色譜法測(cè)定藥物含量的計(jì)算 (1)講解

色譜法測(cè)定藥物含量的計(jì)算制作單位：滄州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校制作人：劉清新

一、色譜法測(cè)定藥物含量常用的方法1、外標(biāo)法以被測(cè)物質(zhì)的純品作為對(duì)照品，在相同色譜條件下，以對(duì)照品和樣品的響應(yīng)信號(hào)進(jìn)行比較定量的方法。2、內(nèi)標(biāo)法以非被測(cè)物的另一物質(zhì)的純品作為內(nèi)標(biāo)物，加入到準(zhǔn)確稱量的試樣中，根據(jù)被測(cè)物和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量以及相應(yīng)峰面積比與相對(duì)響應(yīng)值，測(cè)定待測(cè)組分含量的方法。（一）外標(biāo)法按各品種項(xiàng)下規(guī)定，精密稱（量）取對(duì)照品和供試品，分別配成對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別精密取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量對(duì)照品溶液和供試品溶液中待測(cè)成分的峰面積（或峰高），計(jì)算供試品溶液的濃度。計(jì)算公式：

1.原料藥含量計(jì)算二、色譜法測(cè)定藥物含量的計(jì)算實(shí)例解析實(shí)例1：高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定鹽酸環(huán)丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及結(jié)果計(jì)算。規(guī)定：按無(wú)水物計(jì)算，含C17H18FN3O3不得少于88.5%測(cè)定方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.05mol/L枸櫞酸溶液-乙腈（82∶18）用三乙胺調(diào)節(jié)pH至3.5為流動(dòng)相，流速為1ml/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為277nm，理論板數(shù)按環(huán)丙沙星峰計(jì)算不低于2000，環(huán)丙沙星峰和相鄰雜峰間分離度應(yīng)符合要求。供試品的測(cè)定精密稱取本品51.24mg，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取環(huán)丙沙星對(duì)照品51.07mg，同法測(cè)定。已知：本品的水分為2.0%，對(duì)照品水分為1.8%。測(cè)定數(shù)據(jù)：AR＝14325，AX＝13004；mx＝50.24mg；mR＝51.07mg。實(shí)例解析實(shí)例1：高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定鹽酸環(huán)丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及結(jié)果計(jì)算。解析：

鹽酸環(huán)丙沙星含量%=結(jié)果：符合規(guī)定（規(guī)定：按無(wú)水物計(jì)算，含C17H18FN3O3不得少于88.5%）。2.片劑含量測(cè)定與計(jì)算實(shí)例解析實(shí)例2：高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定三唑侖片的含量及結(jié)果計(jì)算。規(guī)定：本品含三唑侖（C17H12Cl2N4）應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%測(cè)定方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（55∶45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm，理論板數(shù)按三唑侖峰計(jì)算不低于2000。供試品溶液：取本品（規(guī)格:0.25mg/片）50片，稱定總重量為0.2010g，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉0.09811g，置100ml量瓶中，精密加50%甲醇溶液稀釋至刻度，濾過(guò)，取續(xù)濾液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取三唑侖對(duì)照品12.10mg，置100ml量瓶中，精密加50%甲醇溶液稀釋至刻度（必要時(shí)超聲處理），同法測(cè)定。實(shí)例2：高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定三唑侖片的含量及結(jié)果計(jì)算。測(cè)定數(shù)據(jù)：AR＝9636，AX＝5137，W50＝0.2010g，ms＝0.09811g。已知：標(biāo)示量為0.25mg/片。解析：

結(jié)果：符合規(guī)定[規(guī)定：本品含三唑侖（C17H12Cl2N4）應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%]。3.注射液含量計(jì)算實(shí)例解析實(shí)例3：高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定己酸羥孕酮注射液的含量及結(jié)果計(jì)算。測(cè)定方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（85∶15）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，取己酸羥孕酮對(duì)照品與戊酸雌二醇對(duì)照適量，用甲醇溶解并稀釋制成每1ml中各含20μg的混合溶液，進(jìn)行測(cè)試，己酸羥孕酮峰與戊酸雌二醇峰的分離度應(yīng)符合要求。測(cè)定法：用內(nèi)容量移液管緊密量取本品（規(guī)格：2ml:0.25g）2ml置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取己酸羥孕酮對(duì)照品適量，用甲醇溶解并定量稀釋成20.15μg/ml溶液，同法測(cè)定。實(shí)例解析實(shí)例3：高效液相色譜外標(biāo)法測(cè)定己酸羥孕酮注射液的含量及結(jié)果計(jì)算。測(cè)定數(shù)據(jù)：AR＝3232，AX＝3648解析：結(jié)果：符合規(guī)定。[規(guī)定：本品含己酸羥孕酮（C27H40O4）應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%]二、內(nèi)標(biāo)法按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液。取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算校正因子f：

S：內(nèi)標(biāo)物R：對(duì)照品X：供試品1.原料藥含量計(jì)算-內(nèi)標(biāo)法實(shí)例解析實(shí)例4：高效液相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定丙酸倍氯米松的百分含量及結(jié)果計(jì)算。（規(guī)定：按干燥品計(jì)算，含C28H37ClO7應(yīng)為97.0%～103.0%）測(cè)定方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（74∶26）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm，理論板數(shù)按丙酸倍氯米松峰計(jì)算不低于2500，丙酸倍氯米松峰和內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)大于4.0。內(nèi)標(biāo)溶液：精密稱定睪酮適量，加流動(dòng)相制成濃度為0.1223mg/ml的溶液。測(cè)定法：精密稱取本品12.73mg，置100ml量瓶中，加甲醇74ml使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻；精密量取該溶液10ml與內(nèi)標(biāo)溶液5ml，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取丙酸倍氯米松對(duì)照品12.50mg，同法測(cè)定。實(shí)例解析實(shí)例4：高效液相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定丙酸倍氯米松的百分含量及結(jié)果計(jì)算。測(cè)定數(shù)據(jù)：AS＝2027，AR＝4346，AS

?＝2042，AX＝4487。干燥失重=0.22%。解析：結(jié)果：符合規(guī)定。（規(guī)定：按干燥品計(jì)算，含C28H37ClO7應(yīng)為97.0%～103.0%）2.片劑含量計(jì)算-內(nèi)標(biāo)法3.注射液含量計(jì)算-內(nèi)標(biāo)法實(shí)例解析實(shí)例5：高效液相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定十一酸睪酮注射液的含量及結(jié)果計(jì)算。測(cè)定方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-異丙醇-水（43:43:14）為流動(dòng)相；流速為1.5ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm，理論板數(shù)按丙十一酸睪酮峰計(jì)算不低于4000，十一酸睪酮峰和內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)符合要求。內(nèi)標(biāo)溶液的制備：精密稱定苯丙酸諾龍適量，加甲醇制成濃度為0.6113mg/ml的溶液。供試品的測(cè)定：用內(nèi)容量移液管精密量取本品（2ml:0.25g）1ml，置50ml量瓶中，用乙醚分?jǐn)?shù)次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml至10ml具塞離心管中，在溫水浴中使乙醚揮散；用甲醇振搖提取4次（5ml、5ml、5ml、3ml），每次振搖10分鐘后離心15分鐘，合并甲醇提取液，置25ml量瓶中，精密加內(nèi)標(biāo)溶液5ml，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取十一酸睪酮對(duì)照品61.08mg，置25ml量瓶中，精密取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5ml置25ml量瓶中，用甲醇稀釋