實(shí)驗(yàn)八-尿生成調(diào)節(jié)

實(shí)驗(yàn)八、尿生成的調(diào)節(jié)影響尿生成的因素實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握輸尿管插管技術(shù)，學(xué)習(xí)尿量的記錄和測(cè)量方法；2.觀察神經(jīng)體液因素及藥物對(duì)尿生成的影響，并分析其作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理

尿生成的過(guò)程包括：腎小球的濾過(guò)、腎小管和集合管的重吸收和分泌。凡是影響尿生成過(guò)程的因素均可引起尿量的改變。尿生成的調(diào)節(jié)包括腎內(nèi)自身調(diào)節(jié)、神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)分別對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施加不同因素，觀察尿量及其成分的變化。尿生成的生理基礎(chǔ)腎小管腎小體腎小囊腎小球遠(yuǎn)端小管近端小管髓袢細(xì)段近端小管直段近曲小管髓袢升支細(xì)段髓袢降支細(xì)段遠(yuǎn)曲小管

髓袢升支粗段

腎單位原理：

終尿生成＝濾過(guò)液（原尿）－重吸收量＋分泌（比較少，可不考慮）有效濾過(guò)壓＝毛細(xì)血管壓－膠體滲透壓＋囊內(nèi)壓凡能影響上述過(guò)程的因素都可影響尿的生成，從而引起尿量的改變有效濾過(guò)壓＝毛細(xì)血管壓－膠體滲透壓＋囊內(nèi)壓本實(shí)驗(yàn)用兩道同步記錄1道記錄血壓2道記錄尿量實(shí)驗(yàn)對(duì)象：家兔實(shí)驗(yàn)器材和藥品器材：BL-420生理機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、50ml量筒、手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺(tái)、輸尿管插管、玻璃分針、注射器（1ml、5ml、20ml）、壓力換能器、記滴器、紗布。試劑：生理鹽水、20﹪的氨基甲酸乙酯、20﹪葡萄糖、垂體后葉素、0.01%腎上腺素。步驟（一）麻醉、固定（25％烏拉坦4ml/kg）（二）頸部手術(shù)1．做頸部切口，逐層分離皮膚、皮下組織、肌肉（鈍性分離），暴露氣管。2．氣管插管。3．分離雙側(cè)迷走神經(jīng)，穿線備用。（三）尿液收集方法：1.輸尿管插管法

在恥骨聯(lián)合上緣作4～6cm正中切口（切勿傷及其下方的膀胱），剪口以能將膀胱拉出體外為度（勿因剪口過(guò)大暴露其他器官組織）。將膀胱翻至體外（勿使腸斷外露，以免血壓下降）。膀胱的正常位置是在輸尿管腹面，當(dāng)輕輕拉出并翻轉(zhuǎn)膀胱時(shí)，輸尿管則位于膀胱的前方。仔細(xì)辨認(rèn)并分離一側(cè)輸尿管（莫損傷伴行血管），各穿兩條線備用，分別將輸尿管近膀胱端結(jié)扎，在結(jié)扎線的遠(yuǎn)離膀胱端剪開(kāi)一個(gè)斜口（可先用玻璃分針探一下），把預(yù)先充滿生理鹽水的細(xì)塑料管向腎臟方向插入輸尿管（1cm左右），用線結(jié)扎固定。2.膀胱套管法

腹部剪毛，恥骨聯(lián)合上方正中剪口3-5cm，沿腹白線剪開(kāi)腹壁，將膀胱向尾側(cè)移至體外，辨認(rèn)膀胱和輸尿管的解剖部位，用針筒抽取尿液6ml，裝入兩只試管。然后在膀胱頂部選擇血管較少處，作一直徑約1.5cm的，在其中央沿縱向剪一小切口，插入膀胱插管（或膀胱漏斗）。把切口周圍的縫線拉緊，結(jié)扎固定。插管口最好正對(duì)輸尿管在膀胱的入口處，但不要緊貼膀胱后壁而堵塞輸尿管。膀胱插管的另一端則用導(dǎo)管連接至記滴器或刻度試管，記錄尿流量。手術(shù)完畢后，用溫?zé)岬纳睇}水紗布覆蓋腹部創(chuàng)口。用線結(jié)扎膀胱頸部，以阻斷同尿道的通路。（四）連接換能器和記滴器輸尿管插管或膀胱套管與記滴器相連，使引流出的尿液滴在記滴器的兩個(gè)電極之間，構(gòu)成一個(gè)完整的電通路，記錄通道會(huì)記錄下來(lái)一次尿滴。觀察項(xiàng)目

