20.3金免疫層析技術(shù)講解

第二十章金免疫技術(shù)教學(xué)目標(biāo)掌握膠體金免疫滲濾技術(shù)及免疫層析技術(shù)的基本原理及技術(shù)要點(diǎn)。熟悉膠體金免疫技術(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)。了解金免疫技術(shù)試劑盒的組成。知識(shí)目標(biāo)技能目標(biāo)掌握金免疫技術(shù)的操作方法、正確判讀和分析結(jié)果。思政-素質(zhì)目標(biāo)臨床免疫學(xué)思維、生物安全、質(zhì)控意識(shí)、責(zé)任意識(shí)。膠體金免疫滲濾技術(shù)的檢測(cè)原理、方法類型和關(guān)鍵技術(shù)。膠體金免疫層析技術(shù)的檢測(cè)原理、方法類型和關(guān)鍵技術(shù)。金免疫技術(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)及臨床意義。本章要點(diǎn)膠體金免疫層析技術(shù)二三一膠體金免疫滲濾技術(shù)金免疫技術(shù)的評(píng)價(jià)與應(yīng)用目錄免疫層析技術(shù)的原理與滲濾技術(shù)相同，不同點(diǎn)在于液體的移動(dòng)是基于層析作用的橫流，而不是通過(guò)直向的穿流。該方法的試劑為試紙條形式，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。測(cè)定項(xiàng)目包括HCG等激素、腫瘤標(biāo)志物、心血管病標(biāo)志物、傳染病的抗原和抗體等。膠體金免疫層析技術(shù)二將各種反應(yīng)試劑分點(diǎn)固定在試紙條上，檢測(cè)標(biāo)本滴加在試紙條的一端，通過(guò)層析作用使樣品在層析材料上泳動(dòng)，樣本中的待測(cè)物與試紙條上的試劑發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)，形成的復(fù)合物被富集或固定在層析條上的特定區(qū)域（檢測(cè)線），無(wú)關(guān)物則越過(guò)該區(qū)域而被分離，通過(guò)膠體金的呈色條帶判讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一、檢測(cè)原理雙抗體夾心法測(cè)抗原二、方法類型AGTBC競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原AGTCB

A、B兩端分別粘貼吸水材料，G處為干燥固定在玻璃纖維膜等材料上的膠體金結(jié)合物，T處粘附有已知的抗體或抗原，C處為粘附的質(zhì)控品（抗免疫金抗體），T、C點(diǎn)物質(zhì)往往以直線的形式包被在膜上。三、關(guān)鍵技術(shù)（一）試劑盒組成AGTCB以雙抗體夾心法為例：1將試紙條標(biāo)記線一端浸入待測(cè)標(biāo)本中2秒～5秒或在標(biāo)本加樣處加一定量的待檢標(biāo)本，平放于水平桌面。25min～20min內(nèi)觀察結(jié)果。3結(jié)果判斷。（二）技術(shù)要點(diǎn)吸水墊結(jié)合物墊NC膜觀察窗吸水墊待測(cè)標(biāo)本層析金標(biāo)抗體