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實驗6小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象觀察姓名:學(xué)號:實驗?zāi)康耐ㄟ^對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞活動的觀察,加深理解細(xì)胞吞噬作用的過程;了解巨噬細(xì)胞吞噬能力檢測的形態(tài)學(xué)方法實驗原理吞噬作用也稱為胞吞作用(cellulareating),指細(xì)胞通過質(zhì)膜內(nèi)陷形成內(nèi)吞泡的方式吞入不能滲透過膜的較大固體物質(zhì)(直徑一般大于250mm)的過程。許多原生動物通過吞噬作用攝取營養(yǎng);高等動物體內(nèi)的巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞的吞噬作用成為動物體非特異性免疫的重要組成部分。不同動物來源的巨噬細(xì)胞或同一動物來源的不同巨噬細(xì)胞吞噬功能強(qiáng)弱不同,個體吞噬細(xì)胞的平均吞噬能力是機(jī)體非特異性免疫功能強(qiáng)弱的重要反映。吞噬細(xì)胞細(xì)胞膜上有識別某些病原體相關(guān)分子及凋亡細(xì)胞磷脂酰絲氨酸等配體的受體,可以使巨噬細(xì)胞識別結(jié)合病原體、凋亡細(xì)胞及其它異物,引起受體胞內(nèi)區(qū)活化,進(jìn)而導(dǎo)致與其相連的細(xì)胞骨架重排引發(fā)吞噬作用。胞吐吞噬溶酶體內(nèi)吞體內(nèi)吞胞吐吞噬溶酶體內(nèi)吞體內(nèi)吞巨噬細(xì)胞吞噬自身衰老凋亡細(xì)胞而不吞噬正常細(xì)胞,原因是,凋亡細(xì)胞細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面的磷脂酰絲氨酸反轉(zhuǎn)到胞膜外側(cè)面而被巨噬細(xì)胞模式識別受體識別。吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指數(shù)兩個指標(biāo)反映。吞噬百分率=吞噬有雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/巨噬細(xì)胞總數(shù)×100%吞噬指數(shù)=吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/吞噬有雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)實驗材料、試劑及器材(一)材料:健康小白鼠:6-8周齡健康小白鼠,實驗前1~2天,每只腹腔注射4%淀粉肉湯1mL??鼓u血(二)試劑:4%淀粉肉湯D-Hanks液0.85%生理鹽水180IU/mL肝素鈉生理鹽水溶液(三)用品普通光學(xué)顯微鏡、10mL低速離心機(jī)、托盤天平、水浴箱(37℃)、5mL一次性注射器、10mL玻璃離心管、試管架、膠頭滴管等實驗操作巨噬細(xì)胞收集:脫頸處死小鼠;腹腔注入2mL生理鹽水,揉勻;剪開腹部皮膚,暴露腹膜;用帶針頭的注射器插進(jìn)腹腔吸取腹腔液。體外吞噬。0.3mL腹腔液+0.3mL雞紅細(xì)胞懸液,37℃吞噬。制片及觀察。分別在0min、15min、30min、45min制備細(xì)胞混合液臨時裝片,觀察現(xiàn)象并作圖。實驗結(jié)果圖1小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞血紅細(xì)胞裝片(不染色)時間0min15min30min45min現(xiàn)象表1巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞過程各個階段巨噬細(xì)胞吞噬物的變化亦具有與時間相關(guān)的特點(diǎn),巨噬細(xì)胞吞噬物在形態(tài)上易于觀察和檢測,這些特征使得巨噬細(xì)胞在損傷時間推斷過程中具有重要的法醫(yī)學(xué)意義。作業(yè)與思考題畫圖顯示巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞過程各個階段。答:如表1.在體外吞噬實驗中,為什么隨著吞噬時間延長,制片中出現(xiàn)的巨噬細(xì)胞數(shù)量減少?答:巨噬細(xì)胞(Macrophages)能夠吞沒、破壞受損傷組織,有助于啟動康復(fù)過程。雖然它們在損傷位點(diǎn)發(fā)揮關(guān)鍵作用,但一旦任務(wù)完成,就需要盡快撤離,結(jié)束炎癥反應(yīng),為再生過程開路。繼續(xù)存在的巨噬細(xì)胞不利于組織恢復(fù)。如不預(yù)先洗滌雞紅細(xì)胞會影響實驗結(jié)果嗎?為什么?答:會。D-hanks液是一種平衡鹽溶液,用于洗滌雞血紅細(xì)胞,如果不洗滌則雞血紅細(xì)胞含有鈣鎂離子,會破壞巨噬細(xì)胞溶酶體水解酶的活性,影響吞噬過程的進(jìn)行。反思與改進(jìn)注射時注意不要注入皮下或?qū)⑨橆^插進(jìn)小鼠內(nèi)臟。進(jìn)針部位選在下腹部,距離生殖器約1cm處腹中線兩側(cè),針頭與皮膚保持約30度到45度角,針頭進(jìn)入皮膚約1cm;可用一只手的拇指和食指將下腹部皮膚及腹膜夾起,然后將針頭插入空腔。要注意計時,不同階段細(xì)胞的形態(tài)不同。