手術(shù)和實(shí)驗(yàn)裝置安裝完畢后，記錄正常血壓和尿量曲線，然后依次進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)，觀察血壓和尿量的變化。注意：每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)前都要記錄尿量作為對(duì)照。記錄正常每分鐘尿形成的滴數(shù)。耳緣靜脈注射生理鹽水20ml，觀察尿量的變化↑耳緣靜脈注射1∶10000腎上腺素0.5ml，觀察其尿量變化↓。耳緣靜脈注射20%葡萄糖液10-15ml，觀察尿量變化↑結(jié)扎并剪斷兩側(cè)迷走神經(jīng)，用連續(xù)單刺激其外周端，使血壓下降，觀察尿量變化↓。耳緣靜脈注射抗利尿激素2U（0.2ml），觀察尿量變化↓。結(jié)果分析1一次快速注射20ml生理鹽水，使血容量增加，會(huì)引起下列情況：（1）血液被稀釋，血漿膠體滲透壓下降，腎小球有效濾過(guò)壓增加，腎小球有效濾過(guò)率增加，尿量增加。（2）血容量增加，腎小球血漿流量增加，使尿液濾過(guò)增多，也促使尿液增加。（3）血容量增加，刺激左心房及胸腔大靜脈容量感受器，沖動(dòng)沿迷走神經(jīng)上傳到下丘腦的視上核和室旁核，使抗利尿激素（ADH）的分泌與釋放減少，遠(yuǎn)曲小管，集合管對(duì)水的重吸收減少，尿液增多。結(jié)果分析2靜注大劑量腎上腺素后，血壓上升（使與外周小動(dòng)脈平滑肌中的α受體相結(jié)合，使之收縮）尿量減少機(jī)制：腎小球毛細(xì)血管血壓高低既受全身動(dòng)脈血壓的影響，又受腎小球入球小動(dòng)脈和出球小動(dòng)脈的口徑比例（也就是血管平滑肌舒縮程度）的影響，而后一種因素比前一種因素更為重要?？墒鼓I小球入球小動(dòng)脈收縮，，使腎小球毛細(xì)血管中血流量降低，濾過(guò)率減少，尿量減少。因此在臨床上搶救休克病人，使用大劑量的腎上腺素時(shí)一定要注意患者尿量的變化。結(jié)果分析320%葡萄糖4ml/Kg注入后，可見(jiàn)尿量立即大量增加因?yàn)榧尤牒竽I中濾過(guò)的葡萄糖超過(guò)了腎的腎糖閾，經(jīng)腎小球?yàn)V出的大量葡萄糖不能被腎小管上皮細(xì)胞全部重吸收，致使小管液中出現(xiàn)較多的葡萄糖，使腎小管液中的滲透壓增加，防礙水的重吸收，于是水隨葡萄糖一起排出，尿量增加。此稱為滲透性利尿。此時(shí)尿液作生化實(shí)驗(yàn)，可檢測(cè)出尿糖。結(jié)果分析4刺激迷走神經(jīng)心輸出量減少尿量減少迷走興奮結(jié)果分析5抗利尿激素antidiuretichormone，ADH來(lái)源：下丘腦視上核和室旁核神經(jīng)元分泌，神經(jīng)垂體貯存、釋放作用：①提高遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的通透性；②增加髓質(zhì)組織間液的溶質(zhì)濃度

機(jī)制：ADH→V2→GS→AC→cAMP→PKA→使AQP-2鑲嵌在管腔膜上形成水通道，增加水的重吸收思考題：試分析尿生成的主要環(huán)節(jié)，討論各因素影響尿生成的機(jī)制。一次性口服大量清水和靜脈大量生理鹽水時(shí)，尿量變化有何異同？其作用機(jī)制如何？實(shí)驗(yàn)前給家兔喂食足量的青菜或水，否則應(yīng)在手術(shù)時(shí)給予靜脈補(bǔ)液。每一項(xiàng)處理因素前，要求完整對(duì)照。等前一項(xiàng)影響因素基本消失、血壓和尿量基本恢復(fù)后再實(shí)施下一步新的項(xiàng)目操作。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目順序可根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況做調(diào)整。保護(hù)耳緣靜脈。靜脈注射盡量從耳緣靜脈遠(yuǎn)心端開(kāi)始，逐步向近心端移行。亦可保留耳緣靜脈輸液用的頭皮針，方便靜脈給藥。輸尿管插管防止出血及插入夾層。輸尿管手術(shù)的難度較大，應(yīng)注意防止導(dǎo)管被血凝塊堵塞，或被扭曲而阻斷尿液的流通。注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目預(yù)期結(jié)果分析尿量電刺激迷走神經(jīng)外周端↓電刺激使迷走神經(jīng)末梢釋放的Ach使心臟活動(dòng)減弱,心輸出量↓,血壓↓,腎血流量↓,腎小球有效率濾過(guò)壓↓,原尿↓注射大量生理鹽水↑血容量↑，血液稀釋，血漿膠滲壓↓腎小球有效率濾過(guò)壓↑,原尿↑；同時(shí)通過(guò)多途徑引起ADH分泌↓,使遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的重吸收↓；另外還引起心房釋放心房鈉素，刺激腎利鈉利尿放血↓血容量↓，腎小球有效率濾過(guò)壓↓,原尿↓；ADH分泌↑，遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的重吸收↑注射大量高滲葡萄糖↑尿糖陽(yáng)性由于血糖濃度急劇升高，大量葡萄糖濾出，使小管液中的糖超過(guò)腎糖閾，大量葡萄糖不能被吸收，而提高了小管液的滲透壓，阻礙了腎小管對(duì)水的重吸收（滲透性利尿）實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目預(yù)期結(jié)果分析尿量注射NE↑（小劑量）小劑量NA使腎出球小動(dòng)脈收