(xì)胞壁會(huì)阻礙底物的滲透和擴(kuò)散，降低反應(yīng)效率知識(shí)點(diǎn)三、生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用1．運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法果酒果醋腐乳泡菜微生物類型酵母菌(真菌)兼性厭氧菌醋酸桿菌(細(xì)菌)好氧細(xì)菌毛霉(真菌)好氧菌乳酸菌(細(xì)菌)厭氧菌原理酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精醋酸桿菌有氧呼吸產(chǎn)生醋酸毛霉代謝產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸控制條件前期有氧后期無氧，20℃左右有氧，30℃~35℃有氧，15℃~18℃無氧，常溫實(shí)驗(yàn)流程【特別提醒】①在泡菜的腌制過程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在一定條件下可轉(zhuǎn)化為能致癌、致畸和致突變的物質(zhì)——亞硝胺。②在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰(紫)紅色染料，通過目測比較，可大致估算亞硝酸鹽的含量。2．植物激素與組織培養(yǎng)生長素和細(xì)胞分裂素在植物組織培養(yǎng)中的作用及特點(diǎn)：(1)在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢。(2)使用順序不同，結(jié)果不同，具體如下：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化7同時(shí)使用分化頻率提高(3)用量比例不同，結(jié)果也不同：高：利于根的分化、抑制芽的形成適中：促進(jìn)愈傷組織的生長3．植物芳香油三種提取方法的比較細(xì)量的比值低：高：利于根的分化、抑制芽的形成適中：促進(jìn)愈傷組織的生長3．植物芳香油三種提取方法的比較提取方法實(shí)驗(yàn)原理方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過濾、靜置③再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中4．DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(1)DNA的粗提取和鑒定：①基本原理：a．DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。b．DNA不溶于酒精溶液。c．DNA不被蛋白酶水解。d．DNA在水浴加熱條件下可被二苯胺染成藍(lán)色。②主要步驟：選取材料→破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出與鑒定。③注意事項(xiàng)：a．選擇動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞比較容易破碎，選擇植物細(xì)胞時(shí)則要先溶解細(xì)胞膜(如加洗滌劑、研磨等)。b．以鳥類的紅細(xì)胞為材料時(shí)，需向血液中加入檸檬酸鈉抗凝。c．二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用。(2)PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用：①目的——獲取大量的目的基因8②原理——雙鏈DNA的復(fù)制。③條件——需要DNA模板、引物(一般為單鏈DNA)、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶和酶促反應(yīng)所需的離子，同時(shí)還要控制溫度。④過程：a．變性：在95℃時(shí)DNA解旋。b．復(fù)性：在50℃時(shí)引物與DNA單鏈結(jié)合。c．延伸：在72℃時(shí)合成DNA子鏈(兩個(gè)引物間的序列)。(3)蛋白質(zhì)的提取和分離：①實(shí)驗(yàn)原理：依據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性可以將不同種類的蛋白質(zhì)分離。②常用方法：a．凝膠色譜法：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。b．電泳：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速度，由此將各種分子分離。c．蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。【特別提醒】①人和哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有DNA，不適于作為DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。②凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過大會(huì)造成洗脫液體積增大，樣品稀釋度增大；凝膠色譜柱的高度與分離度有關(guān)。③紅細(xì)胞洗滌過程中，洗滌三次后，上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無法除去血漿蛋白；離心時(shí)轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞等會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。④血紅蛋白釋放過程中，蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞，甲苯的作用主要是溶解細(xì)胞膜。知識(shí)點(diǎn)四、微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用1．微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)要素來源功能碳源無機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞中的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；②既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等9氮源無機(jī)氮源無機(jī)氮：NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等將無機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長因子維生素、氨基酸、堿基①酶和核酸的組成成分；②參與代謝過程中的酶促反應(yīng)2.微生物的純化培養(yǎng)的方法(1)平板劃線法①通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面②在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的菌落。(2)稀釋涂布平板法①將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。②在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。3．測定微生物數(shù)量的方法(1)直接計(jì)數(shù)法：常用的是顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2)間接計(jì)數(shù)法：常用的是稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法?！咎貏e提示】(1)顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)算的細(xì)菌中包括死細(xì)菌。稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的是活菌數(shù)。(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目要低。知識(shí)點(diǎn)五、酶的應(yīng)用1．