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文檔簡介
貴州省黔西南州興仁市鳳凰中學2023-2024學年高三沖刺模擬生物試卷考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.絕大多數(shù)酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì),下列關(guān)于這類酶的敘述中錯誤的是()A.需要核酸作為合成時的模板 B.保存時需要低溫和適宜的pHC.在高溫時其結(jié)構(gòu)會變得松散 D.向該類酶溶液中加入一定量食鹽會使酶失活2.某沿海區(qū)域的海藻林群落中生長著各種大型海洋褐藻,為大量的魚類、貝類和無脊椎動物等提供食物和棲息場所。在其中生活的海獺通過捕食關(guān)系對不同種類海膽的數(shù)量起到一定的控制作用。近年來,海獺被大量捕殺,海膽數(shù)量激增,從而大量捕食海藻,海藻林衰退,導(dǎo)致整個群落被嚴重破壞。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.海獺的捕食作用是決定該海藻林群落結(jié)構(gòu)的重要因素B.不同季節(jié)的光照等條件不同,也會導(dǎo)致該海藻林中動物的垂直分布發(fā)生變化C.由于人類對海獺的捕殺,使得該群落結(jié)構(gòu)簡單化,其發(fā)展方向與自然演替不同D.人類活動對群落的影響要遠遠超過其他所有自然因素的影響3.生物科學是一門實驗科學,下列有關(guān)生物學實驗的敘述正確的是()A.番茄汁和胡蘿卜汁是檢測還原糖是否存在的良好材料B.取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體的原因是此處的葉肉細胞中的葉綠體多而大C.制作人的口腔上皮細胞臨時裝片觀察線粒體時,需在潔凈載玻片中央滴一滴生理鹽水D.由于菠菜葉肉細胞的原生質(zhì)層呈現(xiàn)綠色,所以可以用它作材料觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象4.某小組探究“不同濃度2,4-D對大蒜生根情況的影響”,實驗結(jié)果如下表。下列分析正確的是()編號2,4-D濃度(mol/L)根的平均數(shù)目(根)根的平均長度(mm)1蒸餾水1.22.826-123.34.536-45.16.446-67.7656-83.58.666-59.82A.2,4-D濃度低于6-5mol/L促進生根,高于6-5mol/L抑制生根B.6-12mol/L與6-8mol/L的2,4-D濃度對生根的促進作用基本相同C.促進生根的最適濃度在6-12mol/L至6-6mol/L之間D.以根的平均數(shù)目為橫坐標、平均長度為縱坐標可以繪制根的生長曲線5.挪威科學家最新的研究顯示,氣候變暖將提高人類患腺鼠疫的可能性。這種疫病是由鼠疫桿菌(宿主為嚙齒動物)引起的。鼠疫桿菌釋放外毒素,使患者出現(xiàn)中毒性休克綜合征。科學家從病愈患者的血清中提取的抗毒素對腺鼠疫患者有顯著療效。下列說法不正確的是()A.外毒素是一種抗原,能引起人體的免疫反應(yīng)B.抗毒素是由效應(yīng)T細胞產(chǎn)生的淋巴因子C.抗毒素的化學本質(zhì)都是蛋白質(zhì)D.該免疫過程屬于體液免疫6.下列各項中,屬于人體對抗病原體第一道防線的是()A.中性粒細胞對病原體的吞噬B.血漿蛋白對病原體的破壞C.皮膚黏膜對細菌的阻擋作用D.人體對外來器官的排異反應(yīng)7.生態(tài)農(nóng)業(yè)是能獲得較高的經(jīng)濟、生態(tài)和社會效益的現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)。下列關(guān)于生態(tài)農(nóng)業(yè)的敘述不正確的是()A.該生態(tài)系統(tǒng)中食物鏈和營養(yǎng)級越多越好B.比傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性強C.設(shè)計的主要原理是能量的多級利用和物質(zhì)循環(huán)再生D.屬于人工生態(tài)系統(tǒng),對病蟲害一般采用生物防治8.(10分)下列關(guān)于生物學現(xiàn)象的敘述,正確的是()A.皺粒豌豆的DNA上插入一段外來DNA,打亂了編碼淀粉分支酶的基因,該變異屬于基因重組B.囊性纖維病是因為編碼一個跨膜蛋白的基因缺失了三個堿基對,造成基因中嘌呤與嘧啶的比值改變C.白化病患者的白化癥狀可能是基因突變的結(jié)果,也可能是白化基因攜帶者婚配的結(jié)果D.編碼血紅蛋白的正?;蛲蛔兂僧惓;蚝蠛械膲A基數(shù)一定不相等二、非選擇題9.