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川芎嗪治療肝纖維化的作用機制20XX川芎嗪治療肝纖維化的作用機制60mph30mph30mph35mph50ph研究背景研究思路造模步驟研究內(nèi)容研究意義川芎嗪治療肝纖維化的作用機制研究背景肝纖維化(hepaticfibrosis,HF)指的是肝細胞在發(fā)生炎癥刺激或壞死時,肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織發(fā)生異常增生的一種病理過程,為肝硬化進展中的早期環(huán)節(jié)。有研究表明,中醫(yī)藥對逆轉(zhuǎn)肝纖維化有較好的療效川芎嗪治療肝纖維化的作用機制研究意義中醫(yī)認為肝纖維化的基本病機屬于瘀血阻絡(luò),活血通絡(luò)是基本治療方法。綜合國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)川芎嗪能通過調(diào)控多種細胞因子抑制肝星狀細胞(HSCs)活化、誘導(dǎo)活化的HSCs凋亡、調(diào)控脂肪細胞因子、肝臟炎癥反應(yīng)、抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)肝竇內(nèi)皮細胞、自噬等發(fā)揮抗肝纖維化作用,在未來肝纖維化的治療中具有應(yīng)用前景。因此,本實驗基于泛凋亡途徑,探討川芎嗪治療肝纖維化的作用機制川芎嗪治療肝纖維化的作用機制研究思路與方法川芎嗪治療肝纖維化的作用機制01構(gòu)建CC14誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠模型,利用不同濃度的川芎嗪對各組小鼠進行治療干預(yù)03通過HE染色確定組織肝纖維化情況,利用Massion染色明確細胞膠原蛋白的表達情況05利用WB檢測BCL2.P62、Caspase-3、caspase-1、BAX1、GSDMD、LC3、β-actin、1L-18、1L-β等的表達水平02檢測各種生化指標如AST\ALT\HYP,明確川芎嗪治療肝汗維化的藥效作用機制04利用RT-PCR確定相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的mRNA表達水平川芎嗪治療肝纖維化的作用機制研究內(nèi)容造模步驟15只小白鼠分為5組,空白組、模型組、川芎嗪低劑量組、川芎嗪中劑量組、川芎嗪高劑量組,每組3只小鼠除空白組小鼠以外的4組皮下注射硫代乙酰胺(TAA)誘導(dǎo)肝纖維化,一周兩次,連續(xù)給藥四周除空白組和模型組,其余各組均灌胃相應(yīng)劑量的川芎嗪,每日一次,連續(xù)給藥4周腹腔注射水合氯醛麻醉小鼠,取血清和肝組織川芎嗪治療肝纖維化的作用機制實驗步驟完成小鼠血清中AST、ALT酶活性,肝臟組織中羥脯氨酸HYP的檢測完成小鼠和小鼠肝臟組織HE染色和Masson染色完成RT-PCR中MMP-1TGF-B、COLIAI和TIMPImRNA水平檢測,用熒光定量或者半定量PCR完成BCL2.P62、Caspase-3、caspase-1、BAX1、GSDMD、LC3、β-actin、1L-18、1L-β等蛋白印跡檢測-
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