直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞直接使用酶固定化酶固定化細(xì)胞制作方法化學(xué)結(jié)合法固定化、物理吸附法固定化包埋法固定法是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否是催化反應(yīng)單一或多種單一一系列反應(yīng)底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)小分子物質(zhì)缺點(diǎn)①對環(huán)境條件非常敏感，易影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列酶促反應(yīng)反應(yīng)物不易與酶接近，尤其是大分子物質(zhì)，反應(yīng)效率下降優(yōu)點(diǎn)催化效率高、耗能低、低污染①既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；②可以重復(fù)利用成本低、操作容易2.加酶洗衣粉的洗滌效果的探究(1)判斷加酶洗衣粉洗滌效果的方法：可在洗滌后比較污物的殘留狀況，如已消失、顏色變淺、面積縮小等。(2)加酶洗衣粉的洗滌效果的探究方法：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的原則是對照原則和單一變量原則，如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果有何不同時(shí)，以控制洗衣粉的種類為變量，其他條件完全一致；同時(shí)，普通洗衣粉處理污物與加酶洗衣粉處理污物形成對照實(shí)驗(yàn)。(3)變量的分析和控制：影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有水溫、水量、水質(zhì)、洗衣粉的用量、衣物的材質(zhì)、衣物大小、浸泡時(shí)間、洗滌的方式和洗滌的時(shí)間等。在選擇適宜的變量作為探究課題的時(shí)候，應(yīng)注意切合實(shí)際，如選擇水溫時(shí)，我們可以選擇一年中冬季、春季、秋季和夏季的實(shí)際常溫5℃、15℃、25℃和35℃進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。知識(shí)點(diǎn)六、植物有效成分的提取不同物質(zhì)的提取分離方法提取方法方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾、分離油層、除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法石灰水浸泡、漂洗、壓榨、過濾、靜置、再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦煳原料的提取有機(jī)溶劑萃取粉碎、干燥、萃取、過濾、濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中高頻考點(diǎn)突攻高頻考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)和利用例12019全國卷III·37）回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上（填“能夠”或“不能”）生長，原因是。（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。【舉一反三】(2018·全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能。在照射前，適量噴灑，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原【變式探究】空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無菌平板；③設(shè)置空白對照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。回答下列問題：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是。(2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是。(3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法(填“正確”或“不正確”)?！咀兪教骄俊靠諝庵械奈⑸镌谥亓Φ茸饔孟?，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無菌平板；③設(shè)置空白對照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。回答下列問題：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是。(2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是。(3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法(填“正確”或“不正確”)?！咀兪教骄俊繛榱苏{(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是。____________________________________(3)示意圖A和B中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中 的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高的利用率。高頻考點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用例2.（2019江蘇卷·9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是A．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D．毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵【舉一反三】（2018江蘇卷，16）某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．夏季生產(chǎn)果酒時(shí)，常需對罐體進(jìn)行降溫處理B．乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C．正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓D．可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵【變式探究】泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一，但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害，某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”，查閱資料得到下圖。(1)制作泡菜時(shí)，泡菜壇一般用水密封，目的是。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有。(2)據(jù)上圖，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因?yàn)楹笳撸籶H呈下降趨勢，原因是。(3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍)，擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度(4%～10%)，探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定其最適條件。請你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表，并推測實(shí)驗(yàn)結(jié)論?！九e一反三】某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：(1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是。____________________________________(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出 的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在－20℃長期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。高頻考點(diǎn)三植物組織培養(yǎng)例3、（2019江蘇卷·10）下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是A．用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近B．