(10分)甜味蛋白Brazzein是從一種西非熱帶植物的果實中分離得到的一種相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì),它含有54個氨基酸,是目前最好的糖類替代品。迄今為止,已己發(fā)現(xiàn)Brazzein基因在數(shù)種細菌、真菌和高等植物、動物細胞中都能表達。請回答下列問題:(1)Brazzein基因除了可從原產(chǎn)植物中分離得到外,還可以通過__________的方法獲得,此方法在基因比較小,且__________已知的情況下較為適用。(2)將Brazzein基因?qū)爰毦?、真菌和高等植物細胞時都可使用的常用載體是__________,構(gòu)建基因表達載體是基因工程的核心步驟,其目的是__________________________________________________,同時,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?;虮磉_載體中,除了目的基因外,還必須有____________________、復(fù)制原點等。(3)若受體胞是大腸桿菌,可先用Ca2+處理細胞使其______________,再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與大腸桿菌混合;若受體是雙子葉植物,則常采用的方法是_____________。若受體是哺乳動物,則可將Brazzein基因與________的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,以便從乳汁中獲得大量的Brazzein蛋白。10.(14分)回答下列(一)(二)小題:(一)回答與固定化酶相關(guān)的問題:(1)常用固定化果膠酶處理含果膠的污水,其主要優(yōu)點有___________________,果膠酶可以在_______________等微生物體內(nèi)找到,酶的固定化方法除了包埋法外,還包括______________、交聯(lián)法、共價偶聯(lián)法等。(2)科研人員用海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶,以硏究固定化酶的相關(guān)性質(zhì)和最佳固定條件。酶活力為固定化酶催化化學反應(yīng)的總效率,包括酶活性和酶的數(shù)量。如圖甲、乙為部分研究結(jié)果。分析并回答相關(guān)問題①由圖甲可知,固定化小麥酯酶的最適宜溫度是_______________。②由圖甲和圖乙可知,酶對有機溶劑不敏感,但對______________和______________非常敏感。③用固定化酶技術(shù)與微生物降解相比,其作用不需要適宜的(_______)A.溫度B.酸堿度C.水分D.營養(yǎng)(二)回答與基因工程和動物克隆有關(guān)的問題:(1)可利用______________方法檢測某人體內(nèi)是否有抗體,從而判斷某人是否被冠狀病毒感染。(2)上海多家生物公司已研發(fā)出冠狀病毒檢測試劑盒。該方法采用RT-PCR技術(shù)對病毒抗原進行檢測。2019新型冠狀病毒是RNA病毒,應(yīng)該先用______________將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。再設(shè)計引物進行PCR擴增檢測。(3)2020年1月10日,科學家完成病毒基因組測序,經(jīng)科學家初步研究發(fā)現(xiàn)冠狀病毒核衣殼N蛋白具有特異抗原性。因此可用____________獲取目的基因,利用____________與表達載體構(gòu)建成重組DNA分子。導(dǎo)入經(jīng)____________處理的受體細菌,誘導(dǎo)表達后分離純化核衣殼N蛋白作為抗原。(4)將核衣殼N蛋白注射到小鼠體內(nèi),獲取經(jīng)免疫的脾細胞,再與小鼠的_____________融合,經(jīng)篩選獲得雜交瘤細胞系。再經(jīng)____________培養(yǎng)法篩選岀雜交瘤細胞株。經(jīng)體內(nèi)或體外擴増培養(yǎng),獲得單克隆抗體。此抗體優(yōu)點是___________________________________________________。11.(14分)山楂果漿黏度大,含有豐富的果膠。為提高山楂果汁的產(chǎn)量,某興趣小組從土壤中分離產(chǎn)果膠酶的微生物,并探究溫度對果膠酶活性的影響,進行了下列實驗?;卮鹣铝袉栴}:(1)若要分離產(chǎn)果膠酶菌株,需配制以_______________為唯一碳源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基能分離目的菌株的原因是____________________________________________。