實驗七SQL語言的應(yīng)用【實驗?zāi)康摹?.學(xué)會SQL語言的數(shù)據(jù)定義。2.掌握運(yùn)用SQL語言對表的數(shù)據(jù)查詢方法。3.掌握運(yùn)用SQL語言對表的數(shù)據(jù)操縱方法。4.掌握運(yùn)用SQL語言對表的數(shù)據(jù)修改方法?!緦嶒灉?zhǔn)備】1.SQL語言建立表結(jié)構(gòu)語句(CREATETABLE)和修改表結(jié)構(gòu)語句(ALTERTABLE)。2.SQL語言對表記錄數(shù)據(jù)的修改語句(DELETE,INSERT,UPDATE等)。3.SQL語言對表的數(shù)據(jù)查詢(基本查詢,條件查詢,嵌套查詢,多表查詢,連接查詢,分組查詢)。4.SQL語言對表的查詢結(jié)果處理(排序輸出,重定向輸出,輸出合并)。【實驗內(nèi)容】1.根據(jù)學(xué)生信息表.dbf,使用SQL語言創(chuàng)建xs.dbf自由表,其字段標(biāo)題用英文縮寫字符表示。2.根據(jù)學(xué)生信息表.dbf表中的記錄數(shù)據(jù),使用SQL語言的命令向xs.dbf中輸入不含照片和簡歷的三條記錄。3.使用SQL語言的命令對所有姓王的學(xué)生的籍貫修改為“新疆”。4.使用SQL語言命令,對xs.dbf完成:(1)顯示所有男生并且籍貫為湖南或湖北的記錄數(shù)據(jù)。(2)顯示姓“劉”學(xué)生的姓名、性別、出生日期、籍貫、入學(xué)成績等數(shù)據(jù)。(3)統(tǒng)計女生人數(shù)。(4)根據(jù)學(xué)生信息表.dbf、選課.dbf、課程.dbf三個表,查詢所有同學(xué)的全部學(xué)習(xí)成績,顯示學(xué)生姓名、課程編號、課程名、成績等字段。5.查詢課程.dbf表中所有被學(xué)生選修的課程號、課程名稱。6.對學(xué)生.dbf按性別順序列出學(xué)生的學(xué)號、姓名、性別、課程名及成績,性別相同的再先按課程名后按成績(由高到低)排序,并將查詢結(jié)果存入_xscj.dbf表中。7.分別統(tǒng)計男女生中入學(xué)成績大于590分的少數(shù)民族學(xué)生人數(shù)。8.列出平均成績大于等于80分的課程號及平均成績。9.列出選修課程號為“01102”或“0110510.列出少數(shù)民族學(xué)生的學(xué)號、姓名、課程號及成績?!緦嶒灢襟E】以下各SQL語言命令均在VFP命令窗口中輸入:1.CREATETABLExsFREE(xhc(7),xmc(8),xbc(2),csrqD,ssmcfL,jgc(6),;yxcjn(5,1),jlM,zpG)2.為xs.dbf表輸入三條記錄:INSERTINTOxs(xh,xm,xb,csrq,ssmcf,jg,yxcj);VALUES('200402','劉平平','女',{^1982-09-10},.F.,'湖南',598)INSERTINTOxs(xh,xm,xb,csrq,ssmcf,jg,yxcj);VALUES('200409','王麗平','女',{^1981-03-29},.F.,'山東',598)INSERTINTOxs(xh,xm,xb,csrq,ssmcf,jg,yxcj);VALUES('200410','王大力','男',{^1980-12-09},.T.,'山西',621)3.UPDATExsSETjg='新疆'WHERE'王'$xm4.(1)SELECT*FROMxsWHERExb='男'AND'湖'$jg(2)SELECTxm,xb,csrq,jg,yxcjFROMxsWHERExmLIKE'劉'(3)SELECTCOUNT(*)FROMxsWHERExb='女'(4)SELECTa.姓名,b.課程號,c.課程名,b.成績FROM學(xué)生a,選課b,課程c;WHEREa.學(xué)號=b.學(xué)號ANDc.課程號=b.課程號5.SELECT課程號,課程名FROM課程WHERE課程號IN(SELECT課程號FROM選課)6.SELECTa.學(xué)號,a.姓名,a.性別,c.課程名,b.成績FROM學(xué)生a,選課b,課程c;WHEREa.學(xué)號=b.學(xué)號ANDb.課程號=c.課程號;ORDERBYa.性別,c.課程名,b.成績DESCINTOTABLE_xscj7.SELECT性別,COUNT(性別)FROM學(xué)生GROUPBY性別WHERE少數(shù)民族否AND入學(xué)成績>5908.SELECT課程號,AVG(成績)FROM選課GROUPBY課程號HAVINGAVG(成績)>=809.SELECT學(xué)號,課程號FROM選課WHERE課程號='01102'UNION;SELECT學(xué)號,課程號FROM選課WHERE課程號='01105'10.SELECTa.學(xué)號,a.姓名,b.課程號,b.成績FROM學(xué)生aINNERJOIN;選課bONa.學(xué)號=b.學(xué)號WHEREa.少數(shù)民族否【實驗練習(xí)】根據(jù)已建立的學(xué)生表、課程表、選課表、授課表和教師表完成以下操作:1.查詢1981年以前出生的學(xué)生名單。2.查詢男女生的平均年齡。3.用SQL語言命令完成:(1)顯示職稱為副教授的教師姓名、出生日期、所教課程號、課程名及所教學(xué)生人數(shù)。(2)顯
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