DNA析出過程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂C．預(yù)冷的乙醇可用來進(jìn)一步純化粗提的DNAD．用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱【舉一反三】（2018江蘇卷，17）關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是()A．在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑，溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色B．在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍(lán)色變成紫色C．提取DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾液D．將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無色變成藍(lán)色【舉一反三】（2018江蘇卷，8）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是()A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D．過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上【變式探究】為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題：(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過程稱為。(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的原因有；培養(yǎng)液中蔗糖的作用是、。(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)處理，會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶和酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞，合理的解釋是________________________________________(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù)，其原理與酵母細(xì)胞固定化類似。下列說法正確的有(填序號(hào))。①選取旺盛生長的愈傷組織細(xì)胞包埋②必須在光照條件下培養(yǎng)③培養(yǎng)過程中需通空氣④固定化后植物細(xì)胞生長會(huì)變慢【變式探究】用多倍體育種的方法培育三倍體無子西瓜，每年都要制種，很麻煩。某活動(dòng)小組同學(xué)們，想到了利用植物組織培養(yǎng)的方法來解決此難題。請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。(1)離體的組織和細(xì)胞，對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)基是，其主要成分包括：大量元素、微量元素、有機(jī)物，還常常需要添加；對培養(yǎng)基要進(jìn)行滅菌。(2)選取合適的外植體作為實(shí)驗(yàn)材料，接種前還要對其進(jìn)行處理。為提高組織培養(yǎng)成功率，常選擇的材料做外植體。(3)如果外植體選取的材料為莖段，插入培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意。培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)通過形成愈傷組織，愈傷組織的特點(diǎn)是。高頻考點(diǎn)四酶的應(yīng)用例4、（2019江蘇卷·13）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯(cuò)誤的是()A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B．用加酶洗滌劑能減少洗滌時(shí)間并節(jié)約用水C．含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對耐高溫的【舉一反三】(2018·江蘇高考)(多選)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯(cuò)誤的是()A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來B．洗衣粉中的蛋白酶通常會(huì)將添加的其他酶迅速分解C．在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時(shí)，其中的酶會(huì)迅速失活D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不會(huì)影響其中酶的活性【變式探究】回答與果膠、淀粉等提取和利用有關(guān)的問題：某植物富含果膠、淀粉、蛋白質(zhì)和纖維素成分。某小組開展了該植物綜合利用的研究。(1)果膠提取工藝研究結(jié)果表明，原料先經(jīng)過一段時(shí)間沸水漂洗的果膠得率(提取得到的果膠占原料質(zhì)量的百分率)顯著高于常溫水漂洗的果膠得率，最主要原因是沸水漂洗(A.有助于清洗雜質(zhì)和去除可溶性糖B．使植物組織變得松散C．使有關(guān)酶失活D．有利細(xì)胞破裂和原料粉碎制漿)。(2)在淀粉分離生產(chǎn)工藝研究中，為促進(jìn)淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝劑(乳酸菌菌液)，其菌株起重要作用。為了消除絮凝劑中的雜菌，通常將生產(chǎn)上使用的菌液，采用，進(jìn)行單菌落分離，然后將其 ,并進(jìn)行特性鑒定，篩選得到純的菌株。(3)在用以上提取過果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中，將剩渣制成的汁液經(jīng)蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后，發(fā)現(xiàn)仍存在渾濁和沉淀問題?？商砑邮构z徹底分解成半乳糖醛酸，再添加 ,以解決汁液渾濁和沉淀問題。(4)在建立和優(yōu)化固定化酶反應(yīng)器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的活性，然后主要優(yōu)化各固定化酶反應(yīng)器中的(答出2點(diǎn)即可)、反應(yīng)液pH和酶反應(yīng)時(shí)間等因素。其中，酶反應(yīng)時(shí)間可通過來調(diào)節(jié)。真題感怪1.（2019江蘇卷·9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是A．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D．毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵2.（2019江蘇卷·13）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯(cuò)誤的是A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B．用加酶洗滌劑能減少洗滌時(shí)間并節(jié)約用水C．含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對耐高溫的3.（2019北京卷·3）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表。菌種H/C細(xì)菌Ⅰ2.2細(xì)菌Ⅱ有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B．篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布C．以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D．H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異4.（2019江蘇卷·19）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不合理的是A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C．