(2)將從果園采集的土壤放入適量的無菌水中,振蕩混勻制成土壤懸液,備用。①為獲得均勻分布的單菌落,先將土壤懸液進行____________處理,然后將處理后的土壤懸液接種于______________(物理狀態(tài))培養(yǎng)基上。該方法也可用于測定產(chǎn)果膠酶菌的數(shù)量,但測定的菌體數(shù)量通常比實際值______________________。②若增加對照組可提高實驗結(jié)果的可靠性,對照組的設(shè)置為__________________________。(3)為探究不同溫度對果膠酶活性的影響,某興趣小組進行了如下實驗:實驗步驟①在甲、乙兩支試管中分別加入5mL山楂泥?2mL果膠酶,并置于10℃恒溫水浴鍋中保溫5分鐘;②將步驟①處理后的果膠酶倒入山楂泥中,混勻后10℃保溫20分鐘;③過濾混合物,收集濾液,測定果汁量;④將實驗溫度分別設(shè)置為20℃?30℃?40℃?50℃?60℃?70℃?80℃的條件下,重復(fù)實驗步驟①②③,并測定、記錄果汁量。實驗結(jié)果:(略)上述實驗步驟①②中先分別保溫、再混合的目的是____________________,該實驗通過______________來判斷果膠酶活性的大小。12.斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細胞中選擇性表達,研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達載體,并導(dǎo)入到斑馬魚細胞中研究其作用,請回答:(1)為獲取HuC基因,研究人員從早期胚胎神經(jīng)細胞中提取HuC基因的mRNA,通過_________獲得大量的DNA,進而構(gòu)建出HuC基因的______________。(2)DraⅢ,SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達載體,需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進行切割,這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。(3)用Ca2+處理大腸桿菌,大腸桿菌細胞即能夠______________。實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________,篩選出導(dǎo)入表達載體的大腸桿菌。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
絕大多數(shù)的酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),少部分酶的本質(zhì)為RNA。酶的合成都需要經(jīng)過轉(zhuǎn)錄過程,轉(zhuǎn)錄需要DNA為模板,合成相應(yīng)的mRNA。當酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞的時候會失去活性,一般高溫、強酸、強堿等環(huán)境會使酶變性失活?!驹斀狻緼、蛋白質(zhì)的合成需要mRNA作為直接模板,mRNA的合成需要DNA作為模板,A正確;B、酶在低溫和適宜pH下保存,既不會被微生物分解,又不會破壞空間結(jié)構(gòu),B正確;C、酶在高溫時空間結(jié)構(gòu)被破壞,結(jié)構(gòu)會變得松散,C正確;D、食鹽可以使溶液中蛋白質(zhì)沉淀,即發(fā)生鹽析,但不會使蛋白質(zhì)變性失活,D錯誤;故選D。2、D【解析】
1、群落的空間結(jié)構(gòu):(1)垂直結(jié)構(gòu):植物群落的垂直結(jié)構(gòu)表現(xiàn)垂直方向上的分層性,其中植物的垂直結(jié)構(gòu)決定了動物的垂直分層。(2)水平結(jié)構(gòu):水平方向上由于光照強度地形明暗濕度等因素的影響,不同地段上分布著不同的生物種群。2、群落演替:隨著時間的推移,一個群落被另一個群落代替的過程。主要類型:初生演替和次生演替。【詳解】A、根據(jù)題干信息“近年來,海獺被大量捕殺,海膽數(shù)量激增,從而大量捕食海藻,海藻林衰退,導(dǎo)致整個群落被嚴重破壞”,可見海獺的捕食作用是決定該海藻林群落結(jié)構(gòu)的重要因素,A正確;B、光照條件是決定海藻林植物群落的垂直結(jié)構(gòu)表現(xiàn)垂直方向上分層的重要因素,植物的垂直結(jié)構(gòu)決定了動物的垂直分層,B正確;C、由于人類對海獺的捕殺,使得該群落結(jié)構(gòu)簡單化,其發(fā)展方向與自然演替不同,C正確;D、人類活動對群落的影響不一定超過其他所有自然因素的影響,如火山噴發(fā),D錯誤。故選D。【點睛】本題考查群落的特征及群落的演替過程,要求學生的識記和理解群落的垂直結(jié)構(gòu)及影響因素及次生演替和初生演替的區(qū)別,試題難度一般。3、D【解析】
