消瘀接骨散對兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)液中MMP-1、MMP-3影響的實(shí)驗(yàn)研究及其治療KOA的臨床觀察

消瘀接骨散對兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)液中MMP-1、MMP-3影響的實(shí)驗(yàn)研究及其治療KOA的臨床觀察1目的膝骨關(guān)節(jié)炎(KOA)是臨床上一種常見疾病,消瘀接骨散作為我院院內(nèi)制劑治療KOA具有很好療效。本課題擬通過建立家兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,觀察消瘀接骨散對膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液中基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)表達(dá)的影響,探討其治療KOA部分藥理效應(yīng)及可能作用機(jī)制,并通過臨床觀察其治療KOA的療效及安全性,為消瘀接骨散治療膝骨關(guān)節(jié)炎(KOA)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及臨床依據(jù)。2方法2.1實(shí)驗(yàn)部分選用健康清潔級新西蘭大耳白兔32只,6月齡左右,雄雌各半,隨機(jī)選取正常組、模型組、消瘀接骨散組、扶他林組,每組8只,除正常組外采用膝關(guān)節(jié)石膏制動造模方法進(jìn)行造模,造模成功正常飼養(yǎng)并驅(qū)趕一周后進(jìn)行藥物治療,療程結(jié)束后進(jìn)行標(biāo)本制備,釆用HE染色觀察軟骨退變情況,ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附劑測定法)測定關(guān)節(jié)液上清液中MMP-1、MMP-3的含量。2.2臨床部分按照納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)選取KOA患者60例,隨機(jī)分為治療組(消瘀接骨散組)對照組(扶他林組)各30例。治療組予以消瘀接骨散外用,每日一次,每次6-8小時(shí)。對照組予以扶他林外用,療程為4周。療程結(jié)束后,觀察兩組患者膝關(guān)節(jié)疼痛感覺評分(VAS疼痛評分)、Lequesne指數(shù)評分、中醫(yī)證候量化評分以及血沉的變化,并根據(jù)主要癥狀及體征的變化來判定療效,記錄治療過程有無明顯毒副反應(yīng)。3結(jié)果3.1實(shí)驗(yàn)部分3.1.1大體觀察:正常組兔膝關(guān)節(jié)外觀正常,無明顯腫脹畸形,關(guān)節(jié)軟骨呈半透明狀,表面光滑完整,滑膜呈乳白色,無明顯腫脹、肥厚、充血,關(guān)節(jié)滑液無色透明;消瘀接骨散組及扶他林組外觀上稍有腫脹,關(guān)節(jié)軟骨表面較正常組粗糙,滑膜增厚、稍有腫脹;扶他林組較消瘀接骨散組滑膜稍有充血,關(guān)節(jié)液稍混濁;模型組外觀腫脹、畸形,顏色紅腫,關(guān)節(jié)軟骨表面粗糙不平,軟骨透明度明顯下降,滑膜有明顯的炎癥性改變、腫脹、充血,關(guān)節(jié)液混濁。3.1.2光鏡下組織學(xué)觀察:鏡下觀正常組軟骨厚度正常,軟骨基質(zhì)著色均勻,軟骨表面光滑,軟骨細(xì)胞形態(tài)正常,排列整齊結(jié)構(gòu)分層清晰可辨,潮線完整;消瘀接骨散組細(xì)胞排列規(guī)律尚可,偶而可見少量細(xì)胞簇集現(xiàn)象,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有輕度變性,潮線尚完整;扶他林組細(xì)胞排列不整齊,關(guān)節(jié)各層軟骨細(xì)胞出現(xiàn)簇集樣生長,部分出現(xiàn)潮線不清晰和中斷;模型組關(guān)節(jié)軟骨破壞最是嚴(yán)重,軟骨表面粗糙不平,軟骨表面糜爛、完全剝脫,細(xì)胞排列紊亂,分布不均勻,軟骨層次不清,潮線消失。3.1.3關(guān)節(jié)液中MMP-1和MMP-3水平的表達(dá):根據(jù)關(guān)節(jié)液中所測檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各組間MMP-1含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=124.6,P<0.01),組間多重比較,模型組高于正常組、消瘀接骨散組、扶他林組,且兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);正常組與模型組MMP-3含量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),模型組與消瘀接骨散組、扶他林組三者行單因素方差分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=151.9,P<0.05),對三組行SNK-q檢驗(yàn),提示模型組與消瘀接骨散組、扶他林組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但消瘀接骨散組、扶他林組無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。3.2臨床部分3.2.1治療組和對照組治療后VAS疼痛評分與治療前相比均有差異,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),且在改善膝關(guān)節(jié)疼痛方面治療組優(yōu)于對照組。3.2.2治療組和對照組治療后Lequesne指數(shù)評分與治療前相比均有差異,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),在改善膝關(guān)節(jié)功能方面治療組優(yōu)于對照組。3.2.3治療組與對照組治療后中醫(yī)證候量化評分與治療前相比均有差異,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),改善癥狀、體征方面治療組優(yōu)于對照組。3.2.4治療組與對照組治療后血沉與治療前相比有差異,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但在改善血沉方面,兩者無明顯區(qū)別,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.2.5對兩組患者進(jìn)行臨床癥狀及體征療效評價(jià),治療組總有效率93.3%,對照組為76.6%,對兩組患者治療后臨床療效進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.135,P=0.032),表明治療組療效優(yōu)于對照組。4結(jié)論實(shí)驗(yàn)研究表明消瘀接骨散對家兔膝關(guān)節(jié)軟骨具有保護(hù)作用,可以降低關(guān)節(jié)液中MMP-1、M