在分離平板上長出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值5.（2019全國卷III·37）回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是。（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。6.（2019全國卷Ⅰ·37）已知一種有機(jī)物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌（目標(biāo)菌）。Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機(jī)鹽（適量），X（15g/L）。Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機(jī)鹽（適量）。X（45g/L）。回答下列問題。（1）在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是。Ⅱ、Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是。（2）若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)，其原因是。（3）Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是。（4）假設(shè)從Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供和。7.（2019全國卷II·37）物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌（目標(biāo)菌）?；卮鹣铝袉栴}。（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是。（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是。（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，請簡要寫出?shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即。（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加，三處滴加量相同。②一段時(shí)間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明。8.（2019浙江4月選考·32）回答下列（一）小題：（一）回答與果膠和果膠酶有關(guān)的問題：（1）通常從腐爛的水果上分離產(chǎn)果膠酶的微生物，其原因除水果中果膠含量較高外，還因?yàn)?。?）為了獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落，通常對分離或誘變后的微生物懸液進(jìn)行。（3）在某種果汁生產(chǎn)中，用果膠酶處理顯著增加了產(chǎn)量，其主要原因是果膠酶水解果膠使。果汁生產(chǎn)中的殘?jiān)さ扔糜诠z生產(chǎn)，通常將其提取液濃縮后再加入。使之形成絮狀物，然后通過離心、真空干燥等步驟獲得果膠制品。（4）常用固定化果膠酶處理含果膠的污水，其主要優(yōu)點(diǎn)有和可連續(xù)處理等。在建立和優(yōu)化固定化果膠酶處理工藝時(shí)，除考慮果膠酶的活性和用量、酶反應(yīng)的溫度、pH、作用時(shí)間等環(huán)境因素外，還需考慮的主要有和。12018北京卷，4）以下高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，操作不正確的是()A．在制作果酒的實(shí)驗(yàn)中，將葡萄汁液裝滿整個(gè)發(fā)酵裝置B．鑒定DNA時(shí)，將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進(jìn)行沸水浴C．用蘇丹Ⅲ染液染色，觀察花生子葉細(xì)胞中的脂肪滴（顆粒）D．用龍膽紫染液染色，觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞中的染色體22018江蘇卷，8）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是()A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C．過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D．過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上32018江蘇卷，14）下列關(guān)于酵母細(xì)胞固定化實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A．用溫水使海藻酸鈉迅速溶解，待其冷卻到室溫后用于包埋細(xì)胞B．進(jìn)行包埋時(shí)，用于懸浮細(xì)胞的CaCl2溶液濃度要適宜C．注射器（或滴管）出口應(yīng)盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀D．包埋酵母細(xì)胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性42018江蘇卷，16）某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．夏季生產(chǎn)果酒時(shí)，常需對罐體進(jìn)行降溫處理B．乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C．正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓D．可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵52018江蘇卷，17）關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是()A．在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑，溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色B．在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍(lán)色變成紫色C．提取DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾液D．將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無色變成藍(lán)色62018江蘇卷，21）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯(cuò)誤的是()A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來B．洗衣粉中的蛋白酶通常會(huì)將添加的其他酶迅速分解C．在50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時(shí)，其中的酶會(huì)迅速失活D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不會(huì)影響其中酶的活性7．(2018·全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)觀察到菌落，菌落的含義(2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，可促進(jìn)(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時(shí)，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是。8.(2018·浙江4月高考)回答與果膠、淀粉等提取和利用有關(guān)的問題：某植物富含果膠、淀粉、蛋白質(zhì)和纖維素成分。某小組開展了該植物綜合利用的研究。(1)果膠提取工藝研究結(jié)果表明，原料先經(jīng)過一段時(shí)間沸水漂洗的果膠得率(提取得到的果膠占原料質(zhì)量的百分率)顯著高于常溫水漂洗的果膠得率，最主要原因是沸水漂洗(A.有助于清洗雜質(zhì)和去除可溶性糖B．使植物組織變得松散C．使有關(guān)酶失活D．有利細(xì)胞破裂和原料粉碎制漿)。(2)在淀粉分離生產(chǎn)工藝研究中，為促進(jìn)淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝劑(乳酸菌菌液)，其菌株起重要作用。