1、斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀)。2、葉綠體主要分布于綠色植物的葉肉細胞,呈綠色,扁平的橢球形或球形,散布于細胞質(zhì)中,可用高倍顯微鏡觀察其形態(tài)和分布。3、健那綠染液能專一性地使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色,而細胞質(zhì)接近無色。通過染色,可在高倍顯微鏡下觀察到生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布?!驹斀狻緼、番茄汁呈紅色,胡蘿卜汁呈橙色,會影響還原糖的檢測中磚紅色沉淀的觀察,因此不適宜做還原糖的檢測,A錯誤;B、取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體的原因是此處的葉肉細胞中的葉綠體少而大,B錯誤;C、制作人的口腔上皮細胞臨時裝片觀察線粒體時,必需先在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液,C錯誤;D、由于菠菜葉肉細胞的原生質(zhì)層呈現(xiàn)綠色,所以可以用它作材料觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象,D正確。故選D。4、C【解析】
生長素作用具有兩重性,即低濃度促進生長,高濃度抑制生長,主要表現(xiàn)為:既能促進生長,也能抑制生長;既可以疏花蔬果,也可以防止落花落果;既能促進生根,也能抑制生根。分析圖表可知,自變量是不同濃度的2,4-D,因變量是根的平均數(shù)目和長度,1號蒸餾水為對照組,其余是實驗組,其中2、3、4、5號伸長量大于1號,表示2,4-D能促進根的平均數(shù)目和長度的伸長,6號伸長量小于1號,表示2,4-D能抑制根的伸長?!驹斀狻緼、據(jù)表分析,2,4-D濃度為6-5mol/L抑制生根,6-8mol/L促進生根,在6-5mol/L與6-8mol/L之間是抑制還是促進未知,因此A錯誤;B、據(jù)表分析,濃度為l0-12mol/L與l0-8mol/L促進生根數(shù)量基本相同,但長度不同,B錯誤;C、據(jù)表分析,促進生根的最適濃度在l0-12mol/L至l0-l0mol/L之間,C正確;D、由分析可知,自變量是不同濃度的2,4-D,因變量是根的平均數(shù)目和長度,故橫坐標為不同濃度的2,4-D,D錯誤。故選C。5、B【解析】
1、抗原是引起淋巴細胞產(chǎn)生抗體的物質(zhì)??乖ㄟM入人體的微生物等病原體、異物、異體器官等。2、抗體是機體在抗原物質(zhì)刺激下,由B細胞分化成的漿細胞(效應(yīng)B細胞)分泌的能特異性結(jié)合抗原的免疫球蛋白。3、分析題干:外毒素相對于人體而言是異己成分,能引起人體免疫反應(yīng),是抗原,抗毒素是人體漿細胞(效應(yīng)B細胞)產(chǎn)生的抗體,其化學本質(zhì)是免疫球蛋白?!驹斀狻緼、外毒素屬于抗原,能使患者產(chǎn)生抗毒素(抗體),引起人體的特異性免疫反應(yīng),A正確;B、抗毒素是抗體,是由漿細胞產(chǎn)生的免疫蛋白,B錯誤;C、抗毒素在免疫學上稱為抗體,化學本質(zhì)是蛋白質(zhì),C正確;D、抗體消滅抗原的免疫過程屬于體液免疫,D正確。故選B。6、C【解析】
人體免疫系統(tǒng)有三道防線,第一道防線是皮膚、黏膜及其分泌物,第二道防線是吞噬細胞、殺菌物質(zhì)以及炎癥反應(yīng),第三道防線是特異性免疫,包括體液免疫和細胞免疫;第一、第二道防線屬于非特異性免疫,第三道防線屬于特異性免疫?!驹斀狻恐行粤<毎麑Σ≡w的吞噬屬于第二道防線,A錯誤;體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細胞組成人體的第二道防線,因此血漿蛋白對病原體的破壞作用屬于人體的第二道防線,B錯誤;皮膚油脂對細菌的抑制作用屬于人體對抗病原體的第一道防線,C正確;人體對外來器官的排異反應(yīng)屬于第三道防線,D錯誤。故選:C。7、A【解析】
生態(tài)農(nóng)業(yè)是一個生態(tài)上自我維持的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)系統(tǒng),其特點是在保持和改善系統(tǒng)內(nèi)的生態(tài)平衡、不對其周圍環(huán)境造成明顯改變的情況下,求得最大生產(chǎn)力和可持續(xù)發(fā)展。【詳解】A、生態(tài)農(nóng)業(yè)中食物鏈和營養(yǎng)級不是越多越好,且營養(yǎng)級越多消耗的能量越多,A錯誤;B、生態(tài)農(nóng)業(yè)比傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的抵抗力穩(wěn)定性高,B正確;C、生態(tài)農(nóng)業(yè)設(shè)計的指導(dǎo)原則是能量的多級利用和物質(zhì)的循環(huán)再生,C正確;D、生態(tài)農(nóng)業(yè)屬于人工生態(tài)系統(tǒng),對病蟲害一般采用生物防治,D正確。故選A。8、C【解析】
基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段.基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換、增添和缺失,而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變?;蚩刂粕镄螤畹耐緩剑海?)基因通過控制酶的合成來控制代謝過程,進而控制生物體的性狀,如白化病等。(2)基因還能通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物體的性狀,如鐮刀型細胞貧血癥等?!驹斀狻緼、插入外來DNA序列使淀粉分支酶基因的堿基序列發(fā)生了改變,因此從一定程度上使基因的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,由于該變異發(fā)生于基因的內(nèi)部,因此該變異屬于基因突變,A錯誤;B、基因中嘌呤堿基和嘧啶堿基是互補配對的,其比值恒等于1,缺失堿基對不會改變基因中嘌呤和嘧啶的比值,B錯誤;C、白化病的根本原因是基因突變造成酪氨酸酶不能合成,從而影響黑色素形成,但白化病患者也可能的是攜帶白化病基因的正常雙親,婚配出現(xiàn)隱性純合結(jié)果,C正確;D、基因突變是DNA分子上發(fā)生堿基對的替換、增添或缺失,造成DNA分子結(jié)構(gòu)的改變,所以正?;蚝屯蛔兓虻膲A基數(shù)可能不同,也可能相同,D錯誤。故選C。二、非選擇題9、人工合成)核苷酸序列質(zhì)粒使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代啟動子、終止子、標記基因處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(或成為感受態(tài)細胞)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法乳腺蛋白基因【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)獲取目的基因的方法主要有兩種:一是從供體細胞(或基因文庫)中獲取,另一種是人工合成目的基因。人工合成目的基因的方法適合用于基因比較小、核苷酸序列已知的情況。(2)常用的基因載體是質(zhì)粒,構(gòu)建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?;虮磉_載體包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因、復(fù)制原點等。(3)若受體細胞是大腸桿菌,可先用Ca2+處理細胞,使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài);若受體是雙子葉植物,則常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;若受體是哺乳動物,通常將目的基因?qū)肴橄偌毎?,可將Brazzein基因與乳腺蛋白基因啟動子調(diào)控組件重組在一起,可從取其乳汁中獲得所需物質(zhì)?!军c睛】基因工程步驟:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定;要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)。10、酶可以多次利用,使酶和產(chǎn)物實現(xiàn)分離黑曲霉和蘋果青霉吸附法45℃高溫強酸堿D抗原-抗體雜交逆轉(zhuǎn)錄酶化學方法合成限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶氯化鈣骨髓瘤細胞克?。毎寺。┨禺愋詮姡`敏度高【解析】