為了消除絮凝劑中的雜菌，通常將生產(chǎn)上使用的菌液，采用，進(jìn)行單菌落分離，然后將其 ,并進(jìn)行特性鑒定，篩選得到純的菌株。(3)在用以上提取過果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中，將剩渣制成的汁液經(jīng)蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后，發(fā)現(xiàn)仍存在渾濁和沉淀問題。可添加使果膠徹底分解成半乳糖醛酸，再添加,以解決汁液渾濁和沉淀問題。________(4)在建立和優(yōu)化固定化酶反應(yīng)器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的活性，然后主要優(yōu)化各固定化酶反應(yīng)器中的(答出2點(diǎn)即可)、反應(yīng)液pH和酶反應(yīng)時(shí)間等因素。其中，酶反應(yīng)時(shí)間可通過來調(diào)節(jié)。9.(2018·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有 (答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是。_____________________________(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是。10.(2018·江蘇高考)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。如圖所示為操作流程，請回答下列問題：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的，及時(shí)對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行滅菌。(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約(填“25℃”“50℃”或“80℃”)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。(3)挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有。a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b．劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c．挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d．可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株(4)步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺(tái)盼藍(lán)染液染色，用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于，才能達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。11.(2018·全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能。在照射前，適量噴灑，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原12017年江蘇卷，10）下列關(guān)于“腐乳的制作”的實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是()A．控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D．成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生22017年江蘇卷，12）固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是()A．在單寧酶純化時(shí)可采用透析法去除雜蛋白B．化學(xué)結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小C．溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性D．酶的高效性決定固定化單寧酶不會(huì)降解茶飲料中的有益成分32017年江蘇卷，17）為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能，研究性學(xué)習(xí)小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖。由圖中實(shí)驗(yàn)結(jié)果能直接得出的結(jié)論是()A．堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最強(qiáng)B．不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力C．堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同D．加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力42017年江蘇卷，20）下列關(guān)于“酵母細(xì)胞的固定化技術(shù)”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A．活化酵母時(shí)，將適量干酵母與蒸餾水混合并攪拌成糊狀B．配制CaCl2溶液時(shí)，需要邊小火加熱邊攪拌C．將海藻酸鈉溶液滴加到CaCl2溶液時(shí)，凝膠珠成形后應(yīng)即刻取出D．海藻酸鈉溶液濃度過高時(shí)凝膠珠呈白色，過低時(shí)凝膠珠易呈蝌蚪狀52017年江蘇卷，25）下圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A．改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響B(tài)．果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)猓湍妇鷮挠醒鹾粑D(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C．果醋的發(fā)酵周期與實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度密切相關(guān)D．氣體入口與氣體出口可以交換使用62017年新課標(biāo)Ⅰ卷，37）某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題：（1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是，但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是（答出兩點(diǎn)即可）?；颉澳蛩?NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是。（3）用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有72017年新課標(biāo)Ⅲ卷，37）綠色植物甲含有物質(zhì)W，該物質(zhì)為無色針狀晶體，易溶于極性有機(jī)溶劑，難溶于水，且受熱、受潮易分解。其提取流程為：植物甲→粉碎→加溶劑→振蕩→收集提取液→活性炭處理→過濾去除活性炭→蒸餾（含回收溶劑）→重結(jié)晶→成品。回答下列問題：（1）在提取物質(zhì)W時(shí)，最好應(yīng)選用的一種原料是（填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”）的植物甲，不宜選用其他兩種的原因是。（2）提取物質(zhì)W時(shí)，振蕩的作用是。（3）活性炭具有很強(qiáng)的吸附能力，在提取過程中，用活性炭處理提取液的目的是。（4）現(xiàn)有丙酮（沸點(diǎn)56℃)、乙醇（沸點(diǎn)約78℃)兩種溶劑，在提取物質(zhì)W時(shí)，應(yīng)選用丙酮作為提取劑，理由是。（5）該實(shí)驗(yàn)操作過程中應(yīng)注意的事項(xiàng)是（答出兩點(diǎn)即可）。82017年海南卷，30）綠藻A是某種單細(xì)胞綠藻，能夠合成物質(zhì)W。某小組為探究氮營養(yǎng)缺乏對綠藻A增殖及物質(zhì)W累計(jì)的影響，將等量的綠藻A分別接種在氮營養(yǎng)缺乏（實(shí)驗(yàn)組）和氮營養(yǎng)正常（對照組）的兩瓶培養(yǎng)液中，并在適宜溫度和一定光強(qiáng)下培養(yǎng)。定時(shí)取樣并檢測細(xì)胞濃度和物質(zhì)W的含量，結(jié)果如圖。（1）從圖甲可知，在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中，綠藻A的種群增長曲線呈型。（2）綜合圖甲和圖乙的信息可知，在生產(chǎn)上，若要用少量的綠藻A獲得盡可能多的物質(zhì)W，可以采取的措施是。（3）若物質(zhì)W是類胡蘿卜素，根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，應(yīng)選擇的提取方法是。用紙層析法可以將類胡蘿卜素與葉綠素分開，紙層析法分離的原理是。（4）在以上研究的基礎(chǔ)上，某人擬設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究氮營養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響，則該實(shí)驗(yàn)的自變量是。（5）與在光照條件下相比，若要使綠藻A在黑暗條件下增殖，需要為其提供（填“葡萄糖”或“纖維素”）作為營養(yǎng)物質(zhì)，原因是。92017年新課標(biāo)Ⅱ卷，37）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并在32h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：（1）該實(shí)驗(yàn)的自變量是、。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是。（3）如果在實(shí)驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間；若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?1.（2016天津卷.1012分）天津獨(dú)流老醋歷史悠久、獨(dú)具風(fēng)味，其生產(chǎn)工藝流程如下圖。（1）在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度，這是因?yàn)槊?。?）在酒精發(fā)酵階段，需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高的數(shù)量，有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）在醋酸發(fā)酵階段，獨(dú)流老醋采用獨(dú)特的分層固體發(fā)酵法，發(fā)酵30天。工藝如下。①發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如右圖。據(jù)圖分析，與顛倒前相比，B層醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是。②乳酸含量高是獨(dú)流老醋風(fēng)味獨(dú)特的重要成因。發(fā)酵過程中，發(fā)酵缸中層醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的變化，加劇了不同種類乳酸菌的，淘汰了部分乳酸菌種類。2.（2016課標(biāo)1卷.3915分）空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：①配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）;②制作無菌平板；③設(shè)置空白對照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}:（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是。（2）步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是。（3）若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30（即36-6）個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法（填“正確”或“不正確”）。3.（2016四川卷.1012分）圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成色。（2）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為×108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較。（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAG、UGA和UAA）。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含個(gè)氨基酸。4.（2016新課標(biāo)2卷.39)（15分）蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的，回答下列為題：（1）酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的 中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過程③在酵母菌細(xì)胞的中進(jìn)行，與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增值速度。（2）第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在條件下才能完成。（3）在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度（填“低于”或“高于”）第二階段。（4）醋酸桿菌屬于核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中（填“含有”或“不含有”）線粒體。5.（2016新課標(biāo)Ⅲ卷.39）某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問題：（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是。（2）推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出的菌落作為候選菌。（3）乳酸菌在-20℃長期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的（填“蒸餾水”、“甘6.（2016江蘇卷.299分）為了探索海藻酸鈉固定化對綠球藻生長的影響，以及固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用，科研人員用篩選到的一株綠球藻進(jìn)行試驗(yàn)，流程及結(jié)果如下。請回答下列問題：（1）實(shí)驗(yàn)中的海藻酸鈉作用是，CaCl2的作用是。（2）為洗去凝膠球上殘余的CaCl2和其他污染物，并保持綠球藻活性，宜采用洗滌。圖1中1.0%海藻酸鈉組培養(yǎng)24h后,移去凝膠球,溶液呈綠色,原因是。（3）為探索固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用，應(yīng)選用濃度為海藻酸鈉制備凝膠球。（4）圖2中空白凝膠球組Zn2+濃度下降的原因是。結(jié)合圖1和圖2分析，固定化藻的實(shí)驗(yàn)組24~48h間Zn2+濃度下降速度較快的主要原因是；72~96h間Zn2+濃度下降速度較慢的原因有。7.（2016海南卷.30）回答下列問題：（1）蛋白酶甲、乙、丙三者的活性隨pH的變化如圖所示。通常，用清水洗滌衣服上的新鮮血跡時(shí)，不應(yīng)該使用開水，原因是。若要去除衣服上的血漬，應(yīng)選擇含有 （填“蛋白酶甲”、“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”）的堿性洗衣粉，理由是。（2）某同學(xué)為了洗去衣服上的油漬，洗衣時(shí)在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，該同學(xué)的做法 （填“合理”或“不合理”理由是。（3）已知溶液的pH可以影響酶的活性，請推測pH影響某種蛋白酶活性的原因可能是其影響了酶和底物分子中（填“羧基和氨基”、“氨基和甲基”、“羧基和甲基”或“甲基和甲基”）等基團(tuán)的解離狀態(tài)。專題17生物技術(shù)實(shí)踐考情解讀1.近五年的考題中，對微生物的分離和培養(yǎng)的考查尤為突出，側(cè)重考查微生物的分離純化技術(shù)，對傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的發(fā)酵原理、制作流程等的考查頻度也在不斷提高。