固定化酶是指用物理學或化學的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復(fù)合物。在催化反應(yīng)中,它以固相狀態(tài)作用于底物,反應(yīng)完成后,容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離,可被反復(fù)使用。基因工程的基本操作步驟主要包括四步:①目的基因的獲??;②基因表達載體的構(gòu)建;③將目的基因?qū)胧荏w細胞;④目的基因的檢測與表達。工具:限制酶、DNA連接酶和運載體?!驹斀狻浚ㄒ唬?)固定化酶的優(yōu)點:酶可以重復(fù)利用,增大利用率;可以實現(xiàn)酶和產(chǎn)物分離,產(chǎn)物純凈率提高;黑曲霉和蘋果青霉可以合成果膠酶;酶的固定化方法:包埋法、吸附法、交聯(lián)法、共價偶聯(lián)法等。(2)①由圖甲可知,在45℃時,固定化酶的活力最高,故固定化小麥酯酶的最適宜溫度是45℃;②由圖甲和圖乙可知,酶在高溫及強酸、強堿條件下酶活力會降低甚至失活,故酶對上述條件非常敏感;③酶多數(shù)是蛋白質(zhì),不像細胞類生物需要營養(yǎng)物質(zhì)維持生命活動。(二)(1)若檢測某人體內(nèi)是否有抗體,以此判斷某人是否被病毒感染,在分子水平上可用抗原—抗體雜交方法檢測。(2)PCR對象為DNA,而2019新型冠狀病毒是RNA病毒,因此提取病毒RNA后要先用逆轉(zhuǎn)錄酶進行逆轉(zhuǎn)錄。(3)因為抗原蛋白的基因序列已知,因此獲取目的基因的方法為化學方法合成或PCR擴增,并將目的基因與經(jīng)限制酶酶切的載體用DNA連接酶連接,因此構(gòu)建重組質(zhì)粒除DNA連接酶外,還需要限制性核酸內(nèi)切酶;而受體細菌需要用氯化鈣處理,以增加細菌細胞壁的通透性。(4)經(jīng)免疫的脾細胞與小鼠的骨髓瘤細胞融合后獲得的是雜交瘤細胞系;要分離出既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞株,基本要求是只能來源于一個細胞,此方法又稱克隆培養(yǎng)法;單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強,靈敏度高,可大量制備等。【點睛】解答此要求考生識記固定化酶、基因工程等含義及操作步驟,能結(jié)合所學的知識答題,熟記教材相關(guān)知識并能運用專業(yè)術(shù)語準確作答是解題關(guān)鍵。11、果膠只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能利用果膠生長繁殖梯度稀釋固體小在無菌的條件下,將未接種的培養(yǎng)基置于適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng),觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生使果膠酶和山楂泥處于實驗設(shè)置的同一溫度條件下,進行酶促反應(yīng)單位時間、單位體積產(chǎn)生的果汁量【解析】
選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長,欲分離產(chǎn)果膠酶菌株時,應(yīng)以果膠作為唯一的碳源,只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長繁殖?!驹斀狻浚?)要分離出產(chǎn)果膠酶的菌株,需配制以果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基之所以能分離目的菌株是因為除該菌株外其他菌株不含有果膠酶,無法利用果膠,故無法在該培養(yǎng)基上生長。(2)①為獲得較均勻分布的單菌落,還需要將土壤懸液進行梯度稀釋,使土壤懸液的細菌密度降低,并用稀釋涂布法接種于固體培養(yǎng)基上。由于當兩個或多個細胞連在一起生長時,平板上觀察到的只是一個菌落,所以用上述方法測定的菌體數(shù)量通常比實際值少。②若要提高實驗結(jié)果的可靠性,需排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性,故應(yīng)該設(shè)置培養(yǎng)基中未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)皿作為空白對照。(3)將果膠酶作用的底物與果膠酶先分別保溫,再混合的目的是確保在反應(yīng)時山楂泥和果膠酶是處于同一溫度的,避免為實驗增加其他影響因素。酶的活性大小可用一定時間內(nèi)生成物的量來表示,該實驗是通過單位時間、單位體積產(chǎn)生的果汁量的多少來判斷果膠酶活性的大小。【點睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和選擇以及不同溫
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