對植物組織培養(yǎng)、胡蘿卜素的提取僅進(jìn)行了兩次考查，前者側(cè)重考查營養(yǎng)條件及有關(guān)植物激素的作用等；后者側(cè)重考查胡蘿卜素的萃取劑的選擇等。2．常借助某一特定的微生物的分離和培養(yǎng)考查微生物的營養(yǎng)、接種方法等；對于生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用，常借助發(fā)酵實(shí)例考查，填充內(nèi)容多為教材中一些結(jié)論性語句等。植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物有效成分的提取的考查也多以教材基礎(chǔ)知識(shí)為主。3．備考時(shí)，從以下5個(gè)方面來把握：(1)掌握大腸桿菌的純化原理、主要方法及菌種的保存方法。(2)認(rèn)真分析教材中兩個(gè)微生物分離與計(jì)數(shù)的實(shí)例，并掌握微生物的篩選及技術(shù)方法。(3)利用比較法歸納總結(jié)并掌握常見傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的原理、流程及影響因素等。(4)列表比較玫瑰精油、橘皮精油及胡蘿卜素的提取方法、原理、實(shí)驗(yàn)步驟等異同?！局R(shí)網(wǎng)絡(luò)】知識(shí)點(diǎn)一、微生物的營養(yǎng)1．微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)要素來源功能碳源無機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞和合成一些代謝產(chǎn)物②有些既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能源有機(jī)碳源糖、脂肪、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等營養(yǎng)要素來源功能氮源無機(jī)氮源NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸營養(yǎng)要素來源功能生長因子(特殊營養(yǎng)物質(zhì))基①酶和核酸的組成成分②參與代謝過程中的酶促反應(yīng)水和無機(jī)機(jī)鹽外界攝入水不僅是優(yōu)良溶劑而且可維持生物大分子的穩(wěn)定；無機(jī)鹽是細(xì)胞內(nèi)的成分和調(diào)節(jié)物質(zhì)等2．培養(yǎng)基種類及用途劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽)用途鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)3．微生物的分離與計(jì)數(shù)(1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離：①篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選。②過程：土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。(2)分解纖維素的微生物的分離：①原理：即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。②流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。(3)鑒定方法：鑒定分解尿素的細(xì)菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基→細(xì)菌→指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素分解菌(4)計(jì)數(shù)方法：①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積樣品中的細(xì)菌數(shù)量。該方法不能區(qū)分細(xì)菌的死活。②間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)：常用稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落即代表一個(gè)活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布3個(gè)平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值。【特別提醒】消毒和滅菌的區(qū)別條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部部分微生物煮沸消毒法一般物品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌接種工具干熱滅菌玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基及容器的滅菌知識(shí)點(diǎn)二、酶的應(yīng)用1．酶的存在與簡單制作方法(1)酶在生物體內(nèi)的存在(或分布)部位：酶是在生物體活細(xì)胞中合成的。多數(shù)酶在細(xì)胞內(nèi)直接參與生物化學(xué)反應(yīng)，少數(shù)的酶要分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用。(2)酶的制備：①胞內(nèi)酶的制取：需要破碎生物組織細(xì)胞，可用破碎儀、研磨器或勻漿器等機(jī)械將組織細(xì)胞破碎，使酶從活細(xì)胞中釋放出來，進(jìn)入細(xì)胞外的溶液中，經(jīng)過濾、離心制備成粗酶液。②胞外酶的制備：對于唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到細(xì)胞外的酶，可以直接從動(dòng)物分泌物或細(xì)胞外的組織間隙中提取。2．酶活性(力)測定的一般原理和方法(1)酶活性(力)的含義：酶的活性(力)是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。(2)酶活性(力)測定的一般原理和方法：酶的活性(力)通常以單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量或者在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量來表示。3．酶的活性及影響酶活性因素的實(shí)驗(yàn)探究(以果膠酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用為例探究溫度或pH對果膠酶活性的影響)(1)探究不同溫度(或pH)對酶活性的影響時(shí)，溫度(或pH)作為自變量，通常通過設(shè)置合理的梯度來確定最適值，最適值是通過比較相同時(shí)間內(nèi)獲得的產(chǎn)量或效果來確定的。(2)在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將蘋果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫(或同pH)處理，目的是保證底物和酶在混合時(shí)的溫度(或pH)相同，避免蘋果泥與果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度(或pH)，從而影響實(shí)驗(yàn)效果。(3)果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積大小反映了果膠酶催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋果汁的體積就越大。4．探究不同種類加酶洗衣粉的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)原理：加酶洗衣粉的酶制劑有多種，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶等。加入不同的酶制劑，會(huì)制成用于不同污漬洗滌的加酶洗衣粉。復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多，對各種污漬都有較好的洗滌效果。(2)實(shí)驗(yàn)操作程序：步驟燒杯編號(hào)ⅠⅡⅢ注入自來水500mL500mL500mL加入物質(zhì)(等量)奶漬布奶漬布奶漬布控制水溫37℃37℃37℃加入洗衣粉(等量)蛋白酶洗衣粉復(fù)合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉玻璃棒攪拌(等速)5分鐘5分鐘5分鐘觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象5．固定化酶和固定化細(xì)胞的比較項(xiàng)目固定化酶固定化細(xì)胞常用方法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法優(yōu)點(diǎn)①可反復(fù)使用；②有利于工藝的連續(xù)化、管道1可以連續(xù)發(fā)酵，節(jié)約成本；②保持酶在細(xì)胞內(nèi)的原始狀況，增加了酶的穩(wěn)化，同時(shí)降低了生產(chǎn)成本定性；③操作容易不足①酶在固定化時(shí)活力有所損失；②不適用于多酶反應(yīng)細(xì)胞膜、細(xì)胞壁會(huì)阻礙底物的滲透和擴(kuò)散，降低反應(yīng)效率知識(shí)點(diǎn)三、生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用1．運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法果酒果醋腐乳泡菜微生物類型酵母菌(真菌)兼性厭氧菌醋酸桿菌(細(xì)菌)好氧細(xì)菌毛霉(真菌)好氧菌乳酸菌(細(xì)菌)厭氧菌原理酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精醋酸桿菌有氧呼吸產(chǎn)生醋酸毛霉代謝產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸控制條件前期有氧后期無氧，20℃左右有氧，30℃~35℃有氧，15℃~18℃無氧，常溫實(shí)驗(yàn)流程【特別提醒】①在泡菜的腌制過程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在一定條件下可轉(zhuǎn)化為能致癌、致畸和致突變的物質(zhì)——亞硝胺。②在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰(紫)紅色染料，通過目測比較，可大致估算亞硝酸鹽的含量。2．植物激素與組織培養(yǎng)生長素和細(xì)胞分裂素在植物組織培養(yǎng)中的作用及特點(diǎn)：(1)在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢。(2)使用順序不同，結(jié)果不同，具體如下：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高(3)用量比例不同，結(jié)果也不同：高：利于根的分化、抑制芽的形成適中：促進(jìn)愈傷組織的生長3．植物芳香油三種提取方法的比較細(xì)量的比值低：高：利于根的分化、抑制芽的形成適中：促進(jìn)愈傷組織的生長3．植物芳香油三種提取方法的比較提取方法實(shí)驗(yàn)原理方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過濾、靜置③再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中4．DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(1)DNA的粗提取和鑒定：①基本原理：a．DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。b．DNA不溶于酒精溶液。c．DNA不被蛋白酶水解。d．DNA在水浴加熱條件下可被二苯胺染成藍(lán)色。②主要步驟：選取材料→破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出與鑒定。③注意事項(xiàng)：a．選擇動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞比較容易破碎，選擇植物細(xì)胞時(shí)則要先溶解細(xì)胞膜(如加洗滌劑、研磨等)。b．以鳥類的紅細(xì)胞為材料時(shí)，需向血液中加入檸檬酸鈉抗凝。c．二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用。(2)PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用：①目的——獲取大量的目的基因②原理——雙鏈DNA的復(fù)制。③條件——需要DNA模板、引物(一般為單鏈DNA)、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶和酶促反應(yīng)所需的離子，同時(shí)還要控制溫度。④過程：a．變性：在95℃時(shí)DNA解旋。b．復(fù)性：在50℃時(shí)引物與DNA單鏈結(jié)合。c．延伸：在72℃時(shí)合成DNA子鏈(兩個(gè)引物間的序列)。(3)蛋白質(zhì)的提取和分離：①實(shí)驗(yàn)原理：依據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性可以將不同種類的蛋白質(zhì)分離。②常用方法：a．凝膠色譜法：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。b．電泳：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速度，由此將各種分子分離。c．蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定?！咎貏e提醒】①人和哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有DNA，不適于作為DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。②凝膠色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過大會(huì)造成洗脫液體積增大，樣品稀釋度增大；凝膠色譜柱的高度與分離度有關(guān)。③紅細(xì)胞洗滌過程中，洗滌三次后，上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無法除去血漿蛋白；離心時(shí)轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞等會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。④血紅蛋白釋放過程中，蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞，甲苯的作用主要是溶解細(xì)胞膜。知識(shí)點(diǎn)四、微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用1．微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)要素來源功能碳源無機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞中的物質(zhì)和一些代有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等謝產(chǎn)物；②既是碳源又是能源氮源無機(jī)氮源無機(jī)氮：NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等將無機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長因子維生素、氨基酸、堿基①酶和核酸的組成成分；②參與代謝過程中的酶促反應(yīng)2.微生物的純化培養(yǎng)的方法(1)平板劃線法①通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面②在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的菌落。(2)稀釋涂布平板法①將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。②在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。3．測定微生物數(shù)量的方法(1)直接計(jì)數(shù)法：常用的是顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2)間接計(jì)數(shù)法：常用的是稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法?！咎貏e提示】(1)顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)算的細(xì)菌中包括死細(xì)菌。稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的是活菌數(shù)。